2017/7/15

1

Mott cell様変化を伴うB細胞性リンパ腫の犬の2例

埼玉動物医療センター平林美幸 中原美喜 庄山俊宏 林宝謙治

Mott cell様の変化を伴うB細胞性リンパ腫WHO組織分類で未分類の腫瘍

動物での報告はわずか→ 治療法や予後は明らかでない

lymph nodes and tonsil and 80% in the kidneys. Theappearance of these cytoplasmic inclusions was con-sistent with Russell bodies, a characteristic of Mottcells.

Immunohistochemistry (IHC) was performed inorder to determine the expression of CD18, CD3,CD79a, lambda light chain (LLC) and multiple my-eloma oncogene 1/interferon regulatory factor-4(MUM1/IRF-4) (Supplementary Table 1). Sections(4 mm) were mounted on silane-treated charged glassslides, dewaxed and rehydrated and treated withH2O2 3% in water to quench endogenous peroxidaseactivity. Antigen retrieval was carried out as outlined(Supplementary Table 1). For negative reagent con-trols, duplicate sections of each positive and test tissuewere subjected to the same immunohistochemicalmethods with substitution of isotype-matched mousemonoclonal primary antibody (for CD79a, CD18and MUM1/IRF-4) or non-immune rabbit serum(for CD3 and LLC) for the primary antibody. Posi-tive control tissues included canine lymph node (forCD79a, CD18, CD3 and LLC) and canine plasmacy-toma (for MUM1/IRF-4).

Approximately 90% of the neoplastic cells demon-strated weak cell membrane immunoreactivity withthe anti-CD18 antibody, strong cell membrane andvariable cytoplasmic labelling with the anti-CD79aantibody in 60 and 90% of the neoplastic population,respectively (Supplementary Fig. 1), and strong cyto-plasmic and weak cell membrane immunoreactivitywith the anti-LLC antibody in 90% of the neoplasticpopulation (Supplementary Fig. 2). These findingswere consistent with a B-cell immunophenotypewith plasmacytoid differentiation. The glassy eosino-philic cytoplasmic inclusions were uniformly immu-

noreactive with the anti-LLC antibody, consistentwith immunoglobulin containing Russell bodies(Supplementary Fig. 2). Approximately 80% of theneoplastic cells demonstrated strong nuclear immu-noreactivity with the anti-MUM1/IRF-4 antibody(Supplementary Fig. 3), consistent with plasma celldifferentiation. Individual CD3+ cells were scatteredthroughout, often concentrated around the peripheryof the nodules, typical of infiltrating reactive T cells.

Russell bodies are large, homogenous, amorphous,hyaline eosinophilic cytoplasmic inclusion bodiescomposed of immunoglobulin. They are infrequentlyidentified in plasma cells (then termed Mott cells)(Bain, 2009), and are typically ascribed to an imbal-ance between the synthesis of immunoglobulin and itssecretion and/or degradation (Lebeau et al., 2002;Magalhaes et al., 2002). The pathogenic events lead-ing to the cytoplasmic accumulation of immunoglob-ulin are poorly understood. Crystallization maybe related not only to an overproductionand increased concentration of cytoplasmic immuno-globulin, but also to sequence abnormalities in immu-noglobulin genes or to stored paraproteins thatpromote crystallization or derangement of lysosomalprocessing and immunoglobulin clearance (Lebeauet al., 2002). Mutations of the VH region(Magalhaes et al., 2002) as well as amino acid substi-tutions in the VkI variability subgroup (Lebeau et al.,2002), similar to amyloidogenic molecules of immu-noglobulin, have been associated with the accumula-tion of intracytoplasmic immunoglobulin andparaproteins. Hydrophobicity, low temperature andacid pH have also been mentioned as factors leadingto self aggregation of these proteins, and in addition,somatic mutations have been linked to altered hydro-phobicity (Magalhaes et al., 2002). However, theexact mechanisms underlying the formation of immu-noglobulin crystals in vivo, and specifically in theseunique variants of B-cell lymphoma, remains un-known.

