Prévention de lhépatite C chez les adolescents Réseau Hépatite C Ville - Hôpital Côte dAzur.
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HEPATITE CHEPATITE CVirus & MarqueursVirus & Marqueurs
Stéphane ChevaliezStéphane Chevaliez
Centre National de RéférenceCentre National de RéférenceDes Hépatites B, C et deltaDes Hépatites B, C et delta
Laboratoire de Virologie & INSERM U955Laboratoire de Virologie & INSERM U955HHôpital Henri Mondorôpital Henri Mondor
Université Université Paris-EstParis-EstCréteilCréteil
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• Découvert par Houghton en 1989
• 1ère cause d’hépatite chronique et de cirrhose
en Europe et en Amérique du Nord
• 1ère indication de transplantation hépatique
dans les pays industrialisés
Afdhal,NH.2004;SemLivDis,24(Supp2):3‐8
Hépatite C : virus et marqueurs
Virus de lVirus de l’’Hépatite CHépatite C
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Virus de lVirus de l’’Hépatite CHépatite C
•• Famille : Famille : FlaviviridaeFlaviviridae
•• Genre : Genre : HepacivirusHepacivirus
Phylogénie de la région codant la protéine NS5B
Hépatite C : virus et marqueurs
AdaptedfromSimmondsetal.,1999;2001.
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•• Famille : Famille : FlaviviridaeFlaviviridae
•• Genre : Genre : HepacivirusHepacivirus
•• HHôte naturel : Hommeôte naturel : Homme
•• Tropisme : HépatocyteTropisme : Hépatocyte
Virus de lVirus de l’’Hépatite CHépatite CHépatite C : virus et marqueurs
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Organisation StructuraleOrganisation StructuraleHépatite C : virus et marqueurs
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Organisation Génomique desOrganisation Génomique desFlaviviridaeFlaviviridae
Hépatite C : virus et marqueurs
0 1800 3600 5400 7200 9000 10800
C 4Ap7 NS5BNS5ANS4BNS3NS2E2E15’UTR 3’UTR
HepatitisCvirus
Npro
C E1 E2E0 NS2 NS3 NS4B NS5A NS5B4Ap7
5’UTR 3’UTR
Pestivirus
C prM E NS1 2A 2B NS3 NS5NS4A 4BCap
5’UTR 3’UTR
Yellowfevervirus
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Organisation GénomiqueOrganisation GénomiqueHépatite C : virus et marqueurs
PopescuandDubuisson,Bio.Cell2010,102(1):63‐74.
Protéines structurales Protéines non structurales
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Organisation GénomiqueOrganisation GénomiqueHépatite C : virus et marqueurs
Bartenschlageretal,TrendsMicrobiol,inpress.
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IRES et TraductionIRES et TraductionHépatite C : virus et marqueurs
FromDepartmentofStructuralBiology,StanfordUniversityMedicalSchool,USA.
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Réseaux dRéseaux d’’InteractionsInteractionsHépatite C : virus et marqueurs
Parketal,BMCBioinformatics2010,11(Suppl1):S23.
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Protéine de CapsideProtéine de CapsideHépatite C : virus et marqueurs
Boulantetal,JVirol2005,79(17):11353‐11365.
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Piodietal.,Hepatology2008,48(1):16‐27.
VHC G1b
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Capside et LipidesCapside et LipidesHépatite C : virus et marqueurs
Bartenschalgeretal.,TendsMicrobiol,inpress.
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Interaction entre la Capside etInteraction entre la Capside etDGAT-1DGAT-1
Hépatite C : virus et marqueurs
Herkeretal.,NatMed2010,16(11):1295‐1298.
*Diacylglycérol diacyltransférase-1
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Glycoprotéine E2Glycoprotéine E2Hépatite C : virus et marqueurs
• Hétérodimère avec E1• Régions hypervariables
– HVR1– HVR2– igVR
• Rôles– HVR2 et igVRindispensables au “folding“E1-E2– Étapes précoces(interaction avec CD81,peptide de fusion)
Kreyetal.,PLoSPathog.2010,6(2):e1000762;McCaffreyetal.,JGenVirol2011,92:112‐121.
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Étape Précoce : Entrée du VHCÉtape Précoce : Entrée du VHC
Popescuetal.,BioCell2010,102:63‐74.
Hépatite C : virus et marqueurs
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HVR1HVR1
Région HVR1 (27 amino-acides) 80% de divergence nucléotidique entre génotypes Epitope majeur de neutralisation
Timmetal.,WorldJGastroenterol2007;13(36)4808‐4817.
Hépatite C : virus et marqueurs
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Transmission du VHCTransmission du VHCHépatite C : virus et marqueurs
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6a_332b_JFH1Patient 1 (7/04)
5a_SA131b_HVR3812
S5 (7/05)Patient 3 (7/05)Patient 3 (9/05)Patient 2 (7/04)Patient 2 (9/04)Patient 3 (7/04)S4 (6/05)S3 (6/05)S2 (6/05)Patient 3 (01/05)S1 (6/05)
1a_HCT27X52a_Q2B
3a_CB1a_HCT18X5
Patient 61b_AWV2C33
Patient 8Patient 4
Patient 74a_ED43
0.2
100
Surfaces inertes
Girouetal.,ClinInfectDisease2008,47(5):627‐633.
Patients VHC chroniquesSéroconversion VHC
Analyse PhylogéniqueAnalyse Phylogénique
Région HVR1 (81 nt)CLUSTALXDNADist (PHYLIP 3.5)Matrice de distance: Kimura 2-parameter (Ts/Tv=2)Neighbor-JoiningBootstraping : 1000 replicatesNJPlot
Hépatite C : virus et marqueurs
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Protéine p7Protéine p7Hépatite C : virus et marqueurs
• Viroporine dont lastructure 3D a étérécemment déterminéepar ME
• Rôle(s) in vivo ?
