Guia de Practica de Biologia Celular y Molecular Labo.

8/18/2019 Guia de Practica de Biologia Celular y Molecular Labo.

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UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MÉDICA

ESPECIALIDAD LABORATORIO CLINICO Y

ANATOMIA

PATOLOGICA

BIOLOGIA

CELULAR Y MOLECULAR

I CICLO


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EPTM LABORATORIOCLINICO

Y

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PRÁCTICA DE LABORATORIO

Nº 1 EL MÉTODO CIENTÍFICO

I. INTRODUCCIÓN

El método científco es un proceso destinado a explicar enómenos,establecer relaciones entre los hechos y enunciar leyes queexpliquen los enómenos ísicos del mundo y permitan obtener, conestos conocimientos, aplicaciones útiles al hombre. Los científcosemplean el método científco como una orma planifcada detrabaar. !us lo"ros son acumulati#os y han lle#ado a la $umanidad almomento cultural actual.

En las ciencias de la salud, los a#ances tecnoló"icos y la aplicabilidaddel método científco han permitido una abundante producción deartículos científcos %entre artículos de in#esti"ación y re#isionescientífcas& que son la e#idencia escrita y perenne de la "eneración deconocimiento en este campo.

''. OBJETIVO

(econocer los pasos del método científco y las partes de un artículo científco. )prender la aplicabilidad del método científco a las di#ersas ciencias,

identifcando los pasos del método científco en un artículo científcoseleccionado.

'''. MATERIALES

*omputadoras con acceso a internet

+royector multimedia

'. PROCEDIMIENTO

*on instrucciones del docente reconocer en un artículo científco loselementos del método científco- bser#ación, planteamiento de lahipótesis, experimentación y conclusiones.

. ACTIVIDAD EVALUADA

El alumno debe discernir los elementos del método científco en un

artículo de su elección.


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PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº 2

DETERMINACIÓN DE pH DE FLUIDOSBIOLÓGICOS Y CAPACIDAD TAMPÓN DEL

PLASMA SANGUÍNEO

I. INTRODUCCIÓN

El p$ es una medida de acide/ o alcalinidad de una disolución. Endisolución acuosa, la escala de p$ #aría, típicamente, de 0 a 1. !on3cidas las disoluciones con p$ menores que 4 y alcalinas las de p$superiores a 4.

Existen #arios métodos dierentes para medir el p$. 5no de estos esusando un tro/o de papel indicador del p$. *uando se introduce elpapel en una solución, cambiar3 de color. *ada color dierente indica un#alor de p$ dierente. Este método no es muy preciso y no es apropiadopara determinar #alores de p$ exactos.

''. OBJETIVOS

*onocer y entender el concepto de p$. *onocer, entender y aplicar la técnica de medición de p$ utili/ando tiras

indicadoras. (eali/ar mediciones de p$ utili/ando como muestra 6uidos

bioló"icos y que pueda determinar la capacidad tampón del plasmasan"uíneo.

'''. MATERIALES

A!"#$ L%&$'%($')$ rina !ali#a +lasma san"uíneo

7uantes

8ubos de ensayo de19x100mm

asos de precipitación

+ipetas %"raduadas y#olumétricas& 7radilla !olución de :a$ al 0.0;< =enoltaleína

'. PROCEDIMIENTOS

%. M*+),)-# +* pH

1. $omo"eni/ar el 6uido, reali/ando mo#imientos circulares delen#ase, sobre la mesa.

2. 'ntroducir las tiras indicadoras de p$ en la muestra bioló"ica.

http://es.wikipedia.org/wiki/Acidezhttp://es.wikipedia.org/wiki/Base_(qu%C3%ADmica)http://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cidohttp://es.wikipedia.org/wiki/Base_(qu%C3%ADmica)http://es.wikipedia.org/wiki/Base_(qu%C3%ADmica)http://es.wikipedia.org/wiki/Disoluci%C3%B3nhttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%81cidohttp://es.wikipedia.org/wiki/Base_(qu%C3%ADmica)http://es.wikipedia.org/wiki/Acidez


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9. 8omar nota de las mediciones de p$ de cada muestra.. (econocer si la muestra es un 3cido o base.


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b.C%p%,)+%+ (%"p-# +* p%"% /!"%#$

1. *on la ayuda del personal técnico de laboratorio obteneraproximadamente ; mL de plasma humano citratado.

2. >isponer en una "radilla tres tubos de ensayo de 19x100mm y se"uir las indicaciones de la 8abla 1.

T%&%10 olúmenes de plasma, a"ua destilada e indicador de p$. 8ubo 1 8ubo 2 8ubo 9

+lasma ??????? 1.; mL 9 mL)"ua destilada 9 mL 1.; mL ??????????

'ndicador de 2 "otas 2 "otas 2 "otas

El indicador de p$ recomendado es =enoltaleína.

9. *on la ayuda de una pipeta de 1mL a"re"ar "ota a "ota :a$ al0.0;< hasta que se #ea un cambio de coloración en los tubos.

. )notar el número de "otas por cada tubo, necesarios para producirel cambio de coloración.

VI. ACTIVIDAD EVALUADA

Elaborar un inorme con los resultados obtenidos, comparar loobtenido en clase con los #alores teóricos de p$.


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PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº

RECONOCIMIENTO DECARBOHIDRATOS Y LÍPIDOS APARTIR FUENTES BIOLÓGICAS

I. INTRODUCCIÓN

Las células se encuentran or"ani/adas por macromoléculas bioló"icascon características específcas que #an a ormar estructuras din3micasy compartimientos especiali/ados, así tenemos que los lípidos #anormar parte de las membranas celulares, las proteínas ensamblan alcitoesqueleto, los a/úcares orman parte de receptores dereconocimiento a componente del "licocalix y por último los 3cidosnucleicos poseen una unción altamente especiali/ada que es la dealber"ar la inormación "enética de toda célula.

Los carbohidratos son sustancias naturales compuestas de carbono,hidró"eno y oxí"eno. )nti"uamente se les conocía como @hidratos decarbonoA. Estos componentes se clasifcan de acuerdo a su "rupouncional, numero de carbonos y orientación. La unción de losa/úcares no consiste únicamente en producir o almacenar ener"ía. 8ambién se los utili/a como sostén mec3nico. La molécula or"3nica

m3s abundante en la 8ierra B la celulosa, orma parte de las paredesde las células #e"etales y est3 compuesta de unidades de "lucosa.Los carbohidratos orman parte de las proteínas de membranas,ori"inando "lucoproteínas, que inter#ienen en el reconocimiento celular.

Los lípidos son un "rupo hetero"éneo de sustancias or"3nicas, que secaracteri/an por ser insolubles en a"ua y solubles en sol#entesor"3nicos %éter, éter de petróleo, acetona, *$*l9, etc.&. !on esencialesen la estructura celular y constituyen una reser#a ener"ética en losanimales.

