KCKT ( Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ) Disusun oleh : Aqnes Budiarti , M.Sc., Apt
description
Transcript of KCKT ( Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ) Disusun oleh : Aqnes Budiarti , M.Sc., Apt
1Pekerti
Sub Pokok bahasanSub Pokok bahasan
2Pekerti
1. Prinsip kerja alat
2. Manfaat
3. Komponen
4. Kromatogram
5. Keunggulan KCKT
Prinsip kerja alatPrinsip kerja alat
KCKT adalah alat untuk memisahkan campuran zat sekaligus untuk menetapkan kadarnya
Prinsip pemisahan berdasarkan perbedaan polaritas
Alat pemisahan tercanggih dan terpopuler pada 20 tahun terakhir
3Pekerti
Manfaat Manfaat
4Pekerti
Komponen Komponen
5Pekerti
Tempat injeksi (Injection valve)
Tempat injeksi (Injection valve)
Load system
6Pekerti
Fase diam (stationary phase /
column)
Fase diam (stationary phase /
column)Macam: Fase normal
contoh: porous silica Fase terbalik (RP)
contoh: C18 Lichrospher
7Pekerti
Guard column
Penggantian kolomPenggantian kolom
Kinerja sudah jelek, menghasilkan data yang tidak valid
Nilai pemisahan (resolusi) < 2
8Pekerti
9KCKT 2010
Ukuran partikel fase diamUkuran partikel fase diam
Fase gerak (mobile phase)Fase gerak (mobile phase)Solvent Index
PolarityEluotropic Values UV Cut
off (nm)Alumina C18 Silica
Hexane 0,1 0,01 - 0,00 195
Cyclohexane 0,2 0,04 - - 200
Toluene 2,4 0,29 - 0,22 284
Tetrahydrofuram 4,0 0,45 3,7 0,53 212
Chloroform 4,1 0,40 - 0,26 245
Ethyl acetate 4,4 0,58 - 0,48 256
Acetone 5,1 0,56 8,8 0,53 330
Methanol 5,1 0,95 1,0 0,7 205
Acetonitrile 5,8 0,65 3,1 0,52 190
Dimetilformamide 6,4 - 7,6 - 268
Dimethylsulfoxide 7,2 0,62 - - 268
Water 10,2 - - - 190 10Snyder dkk., 1997
Kecepatan alir (flow rate)
Pekerti 11
It is important to use the correct flow rate for your KCKT column
Tehnik elusi1. Isokratik
komposisi dan kecepatan alir fase gerak tetap selama proses analisis
2. Gradien
komposisi dan kecepatan alir fase gerak dapat dirubah selama proses analisis
Pekerti 12
kromatogramkromatogram
13Pekerti
Tipe kromatogramTipe kromatogram
14Pekerti
X
√
Optimasi
Pekerti 15
Keunggulan KCKT
16 Pekerti
Literatur
Ahuja,S.and Dong,M.W.,2005, Handbook of Pharmaceutical Analysis by HPLC, volume 6, Separation Science and Technology, Elsevier Academic Press, Amsterdam.
Snyder, L.R., Kirkland, J.J., and Glajch, 1997, Practical HPLC Method Development, Second Edition, John
Wiley & Sons Inc., New York.
18Pekerti
TERIMA KASIH
DEMIKIAN,