• Cible thérapeutiquepotentielle
Luiketal.,ProcNatlAcadSci2009,4;106(31):12712‐6;GriffinS,ProcNatlAcadSci2009,106(31):12567‐68.
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Activité Antivirale du BIT225Activité Antivirale du BIT225Hépatite C : virus et marqueurs
• IC50 de 314 nM dans le modèle du BVDV• Activité synergique
Luscombeetal.,AntiviralRes2010May;86(2):144‐53.
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Protéine NS2Protéine NS2Hépatite C : virus et marqueurs
• NS2 (région N-ter)– Rôle dans l’organisation
de la formation des
nucléocapsides
• NS2pro (région C-ter)
Jiraskoetal.,PLoSpathog2010Dec16;6(12):e1001233;Ivoetal.,Nature2006,442:831‐835.
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Protéine NS3-4AProtéine NS3-4AHépatite C : virus et marqueurs
Raneyetal.,JBiolChem2010,285(30):22725‐731.
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Inhibition de la Production Inhibition de la Production dd’’IFNIFNpar NS3par NS3
Hépatite C : Nouvelles Hepatite C : virus et marqueurs
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Protéase NS3Protéase NS3Hépatite C : virus et marqueurs
Raneyetal.,JBiolChem2010,285(30):22725‐731.
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Etudes de Phase III Présentées àEtudes de Phase III Présentées àll’’AASLDAASLD™™ 2010 2010
• SPRINT-2• RESPOND-2
• ADVANCE• ILLUMINATE• REALIZE
BOCEPREVIR (BOC)
TELAPREVIR (TVR)
Hépatite C : virus et marqueurs
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SPRINT-2SPRINT-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : Design de lDesign de l’’EtudeEtude
SuiviPRLead-in PR + placebo
SuiviPRLead-in PR + boceprevir
48 PRn = 363
S4 S28 S48 S72
Suivi
Suivi S24
PRLead-in PR + boceprevir
P/R + placebo
ARN-VHC indétectable à S8-24
ARN-VHC détectable à S8-24 BOC/TGRn = 368
BOC/PR48n = 366
*BOC 800 mg q8h; pegIFN alfa-2b 1,5 µg/kg/s; RBV 600-1400 mg/j adaptée au poids.
Poordadetal.,AASLD2010,AbstractLB4.
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SPRINT-2SPRINT-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : CaractéristiquesCaractéristiquesdes Patientsdes Patients
Poordadetal.,AASLD2010,AbstractLB4.
Cohorte 1 (caucasiens) [n=938]
PR48n=311
BOC/RGTn=316
BOC/PR48n=311
Sexe masculin [n(%)] 171 (55) 198 (63) 187 (60)
Age (années) [moyenne] 48 49 49
IMC (kg/m2) [moyenne (±DS)] 27 (±5) 28 (±5) 27 (±5)
ARN du VHC >400,000 UI/mL [n(%)] 286 (92) 287 (91) 289 (93)
Type/sous-type du VHC [n(%)]*
1a 186 (60) 196 (62) 196 (63)
1b 112 (36) 110 (35) 102 (33)
Fibrose sévère/Cirrhose(METAVIR F3/F4) [n(%)]
22 (7) 25 (8) 37 (12)
*La détermination du type et du sous-type a été réalisée par séquençage d’une portion de la région NS5B codant l’ARNpol (méthode de référence)
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SPRINT-2SPRINT-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : RVS et Taux deRVS et Taux deRechuteRechute
Poordadetal.,AASLD2010,AbstractLB4.
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
p<0,0001
p<0,0001
Taux de rechuteTaux de RVS
Hépatite C : virus et marqueurs
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SPRINT-2SPRINT-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : RVS et Taux deRVS et Taux deRechuteRechute
Poordadetal.,AASLD2010,AbstractLB4.
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
p<0,0001
p<0,0001
➜ Le BOC améliore significativement les chances de guérison par rapport au SOC➜ L’adaptation de la durée du traitement à la réponse (TGR) ne semble pas diminuer les
chances de guérison
Taux de rechuteTaux de RVS
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ADVANCEADVANCE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : Design de lDesign de l’’EtudeEtude
S8 S24 S48 S72
*TVR 750 mg q8h; pegIFN alfa-2a 180 µg/s; RBV 1000-1200 mg/j adaptée au poids.eRVR : réponse virologique rapide étendue (ARN indétectable à S4 et à S12)
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
TVR+ PR
Pbo+
PRT8PR
(n = 364) PRPR
Placebo+ P/R PRPR48
(n = 361)
PRTVR + PR PR
T12PR(n = 363)
eRVR+
S12 S36
Suivi
Suivi
Suivi
Suivi
eRVR+
Suivi
eRVR-
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ADVANCEADVANCE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : CaractéristiquesCaractéristiquesdes Patientsdes Patients
T12PR (n = 363) T8PR (n = 364) PR (n = 361)Sexe masculin [n (%)] 214 (59) 211 (58) 211 (58)Origine ethnique
Caucasiens [n (%)] 325 (90) 315 (87) 318 (88)Afro-Américains 26 (7) 40 (11) 28 (8)Hispaniques 35 (10) 44 (12) 38 (11)
Âge (années) [médiane (intervalle)] 49 (19-69) 49 (19-68) 49 (18-69)IMC (kg/m2) [médiane (intervalle)] 26 (18-47) 26 (17-46) 26 (17-48)ARN du VHC > 800 000 UI/ml* [n (%)] 281 (77) 279 (77) 279 (77)Type/sous-type du VHC** [n (%)]
1a 213 (59) 210 (58) 208 (58)1b 149 (41) 151 (41) 151 (42)1 non sous-typable 1 (< 1) 3 (1) 2 (1)
Stade de fibrose, n (%)Fibrose en ponts 52 (14) 59 (16) 52 (14)Cirrhose 21 (6) 26 (7) 21 (6)
*La charge virale (ARN du VHC, UI/ml) a été déterminée par PCR en temps réel (TaqMan® Roche), avec une limite de quantification de 25 UI/mL**La détermination du génotype viral a été réalisée par hybridation inverse, INNO-LiPA v1.0
