Micro RNA (miRNA) Piccole molecole di RNA (20-22 nt) Prodotte da precursori di 90-100 nt trascritti...
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Micro RNA (miRNA)
• Piccole molecole di RNA (20-22 nt)
• Prodotte da precursori di 90-100 nt trascritti autonomamente (anche policistronici) o maturati da introni
• Si legano a mRNA che hanno sequenze complementari
• Presenti in tutti gli eucarioti
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Conservazione dei miRNA
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Strutture secondarie dei pre-miRNA
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Organizzazione dei geni di miRNA
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Biogenesi dei miRNA
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Biogenesi dei miRNA
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Regolazione mediata dai miRNA
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Studio della funzione dei miRNA
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Meccanismo di azione dei miRNA
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Regolazione dei miRNA (regolatori "sponge")
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MONDO A RNA (RNA WORLD)
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Diversità degli organismi
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CARATTERISTICHE DI UN "SISTEMA VIVENTE"
replicazione
evoluzione
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DOGMA CENTRALE
DNA RNA proteine
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CAPACITA' DELL'RNA
RNA come genoma
RNA come catalizzatore
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RNA come genoma
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RNA come enzima
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Apparecchio di Miller (1953)
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Sintesi prebiotiche
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DIFFICOLTA' DELLE SINTESI PREBIOTICHE
rese basse
ribosio instabile (isomeri)
legame glicosidico o
fosfato solo al 3' e 5'
legami fosfodiesterici solo 5'-3'
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Sintesi dei precursori del DNA
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Cofattori di enzimi proteici
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Origine dei cofattori
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FUNZIONI DELL'RNA NELLA CELLULA MODERNA
traduzione rRNA, mRNA, tRNA
maturazione rRNA snoRNA, RNasi MRP
splicing snRNA, introni gruppi I e II
maturazione tRNA RNasi P
sintesi DNA primers, telomerasi
traslocaz. proteine srpRNA
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PERCHE' L'RNA?
l'RNA deve essere venuto prima del DNA
l'RNA deve essere venuto prima delle proteine
molti coenzimi hanno un ribonucleotide nella struttura
l'RNA può agire come catalizzatore
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EVOLUZIONE SINTESI PROTEICA
1) tRNA
2) tRNA sintetasi
3) protoribosoma
4) codice genetico
5) mRNA
6) proteine
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1) sintesi dei precursori del DNA
2) trascrizione inversa
3) replicazione
4) trascrizione
PASSAGGIO RNA DNA
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Scala temporale dell'evoluzione
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Evoluzione prebiotica
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SELEX
(SYSTEMATIC EVOLUTION OF LIGANDS BY EXPONENTIAL ENRICHMENT)
es. affinity column
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Primo esperimento SELEX
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Selezione di un RNA con capacità di legame
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Specificità del legame
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Selezione di una RNA polimerasi
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Scheme for the function of different snmRNAs by targeting bacterial or eukaryal mRNAs or pre-mRNAs leading to regulation of gene expression. Binding of a snoRNA to the splice-site of a eukaryal pre-mRNA or involvement in mRNA editing and modification has recently been proposed as one of several alternatives for a functional role, but remains to be experimentally verified.