Teste do pezinho; Teste da orelhinha; Teste do olhinho; Teste do coraçãozinho.
Imunologia Aplicada Sorologia¢metros para a validação de um teste sorológico Validade...
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Imunologia Aplicada
Sorologia
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1. Elucidar processos patológicos
2. Diferenciar a fase da doença
3. Diagnosticar doença congênita
4. Selecionar doadores de sangue
5. Selecionar doadores e receptores de órgãos
6. Auxiliar no prognóstico da doença
7. Avaliar a eficácia da terapêutica
8. Verificar o agravamento da patologia
9. Avaliar a imunidade específica naturalmente adquirida ou
artificialmente induzida
Importância da pesquisa de Anticorpos
no diagnóstico individual
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1. Estabelecer a prevalência da doença
2. Verificar a Incidência da doença
3. Verificar a erradicação da doença
4. Verificar a reintrodução de novos casos em áreas
consolidadas
Importância da pesquisa de anticorpos
em Inquéritos soroepidemiológicos
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1. Como critério de Cura
2. Na definição da etiologia da doença
3. Na seleção de doadores de sangue
4. Em inquéritos epidemiológicos
Importância dos Testes sorológicos na
pesquisa de antígenos
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Parâmetros para a validação de
um teste sorológico
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Define a presença ou a ausência da doença no
paciente
“GOLD STANDARD TEST”
Mais próximo do verdadeiro estado clínico do
paciente
Testes sorológicos
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Parâmetros para a validação de um
teste sorológico
Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando
comparado com o teste de referência
Sensibilidade
Especificidade
Eficiência
Validade Extrínseca : real situação da população +
desempenho do teste
Precisão
Acurácia ou Exatidão
Reprodutibilidade
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TESTE DOENÇA - Diagnóstico verdadeiro
PRESENTE AUSENTE
POSITIVO Verdadeiros positivos
(VP)
Falsos positivos
(FP)
NEGATIVO Falsos negativos
(FN)
Verdadeiros
negativos
(VN)
TOTAL VP+FN FP + VN
Combinação binária entre resultados prováveis
em um determinado teste e o diagnóstico verdadeiro
da doença
Sensibilidade Especificidade
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Eficiência = VP + VP
VP + VN + FP + FN
Porcentagem correta de resultados dos
testes verdadeiros positivos e negativos
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Parâmetros para a validação de um
teste sorológico
Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando
comparado com o teste de referência
Sensibilidade
Especificidade
Eficiência
Validade Extrínseca : real situação da população +
desempenho do teste
Precisão
Acurácia ou Exatidão
Reprodutibilidade
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Validade Extrínseca
Precisão: Concordância dos resultados obtidos quando um
mesmo teste é feito várias vezes (Erro acidental)
Exatidão ou Acurácia: Capacidade do teste em fornecer
resultados muito próximos ao verdadeiro valor do que se esta
medindo.
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EXATO E PRECISO
PRECISONÃO EXATO E NÃO PRECISO
EXATO E NÃO PRECISO
Validade Extrínseca
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Validade Extrínseca
Precisão: Concordância dos resultados obtidos quando um
mesmo teste é feito várias vezes (Erro acidental)
Exatidão ou Acurácia: Capacidade do teste em fornecer
resultados muito próximos ao verdadeiro valor do que se esta
medindo ("Gold Standard").
Reprodutibilidade: Capacidade de se obter resultados iguais em
testes realizados com a mesma amostra biológica mas realizadas
por pessoas diferentes em locais diferentes
Intrateste : replicatas do mesmo material
Interteste: Dias diferentes e em laboratórios diferentes
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Parâmetros para a validação de um
teste sorológico
Validade Intrínseca : desempenho de um teste quando
comparado com o teste de referência
Sensibilidade
Especificidade
Eficiência
Validade Extrínseca : real situação da população +
desempenho do teste
Precisão
Acurácia ou Exatidão
Reprodutibilidade
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Aplicação de Testes Diagnósticos
Limiar de Reatividade ou “ cut off ” - Região de
Corte
Valor acima do qual os resultados são considerados positivos e indicam os
doentes
Valor abaixo do qual os resultados são considerados negativos e indicam os
não doentes
Para cada “cut off “ estabelecido teremos uma sensibilidade e uma
especificidade diferentes
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CURVA DE DISTRIBUIÇÃO DA FREQUÊNCIA DE
TÍTULOS NORMALMENTE OBSERVADA NA
POPULAÇÃO
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Banco de sangue teste para detectar ....
Ponto de máxima sensibilidade (FP)
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Laboratório de análises:Teste para detectar...
Doença de alta prevalência
Ponto de máxima especificidade (FN)
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Sensibilidade: “verdadeiros positivos".
Testes com alta sensibilidade ( 99%) podem, ao se obter resultado negativo, excluir a
presença da condição ou doença.
Especificidade
"verdadeiros negativos".
Testes com alta especificidade ( 99%) e que são negativos em indivíduos sadios ou
que apresentam sintomas similares mas não apresentam a condição/doença, são
muito úteis para confirmar o diagnóstico.
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1
8
9
0
1
8
9
7
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9
0
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1
9
4
1
1
9
5
9
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9
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9
Testes Sorológicos
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Produção de Anticorpos
Testes sorológicos
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Resposta Imune
Anticorpos
Proteína Imunização
Síntese de Anticorpos Policlonais
Baço
B B BB
B
BB
B
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Cesar Milstein
1927-2002
Georges Khöler
1946-1995
Nobel Medicina
1984
1975
Síntese de Anticorpos Monoclonais
http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/monoclonal.html
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Síntese de Anticorpos Monoclonais
B
M M M
H
B
M
Fusão
polietilenoglicolB B BB
H
HH
B B B
M
H
H
H
HAT
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Policlonal x Monoclonal
Monoclonal
Anticorpos Homogêneos
Respondem a um único epítopo do Ag
Maior afinidade
Pertencem a uma única Classe
Hibridoma – Prolifera em Cultura
Policlonal
Anticorpos heterogêneos
Responde a epítoposdiferentes do Ag
Diferentes afinidades
Podem ser de Classes diferentes
Célula B – Não Prolifera emCultura
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MAB
Identificação de marcadores fenotípicos
Imunodiagnóstico
Diagnóstico e terapia de tumores
Análise funcional de moléculas de superfície e secretadas