Muc luc. .Lal GlOI THI~U XVII

LalNOIDAU XIX

Lal NOI DAU CHO LAN XUAT BAN THUNHAT XXI

- -' , ,- - -,I. NHl1NG VAN DE NEN TANG CUA CONG NGH~ SINH HQC PHAN TU

1 . cuqc CACHMJ;\NGGONGNGH~SINHHqC PHP.NTV

Gong ngh~ ADNtai tei hCJp 2SI! xuat hi~n cua cong ngh~ sinh hc,>cphan tiJ 5SI! thl1ong m~i hoa cong ngh~ sinh hc,>cphan tiJ 9Nhiing van de quan tam va h~u qua 11TOM TAT 13

TAl LI~U THAM KHAo 14

cAu HalON TAp 15

2

2. cAc H~ THONG SINH Hqc DUNG TRONG GONG NGH~ SINH HqC PHAN TV

Sinh v~t nhan so va sinh v~t nhan chua'n 16Escherichia coli 17

Saccharomyces cerevisiae 19

Cac can dl1ang tiel d sinh v~t nhan so va sinh v~t nhan chua'n 20

Te baa sinh v~t nhan chua'n trong moi trl1ong nuoi cay 24TOMTAT 24

TAlLI~UTHAMKHAo 25

cAu HalON TAp 25

3. TONG HQP ADN, ARN vA. PROTEIN 26

Cau truc cua ADN 27

Sac chep ADN 31

Giai mil thong tin di truyen: ARN va protein 33

D!ch mil 39

Dieu hoa phii'm mil ARNtt d vi khua'n 44

flieu.hoa phii'm mil ARNtt d sinh v~t nhan chua'nTOMTAT 50

TAl LI~UTHAMKHAo 52cAu HalON TAp 53

47

4. GONG NGH~ ADN TAl TO HQP 54

Endonucleaza gii1i h~n 56Cac vecto nhan dong plasmit 65

Veda nh~mdong plasmit pBR322 66Bien nap va chon lac 69Cae veda nhan dong plasmit khac

T~o va sang Ic,>cthl1vi~n 74

70

16

Vl1

Ti;1om

Cai nh~p AD~ vao nhi~m sac thg chu 170Lo~ibo cae gen danh dau eh9n 19c 174Tang bai tiet 175Vikhu~n d~ng L 178Ganh n~ng trao dibim cae protein d! chung b S. cerevisiae 200Tiet cae protein d! chung bbi S. cerevisiae 202Pichia pastoris va cae h~ thong bie'u hi$n nam men khac 203H$thong bigu hi~n baculovirut-te baa con trung 206H$ thongveetcJbi~uhi$nbaeulovirut 207nng san ILl(;Jngbaeulovirut tai to hc;!p 209Thiet ke m(>tveetcJcon thai baeulovirut E. coli-te baa can trung 212Glyeosyl h6a va XltIycae tien chat protein d(>ngv~t e6 vu trong cae te baa can trungCae h~ thong bie'u hi~n trong te bao d9ng v~t co vu 214Cae h$ thong danh dau eh9n 1geeho cae veetC1bi~u hi$n trong d(>ngv~t co vu 219TOMTAT 221

TAl LI~UTHAMKHAO 222CAUHOIONTAp 225

8. £)9T BIEN£)!NHHVONGvA KY THU~T PROTEIN 226

Cae quy trinh d9t bien d!nh huang 227£>(>tbien d!nh hLldngoligonucleotit vdi ADN M13 228£>(>tbien d!nh hLldngoligonucleotit vdi ADN plasmit 231Nhan b(>id(>tbien djnh hLldngoligonueleotit b1lngPCR 233£>(>tbien ngau nhiemvdi cae moi oligonucleotit suy bien 235£>(>tbien ngau nhien vdi cae nucleotit tLlcJngtl! 237PCR loi 240

Ghep to hc;!pcae do~n ADN 241Protein d(>tbien vdi cae axil amin khong blnh thLldng 242Cai bien protein 243Bo sunghen va tfnh d~e hi$Ueua enzym 257Thay doi nhieu tfnh chat 258TOMTAT 260

