ﯽﺘﺷﻮﮔ يﺎﻫ ﻪﺟﻮﺟ نﻮﺧ يﺎﻬﺘﯿﺳﻮﻧﻮﻣ...

1

خون جوجه هاي گوشتی يفعالیت مونوسیتهامرفولوژي روده و تأثیر دو مکمل پروبیوتیکی بر 99Kدرگیر با ایکوالي

2و علیرضا وکیلی2، حسن کرمانشاهی 2، رضامجیدزاده هروي* 1سیما آسانی

دانشجوي کارشناسی ارشد - 1 عضو هیئت علمی دانشگاه فردوسی مشهد - 2

[email protected]

چکیده

در شرایط درگیري فعالیت منوسیت هاي خون مرفولوژي روده و بر این آزمایش به منظور بررسی عملکرد دو مکمل پروبیوتیکیاده ها باروش فاکتوریل تکرار استفاده گردید و د 4تیمار و 5تصادفی با "جوجه گوشتی در قالب طرح کامال 400از . شد میکروبی انجام

اعمال از حاصل روزانه کم رشد یا وزن کاهش، توانستند 2 پروبیوتیکی مکمل کننده مصرف هايجوجه ،آنالیز گردید 2*2*3 ایلئوم در کریپت عمق اما نداشت، ویلی عرض و ویلی ارتفاع بر داري معنی اثر پروبیوتیکی مکمل مصرف . کنند جبران را درگیري

بیان 2 پروبیوتیکی مکمل کننده مصرف هاي جوجه در). P >05/0( بود یافته افزایش 2 پروبیوتیکی مکمل کننده رفمص هاي جوجهIL-10 تولید بر اثرگذاري با و یافت افزایش زیادي میزان به TNF-α بهبود باعث و کاهش درگیر پرندگان بر را التهابی اثرات توانست

.گردد غذایی تبدیل ضریب و خوراك مصرف روزانه، وزن افزایش بدن، وزن

IL-10، عمق کریپت ، 99kمکمل پروبیوتیکی، منوسیت هاي خون، درگیرشده با ایکوالي : واژه هاي کلیدي

2

مقدمه معرض در وریط آن در که پرورش بزرگ اسیمق در. هاست کشور از ياریبس در ياقتصاد يها تیفعال نیمهمتر از یکی وریط صنعت

باعث جهینت در و افتد یم اتفاق ستیز طیمح طیشرا شدن بدتر و يماریب به مربوط مشکالت اغلب. رندیگ یم قرار زا استرس طیاشر مکانیسم تضعیف نتیجه در و روده میکروفلور تعادل در اختالل بروز منجربه عوامل این همچنین. گرددیم يجد ياقتصاد يضررها جادیا

حذف یا مهار منظور به اغلب شرایطی چنین در. نمایند می پیدا فعالیت فرصت بیماریزا اجرام ترتیب بدین و گردند می بدن دفاعی هاي بیوتیک آنتی مانند میکروبی ضد غذایی افزودنیهاي از تولید، افزایش و غذایی بازده بهبود همچنین و روده در موجود آور زیان اجرام

خوراك در ترکیبات این درمانی تحت مقادیر مدت طوالنی و مستمر مصرف دهد می شانن آمده بعمل هاي بررسی. شود می استفاده ها آمدن بوجود موجب مدتی از پس و گردیده دامی هاي فراورده در آنها بقایاي حضور به منجربه است ممکن طیور و دام

. گردد انسان در داروها به مقاوم هاي میکرواورگانسیم

اثرات مورد در ینگران همچنین. است شده ایجاد وریط يبرا رشد محرك عنوان به ها کیوتیب یآنت فمصر توقف به تمایل رو این از مواد با ها بیوتیک آنتی نییگزیجا بدنبال که داشت آن بر کننده دیتول هم و کننده مصرف هم یدرمان عوامل عنوان به آنها یجانب

به را ازآنها استفاده کشاورزان از یبرخ حاضر حال در و شدند گرفته ظرن در مناسب جایگزین عنوان به ها کیوتیپروب. دیگرباشند .[1,2] دهند یم حیترج ها کیوتیب یآنت از استفاده

از ممانعت روي ها پروبیوتیک تأثیر مهمترین. دارند میزبان حیوان روي مثبتی اثر که هستند زنده میکروبی هاي مکمل ها پروبیوتیکپروبیوتیک ها این پتانسیل رادارند که از رشد باکتري هاي پاتوژن روده، وهمچنین. باشد می گوارش گاهدست در مضر باکتریهاي رشد

. در جوجه جلوگیري نمایند 1بخصوص سالمونال

و فاکتورهاي ایمنی در منوسیت هاي خون می باشد و مرفولوژي روده هدف از این مطالعه بررسی تاثیر مکمل هاي پروبیوتیکی بر .گردد 99Kمیکروبی با ایکوالي درگیريباعث کاهش آسیب هاي حاصل از یا مکمل هاي پروبیوتیکی می توانند اینکه آ

متن مقالهمطابق این تعریف، پروبیوتیک ها مکمل هاي غذایی میکروبی هستند که از طریق : ارائه نمود از پوبیوتیک تعریف منحصربه فردي فولر

. تعریف جدید بر ماهیت زنده پروبیوتیک ها تاکید دارد این. [3] دارند میزبان روي بر سودمندي تأثیراتتعادل میکروبی روده بهبود الکتوباسیل ها، : دسته اي که در دستگاه گوارش تشکیل کلونی می دهند مانند. پروبیوتیک ها را می توان در دو دسته قرار داد