In domestic animals, B-cell lymphoma with Mottcell differentiation is rare (Table 1). Mott cell lym-phomas have usually been attributed to a neoplastictransformation within B cells of the gastrointestinaltract (given the ubiquity of enteric involvement inthe few cases reported). The small number of casesreported makes prognostic extrapolations difficult;however, extensive nodal and extranodal involve-ment was common, and response to chemotherapywas limited. Presence of a monoclonal gammopathyhas been investigated in some cases with M proteinsecretion reported despite the lack of any observablehyperglobulinaemia (Seelig et al., 2011). M proteinsecretion or the presence of a monoclonal gammo-pathy could not be evaluated in the present case.

Fig. 3. Kidney. Neoplastic cells often contain large (5e12 mm)round to oval, homogenous, pale, eosinophilic glassy cyto-plasmic inclusions that displace the nucleus eccentrically(arrow). HE.

Variant Large B-cell Lymphoma in a Dog 331

A B

C D

E F

Figure 1. (A-D) Mott cells in cytologic smears of reactive hyperplastic canine lymph nodes. Wright–Giemsa, 9100 objective. (E-F) Mott cells in histo-

logic sections of feline plasmacytic laryngitis. H&E,940 objective.

Vet Clin Pathol 42/2 (2013) 125–126©2013 American Society for Veterinary Clinical Pathology126

A B

C D

E F

Figure 1. (A-D) Mott cells in cytologic smears of reactive hyperplastic canine lymph nodes. Wright–Giemsa, 9100 objective. (E-F) Mott cells in histo-

logic sections of feline plasmacytic laryngitis. H&E,940 objective.

Vet Clin Pathol 42/2 (2013) 125–126©2013 American Society for Veterinary Clinical Pathology126

A B

C D

E F

Figure 1. (A-D) Mott cells in cytologic smears of reactive hyperplastic canine lymph nodes. Wright–Giemsa, 9100 objective. (E-F) Mott cells in histo-

logic sections of feline plasmacytic laryngitis. H&E,940 objective.

Vet Clin Pathol 42/2 (2013) 125–126©2013 American Society for Veterinary Clinical Pathology126

A B

C D

E F

Figure 1. (A-D) Mott cells in cytologic smears of reactive hyperplastic canine lymph nodes. Wright–Giemsa, 9100 objective. (E-F) Mott cells in histo-

logic sections of feline plasmacytic laryngitis. H&E,940 objective.

Vet Clin Pathol 42/2 (2013) 125–126©2013 American Society for Veterinary Clinical Pathology126

Mott cellラッセル小体（免疫グロブリン

の蓄積）を細胞質に大量に含む細胞

• 慢性炎症• 多発性骨髄腫• 一部のB細胞性リンパ腫 Cazz ini Pet al.,VetClin Pathol. 2013.

Snyman HNet al.,J.Comp. Path. 2013.

症例1プロフィール

• 2歳齢• 避妊雌• ミニチュア・ダックスフンド

主訴• 血便、腹腔内腫瘤(紹介受診)

身体検査• 腹腔内に5cm大の腫瘤を触知

検査結果

血液検査 リンパ球数の増加（9118/μl）CRPの上昇 （3.85mg/dl）

便検査 特異所見なし

尿検査 特異所見なし

• 胸骨リンパ節の腫大（2.0cm大）

• 複数の腹腔内リンパ節の腫大• 腸管壁から発生する腫瘤（各2.0-5.0cm大）

2017/7/15

2

胸腔/腹腔内リンパ節：mott cell様の変化を伴うリンパ腫を疑う脾臓、肝臓、骨髄 ：腫瘍細胞は認められない

細胞診：腹腔内リンパ節

写真提供：IDEXX laboratories 平田雅彦先生

生検：腹腔内（脾門）リンパ節

診断mott cell様の変化を伴うB細胞性リンパ腫

（ステージⅢ、サブステージb）

病理組織学的診断：リンパ腫

（小細胞～中細胞、mott cell様の変化を伴う）

クローナリティー検査 ：B細胞性のクローナリティあり

写真提供：ノースラボ 賀川由美子先生

0

20

40

60

80

100

L-ASP

VCR CPM VCR DOX VCR CPM VCR DOX VCR

治療：化学療法（UW25）

CR

各薬剤投与後の腫瘤の大きさ（%）

L-ASP ：L-アスパラキナーゼ (400U/kg)VCR ：ビンクリスチン (0.5mg/m2 )CPM ：サイクロフォスファマイド(250mg/m2 )DOX ：ドキソルビシン (1mg/kg )