Existen muchas pruebas cuantitati#as y cualitati#as que puedenidentifcar la presencia de carbohidratos y lípidos, a continuación seensayaran al"unas de ellas.

''. OBJETIVOS

(econocer la presencia de carbohidratos y lípidos enelementos bioló"icos naturales yCo procesados.

'''. MATERIALES


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A!"#$ L%&$'%($')$ 5#as 5na +apa 5na Debida Li"ht 5na bebida

ener"i/ante

)ceite !olución de Lu"ol !udam ''' Fcido sulúrico

concentrado


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Dísturi $oas de bísturi 8ubos de 19x100 8ubos de 1Gx1;0 +ipetas de pl3stico orteros

'. PROCEDIMIENTOS

.1 D*(*'")#%,)-# G*#*'% +* G3,)+$0Los 7lúcidos o $idratos de carbono por acción deshidratante del 3cidosulúrico ori"inan compuestos deri#ados del urural, los que enpresencia del ala?natol presente en el (eacti#o de olish, ormar3n

un compuesto coloreado.

Preparación:

*on la ayuda del mortero obtener /umo de u#as*on un marcador colocar una inicial o dos iniciales a cada tubo deensayo de 19x100 mm #acío- ), 5, DL o DE.*olocar en los dierentes tubos marcados- 1 mL de a"ua destilada, 1 mLde /umo de u#as, 1 mL de la bebida Li"ht o 1mL de la bebidaener"i/ante.

)dicionar a cada tubo una %1& "ota del (eacti#o de olish y a"itar los tubos.*on el tubo inclinado y sobre la mesa de trabao, a"re"ar lentamente porla pared del tubo, sin a"itar, 1 ml. de 3cido sulúrico concentrado.anteniendo el tubo inclinado esperar 90 se"undos.*on cuidado colocar el tubo en posición #ertical sobrela "radilla. : )7'8)( L! 85D!.bser#ar si hay ormación de anillo morado.

.2D*(*'")#%,)-# +* A")+-#0

El yodo del Lu"ol es absorbido por el almidón y orma con él compuestoscompleos de color a/ul ne"ru/co %yoduro de almidón&.

Preparación:

1.*olocar 2 ml. de /umo de papa en un tubo de 1Gx1;0 mm y 2 mL de a"ua enotro.

2.)dicionar 9 "otas de Lu"ol y a"itar.9.bser#ar la ormación de color %a/ul ne"ro si es positi#o&

.9D*(*'")#%,)-# +* L4p)+$0 S$!&))+%+ +* S!+%" III


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El !udam ''' es un compuesto coloreado que es m3s soluble en los lípidosque en el alcohol, al solubili/arse en los lípidos produce una coloraciónrosada.


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Preparación:

1.*olocar 2 mL. de aceite comestible en un tubo de 1Gx1;0 mm.2.)dicionar 2 ml. de !udam '''9.bser#ar la coloración producida.

.La ormación de una coloración rosada indica que la prueba es positi#a.

. ACTIVIDAD EVALUADA(eali/ar el inorme con los resultados obtenidos dando lasconclusiones respecti#as, entre"ar el inorme al docente de pr3ctica.


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RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS Y DEMOSTRACIÓNE5PERIMENTAL DE LA ACTIVIDAD EN6IMÁTICA. E5TRACCIÓN

DE ACIDOS NUCLEICOS

I. INTRODUCCIÓN

Las proteínas son macromoléculas compuestas de amino3cidosunidos por enlaces peptídicos. Estos componentes desempeHan unpapel undamental para la #ida y osn las biomoléculas m3s #ers3tiles ydi#ersas. (eali/an unciones dierentes como- estructural, inmunoló"ica, en/im3tica, contr3ctil, homeost3tica, transducción deseHales y protectora. ) un "rupo de las proteínas las caracteri/a elparticipar en reacciones bioquímicas y se les conoce con el nombre deen/imas. Las en/imas son, en su mayoría, proteínas catali/adoras quepermiten acelerar reacciones bioquímicas dentro de la célula que por sisolas tardarían muchísimo tiempo en la transormación de lasmacromoléculas necesarias paralos procesos de catabolismo y metabolismo. !e estima que en elambiente celular se dan 10 000 reacciones en/im3ticas diarias quepermiten mantener la homeostasis celular.

El mecanismo de acción en/im3tica se basa en los si"uientes pasos- %1&unión de la en/ima con sus sustrato, %2& ormación del compleo en/imasustrato, %9& liberación de los productos de la reacción en/im3tica.

5na peculiaridad de las reacciones en/im3ticas radica en que lasen/imas no se modifcan, es decir su cantidad es constate al inicio y fnalde la reacción.

)l ser proteínas, las en/imas también est3n suetas a los enómenos dedesnaturali/ación por lo que los cambios bruscos de p$ y detemperatura pueden aectar la acti#idad en/im3tica.

8odas las células contienen )>: sin embar"o esta molécula tanimportante, en eucariotas, se encuentra prote"ida por membranas%nuclear y citoplasm3tica&. Es así, que al intentar extraer )>:necesitamos romper estas barreras utili/ando medios apropiados, comodeter"entes, en/imas, homo"eni/ación o sonicación.

''. OBJETIVOS


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(econocer la presencia de proteínas a partir de uentesbioló"icas si"uiendo los protocolos establecidos

*omprobar la acti#idad en/im3tica de uentes bioló"icas Extraer 3cidos nucleicos a partir de una muestra bioló"ica


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'''. MATERIALES

A!"#$ L%&$'%($')$ !ali#a %tomado en

clase& =resas 5n hue#o

orteros con pilón

8ubos de prueba de 1G x1;0 7radilla +ipetas +asteur DeaIer de ;0 ml +laca de a"lutinación %+laca

exca#ada& 7asa Embudo Da"ueta ondadientes

$idróxido de sodio al 0< !ulato de cobre al 1< )lmidón 1< Lu"ol Etanol helado !olución de lisis %E>8) 0.1

'. PROCEDIMIENTOS

.1 D*(*'")#%,)-# +* p'$(*4#%0 P'!*&% +* B)!'*(Los compuestos que contienen dos o m3s enlaces peptídicos orman uncompleo con las sales de cobre en un medio uertemente alcalino,dando un color púrpura o #ioleta.

+reparación-1.arcar dos tubos de 19 x 100 mm con las letras *$ y ), colocar 2 mL

de la solución de solución *lara de hue#o al 10< o 2 mL de a"uadestilada en cada tubo.

2.)"re"ar 2 ml. de la solución de $idróxido de sodio al 0< a cada tubo y me/clar.9.)Hadir 2 "otas de !ulato de cobre al 1


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9. >espués de 90 se"undos a"re"ar una "ota de lu"ol y e#idenciar sihay ormación de coloración a/ul.