گروهی که آزادانه شناور هستند و تشکیل کلونی نمی دهند مانند باسیلوس ها و ها و استرپتوکوكانتروکوك ها، که وقتی به هستند طبیعت در سمی غیر و پاتوژن غیر زنده هاي میکرواورگانیسم ها پروبیوتیک "صراحتا .[4] ساکارومایسزسرویزیه

متعدد ) برون تنی و درون تنی(آزمایشگاهی و مزرعه اي العاتمط .[5]مثبتی بر سالمتی میزبان دارند تأثیرمسیر گوارشی وارد می گردند، نشان داده است که مهار میکروب هاي پاتوژن روده که باعث اختالالت میکروبی روده می گردد، می تواند حساسیت و عفونت را

.[6,7]بیوتیک مقاومت به عفونت را افزایش می دهد کاهش داده و عالوه برآن پروبیوتیک و پري

1salmonella

3

براي عمل این. بچسبند روده پوششی بافت به موثر طور به توانند می که دارند وجود ها باکتري از خاصی هاي سویه اتنه انتخاب باکتریایی هاي سویه که است مهم بسیار بنابراین. [8] است ضروري امري رقابتی حذف عمل نحوة با هایی میکرواورگانیسم

آنها .[9,10]) کنند زیست میزبان حیوان گوارش دستگاه در معمول طور به( باشند شده ناختهش میزبان حیوان گوارش دستگاه براي شده .[3,11] باشند مناسب استقرار یا اتصال عوامل داراي باید

بولگاریکوس، آنهاالکتوباسیلوساغلب . هایی که معموال براي تهیه پروبیوتیک استفاده می شوند متنوع و بسیار زیاد هستند گونهکتوباسیلوس اسیدوفیلوس، الکتوباسیلوس کازئی، الکتوباسیلوس هلوتیکوس، الکتوباسیلوس الکتیس، الکتوباسیلوس سالواریوس، ال

و اشرشیا sppبیفیدوباکتریوم فائکالیس،ترموفیلوس، انتروکوکوس فاسیوم، انتروکوکوس استرپتوکوکوسالکتوباسیلوس پالنتاروم، بولگاریکوس و الکتوباسیلوسآن دو استثناء . اي هستند دو گونه از آنها بقیه آنها همگی سویه هاي رودهمی باشند و به استثناء کالي

الکتوباسیلوس باکتري سویه سه از طرح دراین .[12] د باشن می ماست آغازگر هاي اورگانیسم که هستنداسترپتوکوکوس ترموفیلوس الکتوباسیلوس و سکوم از سالواریوس الکتوباسیلوس. شد استفاده الکتیس کوسالکتوکو و پالنتاروم الکتوباسیلوس ، سالواریوس

گونه یک سالواریوس گونه. هستند شکل باسیلی و منفی کاتاالز مثبت، گرم باکتري دو هر. بودند شده جدا مرغ دان چینه از پالنتاروم مختلف سنین هاي مرغ روده و دان چینه از متنوع سویه 8 ، همکاران و بیسلی .آید می شمار به پرنده گوارش دستگاه در غالب و متنوع

تولید براي کلستردیوم با شده باند سالمونالزیس مهار قابلیت و روده اپیتلیوم به مناسب چسبندگی بودن، ضرر بی دلیل به. کردند جدانشان مجیدزاده .[14] است تشخیص قابل مسن پرندگان در بیشتر وسسالواری الکتوباسیلوس. [13] دادند قرار توجه مورد پروبیوتیک

فعالیت پالنتاروم الکتوباسیلوس. بیشترین فعالیت ضد باکتري را دارند سالواریوس الکتوباسیلوس و پالنتاروم الکتوباسیلوسکه داد ایکواليفعالیت ممانعتی مناسب در برابر . ین مقاومت به صفرا مناسبی را نشان دادو همچن ایکواليممانعتی قابل قبولی مقابل سالمونال و

. [15]قابل توجه است سالواریوس الکتوباسیلوسو آبگریزي باال در

يزا يماریب ریغ مثبت گرم يها يباکتر. است ها کیوتیپروب از استفاده مدنظر اهداف نیتر جیرا از یکی زبانیم یمنیا ستمیس میتنظ از که داشته یسالمت يرو یمثبت اثرات شده استفاده کیوتیپروب عنوان به که انسان و موش گوارش دستگاه در) غذا هم( لوسیالکتوباس

التهابی . بود [18]یالتهاب ضد يها تیفعال با همراه [17] یاکتساب و یذات یمنیبهبودا و [16] است ها تیلنفوس ریتکث شیافزا آن جملهباکتریهاي گرم . له پاتوژن ها یا آسیب سلولها ایجاد می گردد یک پاسخ فیزیولوژیکی وایمنی نرمال در میزبان استکه به وسیله حم

که در دیواره سلول باکتري وجود ) LPS(منفی به وسیله پیوستن به میزبان باعث ایجاد عفونت می شوند، در این مورد لیپوپلی ساکارید) LPS. (بازي می کند و باعث هدایت به سمت پاسخ ایمنی و توسعه اختالل التهابی قوي می شود دارد، نقش کلیدي را درایجاد عفونت

تحریک سلولها که به . یک القاکننده قوي مونوسیت ها و ماکروفاژها هستند که واسطه کلیدي براي پاسخ ایمنی ذاتی هستندل اتفاق بیافتد که نتیجه نهایی آن ترشح و تولید سیتوکین ایجاد میگردد باعث می شود که یک سیگنال آبشاري داخل سلو LPSواسطه