TAl LI~UTHAMKHAO 261

CAUHOIONTAp 262

214

II. CONG NGH~ SINH HQC PHAN n) CUA cAc H~ THONG VI SINH V~T

9. cAc PH110NGPHAp CHANDOAN PHAN Tl1 266

Cae quy trinh eh~n dean mi~n dieh 268Phep tha hap phI,!mien dich lien ket enzym 268Khilngth~ desndong 270T~o va ch9n 19C te baa lai 271Xac d!nh dong te baa lai sinh khc'mgth~ d~c hi~u 272Cae h~ thong eh~n dean ADN 274Mau do lai 275

Ch~n dean b~nh sot ret 276Phat hi~n Trypanosoma cruz; 277Quy trinh lai khong ph6ng x~ 278DEmhi~u phan ta 280Xac d!nh dau van tay ADN 282Nhan bingau nhien cac do~mADNda hinh 284Th~ eam bien sinh h9C vi khu~n 286Ch~n dean phan tlt cae b~nh di truyen 287Sang19Cb~nhxCInang 288Thieu mau te baa hinh liem 288

Quy trinh PCR/OLA 289Mau do kh6a 291

Xac d!nh ki~u gen b~ng cac moi PCR danh dau huynh quangTOMTAT 294

TAl LI~U THAMKHAO 295

cAu Hal ONT~P 296

293

10.cAc CHATDIEUTR! 298

Cae dU'geph~m 301PhEInI$pADNbs CUBinterferon 301Cac interferon ngU'ai 302Hormon t~ng trlJdng CUBnglJai 303Yeu to alpha gay ho~i ta khoi u 304Toi whoa sl! bi~u hi~n gen 305Cac taGnhan trj b~nh dlJt 319San xuat khang th~ d E. coli 322Cac thlJ vi~n t6 h

Khangth§ ehuoidcJn 326Axit nucleic dung lam chat dieu tr!ARN doi nghia 330Oligonucleotit doi nghia 331Cae ribozym 334Cae phEIntCtkham ADN-ARN 336Cae ARN gay nhieu 339Cae gen khang th§ 339f>ieu tr! cae roi lo~n di truyen 340Li~u phap gen nguai 345Li~u philp kich ho~t lien chat thuocTOM TAT 352

TAl LIEU THAM KHAo 353

cAu HalON TAp 357

330

350

11. VACXIN 359

Vacxin ti~u don vi 362Virut heepet don hinh 363B~nh Id mom long m6ng 364Vaexin peptit 365Gay mien d!eh gen: vaexin ADN 368Vacxin giam dc?cIl!c 373Benh ta 373

Cae loai SalmonellaCae loai Leishmania

Virut heepet dOnhinhVacxin vecto 379

Vaexin dinh hvdng chong virut 379Vaexin d!nh hvdng chong vi khuan 384Vikhuandunglamhe thongehuy§ngiaokhimgnguyenTOMTAT 388TAl LIEUTHAMKHAo 389

cAu HalON TAp 392, " . ,

12. TONG H

Tong hc;Jpcao su bi:1ngvi sinh v$t 428

San xuat cac polyhydroxyalkanoat bi:1ngvi sinh v$tTOMTAT 430

TAl LI~UTHAMKHAo 430

cAu HalON TA,p 433

13. SINH HOC CHONG 6 NHIEMVA SLrDl,JNGSINH KHOI

Phan huy vi sinh cae chat phi sinh hc;>c 436Cai bien gen cae con dltdng phan huy sinh hc;>c 441Bien doi bi:1ngchuygn plasmit 442Bien doi bi:1ngcach thay doi gen 443sl'r dl;lng tinh b{>tva cae lo~i dltdng 451San xuat thLfdngm

CAUH610N TAp 523

15. THUOC TRlJ sAu VI SINH 525

£>i?eto' tru sau eua B. thuringiensis 526Cd che ho?t d(mg va each sa dyng 526PMn I$p gen d(>c to 531Cai bien cac gen d(>cto cua B. thuringiensis 532Ngan ch~n sy' phat tri~n tfnh khang thuoc 542Cai bien gen d~ car thii~msy' ki~m scat sinh h9C 544Dung baeulovirut lam tae nhan kiim soat sinh hng 545

