MICROSCOPIOEQUIPO #13°B Laboratorista Químico.

CBTIS No. 128

ÍNDICE.

oHistoria del Microscopio.

oTécnicas del Microscopio.

oPartes del Microscopio.

oTipos de Microscopio.

oInstalación.

oMantenimiento de Microscopio.

HISTORIA DEL MICROSCOPIO.

El microscopio se invento, hacia 1610, por Galileo, según los italianos, o por Jansen, en opinión de los holandeses. La palabra microscopio fue utilizada por primera vez por los componentes de la "Accademia dei Lincei" una sociedad científica a la que pertenecía Galileo y que publicaron un trabajo sobre la observación microscópica del aspecto de una abeja.

Sin embargo las primeras publicaciones importantes en el campo de la microscopia aparecen en 1660 y 1665 cuando Malpighi prueba la teoría de Harvey sobre la circulación sanguínea al observar al microscopio los capilares sanguíneos y Hooke publica su obra Micrographia.

A mediados del siglo XVII un comerciante holandés, Leenwenhoek, utilizando microscopios simples de fabricación propia describió por primera vez protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos.

Durante el siglo XVIII el microscopio sufrió diversos adelantos mecánicos que aumentaron su estabilidad y su facilidad de uso aunque no se desarrollaron mejoras ópticas. Las mejoras mas importantes de la óptica surgieron en 1877 cuando Abbe publica su teoría del microscopio y por encargo de Carl Zeiss mejora la microscopía de inmersión sustituyendo el agua por aceite de cedro lo que permite obtener aumentos de 2000A principios de los años 30 se había alcanzado el limite teórico para los microscopios ópticos no consiguiendo estos, aumentos superiores a 500X o 1000X sin embargo existia un deseo científico de observar los detalles de estructuras celulares ( núcleo, mitochondria... etc.).

El microscopio electrónico de transmisión (T.E.M.) fué el primer tipo de microscopio electrónico desarrollado este utiliza un haz de electrones en lugar de luz para enfocar la muestra consiguiendo aumentos de 100.000 X. Fue desarrollada por Max Knoll y Ernst Ruska en Alemania en 1931.

Posteriormente, en 1942 se desarrolla el microscopio electrónico de barrido (SEM).

TÉCNICAS DEL MICROSCOPIO

Una de las finalidades de la microscopía es permitir observar los especímenes de la mejor manera posible, logrando un buen balance entre el contraste y la resolución.

La modificación de la manera como incide la luz sobre el espécimen: Empleo de condensadores y filtros:- Microscopio de campo oscuro.- Microscopio de contraste de fase. - Microscopio de luz polarizada, Microscopio petrográfico y metalúrgico. - Contraste por interferencia diferencial (Differential InterferenceContrast) Nomarski.

• La modificación de la fuente emisora de luz: Cambiando la luz blanca por luz ultravioleta o rayos láser:- Microscopio de luz ultravioleta.- Microscopio de fluorescencia.- Microscopio confocal.

TÉCNICAS DEL MICROSCOPIO

Se han diseñado técnicas microscópicas más complejas que incrementan el contraste sin afectar la resolución. Son artificios que proporcionan efectos ópticos en la muestra, permitiendo que aquellos detalles que pasan desapercibidos se traduzcan en cambios de intensidades luminosas las cuales si pueden ser reconocidas por el ojo humano.

En este sentido, las limitaciones presentadas por los microscopios compuestos ordinarios han sido superadas mediante el diseño y fabricación de microscopios particulares o de accesorios especiales

PARTES DEL MICROSCOPIO oCOMPONENTES

MECÁNICOS: Son aquellos que sirven de sostén, movimiento y sujeción de los sistemas ópticos y de iluminación así como de los objetos que se van a observar.

oCOMPONENTES ÓPTICOS: Son los objetivos, los oculares, el condensador y los prismas. Los tres primeros están constituidos por sistemas de lentes positivos y

COMPONENTES MECÁNICOS.

oBase o pie: Es un soporte metálico, amplio y sólido en donde se apoyan y sostienen los otros componentes del microscopio.

oBrazo, estativo o columna: Permite la sujeción y traslado del microscopio. Soporta al tubo óptico, a la platina y el revolver.

