Koagulacija - predavanje 2014
-
Upload
vanja24312 -
Category
Documents
-
view
41 -
download
11
description
Transcript of Koagulacija - predavanje 2014
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
1
Biohemijski aspekti
hemostaze
Predmet: Opšta biohemija
Studijski program: Farmacija – medicinska biohemija
Hemostaza
• Hemostaza - zaustavljanje krvarenja
• Faze
– Vaskularna
– Trombocitna
– Faza koagulacije krvi
– Fibrinoliza
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
2
Adhezija trombocita
Kolagen
von Willebrand-ov faktor
GPIb-IX-V
Trombocit
Endotel
Cirkulacija
Aktivacija i agregacija
Počinje pod dejstvom kolagena (GPVI i GPIaIIa)
1. Kontrakcija citoskeleta i reakcija oslobađanja
• guste granule: ADP (P2Y12: cAMP↓; P2Y1: Ca2+↑ PKC↑), serotonin
• α-granule: vWF, fibrinogen, trombocitni faktori
2. Sinteza TXA2 (Gq - Ca2+↑ PKC↑)
3. Promena konformacije GPIIbIIIa (vezivanje fibrinogena)
• Zajednički i konačni mehanizam agregacije izazvane bilo kojim fiziološkim agonistom ili patološkim agensom.
4. Premeštanje anjonskih fosfolipida u spoljašnji lipidni sloj
• Ovo omogućuje vezivanje FVa i FVIIIa, a time i aktivaciju FX u FXa, kao i protrombina u trombin.
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
3
Trombin Aktiviran PAR1
Plazma membrana
Citozol trombocita
Trombin - aktivacija receptora
PAR1 – Protease Activated Receptor 1
Efekti aktivacije PAR1
1. Kontrakcija citoskeleta i reakcija oslobađanja
2. Sinteza TXA2 (Gq - Ca2+↑ PKC↑)
3. Promena konformacije GPIIbIIIa (vezivanje fibrinogena)
4. Premeštanje anjonskih fosfolipida u spoljašnji lipidni sloj
Trombin ima ključnu ulogu u povećanju mase agregata trombocita!
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
4
Prirodni inhibitori agregacije
• Prostaciklin (PGI2)
– Sinteza u ćelijama endotela (ciklooksigenaza)
– cAMP ↑ - inhibicija aktivacije trombocita
• NO
– Sinteza u ćelijama endotela
– Deluje sinergistički sa PGI2
• CD39
– Vezan za spoljašnju površinu endotelnih ćelija
– Ekto-ADP-aza - sprečava dejstvo ADP-a
InhibitoriGPIIb-IIIa
AntagonistiP2Y12
Aspirin
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
5
Faktori koagulacijeI FibrinogenII ProtrombinIII Tkivni faktor ili tromboplastinIV Ca2+
V ProakcelerinVII ProkonvertinVIII Antihemofilni faktorIX Christmas-ov faktorX Stuart-ov faktorXI Prethodnik tromboplastinaXII Hageman-ov faktorXIII Proglutaminaza
PrekalikreinHMWK (High molecular weight kininogen)
-Serin-proteazaKofaktor-KofaktorSerin-proteazaKofaktorSerin-proteazaSerin-proteazaSerin-proteazaSerin-proteazaTransglutaminazaSerin-proteazaKofaktor
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
6
Aktivacija faktora koagulacije
Aktivan oblik
Neaktivan oblik
Enzim (prethodniaktivan faktor)
X →→→→ Xa
Unutrašnji put
Spoljašnji put
Fibrinogen →→→→ Fibrin
Zajedni čki put
aPTTPT
Koagulacija: tradicionalni model
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
7
VIIIa
X
FL,Ca2+
TF-VIIa
TF
VII
XaX
IXaIX
FL,Ca2+
FL,Ca2+
Spoljašnji put
Unutrašnji put
XIa
Kontaktni sistem(XIIa, Kalikrein, HMWK)
Trombin Zajedni čki put
Xa
IIaII
FL,Ca2+Va
ProtrombinTrombin
IaI
FibrinogenFibrin
(meki ugrušak)
Fibrin(čvrsti ugrušak)
XIIIaXIII
Zajedni čki put
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
8
Struktura fibrinogena
Konverzija fibrinogena u fibrin
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
9
Dejstvo faktora XIIIa
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
10
γ-Karboksilacija Glu
Gla-domen
Gla-ostaci
Ca2+
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
11
Antagonisti vitamina K
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
12
t½
Faktor VII 4-6 h
Protein C 8-12 h
Faktor IX 20 h
Faktor X 24 h
Protrombin 60 h
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
13
Koagulacija : ćelijski model
Inhibitori koagulacije
• Antitrombin
– Trombin (IIa)
– Xa
• Protein C
– Va
– VIIIa
• Inhibitor spoljašnjeg puta (TFPI)
– Faktori spoljašnjeg puta
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
14
Antitrombin III
• Inhibitor serin-proteaza
– Trombin
– Xa
• Aktivacija heparinom (in vivo: heparan-sulfat na površini endotelnih ćelija)
– 1000 x brže stvaranje kompleksa antitrombin-proteaza
Trombin (aktivan oblik) Antitrombin III
Kompleks trombin-antitrombin (neaktivan)
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
15
Heparin
• Polisaharid (glikozaminoglikan)
• Nefrakcionisani heparin
– 10 - 50 ostataka; Mr = 3.000-30.000
• Heparin niske molekulske mase
– 6 - 30 ostataka; prosečna Mr = 4.500 - 5.000
• Pentasaharid - vezivanje i aktivacija AT
PentasaharidNefrakcionisaniheparin
Faktor Xa
Antitrombin
Trombin
PentasaharidNefrakcionisaniheparin
Faktor Xa
Antitrombin
Trombin
Faktor Xa
Pentasaharid
Heparinniskemolekulskemase
Antitrombin
Faktor Xa
Pentasaharid
Heparinniskemolekulskemase
Antitrombin
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
16
Aktivacija proteina C
Trombomodulin
Trombin
E n d o t e l
S
S
PC(proenzim)
APC
S
S
Aktivacioni peptid
EPCR
EPCR – Endotelni Protein C receptor
Dejstvo proteina C
• Aktivnost serin-proteaze - hidroliza faktora koagulacije
– Faktor Va (faktor V Leiden)
– Faktor VIII
• Protein S
– Kofaktor proteina C
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
17
TFPI: inhibitor spoljašnjeg puta
• Sinonimi:
– TFPI - Tissue Factor Pathway Inhibitor
– LACI - Lipoprotein-Associated Coagulation Inhibitor
– Antikonvertin (stari naziv)
• Funkcija:
– inhibicija multienzimskog kompleksa spoljašnje F X - aze (VIIa i Xa)
TFPI
Prof. dr Z. Jelić-Ivanović: Predavanja iz opšte biohemije 13.2.2014
18
Fibrinoliza
FDPt-PAFibrin
Plazminogen
α2-antiplazminPAI-1
Fibrin
Plazmin
Prokoagulantni faktori:
TrombocitiFaktori koagulacijeInhibitori fibrinolize
Antikoagulantni faktori:
EndotelInhibitori koagulacije
Fibrinoliza