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1

.9 E:('%,,)-# +* 9,)+$ #!,*),$1. *on la ayuda de un mortero y pilón, triturar dos resas "randes

hasta obtener una pasta.

2. En el mismo mortero, a"re"ar ; ml de solución de lisis. Esperar ; minutos.9. =iltrar la me/cla obtenida a tra#és de "asa y con la ayuda de unembudo, hacia dos tubos de ensayo.

. ) cada tubo de ensayo a"re"arle Etanol río lentamente y por la pared del tubo.;. bser#ar la aparición de tres ases.G. *on la ayuda de una ba"ueta retirar el )>: extraído.

. ACTIVIDAD EVALUADAElaborar un inorme donde se undamenta los resultados obtenidos y

presentarlo al docente.

'. ANE5OS

E ; S < E = S > E ; P

F)?!'% 1. Esquema de una reacciónen/im3tica.


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PRÁCTICA DE

LABORATORIO N@

MICROSCOPIA

I. INTRODUCCIÓN

En un principio el proceso de la Diolo"ía ue lento debido a lacompleidad del ser #i#iente y lo limitado de los a#ancestecnoló"icos. Es en el si"lo K'' con el aporte de

).): LEEE:$M %1G49?1429&, quien usó por primera #e/ elmicroscopio simple para el estudio de lo que llamó @anim3culusA,es que se obtiene un a#ance decisi#o en este campo. *on elpereccionamiento del microscopio compuesto y la aplicación delmicroscopio electrónico en nuestros días, es posible la obser#aciónde la ultraestructura para la compresión de los enómenosbioló"icos.

''. OBJETIVOS

*onocer la constitución y uncionamiento del microscopio compuesto.

anear el microscopio y entender la importancia de su uso en la

ormación de su carrera. (eali/ar preparaciones para obser#arlas a tra#és del microscopio. >ierenciar las partes ópticas y mec3nicas del microscopio óptico.

'''. MATERIALES

A!"#$ L%&$'%($')$ (ecorte de periódico $ebras de lana

de dos coloresencendidosdistintos

8iera *olores

icroscopio compuesto L3minas portaobetos

L3minas cubreobetos%laminillas& +apel lente )ceite de inmersión %aceite de

cedro&

'. PROCEDIMIENTO

9.1 R*,$#$,)")*#($ +* "),'$,$p)$


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1

a) Partes Mecánica b) Parte óptica

- +ie o base- Dra/o- 8ubo óptico- mono

o binoculares

- culares %10K&- beti#os %K, 10K,

0K, 100K&- *ondensador


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- (e#ól#er- 8ornillo

macrométrico- 8ornillo

micrométrico.

- +latina- +in/as.

- >iara"ma- EspeoC L3mpara

9.2 P'*p%'%,)-# +* 9")#%a. *on la ayuda de la tiera corte una letra @eA del recorte periodístico.b. 8ome una l3mina portaobeto por sólo por los bordes y límpiela bien con

un peda/o de papel lente.c. *on un "otero #ierta una "ota de a"ua en el centro de la l3mina, lue"o

coloque la letra @eA en la "ota de a"ua teniendo presente que quede

en posición de lectura, pon"a la laminilla sobre la muestra. $a"a lomismo con una hebra de lana.

d. ) continuación las preparaciones ser3n utili/adas para la#isuali/ación a tra#és del microscopio.

9.9 E#$!* !$ +* "),'$,$p)$

1. *oloque el microscopio sobre la mesa, de tal manera que el o los

lentes oculares queden rente a usted. Limpie los lentes obeti#os,lente del condensador y oco con papel lente.

2. *on mucho cuidado conecte el cable en el tomacorriente de surespecti#a mesa, encienda el interruptor de la l3mpara y "ire laperilla de intensidad en tal sentido que #ea que la l3mpara de lu/ seencienda.

9. *on la ayuda del re#ól#er coloque el lente de menor aumento enposición rontal al lente del condensador ubicado en el centro de laplatina.

. >escienda la platina "irando el tornillo macrométrico.;. bser#e a tra#és del ocular y obser#e que el campo #isual este

iluminado y uniorme, antes de colocar la muestra, abra y cierre eldiara"ma, cerciórese que la platina esté descendida.

G. *oloque la l3mina pre#iamente preparada sobre la platina,ase"ur3ndola con las pin/as y centre con las mismas de tal maneraque la muestra quede iluminada.

4. bser#ando a tra#és del ocular enoque la muestra con la ayuda deltornillo macrométrico. Este tornillo permite el despla/amiento de la

platina para la obser#ación de la muestra en el campo #isual.J. +roceda a afnar la ocali/ación de la muestra con ayuda del tornillomicrométrico


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N. +ara amplifcar la ima"en, "ire el re#ól#er para ubicar el si"uienteobeti#o en posición, ten"a presente que los aumentos son"raduales. El cambio de obeti#o o de preparación exi"e un nue#ocontrol del diara"ma.


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9. A!"*#($ +* "),'$,$p)$+ara saber cu3nto de aumento posee un microscopio, basta multiplicarel aumento dado por el ocular, por el aumento dado por el obeti#o.

Eemplo- !i el ocular es de 10KO el obeti#o 9K,entonces tendremos- 10 x 9P 90 aumentos

9.; C!)+%+$ !* * +*&*# (*#*' ,$# * "),'$,$p)$.a&anten"a el microscopio limpio y en el lu"ar adecuado.b&8ransporte el microscopio, con la mano derecha a"arrando el bra/o y la

mano i/quierda debao de la base, nunca por los tornillos macrométricosni por la platina.

c& +ara ocali/ar la preparación, mue#a la platina siempre de abao hacia arriba.d&:o "uarde reacti#os #ol3tiles en el mismo lu"ar donde se "uarda el microscopio.e&:o desmonte los lentes oculares ni los obeti#os.& +ara limpiar los oculares y obeti#os use siempre el papel lente, no use

paHuelos ni otro tipo de papel %hi"iénico o toalla&.


Elabore un inorme donde estén los dibuos de las muestras del recorte deperiódico, lana y artrópodo a 0K 100K y 00K e incluya la descripción

reali/ada en el ítem 1.


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RECONOCIMIENTO DE LAS CÉLULAS PROCARIOTAS Y

EUCARIOTAS

I. INTRODUCCIÓN

En 1N9N, en base a obser#aciones reali/adas por los científcos alemanes!chleiden y !chQan, se plasmó la teoría celular, la cual produo uncambio radical en las *iencias Dioló"icas. Esta teoría postula que los@cuerpos de todos los animales y #e"etales est3n ormados de célulasy que solo pueden aparecer nue#as células por di#isión de las célulaspre?existentesA. >e ahí que los or"anismos por muy sencillos que seanest3n constituidos por unidades #i#as denominadas células. Existendos "randes "rupos de células la procariota y la eucariota.