Cai bien gen d~ cai thi~n sy' ki~m scat sinh h9c 547TOMTAT 549

TAl LI~UTHAMKHAo 550CAUH610N TAp 553

16. SAN XUAT PROTEIN QUY Me LON TlJVI SINH V~TTAI T() HQP

Cae nguyen t~e nuoi vi sinh v~t 556Len men thee me 557

Len men thee me co bo sung 559Len men lien tyc 560

Tang tai da hi~u qua cua qua trinh len men 561

Nu6i cay te baa m$t d(>cao 564

L6 phan li'ng sinh h

Slf tiet protein ngo?i lai 610

San xuat thl!c v~t chuygn gen khong co gen danh dauLo?ibo gen dimh dau khoi ADN nhan 612Lo?i bo gen dimh dau khoi ADN h,JCI?p 613TOMTAT 614

TAl LI~U THAM KHAo 615CAU HOI ONTAp 617

18. GAl BIEN GEN THI!C V';T: cAc UNGDI,ING 686

Phat trign cay khang sau, b~nh va thuoc di~t coCay khang sau 620

Cay khang virut 630

Cay khang thuoc di$t co 637

Cay khang nam va vi khu~n 639Phat trign cay chong chiu stress va Sl! gia hoaStress oxy h6a 645Stress muoi 646

Chin qua va heo hoa 648

Bien d6i di truyen Sl! t~o siic to hoa 651Cai bien ham Iu,""ngchat dinh dudng cua cayAxit amin 654

Lipit 657Vitamin 658

S~t 661

Cai bien huClng vi va hinh dang cua cay 663Chong mat mau 663

£)9 ng9t 664

Tinh b9t 666

Cay lam 16phan Lrng sinh hQc 669Khangth~ 670

Polyme 671

Protein ngo?i lai d thlfc V?t 671Vacxin an du,""c 672

Nang suat cay trong 675Tang ham Iv

Sa dLJngehu(>tehuy~n gen lam cae h$ thong tha nghi$mBieu h6a e6 dieu ki$n sLJ'bi~u hi$n gen 708Ki~mscat dieu ki$n ehet te baa 711Nhan bim gia sue bang cay ehuy~n nhan 712Bo, eUu, de va ltlocut mang b$nh di truyen tren nhi~m s~c th~Ban d6 BAC toan bi? bi? gen 754L$p him do lai ph6ng X? 754Trinh tl! bi? gen ngLtdi 757Phat hi~n di?t bien trong gen ngLtdi 759Phan Ueheau hinh don s9i 759Bien di gel gradien bien Unh 760Phan Uchdi kep 762C~t hoa h9Cc~p ghep sai 763Xac d!nh trinh tLJ'ADN trLJ'ctier 765Xae d!nh ehue nang gen 765TOMTAT 771

TAl LI~UTHAMKHAo 771CAUHalON TAp 772

. - -'.:. . -'- -IV. QUY D!NH VA CAP BANG SANG CHE CONG NGH~ SINH

HQC PHAN TV 775

21. QUYD!NHVE sa DVNG GONG NGH~ SINH HQC 776

Quy dinh ve eong ngh~ ADN tai t6 hng 787Cae tranh eai ve GMO 789

Li~u phap gen ngLtdi 794Phat tri~n chfnh sach doi vdi li$u phap gen te baa soma

780

794

751

stj tieh lay cae gen khiem khuyet d cae the h~ tudng laiLi~uphap gen dong sinh di,jed nguai 798Nhan blm nguai? 799T6MTAT 800

TAl Llt;UTHAMKHAo 802

CAU HOIONT~P 804

22. CAP BANG SANG CHE CHO cAc SANG CHE CONG NGH~ SINH HQC

Cap b~ng sang ehe 806

Cap b~ng sang che d cac quac gia khilc nhau 809

Cap b~ng sang che eho cae trinh tl,l'ADN 811

Cap b~ng sang che eho sinh v~t da baa 812

Cap b~ng sang che va cae nghiim cUu cd blm 812T6M TAT 814

TAl LI~U THAMKHAo 815

CAUHOIONT~P 816

798

THU~N NGl1 817

805