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
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ADVANCEADVANCE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : RVSRVS
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
p<0,0001
p<0,0001
Prop
ortion
depa
tien
tsayant
développ
éun
eRV
S(%
)
Hépatite C : virus et marqueurs
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ADVANCEADVANCE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients NaPatients Naïfs de Génotype 1 : ïfs de Génotype 1 : RVSRVS
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
p<0,0001
p<0,0001
Prop
ortion
depa
tien
tsayant
développ
éun
eRV
S(%
)
➜ Le TVR améliore significativement les chances de guérison par rapport à labithérapie standard
➜ Le traitement par TVR 8 ou 12 semaines donne des taux de RVS comparables(différence NS)
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RESPOND-2RESPOND-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en échecPatients en échec Thérapeutique de G1 : Thérapeutique de G1 : DesignDesignde lde l’’EtudeEtude
SuiviPRLead-in PR + placebo
SuiviPRLead-in PR + boceprevir
PR48n = 80
S4 S28 S48 S72
Suivi
Suivi S24
PRLead-in PR + boceprevir S32
PR +placebo
ARN-VHC indétectable à S8
ARN-VHC détectable à S8 BOC/TGRn = 162
BOC/PR48n = 162
*BOC 800 mg q8h; pegIFN alfa-2b 1,5 µg/kg/s; RBV 600-1400 mg/j adaptée au poids.
Baconetal.,AASLD2010,Abstract216.
Hépatite C : virus et marqueurs
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RESPOND-2RESPOND-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en échecPatients en échec Thérapeutique de G1 : Thérapeutique de G1 : RVS etRVS etTaux de RechuteTaux de Rechute
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
p<0,0001
p<0,0001
Taux de rechuteTaux de RVS
17/60 8/25 95/162 17/111 107/161 14/121
Lead‐in+32BOC/PR±PR12
Baconetal.,AASLD2010,Abstract216.
Hépatite C : virus et marqueurs
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RESPOND-2RESPOND-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en échecPatients en échec Thérapeutique de G1 : Thérapeutique de G1 : RVS etRVS etTaux de RechuteTaux de Rechute
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
p<0,0001
p<0,0001
Taux de rechuteTaux de RVS
Lead‐in+32BOC/PR±PR12
➜ Le BOC améliore significativement les chances de guérison par rapport auretraitement par SOC
17/60 8/25 95/162 17/111 107/161 14/121
Baconetal.,AASLD2010,Abstract216.
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 38: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/38.jpg)
RESPOND-2RESPOND-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en échecPatients en échec Thérapeutique de G1 : Thérapeutique de G1 : RVSRVSSelon la Réponse AntérieureSelon la Réponse Antérieure
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
RRRépondeurs partiels
Lead‐in+32BOC/PR±PR12
2/29 15/51 23/57 72/105 30/58 77/103
Baconetal.,AASLD2010,Abstract216.
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 39: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/39.jpg)
RESPOND-2RESPOND-2——BOC + BOC + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en échecPatients en échec Thérapeutique de G1 : Thérapeutique de G1 : RVSRVSSelon la Réponse à S4Selon la Réponse à S4
Prop
ortion
depa
tien
ts(%
)
Diminution de l’ARN ≥1 Log10
Diminution de l’ARN <1 Log10
Lead‐in+32BOC/PR±PR12
17/66 15/46 80/110 15/44 17/66
Baconetal.,AASLD2010,Abstract216.
➜ Intérêt de la phase de Lead-in comme facteur prédictif de la RVS
p<0,0001
p<0,0001
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 40: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/40.jpg)
REALIZEREALIZE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en Echec ThérapeutiquePatients en Echec Thérapeutique de G1 : de G1 : DesignDesignde lde l’’EtudeEtude
SuiviPR + placebo48 PRn = 130
*TVR 750 mg q8h; pegIFN alfa-2a 180 µg/s; RBV 1000-1200 mg/j adaptée au poids.
Pressrelease,Sept2010.
PR
SuiviPR + TVRn = 260 PR(Ll) PR
SuiviPR(LI) PRn = 260
S4 S16 S48 S72S8 S12
PR + TVR
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 41: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/41.jpg)
REALIZEREALIZE——TVR + TVR + PegIFN PegIFN + RBV chez des+ RBV chez desPatients en Echec ThérapeutiquePatients en Echec Thérapeutique de G1 : de G1 : RVSRVS
Pressrelease,Sept2010.
Prop
ortion
depa
tien
tsayan
tune
RVS(%
)
T12/PR48* (n=520)PR48 (n=130)
*Braspoolés
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 42: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/42.jpg)
TMC435 Administré en Monothérapie chezTMC435 Administré en Monothérapie chezdes Patients de Génotype 2, 3, 4, 5 et 6des Patients de Génotype 2, 3, 4, 5 et 6
Mannsetal.,AASLD2010,Abstract82.
J7J3
Dim
inutionmoyen
nedel’A
RN
duVHC(LogUI/mL)
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 43: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/43.jpg)
Lesburgetal.,NatstructBiol1999,6:937‐943;Bressanellietal.,ProcNatlAcadSciUSA1999,96:13034‐13039;Agoetal.,SrructureFoldDes1999,7:1417‐1426.