التهابی نرمال درگیر در این فعالیتها چندین هاي پاسخ .[19]ها ودیگر واسطه هاي التهابی که تشکیل دهنده پاسخ هاي التهابی هستند واکنش میتنظماکروفاژها نقش مهمی را در در این قسمت . نوترئوفیل ها، ماکروفاژها و لنفوسیت ها هستند:ترکیب متفاوت سلولی مثل

.[20]التهابی و پاسخ هاي ایمنی براي حفظ یک واکنش دفاعی بازي می نمایند

يها تیفعال انیم قیدق يها سمیمکان. دارد اثر یمنیا ستمیس توسعه يرو کیوتیپروب عنوان به گوارش دستگاه يها کروبیم بردن کار به یمتفاوت يها مجموعه ها کیوتیپروب که است شده داده نشان حال هر به. ستین روشن یلیخ ها کیوتیوبپر و یمنیا ستمیس کننده لیتعد

یاخته. دینما یم فایا یمنیا پاسخ میتنظ و القا در یروشن نقش که کنند ترشح را ها نیتوکیس تا کرده تحریک یمنیا ستمیس يسلولها از هاي پاسخ تنظیم در اي یاخته بین واکنشهاي ایجاد وسیله به که کنند می ترشح ئینیپروت مواد متنوعی بسیار تعداد ایمنی سیستم هاي

یاخته بر ها سیتوکین "مثال: متفاوتند ها هورمون با نظر چند از ها سیتوکین. است سیتوکین ها پروتئین این براي مناسب نام. موثرند ایمنی

4

سیتوکین نوع یک فقط زمان یک در بندرت ها یاخته بعالوه. مؤثرند اي ویژه اندام بر فقط ها هورمون ولی کنند اثرمی مختلف هاي هستند سیتوکینهایی اینترلوکینها. کند می ترشح TNF-a و IL-1,IL-6 , IL-12 سیتوکین نوع 4 الاقل ماکروفاژها "مثال. کنند می تولید

از یک که هستند مشابه سیتوکین نوع دو) TNF( مورهاتو نکروز عامل. کنند می تنظیم را لکوسیتها سایر و لنفوسیتها بین روابط که کشنده اثر توموري هاي یاخته بعضی بر شود، می درك اسمشان از که همانگونه شوند، می مشتق Tيها سلول از دیگري و ماکروفاژها

گیرنده بروز: از عبارتند اههار این. شود می تنظیم مختلف راههاي از سیتوکینها فعالیت. باشند نیزمی دیگري اعمال داراي ولی دارند آثار با مخالف آثاري داراي که دیگر هاي سیتوکین توسط و ویژه هاي پروتئین به اتصال انتاگونیست، هاي گیرنده کننده، تنظیم

هاي هیاخت تمام بر "تقریبا و شود می ترشح وفیبروبالستB و Tهاي یاخته ماکروفاژها، توسط TNF-α. باشند می نظر مورد سیتوکین. کند می تنظیم را مختلف هاي یاخته رشد و دارد دخالت التهابی و ایمنی واکنشهاي از زیادي تعداد در TNF-α. است موثر دار هسته

.IL-10شود می توموري هاي یاخته از برخی آپوپتوز موجب شود، می مستفاد نامش از که طوري به و سازد می فعال نیز را ماکروفاژها فاکتور ابتدا در IL-10. شود می ترشح پوست شاخی هاي یاخته و ماکروفاژها سلها، Th0، B است آن عمده منشا که Th2 بر عالوه

TNF-a و IL-1 ,IL-6 ترشح همچنین. باشد می NK هاي یاخته و Th1 فعالیت مانع شد، می نامیده سیتوکین سنتز از کننده جلوگیري) آنتاگونیست گیرنده( IL-1RA تولید ولی دارد منفی اثر II کالس MHC هاي گیرنده دتولی بر و کند می سرکوب را ماکروفاژ توسط

.[21] باشد می سلها ماست و تیموسیتها ،B لنفوسیتهاي محرك IL-10.کند می تقویت را

مرگ افزایش و انتریک بیماري باعث که شود می باسیلوسیس کولی مثل شده شاخته هاي بیماري انواع باعث پاتوژنیک اشرشیاکولی که است هایی باکتري مهمترین از یکی ایکوالي .[22,23]است طیور صنعت در اقتصادي هاي زیان آن نتیجه و گردد می ها جوجه در

ارگانیسم این متفاوت هاي سویه وسیله به که دارد وجود اسهال بیماري از متفاوت نوع دو حداقل. شود می گوساله در اسهال باعث هاي ژن آنتی. است همراه اسهال ایجاد براي واگیري عامل 2 با که نیک انتروتوکسی ایکوالي با ارتباط در که نوع یک .گردد می تولید

اغلب گردد، می یافت گوساله در که رایجی هاي سویه. دهند تشکیل کلنی و بچسبند کوچک روده ویلی به که قادرند آنها فیمبریال99k(F5) و F (41)فیمبریاست ژن آنتی هردو یا.