La principal característica de la célula procariota es que carece denúcleo celular. Las bacterias, los or"anismos procariotas m3srepresentati#os, comprenden por una parte, especies de importanciamédica puesto que producen una serie de inecciones y padecimientosen el hombre y en los animales pero, por otra parte, una "ranmayoría representa benefcios para la a"ricultura, la industria y la salud

humana y animal.

La célula eucariota es m3s complea que la célula procariota y contiene, adierencia de esta última, núcleo celular. Los or"anismos m3s simples%proto/oarios& est3n constituidos de una sola célula eucariota mientrasque los m3s compleos o multicelulares est3n ormados por un "rannúmero de células eucariota que se hallan or"ani/adas en teidos,ór"anos y sistemas.

!ea que se trate de una célula procariota o eucariota estas, aobser#ación directa del microscopio, son diíciles de obser#ar puestoque estructuras que dean pasar la lu/ por lo que se requiere en empleode colorantes que permitan su apreciación.

''. OBJETIVOS

(eali/ar tinciones para la obser#ación de células de procariotas y eucariotas

>ierenciar a la célula procariota y eucariota

bser#ar y caracteri/ar a las células eucariotas de tipo ún"ico, animal y#e"etal


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'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ A!"#$ icroscopios +apel lente Laminas con muestras

5na cebolla *hicha de

ora


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de hon"os echero de alcohol an"o de bisturí $oa de bisturí +alitos mondadientes Lamina portaobetos Lamina cubreobeto >epósito para eliminar

l3minas y laminillas. )/ul de metileno )ceite de inmersión *ristal ioleta Lu"ol )lcohol - acetona %1-1& !aranina

'. PROCEDIMIENTO

O&*'7%,)-# +* ,!% p'$,%')$(%Mediante la Coloración de Gram

1. *olocar una "ota de solución fsioló"ica sobre una l3mina. *on elmondadientes obtener una muestra de sarro dental y esparcir enespiral en la "ota de solución fsioló"ica.

2. !ecar al mechero y una #e/ seco cubrir con cristal #ioleta por 1

minuto. Enua"ar con a"ua de caHo, colocando la l3mina inclinada.9. *ubrir la muestra con lu"ol por 1 min. Enua"ar con a"ua de

caHo, colocando la l3mina inclinada.. *ubrir con alcohol?acetona esperar 90 se"undos. Enua"ar con a"ua de

caHo.;. *ubrir la muestra con saranina por 1 min. Enua"ar con a"ua de caHo.G. !ecar la muestra preparada por acción del calor o al medio ambiente.4. bser#ar en el microscopio, comen/ando con el obeti#o de K

hasta el lente de 100K. 5na #e/ enocado con el obeti#o de 100K

utili/ar aceite de inmersiónO&*'7%,)-# +* ,!% *!,%')$(%

Célula animal (Epitelio bucal)

1. *on un hisopo limpio extrai"a sua#emente la mucosidad de la ca#idad bucal.2. >eposite la mucosidad extraída en el centro de una l3mina

portaobetos y extiéndalo con un rotis.9. )"re"ue dos "otas de a/ul de metileno y espere ; minutos.. Elimine el exceso de colorante utili/ando a"ua destilada y

coloque una laminilla cubreobetos.


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;. bser#e con el obeti#o de K, 10K, 0K y 100K aHadiendopre#iamente aceite de inmersión.


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G. )uste el diara"ma para incrementar el contraste.4. bser#ar y esquemati/ar. >efnir estructuras #isibles y las

características #isibles de una célula animal.

Célula veetal %*ataflo de cebolla- Allium cepa&

1. !eparar una de las capas del bulbo de cebolla. *on ayuda de unapin/a desprenda la membrana que cubre la parte interna de lacebolla %cataflo&.

2. Extender la membrana sobre una l3mina portaobetos y a"re"aruna "ota de lu"ol. *uidadosamente colocar una laminillacubreobeto.

9. bser#e con el obeti#o de K, 10K y 0K.. )uste el diara"ma para incrementar el contraste.

J. bser#ar y esquemati/ar. >efnir estructuras #isibles y lascaracterísticas #isibles de una célula #e"etal.

Célula f!nica (Asperillus" Penicillum # $acc%arom#ces cereviseae )

Enocar las l3minas con muestras preparadas hon"os y obser#ar conlente de 10K, 0K y 100K y aceite de inmersión.

$acer una preparación con la chicha de ora. *olocar una "ota dechicha de ora en una l3mina y cubrir con una laminilla. bser#ar con ellente de 10K y 0K.


(eali/ar los esquemas de cada uno de las muestras y con lama"nifcación con las cuales ueron obser#adas indicando- lasmuestras, coloración empleada %si corresponde& y las principalesestructuras #isuali/adas en cada tipo celular.


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OSMOSIS

I. INTRODUCCIÓN

El a"ua es capa/ de 6uir a tra#és de la membrana plasm3tica por unproceso que se denomina ósmosis. La ósmosis es defnida como elpaso de a"ua a tra#és de una membrana semipermeable de unare"ión con menor concentración de soluto a una de mayorconcentración de soluto. Este proceso puede ser e#idenciado tanto encélulas animales como #e"etales utili/ando el microscopio óptico ysoluciones hipotónicas %con menor concentración de soluto encomparación con la célula&, hipertónicas %con mayor concentración de

soluto en comparación con la célula& e isotónicas %i"ual concentración desoluto en comparación con la célula&.

) pesar de que a"ua es le#emente permeable a tra#és de lamembrana celular, muchas células son m3s permeables al a"ua de loque puede explicarse con la diusión simple a tra#és de la bicapalipídica. Esto se explica con la existencia de unas proteínastransmembranales denominadas acuaporinas, las que permiten eldespla/amiento pasi#o del a"ua de un lado de la membrana

plasm3tica al otro. )sí, las acuaporinas establecen unos orifcios en lamembrana plasm3ticas a tra#és de los cuales el a"ua in"resa o sale de lacélula. Las acuaporinas son muy prominentes en células como las deltúbulo renal o las raíces #e"etales, donde el paso del a"ua tiene unaunción crucial en las acti#idades fsioló"icas del teido.

''. OBJETIVOS

bser#ar los enómenos de ósmosis y su eecto para la célula animal y#e"etal

'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ A!"#$


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icroscopio compuesto +apel lente +ipetas +asteur L3minas portaobeto Laminillas cubreobeto an"o de bisturí $oa de bisturí +in/a de metal con punta

roma Lancetas de punción

Elodea


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)lcohol yodado !oluciones de :a*l 0.0;


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Y

'. ANE5OS

% SOL. ISOTÓNICA & SOL. HIPOTÓNICA ,

SOL. HIPERTÓNICA F)?!'% 2. Eectos del paso de

a"ua en un "lóbulo roo.