oPlatina: Superficie plana de posición horizontal que posee una perforación circular central. En ella se apoya la preparación (lámina portaobjetos que contiene a la muestra que se va a examinar) que se sujeta a la platina mediante pinzas o con un carrito o charriot que, mediante mandos especiales facilitan el movimiento de la preparación de derecha a izquierda y de adelante hacia atrás

oTubo óptico: Consiste en un cilindro metálico que suele medir 160mm o 170 mm de longitud (dependiendo del fabricante del microscopio) el cual en un extremo, está conectado al revolver o porta objetivos y en el otro se relaciona con el (los) ocular(es).

oRevolver o porta-objetivos: Es un componente que gira alrededor de un eje con la finalidad que los objetivos que sostiene coincidan de manera perpendicular con la perforación central de la platina. En su superficie inferior posee varios agujeros donde se atornillan los objetivos.

oTornillos macrométrico y micrométrico: Generalmente están situados en la parte inferior del brazo o columna. Pueden estar separados o el tornillo micrométrico está incorporado en la circunferencia del tornillo macrométrico. Ambos tornillos permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así conseguir un enfoque óptimo de la imagen.

oEngranajes y cremallera: Constituyen mecanismos de desplazamientos de las diferentes partes del microscopio.

oCabezal: Es un componente situado en relación con el tubo del microscopio que alberga principalmente prismas o espejos que sirven para acondicionar en él dos o más oculares, o sistemas mecánicos que soportan cámaras fotográficas, de vídeo o sistemas de proyección de la imagen.

COMPONENTES ÓPTICOS

oCondensador: Es el componente óptico que tiene como función principal concentrar y regular los rayos luminosos que provienen de la fuente luminosa. Está formado por una o dos lentes convergentes que reúnen los rayos luminosos y los orientan hacia la abertura central de la platina.

oObjetivos: Los objetivos están considerados los elementos más importantes en la formación de la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen la calidad de la imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para captar los detalles de la misma (poder de resolución).

CLASIFICACIÓN DE OBJETIVOS.

oAcromáticos: Estos objetivos corrigen los rayos luminosos azules y rojos haciéndolos coincidir en un solo plano focal. En tanto que los otros rayos coloreados se forman en otro plano focal generando una imagen cuyos bordes se observan levemente difusos (espectro luminoso secundario). Los objetivos de los microscopios “de estudiante” son acromáticos.

oSemiapocromáticos: Se les conoce también como objetivos de “fluorita”, corrigen el espectro secundario dando como resultado imágenes de bordes más nítidos. Por la alta capacidad que tienen para transmitir las radiaciones luminosas de onda corta, se les considera como los objetivos ideales para microscopía de fluorescencia.

oApocromáticos: En estos objetivos se hacen coincidir en solo plano los rayos luminosos azules, rojos y verdes, obteniendo así una imagen de bordes sumamente pero laberración trae consigo la acentuación de otra, que de curvatura de campo, pues la superficie focal de la es ligeramente curva, dando como resultado que, al la imagen y tratar de enfocarla en la zona central del microscópico se desenfoca la ona periférica y viceversa.

oPlanapocromáticos: Son los objetivos en los cuales se corregido la mayor cantidad por la corrección de esta aberración como la cromática, curvatura de campo, de esfericidad y de astigmatismo; por lo tanto se obtienen imágenes sumamente nítidas y el campo microscópico aparece totalmente plano, enfocado en toda su

TIPOS DE MICROSCOPIOS.

oEl microscopio compuesto: es el microscopio más utilizado en la ciencia, el trabajo y el hobby. Consiste en dos partes ópticas: lentes oculares (el que está próximo a tus ojos) y los lentes objetivos (el que está posicionado cerca de la prueba observada). El microscopio compuesto fue el primero introducido por inventor holandés Zacarías Janssen(el también es conocido por inventar el telescopio). Su aparato sofisticado para el año 1590, llevaba a cabo dos tareas: para ver estrellas y pequeños objetos. El instrumento se convirtió en una invención del primer microscopio compuesto y un telescopio al mismo tiempo.

o Microscopio óptico: liviano, es un microscopio óptico común utilizando las longitudes de las ondas de luz visibles. Los microscopios livianos son muy utilizados como herramienta para ver objetos pequeños en colores. El microscopio liviano puede ser binocular o monocular, triocularpara el uso de aparatos de video. Los microscopios ópticos o livianos usan lentes refractivos y oculares hechas de vidrio para dirigir una imagen magnificada hacia el ojo u otro aparato que captura la imagen. La habitual magnificación del microscopio liviano es 1500x pero también puede llegar a 2000x con menos calidad de visión.