مواد و روش هادر این . صورت پذیرفتدانشگاه فردوسی مشهد دانشکده کشاورزي طیور در مرکز تحقیقات دام و در سالن تحقیقاتیتحقیق این

20تکرار و در هر تکرار 4تیمار با 5که به طور تصادفی به . استفاده شد 308قطعه جوجه نر یکروزه گوشتی نژاد راس 400آزمایش از از طریق دهان خورانده شد و تا ) k99 )cfu/ml 107یکوالي روزگی به نیمی از پرندگان هر پن باکتري ا 21در سن . پرنده تقسیم شدند

از استفاده و با 308براساس کاتالوگ سویه راس ها یک جیره پایه به منظور تغذیه جوجه. روزگی در پن هاي متناظر نگهداري شدند 42و الکتوباسیلوس سالواریوس ، الکتوباسیلوس پالنتارومدراین طرح از سه سویه باکتري ). 1جدول (تنظیم شد UFFDAنرم افزار

. از چینه دان مرغ جدا شده بودند الکتوباسیلوس پالنتاروماز سکوم و الکتوباسیلوس سالواریوس. استفاده شد الکتوکوکوس الکتیسیک گونه متنوع و غالب در دستگاه گوارش پرنده به سالواریوسگونه . یلی شکل هستندهر دو باکتري گرم مثبت، کاتاالز منفی و باس

هاي ذکر شده همراه با محافظت کننده مناسب در آزمایشگاه تهیه شدند، به یاین مکمل ها بصورت ترکیبی از باکتر .[13]شمار می آید و مکمل الکتوکوکوس الکتیسو الکتوباسیلوس پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوس ،حاوي مخلوط سه باکتري 1طوري که مکمل

مکمل هاي پروبیوتیکی با شکل فیزیکی . بودند ، الکتوباسیلوس پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوسحاوي مخلوط دو باکتري 2 . باکتري به جیره پایه اضافه شدند و در دسترس جوجه ها قرار گرفتند) cfu/g 108(پودري به مقدار

5

ی در جوجه هاي گوشتیو پایان، رشد ترکیب جیره هاي آزمایشی در دوره هاي آغازین. )1(ولجد روزگی25-42 روزگی11-24 روزگی 1-10 (%)اجزاي جیره

63/59 02/56 67/50 ذرت 67/30 77/34 15/39 % )44پروتئین ( کنجال سویا

87/5 0/5 43/5 ذرت روغن 67/1 77/1 08/2 دي کلسیم فسفات

97/0 99/0 23/1 سنگ آهک 37/0 35/0 37/0 نمک

25/0 25/0 25/0 مکمل ویتامین 25/0 25/0 25/0 مکمل معدنی

23/0 34/0 37/0 ال متیونین- دي 09/0 26/0 2/0 الیزین -ال

ترکیب محاسبه شده 3025 3073 35/3162 (kcal/kg)انرژي قابل متابولیسم

22 49/20 78/18 (g/kg)پروتئین خام 05/1 88/0 84/0 (g/kg)کلسیم

5/0 44/0 41/0 (g/kg)فسفر قابل دسترس 40/1 28/1 05/1 (g/kg)لیزین

05/1 98/0 83/0 (g/kg)سیستئین+ متیونینمیلیگرم ریبوفالوین، 5/7میلیگرم تیامین، K3 ،53/1میلیگرم ویتامین D3، 5ویتامین A ،IU1800واحد ویتامین IU11000: هر کیلوگرم مکمل ویتامینه شامل

میلیگرم بیوتین، B12، 5میلیگرم ویتامین 6/1میلیگرم اسید فولیک، 26/1میلیگرم پیرودوکسین، 53/1میلیگرم نیاسین، 4/30میلیگرم پنتوتونات، 4/12میلیگرم 250میلیگرم روي، 5/84میلیگرم منگنز، 3/16: میلیگرم آنتی اکسیدان، و هر کیلوگرم مکمل معدنی شامل 100میلیگرم کولین کلراید، 1100 .میلیگرم ید 6/1میلیگرم سلنیم و 20میلیگرم کبالت، 48/0میلیگرم مس، 20آهن،

روزگی بعد از 21و 14، 7زانه در روزهاي میانگین وزن بدن ، رشد رو. ساعته بود 24مصرف غذا و آب به صورت آزاد و روشنایی سانتی متر از روده 5/0، قسمت کوچکی حدود روزگی 42در براي اندازه گیري خصوصیات بافتی روده. درگیري اندازه گیري شد

درصد 10با سرم فیزیولوژي شسته و سپس براي فیکس کردن به آن فرمالین ) از حیوان مرده(کوچک را جدا کرده به روش اتوپسی از 99kروز بعد از اعمال درگیري با ایکوالي 14در .اضافه شد و نمونه ها را براي تهیه الم به آزمایشگاه بافت شناسی فرستاده شد

در آزمایشگاه جداسازي منوسیت ها با استفاده از روش . پرندگان خون گرفته شدو براي جداسازي منوسیتها به آزمایشگاه فرستاده شد RNAشرکت پارس توس، RNAسپس از منوسیت هاي جدا شده توسط کیت استخراج . غلظت فایکول انجام شد شیب گرادیانت

Real Time-PCRصورت گرفت و با استفاده از روش cDNAساخت RT-PCRاستخراج شد و توسط واکنش رونویسی معکوس .اندازه گیري شد IL-10و TNF-αمیزان بیان ژن هاي

آنالیز آماريپرنده در هر تکرار 10تکرار و 4و 2*2*3تیمار در قالب فاکتوریل 5تصادفی با "زیه و تحلیل آماري از طرح کامالبراي تج

مکمل+ جیره پایه -2تیمار ، خوراك+ به صورت اسپري 1 پروبیوتیکی مکمل+ جیره پایه -1تیمار : تیمار ها شامل . استفاده شد

6

+ جیره پایه -4تیمار، خوراك+ به صورت اسپري 2 پوبیوتیکی مکمل+ جیره پایه -3تیمار،به صورت خوراکی 1پروبیوتیکیتمامی داده هاي جمع . واسپري با آب انجام شدجیره پایه بدون پروبیوتیک -5تیمارو به صورت خوراکی 2پروبیوتیکیمکمل

. آنالیز شدند SAS 9.4آوري شده توسط نرم افزار آماري

:آن به شرح زیر است مدل آماري طرح و اجزاي

Xijkl= µ + Aj + Bk + Cl+ ABjk +ACjl +BCkl+ABCjkl + eijkl ( 1معادله )