Protéine NS5B: RdRpProtéine NS5B: RdRpNouvelles Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 44: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/44.jpg)
Réplication
– Modèle du poliovirus. Virus à ARN monocaténairede polarité positive
DeClercq.,NatureReviewDrugDiscovery,2007;6:1001‐18
Réplication ViraleRéplication ViraleHépatite C : virus et marqueurs
![Page 45: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/45.jpg)
Variabilité GénétiqueVariabilité Génétique
• Erreurs au cours de la réplication– Fréquentes
• 10-4-10-4 mutations par nucléotide copié au cours de la réplication du VHC
– Spontanées– Au hasard
• Absence d’activité exonucléasique 3’⇒5’("proofreading")– Accumulation de mutations
• A l’origine de :– La diversification des types et des sous-types– La distribution en quasi-espèces
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 46: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/46.jpg)
Diversification des GénotypesDiversification des Génotypes
Simmondsetal.,Hepatology2005,42(4):962‐73.
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 47: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/47.jpg)
1a,
AdaptedfromFangJ.,etal.J.ClinLiverDis.1997.
Distribution des GénotypesDistribution des GénotypesHépatite C : virus et marqueurs
![Page 48: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/48.jpg)
Distribution en Quasi-espèceDistribution en Quasi-espèce
Weineretal.,Virology1991;180:842‐848;Martelletal.,JVirol1992;66:3225‐36.
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 49: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/49.jpg)
Copyright©2006Merck&Co.,Inc.,WhitehouseStation,NewJersey,USA
Cibles des Molécules AntiviralesCibles des Molécules AntiviralesHépatite C : virus et marqueurs
Site A (Thumb/fingertips)(JTK-109)
Mutants: 495, 496, 499
Site B (Thumb)HCV-371
Mutants: 419, 423, 482
Site C (Palm) (A-837093)
Mutants: 411, 414, 448
Site Actif(R7128)
Mutants: 282
Site D (Palm)(HCV796)
Mutants: 316
AA
BBCC
DD
EE
Site E (Finger, hypothetical)GS-9190
Mutants: 445,448,452
![Page 50: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/50.jpg)
01234567
-15 -10 -5 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70Days
HC
V R
NA
(Log
IU/m
L)
TMA + + + + - - - - - - - - + +
LOQ(20 IU/mL)
MK-0608 at 1mg.kg-1 orally
- 4,6 - 4,1
wt S282R/T/I wt S282
Activité Antivirale du MK-0608Activité Antivirale du MK-0608Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 51: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/51.jpg)
Cycle ViralCycle ViralHépatite C : virus et marqueurs
AdaptedfromLindenbachandRice,Nature(2005),436:933‐938.
![Page 52: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/52.jpg)
Complexes de RéplicationComplexes de Réplication
Moradpouretal.,NatureReviewsMicrobiology,2007;5:453‐463.
Hépatite C : virus et marqueurs
![Page 53: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/53.jpg)
![Page 54: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/54.jpg)
HEPATITE CHEPATITE CStratégie Diagnostique &Stratégie Diagnostique &
Suivi VirologiqueSuivi Virologique
![Page 55: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/55.jpg)
Marqueurs VirologiquesMarqueurs VirologiquesStratégie diagnostique & suivi virologique
Marqueurs indirects
Anticorps anti-VHC totaux
Marqueurs directs
Ag de capside (AgC)
ARN VHC
Génotype VHC
Profil de résistance
![Page 56: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/56.jpg)
Tests SérologiquesTests SérologiquesStratégie diagnostique & suivi virologique
• Détection et quantification de l’Ag decapside
• Test “Combo”– Détection simultanée de l’Ag de capside et des
anticorps anti-VHC
• Détection des anticorps anti-VHC à l’aided’une trousse de 3ème génération
![Page 57: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/57.jpg)
Antigène de Capside : unAntigène de Capside : unMarqueur de la RéplicationMarqueur de la Réplication
Bouvier‐Aliasetal.,Hepatology2002,36(1):211‐218.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
r = 0.92; p < 0.0001
![Page 58: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/58.jpg)
• Spécificité– 99,2% à 100%
• Sensitivité– ≤10 fmol/L (i.e ~ 500 to 3 000 UI/mL d’ARN VHC)– Tous les génotypes (excepté génotype 2)
• Intervalle de quantification– 10 à 20 000 fmol/L (≤ 7,8 Log10 UI/mL d’ARN
VHC)
• Stable à 37°C pendant 96 heures
Performances Performances Analytiques Analytiques de lade laTrousse Trousse Architect (Abbott)Architect (Abbott)
Rossetal.,JClinMicribiol2010,48(4):1161‐8;Mederackeetal.,JClinVirol2009,46(3):210‐5;Miedougeetal.,JClinVirol2010,48(1):18‐21.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 59: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/59.jpg)
Trousse Trousse Architect :Architect : MonitoringMonitoringdes des Cinétiques ViralesCinétiques Virales
RVR (G1b) SVR (G1b)
Relapser (G1b) NR (G1a)
Rossetal.,JClinMicrobiol2010,48(4):1161‐8.
Core AgRNA
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 60: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/60.jpg)
IntérIntérêts Cliniques êts Cliniques de lade laQuantification de Quantification de ll’’AgCAgC
• Diagnostic de l’infection– Trousses commerciales– Facile à utiliser, automatisée, peu couteux (20% par
rapport à une charge virale VHC)
• Décision de traiter et suivi de l’efficacité destraitements antiviraux– Quantitatif (≤20,000 fmol/L*)– Alternative aux techniques de détection quantification
de l’ARN du VHC(*Abbott Architect HCV Ag Assay)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 61: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/61.jpg)
Tests Virologiques MoléculairesTests Virologiques Moléculaires
Tests quantitatifsSeuil de détection ≥ qualitatifs
Quelle quantité est présente ?
