IDentificación de levaduras 2 gaby.ppt
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IDENTIFICACION DE LEVADURAS
Gentileza de
Maria Teresa Mujica
Virginia Jewtuchowicz
Cristina Iovannitti
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T richosporon spp
presentes
G eotrichum spp
a usentes
bla stosporos
H ifa s presentes y a rtroconid ios
p os it ivoC n eo fo rm an s
n eg a tivoas im ilac ió n d e c a rb oh id ra tos
id en tificac ió n d e o tras es p ec iesd e C ryp toc coc u s
tes t d e L -D O P Aag ar sem illas d e a lp is te
espec ies de C ryptoccocus
positiva
C an d id a g lab ra ta
célula s pequeña ssa ca rosa -treha losa +
p os it ivo S ac ch arom yc es uo tras levad u ras as cop oró g en as
células grandesasim ilación de carbohidratos
ascosporos
nega tiva
urea sa
colonia s b la nca s
R hodotorula spp
colonia s ro ja s
no hifa s- so lo b la stoconid ios
C an d id a a lb ic an sC an d id a d u b lin ien s is
c on c lam id ocon id ios
m orfo log ía , c o lo r en e l C H R O M ag arau xon og ram a, z im og ram a, m ed ios
c om erc ia les
s in c lam id oc on id ios
b las toc on id ios y p s eu d om ic e lios
Aga r leche-tw een 80 a l 1% o a ga r ha rina de m a íz
ESQUEMA PARA LA IDENTIFICACION DE LEVADURAS
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Candida albicans
Candida dubliniensis
BLASTOCONIDIOS CON PSEUDOMICELIOS
CON CLAMIDOCONIDIOS
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C albicans
C dubliniensis
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Candida albicans
Pseudomicelio con clamidoconidias terminales
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C.albicans C. dubliniensis
CHROM agar VERDE VERDE OSCURO
AGARLECHE-T
PSEUDOMICELIOCLAMIDOCONIDIAS
+
PSEUDOMICELIOCLAMIDOCONIDIA
S+++
UTILIZACION XILOSA
POSITIVO NEGATIVO
CRECIM. 42º C
SI NO
CRECIM. 45º c
SI_NO NO
API ID 32C SI SI
BIOLOGIA MOLECULAR
SI SI
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BLASTOCONIDIOS CON PSEUDOMICELIOS
SIN CLAMIDOCONIDIOS
MICROMORFOLOGIA EN AGAR LECHE 1%-TWEEN 20
CHROM Agar
METODOS ENZIMATICOS
ASIMILACION
SISTEMAS SEMIAUTOMATIZADOS
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Candida tropicalis
PSEUDOMICELIOS ABUNDANTES, CONIDIAS SE AGRUPAN EN PEQUEÑOS GRUPOS .
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Candida krusei
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Candida krusei
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Candida krusei
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Candida parapsilosis
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Candida parapsilosis
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Candida parapsilosis
Pseudomicelio, en cadenas ramificadas en
células alargadas.
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Candida guillermondii
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Candida glabrataUTILIZACION
TREHALOSA: +
SACAROSA: -
UREA: NEGATIVA
BLASTOCONIDIOS SIN PSEUDOMICELIOS
COLONIAS BLANCAS EN SDA
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C. parapsilosis (62%) resultó la especie predominante en las onixis blastomiceticas.
C. parapsilosis, C. albicans y C. tropicalis fueron las especies que demostraron mayor indice de asociación.
C. krusei se encontró siempre junto a otra levadura.
El uso de CHROMagar permitió el aislamiento primario de levaduras y la demostración de las asociaciones de especies.
La determinación de la sensibilidad antifúngica resultó útil para demostrar la resistencia de cepas habitualmente sensibles.
Conclusiones
V Jewtuchowicz, MT Mujica, JL Finquelievich, S Scarano, C Iovannitti
Centro de Micología. Departamento de Microbiología. Facultad de Medicina. UBA.
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BLASTOCONIDIOS SIN PSEUDOMICELIOS
COLONIAS ROJAS
UREA POSITIVA
RHODOTORULA SPP
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Saccharomyces cerevisiae
ASCOS
Medio V 8
Acetato
Medio de GORODKOWA
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A S C O S
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Cryptococcus neoformans
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BLASTOCONIDIOS Trichosporon
H I F A S Y A R T R O C O N I D I O S
UREA: Positiva
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Trichosporon
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SIN BLASTOCONIDIOS
Geotrichum spp
H I F A S Y A R T R O C O N I D I O S
Ureasa negativo
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Medios de cultivos
Medio de Gorodkowa
Se usa para formación de ascosporos
Glucosa: 1,25 g
Peptona: 5g
Cloruro de sodio: 2,50g
Extracto de carne: 5g
Agar: 10g
Agua destilada: 500ml
Agar harina de maíz con tween 80
Formación de clamidosporos
Harina de maíz: 40g
Agar: 20g
Tween 80: 10 ml
Agua destilada: 1000 ml
Harina de maíz calentar a 60ºC durante 1 hora. Filtrar y agregar los otros componentes.
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Agar leche con Tween 80
Se usa para producción de clamidosporos (microcultivo)
Tubo 1
Agar 2g
Tween 80 1ml
Agua destilada 100ml
Fraccionar y esterilizar
Tubo 2
Leche descremada 1ml
Esterilizar
Para su uso mezclar los dos tubos fundir y hacer microcultivo.