Liquidos Serosos 1 Comp
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ESTUDIO CITOQUÍMICOESTUDIO CITOQUÍMICODEDE
LIQUIDOS SEROSOSLIQUIDOS SEROSOS
Lic. Mercedes Catani Dra. Rosario San Martín
Dr. Isidoro Prudente Dra. Silvia Zunino Torres
Hospital de Clínicas.
Departamento de Laboratorio Clínico.
Repartición Hematología y Citología.
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LÍQUIDO SEROSO:
Se denomina así al líquido que normalmente se encuentra en las cavidades serosas:
-Cavidad pleural: 10-20 ml
-Cavidad peritoneal: 50 ml
-Cavidad pericárdica: 100 ml
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DERRAME SEROSO: DERRAME SEROSO:
Acumulación patológica de líquido en una cavidad serosa
Pleural (derrame pleural)Pericárdica (derrame pericárdico)Peritoneal (ascitis)
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Capilar sistémico
serosa visceral
serosa parietal
Presión hidrostática
Presión coloidosmótica
Capilar pulmonar
c. linfático
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MECANISMOS DE FORMACIÓN DE DERRAMES MECANISMOS DE FORMACIÓN DE DERRAMES SEROSOSSEROSOS
p. hidrostática
p. coloidosmótica
permeabilidad capilar
obstrucción del drenaje linfático
InsuficienciaCardíacaCongestiva
S.nefróticoCirrosis
InfeccionesE.. InflamatoriasNeoplasias
Neoplasias
Traumatismo
TRASUDADO
EXUDADO
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Los derrames serosos pueden presentarse como complicación de distintas patologías.
Su estudio citoquímico y bacteriológico no sólo proporciona una orientación diagnóstica sino que en algunas situaciones determina conductas terapéuticas.
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Examen macroscópicoExamen macroscópico
ASPECTO
Hemorrágico Punción traumática, derrames neoplásicos, traumatismos, TEP
Hemático o serohemático No tiene valor diagnóstico
Turbio Sobrenadante límpido: células
Sobrenadante turbio: bacterias
lípidos
Opalescente, lechoso Derrames quilosos y seudoquilosos.
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Examen químicoExamen químico
1. Parámetros bioquímicos utilizados para diferenciar trasudados y exudados
2. Parámetros bioquímicos para determinar la etiología de un exudado
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Criterios de LightCriterios de Light
Proteínas líquido pleural
Proteínas séricas
LDH liquído pleural
LDH sérica
LDH en líquido pleural 200 UI / L
> 0.5
> 0.6
> Se considera que el líquido es un exudado cuando cumple uno o más de estos criterios
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60 mg / dl 60 mg / dlColesterol *
200 U / L 200 U / LLDH
30 g / L 30 g / LProteínas
ExudadoTrasudado
* Sólo en líquidos pleurales , en líquidos de ascitis se utiliza como criterio para diferenciar derrames neoplásicos de no neoplásicos
PARÁMETROS BIOQUÍMICOS UTILIZADOS PARA DIFERENCIAR TRASUDADOS de EXUDADOS
PLEURALES
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PARAMETROS UTILIZADOS EN LIQUIDOS PARAMETROS UTILIZADOS EN LIQUIDOS DE ASCITISDE ASCITIS
Gradiente de Albúmina
Albúmina sérica – albúmina líquido :>= 1.1 g/l = HTTP< 1.1 g/l = no HTP
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Etiología de un exudado Etiología de un exudado pleuralpleural
Parámetros bioquímicos Parámetros bioquímicos
GLUCOSApHTRIGLICÉRIDOSAMILASACREATININA
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•DERRAMES PARANEUMÓNICOS COMPLICADOS
•BK
•ENF. REUMÁTICAS
•NEOPLASIAS
GLUCOSAGLUCOSA
Su concentración es similar a la plasmática en los trasudados y en la mayoría de los exudados
Valores 60 mg/dl pueden verse:
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•DERRAMES PARANEUMÓNICOS COMPLICADOS
•BK
•Enf. Reumáticas
•Neoplasias
•Acidosis sistémica
pHpH Sólo tiene valor diagnóstico cuando se
determina en las mismas condiciones que el pH arterial
Valores 7.2 pueden observarse en:
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TriglicéridosTriglicéridos Su determinación está indicada en líquidos de aspecto
opalescente o lechoso y en aquellos con sobrenadante turbio.
Permite diferenciar: - derrames quilosos (obstrucción del drenaje linfático con acumulación de linfa –neoplasias-) -seudoquilosos ( por acumulación de colesterol – BK, AR-).