oMicroscopio digital: es un aparato de captura de video y una pantalla de video formando una sola unidad sin oculares es la definición apropiada para un microscopio digital. Por otro lado, si montas una cámara digital en un microscopio triocular por ejemplo, también hará un buen microscopio digital o microscopio USB "no oficial". Para una mejor imagen o resolución de video y mejor calidad general, es mejor utilizar un microscopio digital apropiado ya que los lentes del microscopio digital están confeccionados especialmente para la cámara. El microscopio digital más común tiene un monitor de 15 pulgadas y una cámara con alrededor 2 millones de pixels.

Microscopio fluorescente: es igual al instrumento común de microscopios livianos con la excepción que ilumina el espécimen con la luz de una onda larga especial causando que el objeto observado emita una luz con un color diferente por la absorción de fluorophores. Las ciencias de vida utilizan de forma amplia microscopios fluorescentes, la mayoría llamados "microscopios epi-fluorescentes". El microscopio fluorescente es muy útil en todos los campos de la biología, haciendo posible estudiar mejor las proteínas y moléculas.

oEl microscopio electrónico: es el más sofisticado de los microscopios conocidos en la ciencia. El microscopio electrónico utiliza lentes electrostáticos y electromagnéticos y a través de los electrones ilumina un objeto, magnificando una imagen hasta 2 millones de veces mientras que la luz del microscopio lo hace solo 2 mil veces. El microscopio electrónico utiliza una onda larga de un electrón llamado Broglie wavelength. Al controlar el rayo de la radiación electromagnética el microscopio electrón hace posible focalizarse, produciendo una imagen de gran escala.

Microscopio estéreo o "microscopio de disección“: es un microscopio óptico utilizado para una visión tridimensional. Capturando la luz con dos objetivos, los microscopios estéreos permiten mejores estudios de un espécimen grueso. Capaz de permitir la observación de superficies oscuras, las funciones del microscopio estéreo permiten ver dos rayos de luz haciendo un efecto visual estéreo. Los microscopios estéreos no son muy populares, la habitual magnificación no es más grande que 100 y 10 veces del tiempo promedio. Algunos microscopios estéreos utilizan objetivos auxiliares para una magnificación superior.

INSTALACIÓN Y ALMACENAMIENTO

4. Verificar que el lugar seleccionado cuente con una toma eléctrica en buen estado, cuyovoltaje esté ajustado en magnitud y frecuencia con los códigos y normas eléctricas.

5. Instalar el microscopio sobre una superficie nivelada de estructura rígida.

6. Para facilitar la colocación del micros copista, proporcionar una silla de altura variable,que le brinde un buen soporte lumbar.

7. Evitar que en sitios cercanos al lugar de instalación del microscopio haya equiposque produzcan vibraciones.

8. Cubrir el microscopio con un protector de polvo si no se usa por períodos de tiempolargos.

9. En zonas de humedad alta, guardar el microscopio durante la noche, en una cabinaprovista de un bombillo de máximo 40 W.

MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO

La limpieza del microscopio es una de las rutinas más importantes y debe considerarse un procedimiento rutinario. Para realizar la rutinade limpieza se requiere lo siguiente:

1. Una pieza de tela limpia, de textura

similar a la de los pañuelos.

2. Una botella de líquido para limpieza

de lentes.

3. Papel para limpieza de lentes. Se

consigue normalmente en las ópticas.

Si no es posible conseguir este

material, se puede sustituir con papel

absorbente suave o con algodón tipo

medicinal.

4. Una pieza de gamuza muy fina.

5. Una pera de caucho para soplar aire.

6. Una cubierta plástica. Se utiliza para

proteger el microscopio del ambiente

externo cuando no está en uso.

MANTENIMIENTO DEL MICROSCOPIO

Instalación y almacenamiento.

1. Asegurarse que el ambiente o área en que se instale el microscopio esté protegido oprotegida del polvo y la humedad.

2. Verificar que el ambiente o área en que se instale el microscopio disponga de seguridad.

3. Confirmar que el lugar seleccionado para ubicar el microscopio esté alejado de lugares como pocetas de agua o donde se trabajen sustancias químicas.