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OBSERVACIÓN DE ORGANELAS

CELULARES

I. INTRODUCCIÓNLos constituyentes subcelulares son compartimientos independientesque se encuentran en relación con el citosol, medio interno que lespro#ee de los sustratos necesarios que se acumulan selecti#amentepara transormarse en productos que ser3n utili/ados por la célulaeucariótica en sus acti#idades celulares.

Los lisosomas son or"anelas cuya unción es la di"estión celularOcontienen alrededor de ;0 en/imas hidrolíticas capaces de di"erirproteínas lípidos, carbohidratos y nucleótidos. 5na de sus característicases el polimorfsmoO los primarios tienen un di3metro aproximado de 0,Rm, unimembranososO los secundarios resultan de la asociación de losprimarios con las #acuolas conteniendo el material a"ocitado,aumentando sus dimensionesO los autolisosomas constituyen una casoexcepcional, ya que di"ieren partes celulares.

Las mitocondrias, son or"anelos "ranulares o flamentosas, ormadas pordos membranas y dos compartimientos, que constituyen en/imas ycoen/imas que trabaan de manera inte"rada para producir ener"ía. !onconsideradas como #erdaderos sistemas traductores de ener"ía, en lascuales in"resa acetil?coen/ima ) pro#eniente de la de"radación denutrientes, requiriendo adem3s como materia prima )>+, osato yoxí"enoO produciendo la salida de )8+, $2 y *2.

Los cloroplastos, son or"anelas encontradas primordialmente en las hoasde los #e"etales, en estas, se reali/an uno de los procesos m3simportantes para la #ida de nuestro planeta- La otosíntesis. Esteproceso es lle#ado inicialmente en la membrana de los tilacoidesmediante la participación de compleos proteicos denominadosotosistemas.

''. OBJETIVOS

(econocer a las mitocondrias en el epitelio bucal (econocer a los lisosomas en or"anismos unicelulares

(econocer a los cloroplastos en muestras #e"etales.


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2

'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ A!"#$ icroscopios +apel lente

an"o de bisturí

Elodea$oas de 7eraniouestras de )"ua


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2

$oa de bisturí +in/as de metal con punta orma Laminas portaobeto Laminillas cubreobeto +ipeta +asteur +laca +etri !olución erde Sanus 1C10,000 (oo :eutro =rascos con Lu"ol =rasco con !uero =isioló"ico )ceite de inmersión

'. PROCEDIMIENTOS

O&*'7%,)-# +* ")($,$#+')% *# *p)(*)$ &!,%01. *on una l3mina limpia y mediante un raspado sua#e obteneruna muestra de la mucosa bucal,

2. (eali/ar un rotis extendiendo la muestra sobre otra l3mina,9. >ear secar la l3mina con la muestra al medio ambiente,. *ubrir la muestra con erde Sanus durante ; minutos,;. Eliminar el exceso de colorante y dear secar al medio ambiente,G. bser#ar al microscopio con obeti#os de 10x y 0x.

O&*'7%,)-# +* )$$"% *# p'$($8$%')$01. (eali/ar una preparación con el a"ua estancada, colocar una

"ota de a"ua estancada que conten"a sedimento sobre unal3mina portaobetos y cubrir con una laminilla obser#ar hasta elobeti#o de 0K.

2. 5na #e/ confrmada la presencia de proto/oarios en el a"uaestancada, traspasar con una pipeta 10 mL de a"ua estancadade la /ona inerior del recipiente hacia una placa +etri, a"re"ar ;"otas de la solución roo neutro por ; minutos.

9. +on"a una "ota de la incubación en el portaobetos,

coloque la laminilla y obser#e a 10K y 0K. Localice en el citoplasma "r3nulos teHidos de roo.

O&*'7%,)-# +* ,$'$p%($ *# /$K% E$+*% G*'%#)$1. *oa una hoa de Elodea y colóquela en un portaobeto, en la

que pre#iamente se ha colocado una "ota de a"ua.2. (ealice el mismo procedimiento con un flamento de "eranio.9. *ubrir cada preparado con una laminilla.. Examine cada uno de los preparados.

;. 'dentifque los cloroplastos en cada una de las muestras.


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. ACTIVIDADES EVALUADAS

(eali/ar los esquemas correspondientes y describir al detalle en losaumentos indicados. Explicar el undamento de las coloraciones

reali/adas.


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Nº DEMOSTRACIÓN DE LA

FERMENTACIÓN

I. INTRODUCCIÓN

La respiración celular es el proceso mediante el cual se oxidanmoléculas ener"éticas %"lucosa principalmente&, empleando al oxí"enocomo aceptor fnal de electrones, y obteniendo "ran cantidad deener"ía para la reali/ación de las unciones celulares b3sicas. +or elcontrario, la ermentación es un proceso anaeróbico que implica laruptura de alimentos por un proceso de de"radación química que no

requiere oxí"eno. Los alimentos no son de"radados completamentehasta *2 y $2 %como ocurre en la respiración&, sino hasta compuestosintermedios tales como 3cido l3ctico %ermentación l3ctica& o alcohol%ermentación alcohólica&. Esta ruptura incompleta de los alimentossi"nifca que menos ener"ía es disponible durante la ermentación queel liberado durante la respiración. )mbos procesos pueden lle#arse ensimult3neo en las células, donde adem3s, los primeros pasos en laruptura de la "lucosa en la respiración, son anaeróbicos.

*iertas bacterias y hon"os deri#an todo o parte de su ener"ía a partir de

la ermentación y los productos fnales son recuentemente el alcoholy *2, el proceso en este caso es denominado ermentaciónalcohólica. Las le#aduras y bacterias, las cuales conducen a laermentación son capaces de emplear sus sistemas en/im3ticos paraliberar ener"ía anaeróbicamente a partir de carbohidratos,particularmente almidón y a/úcar.

''. OBJETIVOS

E#idenciar la acti#idad de ermentación producida por or"anismos ún"icos.

'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ A!"#$ 8ubos de ensayo %1G x 1;0 mm&+ipetas +asteur!oluciones de 7lucosa 2


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IV. PROCEDIMIENTOSF*'"*#(%,)-# *(%#-),%

? En tubos de ensayo colocar los reacti#os se"ún lo indicado en la tabla 2.


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T%&% 20 olúmenes de cada reacti#o a ser colocados en cada tubo de ensayo.

T!&$1

T!&$ 2 T!&$ T!&$

T!&$ T!&$

A?!%

+*()%+%

??? J mL ??? ??? ??? ???

G!,$%2

J mL ??? J mL ??? ??? ???