Valores entre 50-110 mg/dl : estudio de quilomicrones
quiloso seudoquiloso
TG 110 mg/dl 50 mg/dl
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Líquido de AscitisLíquido de AscitisParámetros BioquímicosParámetros Bioquímicos
Gradiente de Albúmina
Albúmina sérica – albúmina líquido :>= 1.1 g/l = HTTP< 1.1 g/l = no HTP
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AmilasaAmilasa
Valores de amilasa mayores al límite superior normal en suero pueden verse en derrames causados por:
•Pancreatitis
•Rotura esofágica
•Neoplasias
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Urea y creatininaUrea y creatinina
Su determinación está indicada ante la sospecha de presencia de orina en la cavidad serosa (estallido vesical, posoperatorio de cirugía abdominal).
Se encuentran valores aumentados de urea y creatinina en el líquido seroso y valores normales de creatinina en sangre.
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Citología de líquidos decavidades serosas
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Citología de líquidos decavidades serosas
Normalmente procedentes de:
• revestimiento seroso : célula mesotelial • sistema monocítico / macrofágico
• capilares subserosos
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Célula mesotelialCélula mesotelial
NORMAL
• Redondeada• 18 a 40 u (25 u)• Núcleo central ovoide• 2 a 3 nucléolos• Citoplasma denso adelgazado en periferia• Aisladas o en grupos de menos de 12 células
(ventana)
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Célula mesotelialCélula mesotelialREACTIVA• Mayor basofilia citoplásmica• Bordes bien delimitados• Discreto grado de anisocariosis
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Célula mesotelialCélula mesotelial
INVOLUTIVA• Derrames crónicos• Degeneración vacuolar
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MacrófagoMacrófago• 45 % células normales en peritoneo. (CD68+)• 15 – 100 u (30 u)• Núcleo excéntrico arriñonado• Citop. claro,finamente vacuolado (encaje)• Material fagocitado• Formas multinucleadas
y gigantes sólo en
serositis reumática
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Células procedentes deCélulas procedentes decapilares subserososcapilares subserosos
• Glóbulos rojos. Punción (1 ul/mm3) Hemorragia.• PMN. % variable. Inflamación. Infarto.• Linfocitos. Procesos benignos: Formas T NA. viral, TBC, neoplasias• Eosinófilos. (10%) Infección viral, parasitaria, mesenquimopatías, TEP, Ntx, Htx.
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Cuadros citológicos patológicosCuadros citológicos patológicos
Células en proporciones variables dependiendo de la causa, duración y complicaciones del derrame.
• Inflamación . Inespecífica . Específica• TBC• TEP• Cirrosis hepática• Derrames neoplásicos
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InflamaciónInflamación• Inespecífica. -células mesoteliales y PMN
- IC - NA - sobreinfección PMN +50%: - pleura: empiema - ascitis: PBE : recuento en cámara de Neubauer PMN > 250/ mm3 - DPCA: GB > 100/ mm3 50% PMN
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InflamaciónInflamación
- AR - macrófagos
- m. gigantes multinucleados
- material necrótico granular• Específica. eosinófilo.
- LES - cél.LE 30% pleuritis lúpica.
- cél. mesoteliales y eosinófilos
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TBCTBC• En pleura - infiltrado linfocitario crónico sin
reacción mesotelial.• En peritoneo - infiltrado linfocitario crónico con
reacción mesotelial y macrofágica.
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TEPTEP
Necrosis hemorrágica subpleural con reacción
inflamatoria perilesional.
• Citología pleomórfica : - fondo hemorrágico.
- reacción mesotelial a/v con
alt. citomorfológicas.
- macrófagos con gránulos
de hemosiderina.
- PMN y linfocitos.
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Cirrosis hepáticaCirrosis hepática
Celularidad pleomórfica: células mesoteliales, macrófagos, linfocitos, y PMN.
Puede observarse hepatocitos como células epiteliales poliédricas con núcleo central y disposición acinar (no debe confundirse con metástasis)
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Derrame neoplásicoDerrame neoplásico
• Mayor frecuencia corresponde a adenocarcinomas
de pulmón, mama, ovario.• Tendencia a formar grupos celulares cohesivos,
tridimensionales o seudoacinos, cuyas células
presentan variadas atipías citomorfológicas.• El mesotelioma ( neoplasia de la serosa ) es muy
poco frecuente.
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MARCADORES MARCADORES TUMORALESTUMORALES
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MARCADORES MARCADORES TUMORALESTUMORALES
• Sustancia producida por la célula neoplásica que refleja su crecimiento y/o actividad, y permite conocer la presencia, evolución o respuesta terapéutica de un tumor maligno.
• Incluye: 1)productos detectables in situ en el tumor o sus metástasis y 2) productos liberados a la sangre y detectables en suero.
• Al 1º grupo dedicaremos nuestra atención.
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INMUNOCITOQUIMICAINMUNOCITOQUIMICA
• .Definición: técnica que hace visible una reacción antígeno - anticuerpo en muestras citológicas.