Tests qualitatifsTrès sensibles
(≤ 50 IU/mL)
Est-ce que le VHC est présent ?
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Déterminationdu Génotype
Quel est le génotype du virus ?
Détection Détection de la résistancede la résistance
Quel type de VHC est présent ?
![Page 62: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/62.jpg)
Tests Virologiques MoléculairesTests Virologiques MoléculairesStratégie diagnostique & suivi virologique
Est-ce que le VHC est présent et en quelle quantité ?
Tests Qualitatifs-Quantitatifs
Déterminationdu Génotype
Quel est le génotype du virus ?
DétectionDétection de la résistance de la résistance
Quel type de VHC est présent ?
![Page 63: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/63.jpg)
Intervalle de QuantificationIntervalle de QuantificationStratégie diagnostique & suivi virologique
10 102 103 104 105 106 107 108
Cobas AmplicorHCV Monitor v2.0
SuperQuant
LCx HCV RNAAssay
Versant HCV RNA3.0 (bDNA)
![Page 64: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/64.jpg)
Avantages Techniques de la PCRAvantages Techniques de la PCRen Temps Réelen Temps Réel
- Diminution du risque de contamination
- Amélioration de la sensibilité
- Augmentation de l’intervalle dequantification linéaire
- Amélioration précision et reproductibilité
- Augmentation de débit à traversl’automatisation
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 65: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/65.jpg)
Intervalle de QuantificationIntervalle de QuantificationStratégie diagnostique & suivi virologique
10 102 103 104 105 106 107 108
*in development
Cobas AmplicorHCV Monitor v2.0
SuperQuant
LCx HCV RNAAssay
Versant HCV RNA3.0 (bDNA)
TaqMan 48 HCVTaqMan 48 HCV(Roche)(Roche)
HCV Quant ASRHCV Quant ASR(Abbott)(Abbott)
Artus HCV QS-RGQArtus HCV QS-RGQ(Qiagen)*(Qiagen)*
Versant HCV RNAVersant HCV RNA1.0 (kPCR, Siemens)*1.0 (kPCR, Siemens)*
![Page 66: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/66.jpg)
Plates-formesPlates-formesCAP-CTM96 (ROCHE)
kPCR (SIEMENS)
m2000SP-m2000RT (ABBOTT)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 67: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/67.jpg)
• Remplace les techniques qualitatives dedétection de l’ARN VHC
• Quantifie l’ensemble des charges viralesobservées en pratique clinique– Charges élevées préthérapeutiques– Faibles charges virales au cours du traitement
• Surveille efficacement les cinétiquesvirales (évaluation précoce des réponsesvirologiques au traitement)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Avantages Cliniques de la PCRAvantages Cliniques de la PCRen Temps Réelen Temps Réel
![Page 68: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/68.jpg)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Quantification ARN du VHC(CTM, Roche)
Chevaliezetal.,2007;Hepatology,46(1):22‐31.
HCV RNA level in Versant HCV 3.0 Assay bDNA(Log10 IU/mL)
Genotype 1 (n=29)
Genotype 2 (n=27)
Genotype 3 (n=29)
Genotype 4 (n=30)
Genotype 5 (n=9)
Genotype 6 (n=2)
r = 0.889; p < 0.0001
8
7
6
5
4
3876543
HC
V R
NA
leve
l in
CA
P/C
TM48
(Log
10 IU
/mL)
![Page 69: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/69.jpg)
80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180 |.........|.........|.........|.........|.........|.........|.........|.........|.........|.........|F_7157 (4a): TAGCCATGGCGTTAGTATGAGTGTTGTGCAGCCTCCAGGACCCCCCCTCCCGGGAGAGCCATAGTGGTCTGCGGAACCGGTGAGTACACCGGAATCGCCGGPatient 1 (4h): ...........................A.....................................A...................T...............Patient 2 (4l): ...........................A.....................................A...................T...............
190 200 210 220 230 240 250 260 270 .........|.........|......-...|.........| .........|.........|.........|.........| .........|........F_7157 (4a): GATGACCGGGTCCTTTCTTGGATTAA-CCCGCTCAATGCCCGGAAATTTGGGCGTGCCCCCGCAAGACTGCTAGCCGAGTAGTGTTGGGTCGCGAAAGGCCPatient 1 (4h): ......................A.T.A..........................................................................Patient 2 (4l): .......................C..-.......................................................C.......T..........
280 290 300 310 320 330 340 |.........|.........|.........|.........|.........|.........|.F_7157 (4a): TTGTGGTACTGCCTGATAGGGTGCTTGCGAGTGCCCCGGGAGGTCTCGTAGACCGTGCACCPatient 1 (4h): .............................................................Patient 2 (4l): .............................................................
Chevaliezetal.,2008;Hepatology,49(4):1397‐1398.
(Log10 IU/mL) CAP/CTM96 m2000SP/m2000RT Versant 3.0
Patient 1 (4h) <1.08 5.4 5.0
Patient 2 (4l) <1.08 6.0 5.7
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Absence de Détection de l’ARN Viral depatients Fortement Virémiques Infectés parun Génotype 4
![Page 70: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/70.jpg)
Quantification deQuantification de Transcrits dTranscrits d’’ARN Sauvages ouARN Sauvages ouMutés en Position 145 et/ou 165Mutés en Position 145 et/ou 165
Chevaliezetal.,Hepatology,2009,50(5):1681.