Pre

出血性膀胱炎

第95病日

PR

その後の治療：VCRの投与

2週間毎3週間毎

4週間毎

休薬 休薬

2年1年 4年 5年3年 6年

6ヶ月間 5.5ヶ月間

再発 再発 治療開始第2179病日

CR CR

症例2プロフィール

• 3歳齢• 未去勢雄• ミニチュア・ダックスフンド

主訴• 下痢、排便時のしぶり• 肛門部腫瘤 (紹介受診)

身体検査• 肛門上部に2cm大の腫瘤

2017/7/15

3

検査結果

血液検査 中度の貧血 （PCV 28%）Albの低下 （2.5 g/dl）

尿検査 特異所見なし

胸部 腹部

• 右肺中葉に1.0cm大の結節

• 右肺中葉に1.0cm大の結節

• 複数の腹腔内リンパ節の腫大• 腸管壁から発生する腫瘤（1.0-4.5cm大） 腹腔内リンパ節、肛門腫瘤 :mott cell様の変化を伴うリンパ腫を疑う

脾臓、肝臓、骨髄 ：腫瘍細胞は認められない

細胞診

写真提供：IDEXX laboratories 小笠原聖悟先生

扁桃肛門

直腸（内視鏡）

病理組織学的診断 ：リンパ腫（中細胞～大細胞）クローナリティー検査 ：B細胞性のクローナリティあり

診断mott cell様の変化を伴うB細胞性リンパ腫

（ステージⅢ、サブステージb）

写真提供：ノースラボ 賀川由美子先生

0

20

40

60

80

100

薬剤投与後の腫瘤の大きさ（%）

治療：化学療法（UW25）

CR

L-ASP ：L-アスパラキナーゼ (400U/kg)VCR ：ビンクリスチン (0.6mg/m2 )CPM ：サイクロフォスファマイド (187.5mg/m2 )DOX ：ドキソルビシン (1mg/kg )

Pre

第147病日

PR肺結節消失

2017/7/15

4

その後の治療：UW25の継続

2週間毎3週間毎4週間毎

※1

2年1年 4年3年

1-2週間毎

※2休薬予定

治療開始第1177病日

※1 DOX : 180mg/m2に到達 → MTX 3.83mg/m2へ※2 CPM : 膀胱炎のためスキップ

まとめと考察症例1 症例2

犬種 M・ダックスフント M・ダックスフント発症年齢 ２歳 ３歳

腫瘍の発生状況小～中細胞性腸管リンパ節（腹腔、胸腔）

中～大細胞性腸管、リンパ節（腹腔）扁桃、肛門粘膜、肺

治療効果 VCRに奏功（休薬で再発）初回CR：95日目

多剤に感受性ありCR：147日目

生存期間 2179日（6年）現在生存（CR）

1177日（3年3ヶ月）現在生存（CR）

Mott cell様の変化を伴うB細胞性リンパ腫（化学療法実施例）生存期間：10ヶ月～ （外科切除＋COP : Kodama et al., 2008）

3ヶ月 （UW25 : Stancy et al., 2009）5ヶ月 （CHOP,L-ASP,CCNU : Seelig et al., 2011）

考察：長期生存について

犬の消化器型リンパ腫化学療法（VELCAP-SC）奏効率 ： 56%生存期間の中央値 ： 77日（95% CI, 34-120days）

（n=18, Rassnick KM et al., J Vet Intern Med. 2009）

若齢のミニチュアダックスフントの消化器型リンパ腫化学療法に対する反応が良く、生存期間が長い

（日本国内の口頭発表）

Mott cell様の変化は負の予後因子ではない？

ディスカッションポイント

ミニチュア

ダックスフント

若齢

B細胞性

Mott cell様変化

±

消化器型

いつまで化学療法を継続するべきか