F'!,($%2

??? ??? ??? J mL ??? ???

S%,%'$%2

??? ??? ??? ??? J mL ???

A")+-#2

??? ??? ??? ??? ??? J mL

T*"p*'%(!'%

94 U* 94 U* 94 U* 94 U* 94 U* 94 U*

? +re#iamente se tienen que preparar una suspensión al 1;< de lale#adura $acc%arom#ces cerevisae en a"ua destilada.

? )"re"ar dicha suspensión a los tubos 2, 9, , ; y G, cuidando que noqueden burbuas de aire, para conse"uir un ambiente de anaerobiosis.*olocar un "lobo en la boca de los tubos para que el sistema quedecerrado herméticamente, sellar con cinta sIotch.

? 'ncubar los tubos a la temperatura indicada por 1 h.? )notar la ormación de *2 para cada tubo %La ermentación se

e#idenciar3 por la presencia de burbuas en el tubo y el "lobohinchando&.

? *on cuidado retira los "lobos de cada tubo y olerlos. (eportar en quetubo se e#idencia olor a etanol.


bser#ar, "rafcar, comparar y discutir los resultados de losexperimentos planteados dependiendo de la uente carbonadautili/ada.

'. ANE5OS


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F)?!'% 9- >e"radación de la "lucosa


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PRÁCTICA DE LABORATORIO Nº1

MOVIMIENTO CELULAR0 POR FLAGELOS CILIOS Y PSEUDÓPODOS

I. INTRODUCCIÓN

Los proto/oarios son or"anismos eucariotas unicelulares que, al i"ual quelas bacterias, nos ayudan y nos perudican. Ellos son benefciosos parala cadena alimentaria, d3ndole ertilidad al suelo y consumiendo "randescantidades de ftoplancton. !in embar"o, al"unos proto/oos nos causanmolestias- Entamoeba %istol#tica, pro#oca disenteríaO *ric%omonasvainalis, #a"initis y *r#panosoma brucei, la enermedad del sueHo.

Estos or"anismos tienen, en su mayoría, un despla/amientodependiente de estructuras din3micas especiali/adas compuestos pordi#ersos tipos proteínas motiles.

!e pueden dierenciar tres "randes "rupos de proto/oarios- aquellosque se despla/an mediante 6a"elos que pertenecen a la claseasti"ophora, los que poseen cilios *ilophora y aquellos que sedespla/an por proyección de su citoplasma ormando los conocidos

pseudópodos pertenecientes a la clase !arcodina.

''. OBJETIVOS

erifcar y comprender el mo#imiento de la célula de #ida libre. bser#ar y comprobar la existencia de estructuras para el mo#imiento

celular.

'''. MATERIALES

Laboratorio )lumnos icroscopios +lacas +etri L3minas portaobetos Laminillas cubreobetos 7otero o +ipeta de 1 ml. Lu"ol al < erde de metilo

*ulti#o de proto/oarios%a"ua estancada&

'. PROCEDIMIENTOS


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M$7)")*#($ %"*&$)+*$ p$' *!+-p$+$0 Amoeba proteus C%*S%',$+)#%

1. !obre una l3mina portaobetos, con un "otero coloque una "otadel culti#o de proto/oarios que conten"a )moeba, cubrirlo lue"o conuna laminilla cubreobetos.

2. >ibuar las obser#aciones reali/adas a 10x, 20x y 0x.


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M$7)")*#($ %?*%' p$' %?*$0 Euglena viridis C%* M%()?$p/$'%1. !obre una l3mina portaobetos, colocar una "ota de culti#o que

conten"a Eu"lena y cubrir con una laminilla cubreobetos.

2. )Hadir después de haber obser#ado una "ota de #erde de metilo o Lu"ol.9. >ibuar las obser#aciones reali/adas a 10x, 20x y 0x.

M$7)")*#($ ,))%' p$' ,))$0 Paramecium caudatum C%* C))$p/$'%1.!obre una l3mina portaobetos, colocar una "ota de culti#o que conten"a

+aramecium, y cubrirlo con una laminilla cubreobeto.2.)Hadir después de haber obser#ado la muestra anterior, una "ota de

#erde de metilo o Lu"ol.9.>ibuar las obser#aciones reali/adas 10x, 20x y 0x.


(eali/ar los esquemas correspondiente e indicar las proteínas que est3nin#olucrados en el mo#imiento de los or"anismos obser#ados.

. ANE5OS

F)?!'% - Estructuras presentes en Eulena


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F)?!'% - Estructuras presentes en Paramecium

F)?!'% - Estructuras presentes en Amoeba proteus


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Nº11 FORMAS DE NQCLEO

I. INTRODUCCIÓN

La hematopoyesis es el proceso de ormación, desarrollo y maduraciónde los elementos ormes de la san"re %eritrocitos, leucocitos yplaquetas& a partir de un precursor celular común e indierenciadoconocido como célula madre hematopoyética multipotente.

En la médula ósea normal, se encuentran todas las células de lasan"re, maduras e inmaduras, de las dos estirpes celulares- linoide ymieloide. +or otra parte, en la san"re periérica en condicionesnormales se hallan casi siempre células maduras, en tanto que en

situaciones particulares %fsioló"icas o patoló"icas& es posibleobser#ar células inmaduras, como en la eritroblastosis etal, oneopl3sicas, como en las leucemias. La médula ósea en el adultoproduce alrededor de G billones de célulasCI"Cdía- 2.; de "lóbulosroos, 2.; de plaquetas y 1 de leucocitos.

La Vestirpe mieloideV, comprende a los eritrocitos, plaquetas, leucocitos"ranulares %neutróflos, basóflos y eosinóflos& y monocitos?macróa"os. El desarrollo de tales elementos se conoce como")*$p$*) y parte de una célula madre precursora común. Encambio, la Vestirpe linoideV, comprende únicamente a los linocitos,que pueden ser de dos tipos- linocitos D y linocitos 8 %hay un tercertipo, los linocitos :M&. El desarrollo de estas células se denomina)#$p$*). >espués de la dierenciación, estas células entran enla san"re para desempeHar di#ersas unciones, siendo transportadasa todo el cuerpo por el plasma, que est3 ormado por a"ua y#arios elementos químicos %proteínas, hormonas, minerales, #itaminasy anticuerpos&.

''. OBJETIVOS

(econocer a los dierentes elementos ormes de la san"re.

*onocer las unciones de los elementos ormes de la san"re.