5.95±0.25
5.88±0.20
6.00±0.11
6.05±0.10
m2000
6.60±0.18<1.08*Double mutant (G145Aand A165T)
6.30±0.024.28±0.35Single mutant (G145 andA165T)
6.69±0.024.02±0.13Single mutant (G145A andA165)
6.43±0.015.73±0.13Wild-type (G145 andA165)
Versant 3.0CTM
bDNA assayReal-time PCR assays
Measured HCV RNA levels (Log10 IU/mL)
HCV 5’NC sequence
*Target not detected
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 71: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/71.jpg)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Quantification ARN du VHC(m2000, Abbott)
Chevaliezetal.,JClinMicrobiol,2009,47(6):1726‐32.
r = 0.972; p < 0.0001
8
7
6
5
4
3876543H
CV
RN
A le
vel i
n m
2000
SP/m
2000
RT (
Log 1
0 IU
/mL)
HCV RNA level in Versant HCV 3.0 Assay bDNA(Log10 IU/mL)
Genotype 1 (n=55)
Genotype 2 (n=21)
Genotype 3 (n=29)
Genotype 4 (n=24)
Genotype 5 (n=9)
Genotype 6 (n=3)
![Page 72: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/72.jpg)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Quantification ARN du VHC(kPCR, Siemens)
DavidSherman.,MolecularSymposium,September2007(source:SiemensMedicalSolutionsDiagnostics).
132 clinical samples
![Page 73: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/73.jpg)
• En pratique clinique, la quantificationde l’ARN du VHC doit être réalisée àl’aide d’une technique de PCR entemps réel– Avec une limite de détection de l’ordre de
10 à 15 UI/mL
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Résumé
![Page 74: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/74.jpg)
Génotypes du VHCGénotypes du VHC
Simmondsetal.Hepatology2005.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 75: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/75.jpg)
Répartition des GénotypesRépartition des GénotypesStratégie diagnostique & suivi virologique
1a,
AdaptedfromFangJ.,etal.J.ClinLiverDis.,1997.
![Page 76: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/76.jpg)
Détermination du GénotypeDétermination du Génotype
• Méthodes moléculaires (genotyping)– Analyse de la séquence après séquençage direct– Hybridation inverse des produits d’amplification sur
des supports solides comportant des sondesgénotype sépcifique : Line Probe Assay (INNO-LiPAHCV, Innogenetics)
– PCR en temps réel à l’aide d’amorces et de sondesgénotype spécifique
• Méthodes sérologiques (“serotyping”)– ELISA compétitif
Arens et al., J Clin Virol, 2001; 22:11-29; Davidson et al., J Gen Virol 1995; 76: 1197-204; Lareu et al., 1997; Le Pogam et al., 1998; J ClinMicrobiol; 36: 1461-3; Ilina et al., J Clin Miocrobiol, 2005; 43(6): 2810-15.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 77: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/77.jpg)
Arensetal.,JClinVirol,2001;22:11‐29;Davidsonetal.,JGenVirol1995;76:1197‐204;Lareuetal.,1997;LePogametal.,1998;JClinMicrobiol;36:1461‐3;Ilinaetal.,JClinMiocrobiol,2005;43(6):2810‐15.
• Méthodes moléculaires (genotyping)– Analyse de la séquence après séquençage direct– Hybridation inverse des produits d’amplification sur
des supports solides comportant des sondesgénotype sépcifique : Line Probe Assay (INNO-LiPAHCV, Innogenetics)
– PCR en temps réel à l’aide d’amorces et de sondesgénotype spécifique
• Méthodes sérologiques (“serotyping”)– ELISA compétitif
Détermination du GénotypeDétermination du GénotypeStratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 78: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/78.jpg)
Versant® HCV Genotype 2.0Assay (INNO-LiPA)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
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Intérêt de la Détermination duIntérêt de la Détermination duSous-Type Sous-Type ??
• Direct Acting Antivirals (DAAs) pourraientavoir des efficacités antivirales différentesselon les sous-types de VHC de génotype 1in vitro et in vivo
• Le traitement par DAAs pourrait être associéà des profiles de résistance différents selonles sous-types de VHV de génotype 1 in vitroet in vivo
Stratégie diagnostique & suivi virologique
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Profils de Résistance duProfils de Résistance du BMS-BMS-70052, 70052, in vitroin vitroSubstitution aminoacidique EC50 fold-change Niveau de
Replication (%)Génotype 1bL31F/V 5-23 146±44P32L 17 18±6Y93H/N 19-28 20 ±7Génotype 1aM28T 683 31±23Q30E/H/R 1 450-24 933 130±56L31M/V 350-3 350 117±29P32L 233 18±5Y93C/H/N 1 850-47 017 18±11
Fridelletal.AntimicrobAgentsChemother.2010;54(9):3641‐50
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 81: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/81.jpg)
Profils de Résistance du Profils de Résistance du TelaprevirTelaprevir(PROVE-2 trial), (PROVE-2 trial), in vivoin vivo
Pt-1 Pt-2 Pt-3 Pt-4 Pt-5 Pt-6R26K
V36L/M V36A V36AT42S
A40T A40TT54S T54S T54A
Y56FT91A
R155K R155K R155K/E R155T/AG174S
Génotype 1bGénotype 1a
Chevaliezetal.InternationalHIV&HEPATITISVIRUSDrugResistanceWorkshopandCurativeStrategies2010.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 82: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/82.jpg)
Détermination du Sous-Type parune Méthode de Référence*
*HCV genotype determination by means of phylogenetic analysis of aportion of the gene encoding the NS5B region was used as the referencemethod
Chevaliezetal.,PLoSOne2009,4(12):e820.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 83: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/83.jpg)
Chevaliezetal.,PLoSOne2009,4(12):e820.