Xijk= مقدار هر مشاهده µ= میانگین جمعیت Aj = اثر مکمل Bk= حوه مصرف پروبیوتیکاثر ن

Cl= درگیري اثر اعمال

ABjk= اثر متقابل نوع مکمل و نحوه مصرف پروبیوتیک ACjl = درگیرياثر متقابل نوع مکمل و نوع

BCkl = درگیرياثر متقابل نحوه مصرف پروبیوتیک و نوع اعمال

ABCjkl= بل نوع مکمل و نحوه مصرف پروبیوتیک و نوع اعمال درگیرياثر متقا

eijkl = خطاي آزمایش

نتایجنتایج حاصله نشان می . نشان داده شده است 2بر وزن بدن در جدول k99تاثیر متقابل نوع مکمل میکروبی و اعمال درگیري با ایکوالي

درگیر شده بودند کاهش وزن بدن نسبت به جوجه هاي درگیرنشده نشان دادند و دهد که جوجه هاي تیمار هاي مختلف که با ایکوالي 2بعد از درگیري مکمل 3ودر هفته هفته بعد از شروع درگیري ادامه داشت 2فقط تا 2این روند در جوجه هاي مصرف کننده مکمل

این با . در رد کردن میکروب هاي پاتوژن موثر بوده است 2توانست این کاهش وزن را جبران نماید، که نشان می دهد احتماال مکمل مکمل پروبیوتیکی دریافت کرده و با که گزارش کردند، پرندگانی که کلستردیوم بوتیریکوم را به عنوان ژانگ و همکاران،یافته هاي نحوه . [24]را جبران نمایند موافق بوده است k88درگیر شدند توانسته اند، کاهش وزن بدن حاصل از مقابله با ایکوالي k88ایکوالي

.مصرف پروبیوتیک به صورت خوراك روند افزایشی را روي وزن بدن داشته ولی این تاثیر معنی دار نبوده است

7

)گرم در روز(تاثیر متقابل نوع مکمل پروبیوتیکی و اعمال درگیري بر وزن بدن در جوجه هاي گوشتی . 2ولجد

روز بعد از درگیري 7 روز بعد از درگیري 14 روز بعد از درگیري 21 A C

1مکمل

95/1320 در گیر نشده 68/1853 53/2670 41/1286 در گیر شده 92/1739 34/2509

2لمکم


بدون مکمل


SEM

86/33

65/51

51/80

P-Value 91/0 60/0 46/0 SEM± استاندارد خطايمیانگین

P-Value سطح احتمال معنی دار شدن )الکتیس الکتوکوکوس و پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس( باکتري سه با پروبیوتیک+ پایه جیره. 1 مکمل )پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس(باکتري دو با پروبیوتیک+ پایه جیره. 2مکمل پایه جیره. مکمل بدون

99Kایکوالي باکتري با شده درگیر: شده درگیر

نتایج حاصله نشان می دهد که . نشان داده شده است 3تاثیر متقابل نوع مکمل میکروبی و اعمال درگیري بر رشد روزانه در جدول هفته 2ند و ازجوجه هاي تیمار هاي مختلف درگیر با ایکوالي کاهش رشد روزانه بیشتري نسبت به جوجه هایی که درگیر نشدند، داشت

هفته بعد از درگیري میکروبی افزایش 2توانست این کاهش رشد روزانه را جبران نماید تا جایی که 2بعد از درگیري میکروبی، مکمل توانسته است از اثرات تخریبی 2نشان دهنده این است که مکمل "رشد روزانه اي برابر با گروه درگیر نشده داشته باشندکه احتماال

. وب هاي پاتوژن جلوگیري نمایدمیکر

)روز/پرنده/گرم(تاثیر متقابل نوع مکمل پروبیوتیکی و اعمال درگیري بر رشد روزانه در جوجه هاي گوشتی . 3جدول روز بعد از درگیري 21 روز بعد ازدرگیري 14 روز بعد از درگیري 7 A C

1مکمل

69/116 10/76 90/74 درگیر نشده 91/109 78/64 57/66 هدرگیر شد

2مکمل

10/119 53/74 62/88 درگیر نشده 97/125 53/75 03/70 درگیر شده

بدون مکمل

06/121 35/95 59/84 درگیر نشده 35/116 01/78 60/74 درگیر شده

SEM

28/4

39/7

01/7

P-Value 52/0 40/0 84/0 SEM± استاندارد خطايمیانگین

P-Value سطح احتمال معنی دار شدن

8

)الکتیس الکتوکوکوس و پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس( باکتري سه با پروبیوتیک+ پایه جیره. 1 مکمل )پالنتاروم الکتوباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس(باکتري دو با پروبیوتیک+ پایه جیره. 2مکمل پایه جیره. مکمل بدون

99Kایکوالي باکتري با شده درگیر: شده درگیرروزگی نشان داد که مکمل هاي پروبیوتیکی روي ارتفاع ویلی 42نتایج این آزمایش بر روي بافت ایلئوم جوجه هاي گوشتی در روز

یلوس سالواریوس و مخلوط دو باکتري الکتوباس( 2اثر معنی داري نداشته با این حال بیشترین ارتفاع ویلی مربوط به مکمل پروبیوتیکی 1مکمل هاي پروبیوتیکی اثر معنی داري روي عرض ویلی هم نداشته است ولی مکمل پروبیوتیکی . می باشد) الکتوباسیلوس پالنتاروم

