7/28/2019 KBA TUGAS

1/7

ALKALOID

Kimia alkaloid sangat beragam sehingga para ahli tidak dapat mengidentifikasi hanyadengan menggunakan kromatografi tunggal.pada umumnya sangat sukar untuk

mengidentifikasi alkaloid yang mungkin terkandung dalam tumbuhan.Adanya alkaloid dapat dideteksi melalui kromatografi lapis tipis (KLT) dengan

menggunakan pereaksi warna, seperti :

Pereaksi Dragendorff Serium ammonium sulfatMetoda pengendapan yang menghasilkan senyawa kompleks sukar larut dengan

logam-logam nerat, misalnya :

Pereaksi meyer Garam reinekat

FLAVONOID

Flavonoid di deteksi dengan metode yang telah dikembangkan oleh para ahli,

diantaranya : Metode yang ditemukan oleh J. Shinoda (1928) atau sering juga disebut metode

Sianidin test. Prinsip metode ini adalah reaksi-reduksi, yaitu dengan

penambahan logam Mg dalam suasana asam (HCl).Flavonoid yang memiliki gugus

OH atau Ome pada posisi 2 gugus fenil akan memberikan warna merah hingga

ungu.

Warna yang terbentuk dapat bervariasi tergantung pada jenis gugus yang ada.Isi flavon dapat bereaksi memberikan warna kuning-orange setelah beberapa waktu,

namun biasanya memberikan reaksi negatif.Apabila Mg diganti dengan Zn, Flavonol

dapat dibedakan dari Flavanon dan Flavanol-3-glikosida dari aglikonnya karena salah

satu akan membentuk warna lebih intensif.

7/28/2019 KBA TUGAS

2/7

Reaksi :

Flavonoid NaOH Mg/HCl

Kalkon Orange-merah Negatif

Dihidrokalkon Kuning pucat Negatif

Auron Merah-ungu Negatif

Flavanon Kuning-orange, merah-ungu dengan

pemanasan

Merah, magenta,violet, hingga biru

Flavon Kuning Kuning-merah

Flavonol Kuning-orange Merah-magenta

Flavonolol Kuning pucat berubah

jadi coklat (oksidasi)

Merah-magenta

Leucoantosianin kuning Pink dengan HCl

menjadi kuat dengan

Mg

Antosianidin/Ant

osianin

Biru-violet Merah berubah jadi

merah muda

Katekin Kuning berubah jadi

merah dan coklat

Negatif

7/28/2019 KBA TUGAS

3/7

Isoflavon Kuning Kuning

isoflavanon Kuning Negatif

Metoda Kromatografi sering digunakan untuk mengindetifikasi flavonoiddengan menggunakan silica atau yang lebih sering menngunakan kertas (KKT)

satu arah atau dua arah. Beberapa pereaksi warna (sray reagents) yang umum

digunakan untuk mendeteksi flavonoid adalah :

Basa

Reagensia Kekuatan Jenis Flavonoid

Amoniak Pekat Semua flavonoid kecuali

antosianin

NaOH Larutan encer Antosianin

Na karbonat 1-5% Semua Flavonoid

Garam-garam

Aluminium asetat 2,5% Flavonol

Alumunium klorida 1-5% dalam etanol Semua flavonoid

Aluminium sulfat 2% Antosianidin

Ferri klorida 1% dalam etanol 0,5%

dalam metanol

Semua flavonoid

7/28/2019 KBA TUGAS

4/7

Ferri potassium tartrat Flavon

Ferro ammonium sulfat 0,2% Katekin dan esternya

Mg asetat Semua jenis flavonoid

Larutan benedicts Semua jenis flavonoid

Amina diazo

Asam sulfanilat Semua jenis flavonoid

p-nitro anilin

Garam diazonium

Aniline

Reagen lain

Vanillin-HCl P 1% Katekin, leukoantosianin

Na Borohidrat 1% dalam isopropyl

alkohol

Flavanon

As. Sitrat-As borat 3% dalam metanol Flavonol

As. P-toluensolfonat 3% dalam alkohol Leukoantosianin, katekin

dan flavonol

Untuk mengidentifikasi dan karakterisasi flavonoid secara spektroskopidiantaranya dapat dilakukan dengan penambahan pereaksi-pereaksi geser,

7/28/2019 KBA TUGAS

5/7

dimana dengan penambahan reagensia tertentu, serapan maksimum pada UV-

VIS akan mengalami pergeseran.

TERPENOID

Senyawa terpenoid Sangat sukar untuk dideteksi karena tidak terdapat pereaksi

warna umum untuk golongan senyawa ini. Analisis yang sering digunakan umumnya

menggunakan kromatografi gas. Walaupun demikian, secara sederhana pada plat

KLT, beberapa metoda dan pereaksi warna senyawa dapat membantu identifikasi

senyawa terpenoid.

Penampak noda yang umum digunakan untuk mendeteksi terpenoid pada plat KLT

dintaranya :

Larutan KMnO4 atauVanillin-H2SO4

Penggunaan pereaksi asam sulfat biasanya juga diikuti dengan pemanasan 100-105

C hingga timbul warna.

Pereaksi yang selektif terhadap terpenoid yang memiliki gugus keto dapat dipakai

2,4-dinitrofenilhidrazin (2,4-DNP).

Pereaksi Lieberman-Buchard (anhidrida asetatat-H2SO4 p) juga sering digunakan

untuk mendeteksi senyawa terpen (warna merah).

Beberapa pereaksi monoterpen pada KLT :

7/28/2019 KBA TUGAS

6/7

Terpena Tanggapan terhadap uji*

UV Brom 2,4-DNP H2SO4

Limonene - + - coklat

-Pinema - + - Coklat

Pulegon + + + Kuning

Geraniol - + - Lembayung

Karvon + + + Merah jambu

p-Simena + - - -

-Terpineol - + - Hijau

1,8-Sineol - - - Hijau

STEROID

Pereaksi yang banyak digunakan untuk mendeteksi golongan ini adalah :

Pereaksi Lieberman-Burchard (anhidrida asetat- H2SO4) yang kebanyakantriterpen dan sterol memberikan warna hijau-biru.

Caranya :

Plat disemprot dengan campuran H2SO4 P 1 ml, anhidrida asetat 20 ml dan

CH3Cl 50 ml, lalu dipanaskan pada suhu 85-95 C selama 15 menit. Disini pun

terjadi berbagai warna yang disebabkan oleh triterpena yang berlainan dan

kepekaannya sangat baik (2-5 g).

Uji deteksi lain yang digunakan ialah uji yang dapat dipakai untuk triterpenasecara umum, misalnya H2SO4 saja atau diencerkan dengan air dan

alkohol.Akhirnya, pelarut yang paling sederhana yaitu air, dapat dipakai sebagai

penyemprot untuk mendeteksi steroid pada plat KLT. (Gritter dan Albers,

1962).

7/28/2019 KBA TUGAS

7/7

KUMARIN

Apabila terdapat gugus hidroksi pada cincin benzen maka senyawa ini juga

berlaku sebagaimana senyawa fenolik yaitu memberikan reaksi positif dengan FeCl 3.

Pengamatan senyawa ini pada KLT dapat dilakukan dengan mengamati dibawah sinar

UV yang sebelumnya telah dibasakan (NaOH 5%). Setelah 5-10 menit akan terlihat

fluoresensi hijau-kuning yang kuat dibawah UV.

Kedde

Kegunaan reaksi kedde untuk mereaksi glokosida

Kedde's reagent :3,5-dinitrobenzoic acid + NaOH warna violet