'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ icroscopios L3minas portaobetos

limpias y desen"rasadas Laminillas cubreobetos +apel lente

http://es.wikipedia.org/wiki/Elementos_figuradoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Elementos_figuradoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Sangrehttp://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Leucocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Plaquetahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lulahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_madrehttp://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Plaquetashttp://es.wikipedia.org/wiki/Neutr%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Bas%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Eosin%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Monocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Macr%C3%B3fagohttp://es.wikipedia.org/wiki/Linfocitoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Elementos_figuradoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Elementos_figuradoshttp://es.wikipedia.org/wiki/Sangrehttp://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Leucocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Plaquetahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lulahttp://es.wikipedia.org/wiki/C%C3%A9lula_madrehttp://es.wikipedia.org/wiki/Eritrocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Plaquetashttp://es.wikipedia.org/wiki/Neutr%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Bas%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Eosin%C3%B3filohttp://es.wikipedia.org/wiki/Monocitohttp://es.wikipedia.org/wiki/Macr%C3%B3fagohttp://es.wikipedia.org/wiki/Linfocitos


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)l"odón Lancetas )lcohol isopropílico )ceite de inmersión


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*olorantes ri"ht o 7iemsa )lcohol yodado )"ua destilada

'. PROCEDIMIENTOS

O&*'7%,)-# +* $'"% +* #3,*$

1. >esinectar el dedo anular con alcohol yodado y al"odón y conuna lanceta estéril pun/ar el dedo y dear caer una "ota desan"re sobre un extremo de la l3mina portaobetos.

2. *on ayuda de otra l3mina portaobeto ormar un 3n"ulo de ;U yreali/ar un rotis, tratando de esparcir homo"éneamente la "otade san"re sobre la superfcie de la l3mina.

9. >ear secar la preparación y proceder lue"o a la coloración con ri"ht o7iemsa.

. *ubrir el rotis con colorante ri"ht por 1 minuto.;. !in eliminar el colorante a"re"ar a"ua destilada y dear actuar por 10

minutos.G. Eliminar lue"o el colorante y la#ar sua#emente con a"ua de caHo.4. >ear secar la l3mina coloreada.J. 5na #e/ que la l3mina coloreada a secado, obser#ar al microscopio

con el obeti#o de 100 K y aceite de inmersión.


(eali/ar un inorme con los esquemas de los elementos san"uíneosobser#ados indicando su unción y características.

'. ANE5OS

F)?!'% . Elementos ormes de la san"re


45/53


Y

9


Nº12 EL CÓDIGO GENÉTICO

I. INTRODUCCIÓN

El )>: contenido en el núcleo celular almacena toda la inormaciónhereditaria bao la orma de "enes. +ara que los "enes se expresendeben ser copiados bao otra orma de 3cido nucleico, el )(:mensaero, que sea capa/ de lle#ar la inormación al citoplasma yconectarse con los ribosomas, donde se eectuara su traducción en larespecti#a proteína. !on estas proteínas las que a su #e/ #an adeterminar las características moroló"icas y fsioló"icas que unor"anismo uni o pluricelular presenta.

8eniendo en cuenta que el )>: posee bases nitro"enadas distintas yque por lo menos existen 20 amino3cidos dierentes capaces de li"arsepara ormar las proteínas, es e#idente que la traducción est3 re"ida poruna cla#e. +or lo tanto, la existencia de caracteres hereditarios no essino la expresión de ciertas re"iones del )>: re"ido por el códi"o"enético, en dicho proceso consideramos los si"uientes aspectosundamentales- a& el )(:m %)(: mensaero& tiene los codones o

tripletes de bases, por eemplo 555O b& el )(:t %)(: de transerencia&unido a un amino3cido específco lle#a un anticodón que debe sercomplementario al codón, eemplo )))O c& el )(:r %)(: ribosomal& quereconoce el extremo del )(:m, por donde se debe iniciar la síntesisde proteínasO d& en "eneral la última letra del codón no es muyimportante para el reconocimiento del anticodónO e& una en/imaespecífca une el amino3cido a su respecti#o )(:t. El )(:t con suamino3cido, reconoce el codón del )(:m. +or eemplo el )(:t, quelle#a el amino3cido =enilalanina, tiene el anticodón ))) y reconocer3 el

codón 555 del )(:mO & los amino3cidos se li"an uno a uno a medidaque aparecen los codones ormando una cadena de proteínasO "& elproceso de síntesis proteica se reali/a en el citoplasma, con laparticipación de los ribosomas y di#ersos elementos esencialesO h& elcrecimiento de la cadena continúa hasta que apare/can codones queindiquen terminación.

''. OBJETIVOS

'ndicar los elementos que inter#ienen en la síntesis proteica >escribir el mecanismo de la síntesis de proteínas


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Y

9

Explicar cómo se puede interrumpir la síntesis proteica. Explicar el códi"o "enético y como la inormación resulta en una

cadena de naturale/a 3cida, b3sica o neutra, y si se trata de unaproteína hidroóbica o hidroflica, etc.


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9

'''. MATERIALES

:ue#e naipes de cada una de las bases nitro"enadas ), 7, 5, * %9G naipes en

total&. 5na tabla de codones con los amino3cidos respecti#os, que ser3utili/ada por el cuarto u"ador %8abla 9&.

5na baraa de 20 naipes que conten"an- 1 naipe marcado con lapalabra Wuimotripsina, 1 naipe marcado con la palabra 8ripsina, 1naipe marcado con la palabra Exopeptidasa, 1 naipe marcadocon la palabra Dromuro de cianó"eno, 1 naipe marcado con lapalabra Dromosuccinimida y 1; naipes en blanco.

'. PROCEDIMIENTOS

1. amos a ormar cadenas de proteínas uniendo amino3cidos se"únlos codones que apare/can. El ue"o se inicia de la si"uientemanera-

2. *ada "rupo de ; alumnos nominar3 a un compaHero en calidadde Sue/ y ser3 el u"ador número 1- los otros ser3n los u"adores2,9, y ;. Los u"adores 2, 9 y recibir3n 12 naipes al a/ar %de labaraa de 9G naipes me/clados al a/ar&.

9. El u"ador no. 2 arroar3 una carta, el u"ador no. 9 arroar3 unacarta, el u"ador no. arroar3 una carta. >e esta orma seobtendr3 un triplete que corresponde al codón. +or eemplo, )57%codón de iniciación&.

. El u"ador :o. 1 anotar3 en una hoa de papel el número de u"ada, el codón, anticodón y el amino3cido.

;. El quinto u"ador sacar3 al a/ar un naipe de su baraa %20 cartas en

total&. !i el naipe es blanco, el ue"o continua, si corresponde alos compuestos mencionados anteriormente, cumplir3 lo queindica el naipe de acuerdo al 8abla

G. !i la cadena ha sido cortada, en la si"uiente u"ada deber3iniciarse otra cadena. !e continuar3 con la numeración de la u"adaque prosi"ue.

4. !e deben reali/ar un total de 100 u"adas, el ue"o ser3 "anado

por el "rupo que puede ormar la cadena m3s lar"a de proteína.