به میزان بیشتري عرض ویلی را ) مخلوط سه باکتري الکتوباسیلوس سالواریوس و الکتوباسیلوس پالنتاروم و الکتوکوکوس الکتیس ( ،بطوریکه مکمل )P<0.05(داده است همچنین هر دو مکمل هاي پروبیوتیکی توانسته اند عمق کریپت را افزایش دهند افزایش

کریپت ویلی به عنوان کارخانه سازنده ویلی در نظر گرفته می شوند و . به میزان بیشتري عمق کریپت را افزایش داده بود2پروبیوتیکی بافتی سریعتر انجام می گیرد و اجازه می دهد که ویلی در پاسخ به ریزش طبیعی این سلولها یا هرچه عمق کریپت بیشتر باشد بازچرخ

این نتایج با . بنابراین مکمل پروبیوتیک می تواند بازچرخ بافتی بافتها را افزایش دهد. [25]توژن در اثر سموم آنها تجدید گرددالتهاب پانشان داد ارتفاع پرزها در دوازدهه و ایلئوم به طور قابل مالحظه اي در جوجه هاي که]طاهري و همکاران[نتایج حاصل از آزمایش

بر طبق این . [26]دریافت کننده پروبیوتیک نسبت به آنهایی که پروبیوتیکی دریافت نکرده بودند، افزایش پیدا کرد مطابقت داشتسته طول و عرض ویلی و عمق کریپت را افزایش دهد ولی توان) خوراك+ صورت اسپري (نتایج با اینکه نحوه مصرف پروبیوتیک به

مبنی بر اینکه جوجه هاي دریافت کننده پروبیوتیک با روش مظفري ن نتایج با نتایج بدست آمده توسطای.این تاثیر معنی دار نبوده استآن با روش اسپري به اضافه ، بیشترین ارتفاع ویلی و عمق کریپت مربوط به دریافت کنندگان )اسپري یا خوراك( هاي مختلف

عرض و عمق کریپت را کاهش داده اما نتوانسته تاثیري K99 با اینکه اعمال درگیري با ایکوالي . [27]خوراك بود، مطابقت داشت .معنی دار روي مولفه بافت شناسی بگذارد، این در حالی است که نسبت ارتفاع ویلی به عمق کریپت را افزایش داده است

)میکرومتر(ه هاي گوشتیجروزگی در جو 42بافت شناسی ایلئوم در فراسنجه هاي تأثیر نوع و نحوه استفاده از پروبیوتیک ها بر 14- 4جدول عمق کریپت/ارتفاع ویلی عمق کریپت عرض ویلی ارتفاع ویلی

a81/405 71/3 428/ 86 80/1477 1مکمل a45/453 39/3 93/380 30/1527 2مکمل

b86/344 06/4 72/343 30/1378 بدون مکملSEM 01/95 22/26 38/16 32/0

P-value 54/0 11/0 0019/0 37/0 67/3 34/407 71/387 90/1464 اسپري و خوراك

77/3 40/395 29/381 40/1457 خوراكSEM 58/77 41/21 37/13 27/0

P-value 94/0 83/0 53/0 79/0 65/3 51/409 94/408 60/1453 درگیر نشده 79/3 23/393 07/360 80/1450 درگیر شده

SEM 57/77 41/21 37/13 27/0 P-value 89/0 13/0 40/0 73/0

a-b در هر ردیف داده هایی که با حروف یکسان نشان داده نشده اند، اختالف معنی دار دارند.

9

SEM± استاندارد خطايمیانگین )توباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس پالنتاروم و الکتوکوکوس الکتیسالک(پروبیوتیک با سه باکتري + جیره پایه . 1مکمل )الکتوباسیلوس سالواریوس، الکتوباسیلوس پالنتاروم(پروبیوتیک با دو باکتري+ جیره پایه .2مکمل

جیره پایه. بدون مکمل مصرف به صورت اسپري شده در یک روزگی و به همرا جیره در طول کل دوره. خوراك+ اسپري

99Kجوجه هاي درگیري داده شده با ایکالي: درگیر شده

شاهد گروه به نسبت ایکوالي با شده درگیر گروه در 2 مکمل در IL-10 بیان میزان است، شده داده نشان 2 و 1 نمودار در که همانطور کنند مصرف هاي جوجه در IL-10 یانب همچنین. است داده نشان بیشتري بیان شاهد برابر 15 حدود بطوریکه. میباشد بیشتر 1 مکمل و

بیان گروه این در. دادند نشان را باالتري بیان 2مکمل کننده مصرف درگیر غیر گروه به نسبت بودند ایکوالي با درگیر که 2 مکملTNF-α آنجاییکه از. بود 1 مکمل و شاهد گروه از باالتر نیز TNF-α از تحریک با یکی از سیتوکین هاي التهابی اولیه است که بعد

-TNFزمان بیان "طبیعتا .[28,29]باکتري هاي گرم منفی توسط فاگوسیتوزهاي تک هسته اي تولید می شود ) LPS(لیپوپلی ساکاریدها

α توسطLPS کوتاه مدت است حتی اگرLPS با این حال سیتوکین هاي معینی مثل اینترفرون گاما . وجود داشته باشد)IFN-γ (تحریک منوسیت ها دراثرTNF-αباعث تنظیم افزایشی تولید ) GM-CSF( کلنی کننده تحریک فاکتورهاي – اژماکروف گرانولوسیت

-TNFوجود دارد که تولید IL-13و IL-4( ،IL-10 ( 4اینترلوکین مثل دیگري هاي سیتوکین مقابل در .[30,31]می شوند LPSتوسط