1st Generation of LineProbe Assay
(LiPA 1.0)
2nd Generation of LineProbe Assay
(LiPA 2.0)
RealTime HCVGenotype II
Sequence Analysis ofthe 5’NCR
GT 1a(n=237)
GT 1b(n=263)
77.6%(n=184)
90.5%(n=238)
70.5%(n=167)
91.3%(n=240)
97.5%(n=231)
96.2%(n=253)
93.2%(n=220)
88.6%(n=233)
Détermination du Sous-TypeStratégie diagnostique & suivi virologique
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- Dans les essais cliniques évaluant les DAAs etprobablement en pratique clinique, le détermination dusous-type des souches de génotype 1 est nécessairepour la stratification et l’interprétation des profils derésistance
- La détermination du génotype sur la seule région 5’NCdoit être proscrite
- La 2nd génération de Line Probe Assay qui utilise dessondes dirigées contre la région core en plus de larégion 5’NC est la meilleure méthode permettant dedistinguer les sous-types 1a et 1b
RésuméStratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 85: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/85.jpg)
rs12979860rs12979860
En amont du géne de l’IL28B, codant l’IFN-λ3
Geetal.,Nature2009;461:399‐401.
IL28B “Single NucleotidePolymorphism” (SNP)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 86: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/86.jpg)
Rép
onse
viro
logi
que
sout
enue
(%)
Thompsonetal.,Gastroenterology2010;139(1):120‐129.
RVS à la Bithérapie Standard enFonction du Génotype IL28B
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Caucasians(n=1171)
African-Americans(n=300)
Hispanics(n=116)
Combined(n=1587)
51%37%
12
49%
1437%
48%29%22%
![Page 87: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/87.jpg)
- En pratique clinique, SNPs en amont du gène del’IL28B (rs12979860 et rs8099917) sont les facteursprédictifs les plus robustes de la RVS à la bithérapie
- Cependant, leur valeur prédictive à l’échelonindividuel n’est pas suffisante pour la prise en comptedans les décisions thérapeutiques
- La détermination du génotype IL28B en association àd’autre paramètres, comme la réponse virologique àS4, pourrait être utile pour adapter le traitement,éventuellement des patients sous triple combinaison
Geetal.,Nature2009;461:399‐401;Tanakaetal.,NatGenet2009;41(10):1105‐9;Afdhaletal,Hepatologyinpress.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Résumé
![Page 88: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/88.jpg)
IntérIntérêts des Tests Virologiquesêts des Tests Virologiquesen Thérapeutiqueen Thérapeutique
Consensusconference:treatmentofhepatitisC;2002,GastroenterolClinBiol,26(2):B303‐20
• Décision de traiter
• Optimisation du schémathérapeutique
• Etude de la réponse virologique autraitement
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 89: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/89.jpg)
Traitement de l’HépatiteChronique C
• Traitement standard– Interféron pégylé alpha-2a or alpha-2b et
ribavirine à doses fixe ou adaptée au poids
• Durée de traitement– 16 à 72 semaines en fonction du génotype et
de la réponse virologique
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 90: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/90.jpg)
IntérIntérêts de la Détermination duêts de la Détermination duGénotypeGénotype
• Détermination systématique dugénotype– Facteur prédictif de la réponse au
traitement
– Conditionne. La dose de ribavirine
. La durée du traitement
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 91: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/91.jpg)
Dose de RibavirineStratégie diagnostique & suivi virologique
Ribavirine0,8g/j
Ribavirin1,0–1,2g/j
Hadziyannis et al., Ann Intern Med 2004;140: 346-355.
Prop
ortion
depa
tien
tsavecRV
S(%
)
![Page 92: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/92.jpg)
Durée de TraitementStratégie diagnostique & suivi virologique
Hadziyannisetal.,AnnInternMed2004;140:346‐355.
24semaines
48semaines
Prop
ortion
depa
tien
tsavecRV
S(%
)
![Page 93: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/93.jpg)
IntérIntérêts de la Détection -êts de la Détection -Quantification de lQuantification de l’’ARN VHCARN VHC
• Evaluation de la réplication virale chez despatients anticorps anti-VHC positifs
• Evaluation de la réponse virologique aucours du traitement pegIFN - RBV
– Réponse virologique rapide (semaine 4)– Réponse virologique précoce (semaine 12)– Réponse fin de traitement (EoT)– Réponse virologique soutenue (semaine 24 post-Rx)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 94: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/94.jpg)
Réponses au Traitement enFonction des Cinétiques Virales
0 4 8 12Semaines
Detection cut-off(10-15 IU/mL)-6
-5
-4
-3
-2
-1
0
+1
HC
V R
NA
redu
ctio
n fr
omba
selin
e (L
og10
IU/m
L)
SOC
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Diminution ≥ 2 Log
![Page 95: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/95.jpg)
Réponse Virologique Précoce :Facteur Prédictif de la RVS
EoTRVSRechute
AdaptedfromFerencietal.,JHepatol2005,43:425‐433.
Diminution >2 Log ou ARN indétectable à S12
Diminution <2 Log à S12
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 96: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/96.jpg)
0 4 8 12Semaines
RVRSlow VR
RVP
SOC
2
Detection cut-off(10-15 IU/mL)-6
-5
-4
-3
-2
-1
0
+1
HC
V R
NA
redu
ctio
n fr
omba
selin
e (L
og10
IU/m
L)
Diminution ≥ 2 Log
Réponses au Traitement enFonction des Cinétiques Virales
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 97: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/97.jpg)
SVR
43/4
5
38/4
2
37/4
4
64/7
2
33/4
1
62/8
3
227/
300
234/
292
250/
355
68/1
56
77/1
57
72/2
03
542/
1019
500/
1016
667/
1035
406/
1019
386/
1016
423/
1035
Semaines avec un ARN du VHC indétectableWeek to first undetectable HCV RNA
ViraferonPeg 1.5µg/kg/w + RBV 1000-1400 mg/dViraferonPeg 1.0µg/kg/w + RBV 1000-1400 mg/dPegIFN alpha-2a 180µg/w + RBV 1000-1200 mg/d
McHutchinsonetal.,NewEnglJMed2009,361(6):580‐593.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
Taux de RVS
![Page 98: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/98.jpg)
Longer Treatment DurationLonger Treatment DurationGenotype 1, Slow virological responders
>2 Log drop at week 12, but detectable HCV RNA
Bergetal.,Gastroenterology2006,130:1086‐97.