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9

J. *ada "rupo a su #e/ har3 el an3lisis de la cadena m3s lar"a quelo"ro ormar. %8abla ;&.


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T%&% 0 *ódi"o "enético5 * ) 7

5

=enilalanina=enilalanin

a Leucina

!erina!erin

a

8irosina 8irosina!8+

!8+

*isteí na*isteí

na

5*)

7

*

LeucinaLeucina

+rolina+rolina

$istidina$istidina7lutamina7lutamina

)r"inina)r"inina

5*)7

)

'soleucina'soleucina

8reonina 8reonina

)spara"ina)spara"ina Lisina

!erina!erina)r"inina

5*)7

7

alin

aalinaalina

)lanin

a)lanina)lanina

)c.

)sp3rtico)c.)sp3rtico)c.7lut3mico

7licin

a7licina7licina

5

*)7

T%&% 0 )cción de di#ersos a"entes sobre la cadena proteica en crecimiento

AGENTE CARACTERÍSTICA ACCION EN EL

8ripsina

En/ima proteolítica queataca uniones- )r"?K yLys?K %siendo K cualquieramino3cido menosprolina&. :o atacaamino3cidos terminales yse requiere que la cadena

!e corta la cadena

Wuimotripsina

En/ima proteolítica queataca uniones 8rp?K, 8yr?Ky +he?K %siendo K

cualquier amino3cido,menos prolina&. :o atacaamino3cidos terminales yse requiere que la cadena

!e corta la cadena

ExopeptidasaEn/ima que ataca al

amino3cido terminal y losepara de la proteína.

!e descuenta unamino3cido ycontinúa el ue o.

Dromuro de odifca la metionina !e corta la cadena

Dromo!uccinimi odifca el triptóano !e corta la cadena


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T%&% 0 )l"unas características de los amino3cidosA")#$9,)+$ A&'*7)%(!'% P*$ N%(!'%*8%

7licina 7ly, 4; :eutra hidroflica

)lanina )la, ) JN :eutra hidroóbicaalina al, 114 :eutra hidroóbicaLeucina Leu, 191 :eutra hidroóbica'soleucina 'le, ' 191 :eutra hidroóbica!erina !er, ! 10; :eutra hidroflica 8reonina 8hr, 8 11N :eutra hidroflica*isteína *ys, 121 :eutra hidroflicaetionina et, 1N :eutra hidroóbica)c. )sp3rtico )sp, 129 )cida hidroflica)c. 7lut3mico 7lu, 14 )cida hidroílica)r"inina )r", 14 D3sica hidroflicaLisina Lys, M 1G D3sica hidroflica$istidina $is, 1;; D3sica hidroflica=enilalanina +he, 1G; :eutra hidroóbica 8irosina 8yr, 1J1 :eutra hidroflica 8riptóano 8rp, 20 :eutra hidroóbica+rolina +ro, + 11; :eutra hidroóbica)spara"ina )sn, 192 :eutra hidroflica7lutamina 7ln, 1G :eutra hidroflica


1. $a"a un resumen de su pr3ctica indicando-a& :úmero total de cadenas ormadas durante la pr3cticab& :úmero de amino3cidos en cada cadena.

2. )nalice y describa las si"uientes características de la proteína m3slar"a que ormó e indique-

a& !i se trata de una proteína 3cida, b3sica o neutra.b& !i se trata de una proteína hidroóbica o hidroílica.


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Nº1 MITOSIS VEGETAL

I. INTRODUCCIÓN

El ciclo celular establece dos etapas. En la primera la célula se di#ide%mitosis o meiosis& ori"inando dos células hias caracteri/ada por ladi#isión del núcleo %cariocinesis&, se"uida de la di#isión delcitoplasma o citocinesisO y en la se"unda la célula no tieneaparentes cambios moroló"icos, comprendiendo el espacio entredos di#isiones celulares sucesi#as y que se denomina interase celular.

La mitosis es un proceso que controla la transmisión de los ras"osde herencia de un núcleo a otro durante la di#isión celular. Este esel mecanismo que "enera nue#as células y reempla/a las célulasdaHadas en los or"anismos multicelulares. La mitosis tiene cuatroetapas defnidas- proase, metaase, anaase y teloase.

''. OBJETIVOS

>ierenciar las ases de una mitosis #e"etal y compararlas con una mitosisanimal

*aracteri/ar las ases de la mitosis y los procesos que in#olucran.

'''. MATERIALES

L%&$'%($')$ A!"#$ icroscopios +apel lente an"o de bisturí $oa de bisturí

+in/a de madera +in/a de metal con puntaroma

Luna de relo +apel toalla +ortaobetos *ubreobetos echero de )lcohol rceína acética? clorhídrica

Dulbos de cebollapretratados

L3pi/


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'. PROCEDIMIENTOS

1. *ulti#ar los bulbos de cebolla en #asos pequeHos conteniendoa"ua corriente, la que deber3 cambiarse cada 2 horas,

mantener los bulbos en oscuridad a 2;U*.2. >espués de J a 42 horas, arrancar con ayuda de una pin/a 2 a 9raíces del bulbo y colocarlas sobre una luna de relo queconten"a rceína.

9. *alentar la placa en la llama de un mechero de alcohol hastaaproximadamente G0U* y se obser#e la emisión de #aporesblancos, e#itar la ebullición del colorante.

. >ear enriar y repetir esta operación cuatro #eces.;. *olocar la raicilla en la l3mina portaobeto, cortar 2 mm de la

punta, aHadir una "ota de rceína ría, cubrir la preparación conlaminilla.

G. *on la punta de un l3pi/ "olpear sua#emente lapreparación describiendo círculos concéntricos para permitir laextensión del teido meristem3tico.

4. *ubrir la l3mina con papel toalla colocando la laminilla endirección a la mesa de trabao.

J. +resionar con el dedo pul"ar como si se estu#iera colocando una huelladi"ital.

N. bser#ar la preparación a 0K y a mayor aumento con lente de inmersión.


'dentifque y esquematice las células en interase, proase, metaase,anaase y teloase. Examine 100 células y determine el número decélulas en mitosis e interaseO adem3s los índices de ases.

Í#+),* ")(-(),$0 +orcentae de células prolierati#as que seencuentran en la mitosis. En el caso de células de la raí/ de la cebolla,

se consideran meristem3ticas a las que tienen el núcleo con undi3metro superior a la tercera parte del ee mayor de la célula.

Í#+),* )#(*'9),$0 porcentae de células prolierati#as en interase.!e calcula restando de 100, el índice mitótico.

Í#+),* +* %*0 +orcentae de las células mitóticas en cada una de las ases.


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F)?!'% . *élulas de Allium cepa en proase, anaase y teloase.

F)?!'% . *élulas de )llium cepa en metaase e interase.

Guia de Practica de Biologia Celular y Molecular Labo.

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