α [32,33]در منوسیت ها را سرکوب می نمایند. IL-10 فعالیت TNF-α تولید کاهش با صورت دو به ها منوسیت با ارتباط در TNF-α پروبیوتیک مصرف ولد گزارشات طبق .[34]میدهد نشان را متضادي اثرات IFN-γ مقابل در مینماید، تنظیم s TNF-RПتولید افزایش و

. [35]شود می IL-6 و IL-1، TNF-α مثل التهابی پیش هاي سیتوکین تولید افزایش باعث در و بوده TNF-α از باالتر بسیار IL-10 بیان که دهد می نشان 2 مکمل کننده مصرف درگیر هاي جوجه در TNF و IL-10 بیان مقایسه

TNF-α بیان چنینهم و شاهد از کمتر بسیار IL-10 بیان 1 مکمل در حالیکه در است کرده کمتر را TNF-α التهابی اثرات"احتماال نتیجه در رشد سرعت بازگشت و عملکردي خصوصیات بهبود در التهابی اثرات شدن کمتر و IL-10 بودن باال. باشد می IL-10 از باالتر

. است مشهود حدودي تا 2 مکمل کننده مصرف هاي جوجه

در منوسیت هاي خون IL-10بر بیان ژن 99Kباکتري ایکوالياعمال درگیري با اثر بین مکمل هاي پروبیوتیکی و ). 1(نمودار

در جوجه گوشتی

0

10

20

30

40

50

60

پروبیوتیكيمكمل 1 پروبیوتیكيمكمل 2 مكملبدون

ھدشا

بھ ت

سبن ن

بیاي

ابر بر

چند

IL-10

نشدهدرگیر

شدهدرگیر

10

در منوسیت هاي خونTNF-αبر بیان ژن 99Kکتري ایکوالياعمال درگیري با بااثر بین مکمل هاي پروبیوتیکی و. 3- 4نمودار

در جوجه هاي گوشتی

مراجع

[1] Trafalska, E.; Grzybowska, K. 2004, Probiotics-An alternative for antibiotics? Wiad Lek., 57,491-498. [2] Nava, G.M.; Bielke, L.R.; Callaway, T.R.; Castañeda, M.P. 2005, Probiotic alternatives to reduce gastrointestinal infections The poultry experience, Animal Health Res, Rev, 6,105-118. [3] Fuller, R. . 1989, Probiotics in man and animals, J. Appl. Bacteriol, 66, 365-378. [4] Fuller, R. 2002. Probiotic the scientific basic. [5] Guillot, J.F., 1998, Les probiotiques en alimentation animale, Cah. Agric., 7, 49-54. [6] Stavric, S., and E. T. Kornegay. 1995. Microbial probiotics for pigs and poultry. Pages 205–231 in Biotechnology in Animal Feeds and Animal Feeding. R. J. Wallace, and A. Chesson, ed. VCH, New York. [7] Rolfe, R. D., 2000, The role of probiotic cultures in the control of gastrointestinal health, J. Nutr, 130:396S–402S. [8] Barrow P. A., Brooker, B. E., Fuller R. and Newport M. I., 1980, The attachment of bacteria to the gastric epithelium of the pig and its importance in the microecology of the intestine, Journal of Applied Baceriology, 48, 147-154. [9] Shahani, K. M. and Ayebo. A. D., 1980, Role of dietary Lactobacilli in gastro-intestinal microbiology, American Journal of Clinical Nutrition, 33, 2501-2503.

0

5

10

15

20

25

30

پروبیوتیكيمكمل 1 پروبیوتیكيمكمل 2 مكملبدون

ھدشا

بھ ت

سبن ن

بیاي

ابر بر

چند

TNF

نشدهدرگیر

شدهدرگیر

11

[10] Gilliland, S. E., 1987, The importance of bile tolerance in lactobacilli used as dietary adjuncts, In: Biotechnology in the Feed Industry, Ed. T.P. Lyons, Alltech Technical Publications, Lexington, Kentucky, USA. [11] Majidzadeh Heravi, R., Kermanshahi, H., Sankian, M., Nassiri, M. R., Heravi Moussavi, A., Roozbeh Nasiraii, L. and Varasteh A. R., 2011. Screening of lactobacilli bacteria isolated from gastrointestinal tract of broiler chickens for their use as probiotic. African Journal of Microbiology Research,5, 1858-1868.

. تهران. نوربخش. اول چاپ.1380). مترجمان.(طیور و امد تغذیه در آنها کاربرد و پروبیوتیکها. ا رجب، و. ن مازندران، افشار ]12[[13] Beasley S.S., Takala T.M., Reunanen J., Apajalahti J., Saris P.E., 2004,Characterization and electrotransformation of Lactobacillus crispatus isolated from chicken crop and intestine, Poult Sci,83,45-8. [14] Tannock G.W., 2004, A special fondness for lactobacilli, Appl Environ Microbiol 70,3189-94.

نامه پایان. گوشتی طیور هاي جیره فیتات تجزیه قابلیت با ترکیب نو پروبیوتیک تولید امکان بررسی. 1390. ر هروي، مجیدزاده ]15[ .مشهد دوسیفر دانشگاه. دکتري دوره