• .Inmunohistoquímica (IHQ): si dicha reacción se realiza sobre tejidos.
• .Aporta mayor sensibilidad diagnóstica a los criterios exclusivamente morfológicos.
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METODOLOGIAMETODOLOGIA
• Se utilizan Ac Monoclonales (Moabs): poseen alta homogeneidad de lugares específicos de unión con el antígeno.
• Los antígenos no deben ser destruidos ni enmascarados por los procedimientos técnicos.
• Fijador: debe estar en función de los grupos reactivos antigénicos que se pretende demostrar.
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METODOLOGIAMETODOLOGIA
• Fijador: debe buscar un equilibrio entre la preservación de la morfología y la inmunoreactividad.
• Se clasifican: 1) actúan por precipitación 2) actúan estableciendo uniones cruzadas.
• Sistemas de revelado: hacen visible la reacción (IFD, IFI).
• Aplicable a PAAF, derrames, bloques celulares, improntas, etc.
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PANELES DE PANELES DE ANTICUERPOSANTICUERPOS
• Los paneles de Moabs se realizan siguiendo 2 líneas: 1) por ANTIGENOS a estudiar
2) por TUMORES a detectar. • 1)Por Antígenos a detectar: • Ag Oncofetales : AFP, CEA.• Mucinas: MUC1, MUC2, MUC3A, (CA-125,
CA15-3, CA 27-29).• Citoqueratinas: 8, 18, 19, (CIFRA, TPS, TPA).• Enzimas e inhibidores: NSE, SCC.
![Page 39: Liquidos Serosos 1 Comp](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042502/55cf9cc7550346d033ab03da/html5/thumbnails/39.jpg)
Tumores a estudiarTumores a estudiar
CQ VM LCA HMB45
Carcinoma + - - -
Linfoma - + + -
Sarcoma - + + -
Melanoma - + + +
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Adenocarcinoma vs Adenocarcinoma vs MesoteliomaMesotelioma
AdenoC Mesotel.
CEA + -
CQ B Peso + +
CQ A Peso - +
CD 15 + -
B 72.3 + -
Desmina - +
![Page 41: Liquidos Serosos 1 Comp](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022042502/55cf9cc7550346d033ab03da/html5/thumbnails/41.jpg)
PROTOCOLO DE PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE PROCESAMIENTO DE LIQUIDOS SEROSOSLIQUIDOS SEROSOS
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PROTOCOLO DE PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE PROCESAMIENTO DE LIQUIDOS SEROSOSLIQUIDOS SEROSOS
•Recepción de la muestraLos líquidos obtenidos por punción serán
remitidos rápidamente al laboratorio en 4 tubosa) tubo estéril para estudio bacteriológico.b) tubo seco sin anticoagulante para estudio
bioquímico.c) tubo con anticoagulante para estudio citológico.d) tubo en anaerobiosis para determinación de pH.
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ProcesamientoProcesamiento
1) Macroscopía• color• aspecto• presencia o no de coágulo• presencia de restos tisulares
2) Centrifugación • convencional 2500 rpm 10’
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ProcesamientoProcesamiento
3) Postcentrifugado• sobrenadante - color - aspecto
• sedimento - volumen - características -hemático - capa blanca celular
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ProcesamientoProcesamiento
4) Estudio bioquímico del sobrenadante• glucosa• proteínas totales• colesterol• LDH• Tg (sobrenadante turbio)• otras determinaciones - amilasa, urea, iones, etc.
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ProcesamientoProcesamiento
5) Citología• Frotis del sedimento resuspendido de centrifugación convencional.
• Citocentrifugación Se realiza de rutina excepto en líquidos muy
hemorrágicos o purulentos, o con una gran capa celular en el sedimento convencional.
Se resuspende el sedimento en 250ul de sobrenadante y se carga la cápsula.
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Ventajas de la citocentrifugaciónVentajas de la citocentrifugación
• Mayor concentración celular.• Disposición celular en monocapa evitando el
solapamiento.• Conserva intacta la morfología celular. • Permite realización de técnicas inmunocito-
químicas.
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• La citocentrifugación siempre debe ser realizada en forma paralela a la centrifugación convencional que aporta la noción cuantitativa de los elementos celulares.
• De una serie de citologías de líquidos serosos que fueron negativas para atipías citomorfológicas
mediante centrifugación convencional , 36 % resultaron positivos para citocentrifugación.
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ProcesamientoProcesamiento
6 ) Secado de lo frotis al aire y tinción con
MGG.
Los tiempos de tinción son similares a los
empleados en extendidos hematológicos,
debiéndose acortar a la mitad la etapa de
Giemsa.
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Confección del informeConfección del informe• Nombre del paciente• Procedencia• Datos filiatorios• Tipo de material• Estudio realizado - macroscopía - bioquímica - citología - en suma diagnóstico• Fecha• Firma responsable