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L’illuminazione in campo scuro PERMETTE DI VEDERE MOLTI OGGETTI COSÌ PICCOLI DA NON DARE SUFFICIENTE CONTRASTO CON ALTRE TECNOLOGIE DI MICROSCOPIA OTTICA 1 2 La struttura di rivestimento dei batteri
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L’illuminazione in campo scuro
PERMETTE DI VEDERE MOLTI OGGETTI COSÌ PICCOLI DA NON DARE SUFFICIENTE CONTRASTO CON ALTRE TECNOLOGIEDI MICROSCOPIA OTTICA
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La struttura di rivestimento dei batteri
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La struttura dei batteri
# = non sono presenti in tutti i batteri
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La colorazione di Gram è un esame di laboratorio che permette la classificazione deibatteri in gram-positivi e gram-negativi (gram+ e gram-).Fu messo a punto dal medico danese Hans Joachim Christian Gram (1884), e mettein evidenza alcune proprietà fondamentali della parete cellulare dei BATTERI.
La parete battericaLa colorazione di GRAM
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G +
G –A COSA SI DEVE QUESTO DIVERSO COMPORTAMENTO?
La parete battericaLa colorazione di GRAM
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La parete batterica
È una struttura rigida e inestensibile che NON interferisce con il trasporto ed ilpassaggio delle sostanze
La sua funzione è quella di proteggere la cellula (principalmente dalla lisi osmotica); dona rigidità alla cellula
È costituita principalmente dal polimero MUREINA (o PEPTIDOGLICANO).
Il PEPTIDOGLICANO è un polimero formato dalla successione lineare di due
zuccheri modificati che si ripetono alternativamente, l’ACIDO N-ACETIL MURAMICO
(AAM) e l’N-ACETILGLUCOSAMMINA (NAG) uniti da un legame β 1-4 glucosidico
AAM NAG
β 1-4
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(Cross-linking)
Il peptidoglicano
Le catene polimeriche di AAM e
NAG affiancate e sovrapposte sono
collegate e irrigidite da corte catene
peptidiche che formano i legami
crociati. La struttura risultante
conferisce particolare rigidità alla
parete cellulare
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I legami crociati del peptidoglicano in G+ e G–
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Il peptidoglicano(grafico riassuntivo)
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La parete batterica di G+ e G–
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GRAM negativo
GRAM positivoGRAM negativo
GRAM positivoGRAM negativo
DUNQUE PERCHÉ I BATTERI G–PERDONO LA COLORAZIONE?
La parete batterica di G+ e G–
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Gli acidi teicoici nella parete dei batteri G+
Gli acidi teicoici sono legaticovalentemente al gruppo 6-ossidrile dell’acido muramico
LEG
AM
E F
OS
FO
-DIE
ST
ER
E
Gli acidi teicoici sono polimeri formati da catene diribitolo o glicerolo unite da legami fosfodiesterici.
Il loro ruolo per la cellula non è del tutto chiaro; probabilmente hanno un ruolo strutturale; dicerto rivestono un ruolo importante nei riguardi dei processi di adesione alle mucosecellulari dell’ospite in alcuni patogeni (come in alcune specie patogene del genereStreptococcus) o in batteri commensali intestinali (come in Bifidobacterium)
RIBITOL FOSFATO
GLICEROL FOSFATO
Bac
illus
sub
tilis
Lact
obac
illus
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Il lipopolisaccaride di parete (LPS) nei batteri G–
Escherichia coliO157:H7
Antigene somatico
Antigene flagellare
Agente causale dell’hamburger disease (colite emorragica)
L’LPS è una molecolacomposta, presente solo nellecellule procariotiche Gram negative. È composto da 3 parti: il LIPIDE A, il CORE e l’ANTIGENE A
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05 ottobre 2009
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MEMBRANA
Altre molecole associate alla parete
Colorazione di Gram
PARETE spessa sottile
solo interna interna ed esterna
acidi (lipo)teicoici LPS
blue/viola rossa/rosa
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Un’altra importante macromolecola contiene la NAG:
la CHITINA…è un omopolimero di unità diacetilglucosammina (più specificamente, N-acetil-D-glucos-2-ammina) legate tra di lorocon un legame glucosidico di tipo β-1,4
Cicatrici di gemmazione (sono rigide poiché ricche di chitina)
La CHITINA è presente in Saccharomyces cerevisiae:
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Saccharomyces cerevisiaeal microscopio…
OTTICOelettronico a scansione
(SEM)elettronico a trasmissione
(TEM)
parete cellulare