[16] Kirjavainen P.V., El-Nezami H.S., Salminen S.J., Ahokas J.T., Wright P.F., 1999, The effect of orally administered viable probiotic and dairy lactobacilli on mouse lymphocyte proliferation, FEMS Immunol Med Mic, 26,131–135. [17] Fang Y., Brent P.D., 2002, Probiotic bacterium prevents cytokineinduced apoptosis in intestinal epithelial cells, J Biol Chem, 227,50959–50965. [18] Maldonado G.C., Moreno De., de LeBlanc A., Vinderola G., Bibas B., ME Perdigo’nG, 2007, Proposed model: mechanisms of immunomodulation induced by probiotic bacteria, Clin Vaccine Immunol, 14,485–492. [19] Gayathri B., Manjula N., Vinaykumar K.S., Lakshmi B.S., Balakrishnan A., 2007, Pure compound from Boswellia serrata extract exhibits anti-inflammatory property in human PBMCs and mouse macrophages through inhibition of TNFa, IL-1b, NO and MAP kinases, Int Immunopharmacol, 7,473–482. [20] Kang S.R., Han D.Y., Park K.I., Park H.S., Cho Y.B., Lee H.J., Lee W.S., Ryu C.H., Ha Y.L., Lee D.H., Kim J.A., Kim G.S., 2011, Suppressive effect on lipopolysaccharide-induced proinflammatory mediators by Citrus aurantium L. in macrophage RAW 264.7 cells via NFjB signal pathway, Evid Based Compl Alt, 10,1–12.

.تهران. نوربخش. اول چاپ.1380).مترجم.(دامپزشکی شناسی ایمنی. ا شیمی، ]21[[22] Oh, J. Y., M. S. Kang, H. Yoon, H. W. Choi, B. K. An, E. G. Shin, Y. J. Kim, M. J. Kim, and J. H. Kwon., 2012, The embryo lethality of Escherichia coli isolates and its relationship to the presence of virulence- associated genes, Poult. Sci, 91,370–375. [23] He, C. L., B. D. Fu, H. Q. Shen, X. L. Jiang, C S. Zhang, S. C. Wu, W. Zhu, and X. B. Wei., 2011, Xiang-Qi-Tang increases avia pathogenic Escherichia coli-induced survival rate and regulates serum levels of tumor necrosis factor alpha, interleukin-1 and soluble endothelial protein C receptor in chicken, Biol. Pharm. Bull, 34,379–382. [24] Zhang Z. F., Zhou T. X., Ao X., and I. H. Kim, 2012, Effects of β-glucan and Bacillus subtilis on growth performance, blood profiles, relative organ weight and meat quality in broilers fed maizesoybean meal based diets, Livest. Sci, 150,419–424. [25] Yason C. V., Summer B. A., and Schat K. A., 1987, Pathogenesis of rotavirus infection in various age groups of chickens and turkeys: Pathology, American Journal of Veterinary Research, 6, 927-938. [26] Taheri H. R., Moravej M., Malakzadegan A., Tabandeh F., Zaghari M., Shivazad M., and Adibmorad M., 2010, Efficacy of pedicoccus acidlactici based probiotic on intestinal coliforms

12

and villus height, serum cholesterol level and performance of broiler chickens, African Journal of Biotechnology, 9(44), 7564-7567.

فلور و شناسی بافت مغذي، مواد هضم قابلیت عملکرد، بر الکتیسی اسیدي پدیکوکوس پروبیوتیک اثر. 1392. م مظفري، ]27[ مشهددانشگاه فردوسی . پایان نامه دوره کارشناسی ارشد. روده در جوجه هاي گوشتی میکروبی

[28] Kriegler M., Perez C., DeFay K., Albert I., Lu S.D., 1988, A novel form of TNF/cachectin is a cell surface cytotoxic transmembrane protein: Ramifications for the complex physiology of TNF, Cell 53:45. [29] Gearing A.J.H., Beckett P., Christodoulou M., Churchill M., Clements J., Davidson A.H., Drummond A.H., Galloway W.A., Gilbert R., Gordon J.L., Leber T.M., Mangan M., Miller K., Nayee P., Owen K., Patel S., Thomas W., Wells G., Wood L.M., Woolley K., 1994, Processing of tumour necrosis factor-a precursor by metalloproteinases, Nature, 370:555. [30] Beutler B., Tkacenko V.,Milsark I., Krochin N., Cerami A., 1986, Effect of g-interferon on cachectin expression by mononuclear phagocytes, Exp Med, 164:1791. [31] Hayes M.P., Freeman S.L., Donnelly R.P., Interferon-g priming of monocytes enhances LPS-induced TNF production by augmenting both transcription and mRNA stability Cytokine, 7,427- 1995. [32] Hart P.H., Vitti G.F., Burgess D.R.,Whitty G.A., Piccoli D.S., Hamilton J.A., Potential antiinflammatory effects of interleukin 4: Suppression of human monocytetumor necrosis factor a, interleukin 1, and prostaglandin E2, Proc Natl Acad Sci USA, 86,3803- 1989. [33] De Waal Malefyt R., Figdor C.G., Huijbens R., Mohan-Peterson S., Bennett B., Culpepper J., Dang W., Zurawski G., de Vries JE: Effects of IL-13 on phenotype, cytokine production, and cytotoxic function of human monocytes. Comparison with IL-4 and modulation by IFN-g or IL-10, J Immunol ,151,6370- 1993. [34]By Harold L., Dickensheets S. L., Freeman, Michael F., Smith Jr., and Raymond P., Donnelly,1997, Interleukin-10 Upregulates Tumor Necrosis Factor Receptor Type-II (p75) Gene Expression in Endotoxin-Stimulated Human Monocytes. [35] Wold A. E., 2001, Immune effects of probiotics. Scand. J. Food Nutr, 45,76–85.

ﯽﺘﺷﻮﮔ يﺎﻫ ﻪﺟﻮﺟ نﻮﺧ يﺎﻬﺘﯿﺳﻮﻧﻮﻣ...

Documents

Transcript of ﯽﺘﺷﻮﮔ يﺎﻫ ﻪﺟﻮﺟ نﻮﺧ يﺎﻬﺘﯿﺳﻮﻧﻮﻣ...