INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI NEGLI ADENOCARCINOMI DUTTALI E

NEI TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS

D Segala, S Bersani, V Zenti, S Beghelli, S Gobbo, S Barbi, P S Moore, G Turri, M Brunelli, P Capelli, G Martignoni, F Menestrina, A Scarpa

UNIVERSITÀ DI VERONA

INTRODUZIONE

L’ INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI (MSI) È DOVUTA ALL’ALTERATA FUNZIONE DEI GENI DEL

MISMATCH REPAIR (MLH1, MSH2, MSH6).

NEL TRATTO GASTROENTERICO MSI È STATA DESCRITTA DAPPRIMA NEL CARCINOMA EREDITARIO DEL COLON NON ASSOCIATO A SINDROME POLIPOSICA

FAMILIARE (HNPCC) (1) E SUCCESSIVAMENTE NEL

CARCINOMA GASTRICO. IN ENRAMBE LE CONDIZIONI SEMBRA AVERE VALORE PROGNOSTICO POSITIVO (2)(3).

(1) Aaltonen LA, Peltomaki P, Leach FS, Sistonen P, Pylkkanen L, Mecklin JP, et al. Clues to the pathogenesis of familial colorectal cancer. Science 1993;260:812–6.

(3) Beghelli S, de Manzoni G, Barbi S, Tomezzoli A, Roviello F, Di Gregorio C, et al.Microsatellite instability in gastric cancer is associated with better prognosis in only stage II cancers. Surgery 2006;139(3):347-56.

(2) Samowitz WS, Curtin K, Ma KN, Schaffer D, Coleman LW, Leppert M, et al. Microsatellite instability in sporadic colon cancer is associated with an improved prognosis at the population level. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 2001;10:917–23

CARCINOMI COLORETTALI

hMSH2

MSI-N

TMSI+

hMHL1

18qLOH

N

T

N

T

hMSH6

ALTERAZIONE

TUMORI DEL PANCREAS

MSI SEMBRA ESSERE PRESENTE CON BASSA FREQUENZA

NELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE (1).

MSI È STATA INOLTRE RISCONTRATA IN UN NUOVO

ISTOTIPO RECENTEMENTE DESCRITTO, IL CARCINOMA MIDOLLARE DEL PANCREAS, IPOTIZZANDO LA SUA

CORRELAZIONE CON HNPCC (2).

NEI TUMORI ENDOCRINI È DESCRITTA IPERMETILAZIONE DI MLH1 E MSI: TALI ALTERAZIONI SAREBBERO CORRELATE ALLA RIDUZIONE DEL RISCHIO DI RECIDIVA (3).

(2) Wilenz RE, Goggins M, Redson M, Marcus VA, Volkan Adsay N, et al. Genetic, immunohistochemical, and clinical features of medullary carcinoma of the pancreas: A newly described and characterized entity. Am J Pathol. 2000 May;156(5):1641-51.

(1) Yamamoto H, Itoh F, Nakamura H, Fukushima H, Sasaki S, et al. Genetic and clinical features of human pancreatic ductal adenocarcinomas with widespread microsatellite instability. Cancer Res 2001;61:3139–44.

(3) House MG, Herman JG, Guo MZ, Hooker CM, Schulick RD, et al. Prognostic value of hMLH1 methylation and microsatellite instability in pancreatic endocrine neoplasms. Surgery 2003 Dec;134(6):902-8

INTRODUZIONE

CON IL NOSTRO STUDIO VOGLIAMO ANALIZZARE L’INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI NELL’ISTOTIPO PREVALENTE DEI TUMORI DEL PANCREAS, L’ADENOCARCINOMA DUTTALE, E NELLE NEOPLASIE ENDOCRINE DEL PANCREAS.

ARCHIVIO DIPARTIMENTO DI PATOLOGIA UNIVERSITÀ DI VERONA

261 NEOPLASIE DEL PANCREAS DI CUI

ADENOCARCINOMI DUTTALI SPORADICI

TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS

MATERIALI E METODI

177

84

• RACCOLTA DATI CLINICO-PATOLOGICI E FOLLOW-UP

• RICERCA INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITIMarcatori utilizzati:

• BAT 25 (INTRONE GENE MSH2)

• BAT 26 (INTRONE GENE KIT)

MICRODISSEZIONE MANUALE DA SEZIONI DI TESSUTO IN PARAFFINA, AMPLIFICAZIONE PCR UTILIZZANDO PRIMERS FLUORESCENTI E LETTURA CON ABI PRISM 310 GENETIC ANALYZER, FOSTER CITY CALIFORNIA

• ESPRESSIONE FENOTIPICA DEI GENI DEL MISMATCH REPAIRMARCATORI IMMUNOISTOCHIMICI

• MLH1 (G168-15 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)

• MSH2 (G129-1129 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)

• MSH6 (Clone 44 PHARMINGEN, San Diego, Calif.)