48 weeks
72 weeks
HCV RNA <50 IU/mL HCV RNA >50 IU/mL
34/51 27/35 104/130 90/119 78/179 94/190 17/100 31/106
p=0.040
121/230121/225
Rat
e of
SVR
(%)
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 99: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/99.jpg)
Genotype 1 and 4, Slow virological responders>2 Log drop at week 12, but detectable HCV RNA
Ferencietal.,Gastroenterology2010,138:503‐512.
HCV RNA <50 IU/mL
Rat
e of
rela
pse
(%)
HCV RNA >50 IU/mL
p<0.01
p<0.05
48 weeks72 weeks
20/35 9/2916/72 11/81
Longer Treatment DurationLonger Treatment DurationStratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 100: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/100.jpg)
Shorter Treatment Duration
• A recent meta-analysis suggested that– In patients infected with HCV genotype 1 with
an RVR, 24 weeks of therapy with SOCshould be considered only in subjects withlow baseline viral loads
– The optimal cut-off defining low baseline HCVRNA level (400,000-800,000 IU/mL) is notclearly defined
Morenoetal.,JHepatol2010;52:25‐31.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 101: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/101.jpg)
Shorter Treatment DurationShorter Treatment DurationGenotype 2 and 3, Rapid virological responders
(<50 IU/mL at week 4)R
ate
of S
VR (%
)
16weeks24weeksp<0.001 p<0.001
375/458 368/405 197/243 115/212 181/215 174/193
Diagoetal.,Hepatology.2010;51(6):1897‐903.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 102: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/102.jpg)
Shorter Treatment DurationShorter Treatment DurationGenotype 2 and 3, Rapid virological responderswith a low baseline viral load (<400,000 IU/mL)
Rat
e of
SVR
(%)
16weeks24weeksp=0.20
111/122 95/100
Diagoetal.,Hepatology.2010;51(6):1897‐903.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 103: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/103.jpg)
HCV genotypeHCV-1 (4,5,6)
RNA quantificationHCV-2,3
SOC24 weeks
Ribavirin (800 mg.d-1)
SOC48 weeks
Ribavirin (1000-1400 mg.d-1)
Decrease < 2 Log Decrease ≥ 2 LogHCV RNA detectable
Stop antiviraltreatment
Continue Rx untilW24
If HCV RNAundetetectable
Continue Rx UntilW72
Decrease ≥ 2 LogHCV RNA
undetectable
Continue Rx untilW48
RNA quantification at W4
HCV RNAundetectable
HCV RNAdetectable
Continue Rxuntil W24
Consider16 weeks
of therapy2
1In patients with a low viral load at baseline (<400,000 IU/mL); 2In patients with a low viral load at baseline (400,000-600,000 IU/mL)
RNA quantification at W4
RNA quantification atW12
HCV RNAundetectable
HCV RNAdetectable
Consider24 weeks
of therapy1
![Page 104: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/104.jpg)
Future HCV Therapy
• Future standard treatment– Pegylated interferon alpha-2a or alpha-2b– Ribavirin– Specific inhibitor of the NS3/4A protease
. Telaprevir
. Boceprevir
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 105: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/105.jpg)
Weeksontherapy
T12PRN=363
T8PRN=364
PR48N=350
360 2412
TVR+PR
Follow‐up
48
TVR+PR PR
PR
Follow‐up
60 728
PR Follow‐up
noeRV
R
PRFollow‐up
PR Follow‐up
noeRV
R
*eRVR=undetectableHCVRNAatweek4andweek12
ADVANCE TrialTelaprevir, Naïve, Genotype 1
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 106: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/106.jpg)
p<0.0001
Prop
ortion
ofP
atients
withSV
R(%
)
p<0.0001
SVR Rates
Jacobsonetal.,AASLD2010,Abstract211.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 107: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/107.jpg)
SPRINT-2 TrialBoceprevir, Naïve, Genotype 1
Weeksontherapy
360 2412 48 60 72
*VR=HCVRNAundetectablebetweenweeks8and24
BOC+PR
Follow‐upPR
LI Follow‐up
4
Follow‐up
PR Follow‐up
noVR
BOC+PRLI
VR
28
BOC/RGTN=368
BOC/PR48N=366
PR48N=363
Poordadetal.,AASLD2010,AbstractLB‐4.
Stratégie diagnostique & suivi virologique
![Page 108: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/108.jpg)
Poordad et al., AASLD 2010, Abstract LB-4.
Taux Taux de RVSde RVSHow to use molecular techniques to optimize management of chronic heptitis C
p<0.0001
Prop
ortio
nofPatients
with
SVR
(%)
p<0.0001
![Page 109: Hépatite C Virus et marqueurs.pdf](https://reader033.fdocument.pub/reader033/viewer/2022061219/54b83fd14a79591e708b4619/html5/thumbnails/109.jpg)
Résumé
- Duration of triple therapy with pegylated IFN,ribavirin and a protease inhibitor will be tailoredto the virological response at week 4 or earlier
- Response-guided therapy is associated withhigh rates of SVR in genotype-1 treatment naïvepatients
- The ideal time points, frequency, and thefeasibility in real-life practice need to be furtherevaluated
Stratégie diagnostique & suivi virologique