UTILIZZAZIONE DEL COMPLESSO AVIDINA-BIOTINA-PEROSSIDASI

ADENOCARCINOMI DUTTALI

• RACCOLTA DATI CLINICO-PATOLOGICI E FOLLOW-UP

• RICERCA INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITIMarcatori utilizzati:

• BAT 25 (INTRONE GENE MSH2)

• BAT 26 (INTRONE GENE KIT)

MICRODISSEZIONE MANUALE DA SEZIONI DI TESSUTO IN PARAFFINA, AMPLIFICAZIONE PCR UTILIZZANDO PRIMERS FLUORESCENTI E LETTURA CON ABI PRISM 310 GENETIC ANALYZER, FOSTER CITY CALIFORNIA

TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS

RISULTATI

ADENOCARCINOMI DUTTALI• 177 PAZIENTI: 100 ♀ , 77 ♂

• ETÀ MEDIA 61 ANNI (RANGE 27-94)

• TOPOGRAFIA: 152 TESTA DEL PANCREAS 19 CORPO DEL PANCREAS 6 CODA DEL PANCREAS• GRADO ISTOLOGICO

G1=8; G2=98; G3=70; G4=1; • TNM

T1N0=2; T1N1=1; T2N0=1; T2N1=2; T3N0=39; T3N1=114; T3N1M1=3;T3NX=2; T4N0=4; T4N1=9;

• STADIO I=3; II=39; III=118; IVA=14; IVB=3;

• MALATTIA RESIDUAR0=117; R1=48; R2= 12;

• 164 PAZIENTI CON FOLLOW-UP MEDIO DI 16 MESI (RANGE 0,4-156)

175 CASI: STABILI (MSI-)MLH1+, MSH2+,MSH6+

1 CASO: INSTABILE (MSI+)

MLH1+, MSH2+, MSH6+

1 CASO: INSTABILE (MSI+)

MLH1-, MSH2+,MSH6+

RISULTATI

ADENOCARCINOMI DUTTALI

N

N

T

T

• MASCHIO, 48 ANNI• NEOFORMAZIONE PERIAMPOLLARE

• ADENOCARCINOMA DUTTALE • G3• T3N1M0• PAZIENTE DECEDUTO A 16 MESI DALLA DIAGNOSI.

MORFOLOGIA NON ASCRIVIBILE AL GRUPPO DEI CARCINOMI MIDOLLARI

MLH1

RISULTATI

TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREAS

• 84 PAZIENTI: 41 ♀ , 43 ♂• ETÀ MEDIA 52 ANNI

• TOPOGRAFIA: 46 TESTA DEL PANCREAS 21 CORPO DEL PANCREAS 16 CODA DEL PANCREAS

• 69 TUMORI NON FUNZIONANTI• 15 TUMORI FUNZIONANTI (11 Insulinomi, 1 Vipoma, 2

Gastrinomi, 1 Glucagonoma)

• 42 NEOPLASIE ENDOCRINE BEN DIFFERENZIATE:15 A COMPORTAMENTO BIOLOGICO BENIGNO (WHO)

27 A COMPORTAMENTO BIOLOGICO INCERTO (wHO)

42 CARCINOMI ENDOCRINI: 39 BEN DIFFERENZIATI SEC. WHO

3 SCARSAMENTE DIFFERENZIATI SEC. WHO

• FOLLOW-UP MEDIO DI 21 MESI

RISULTATI

TUMORI ENDOCRINI DEL PANCREASUN SOLO CASO HA PRESENTATO INSTABILITÀ PER ENTRAMBE LE SONDE ( BAT25 E BAT 26).

• FEMMINA, 48 ANNI• PREGRESSA PARATIROIDECTOMIA

SUBTOTALE PER ADENOMI MULTIPLI (MEN1?)

• RESEZIONE INTERMEDIA PER NEOPLASIA SOLIDA DEL DIAMETRO DI CM 1,9

• NEOPLASIA ENDOCRINA BEN DIFFERENZIATA A COMPORTAMENTO BIOLOGICO BENIGNO SEC WHO

• SINDROME MEN1 NON CONFERMATA

CONCLUSIONI

L’INSTABILITÀ DEI MICROSATELLITI NON È IMPLICATA NELLA PATOGENESI DELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE SPORADICO E DELLE NEOPLASIE ENDOCRINE DEL PANCREAS.

LA VIRTUALE ASSENZA DI MSI IN QUESTI TUMORI PANCREATICI E IN PARTICOLARE NELL’ADENOCARCINOMA DUTTALE, POTREBBE VALORIZZARE LA DISTINZIONE PATOGENETICA DEL CARCINOMA MIDOLLARE DEL PANCREAS.