Gram-negatív fakultatív

anaerob pálcák

(Enterobacteriaceae)

Dr. Szabó Dóra

Semmelweis Egyetem

Orvosi Mikrobiológiai Intézet

Enterobacteriaceae

Morfológia és általános jellemzés

Gram-negatív, nem-spórás, pálca alakú baktériumok

Oxidáz –

Glükózt fermentálják, gáz termeléssel vagy anélkül (aerogenic -

anaerogenic)fakultatív anaerobok

Laktóz pozitív (nem pathogének) és negatív törzsek

Elkülönítésük

biokémiai reakciókkal

antigén szerkezeti különbségek alapján

O, H, K antigének

Tárgylemezagglutináció!!

Enterobacteriaceae

Normál bélflóra tagjai

ember és más állat bélrendszerének normál flórájának tagja

Pathogén törzsek

Enterális pathogén

Extraintestinális kórokozók

Osztályozás - több mint -15 különböző törzs:

Escherichia, Shigella, Edwardsiella, Salmonella, Citrobacter, Klebsiella,

Enterobacter, Hafnia, Serratia, Proteus, Providencia, Morganella,

Yersinia, Erwinia, Pectinobacterium

E. coli fertőzések

Extraintestinális fertőzések

Húgyúti infekciók

Újszülöttkori meningitis

K1 tok antigén

Peritonitis, cholecystitis

Nosocomiális fertőzések

Intestinális fertőzések

gastroenteritis

E. coli intestinális fertőzések

Gastroenteritis – számos E. coli típus, okozhat

különböző gastroenteritist:

enterotoxikus E. coli (ETEC),

enteroinvazív E. coli (EIEC),

enteropathogén E. coli (EPEC) ,

enteroaggregatív E. coli (EAEC),

enterohemorrhagiás E. coli (EHEC).

E. coli törzsek okozta gastroenteritisek

E. coli gastroenteritis

enterohemorrhagiás E. coli (EHEC)

Leggyakrabban O157:H7 szerotípusa okozza.

Élelmiszer, hús, tej közvetítette ZOONÓZIS

Alacsony fertőző dózis

A tünetek vizes hasmenéssel kezdődnek, majd véres

hasmenés alakul ki

Pathogenezis: Shiga-like toxint (SLT) termelnek

Heamolytikus-urémiás szindróma

Thrombotikus thrombocytás purpura

SLT kapilláris endothel receptorhoz kötődik, elongációs

faktoron keresztül gátolja a fehérje szintézist

Shigella genus

Négy speciese van antigénjeik alapján.

S. dysenteriae (Group A)

S. flexneri (Group B)

S. boydii (Group C)

S. sonnei (Group D)

OBLIGÁT HUMÁN PATHOGÉN

Shigella species Antigén szerkezet

O antigén alapján A, B, C, és D szerotípus; O antigén

hasonlít az E. coli-éhoz, ezért fontos, előbb az

identifikálás, és csak utána a szerotípus meghatározás.

Virulencia faktorok

Shiga toxin –S. dysenteriae termeli és kisebb mennyiségben

S. flexneri és S. sonnei.

A fehérjeszintézist gátolja a 60S riboszómális

alegységen.

Az intestinális nyálkahártya kifekélyesedésében van

szerepe.

Shigella Klinikai jelentősége

Shigellosist vagy bacillaris dysentériát okoz.

Feco-oral úton terjed.

Nagyon alacsony a fertőzést kiváltó csíraszám (10-200

organizmus).

1-7 napos inkubációs idő után láz, görcsök, hasi fájdalom, és

vizes hasmenés jelentkezik (toxin hatás miatt) 1-3 napig.

Ezt követheti a gyakori, csekély mennyiségű székletürítés

vérrel, nyákkal, gennyel (intestinal mucosába történő invázió

miatt).

Nagyon ritkán disseminálódik.

S. dysenteria a leggyakoribb pathogén, melyet S. flexneri, S.

sonnei és S. boydii követ.

Shigellosis.

A colon mucosa sigmoidoscopos

képe S. flexneri által okozott enyhe

esetben. Exsudate, fibrinből és

polymorphonuclear leucocytákból

áll.

Shigellosis.

Colon mucosa sigmoidiscopos

képe egy fatális kimenetelű S.

dysenteriae 1 típusa okozta

shigellosis, mely kiterjedt

pseudomembranous colitis képét

mutatja.

SHIGELLOSIS

Mikrobiológiai diagnózis Klinikai minta: széklet, ételmaradék

Tenyésztés: Szelektív differenciáló táptalajokon:

-dezoxycholate citrát agar

- eozin metilénkék agar

Biokémiai identifikálás, tárgylemezagglutináció az O antigén meghatározása

Pozitív Serény teszt. Keratoconjunctivitis

Nyúlban inokulációt követően

SHIGELLOSIS-Kezelés és prevenció

Kezelés

Folyadék és elektrolitpótlás

Antimikrobás kezelés

Szulfonamidok, streptomycin, tetracyclin, ampicillin és klóramfenikol

Rezisztens törzsek gyakoribbá válása miatt érzékenység vizsgálatot kell

végezni

Prevenció

Vakcina

Élő atteunált vakcina

Alegység vakcina

Salmonellae

SALMONELLA SPP.

Gram-negatíve

Motil pálca rods, peritrich flagella

Facultatív anaerob

O antigen

H (flagella) antigéé

Salmonella typhi Vi antigénnel is rendelkezik.

Biokémiai tulajdonágok:

H2S termelés

Laktóz negatív

Salmonella spp. által okozott

megbetegedések

I. Gastroenteritis Salmonella enterica

állatról emberre terjed - ZOONÓZIS

II. Enterális láz (typhus és paratyphus) Salmonella typhi

Salmonella paratyphi A, B és C

emberről emberre terjed

ENTERÁLIS LÁZ

ENTERÁLIS LÁZ

THYPHOID FEVER

kórkozó S. typhi

PARATHYPHOID FEVER

kórokozó S. paratyphi A, B és C; enyhébb

megbetegedés

Mindig humán eredetű!

ENTERÁLIS LÁZ - Patogenezis

Tünetek fejfájás

lépcsőzetesen emelkedő lázmenet

néhány nap alatt igen magasra emelkedik

a beteg tudata ködös, typhosus

relatív bradycardia

hepatosplenomegalia

nem jellemző tünet a hasmenés

lehetnek a has és a mellkas bőrén roseolák

a vérkép jellegzetes lehet

leukopenia

aneosinophilia

lymphocytosis

Enterális lázr a: petechia, b: Peyer plaque és necrosis az ileumban c, d: Peyer-plaque perforációja

Fig. 4.37 Enterális láz. Fekélyek a vékonybélben a Peyer plakkok felett

(Peyer’s patches). By courtesy of Dr. J. Newman.

Roseolák hastyphusos beteg mellkasán és hasfalán.

Mikrobiológiai diagnosztika

Klinikai minta:

széklet: második vagy harmadik héttől pozitív

vizelet: második héttől pozitív

epe, csontvelő aspirátum

vér, hemokultúra: gyakran az első héten pozitív

Direkt kenet nincs diagnosztikus értéke.

Tenyésztés:

Mintákat kioltják brilliant zöld és/vagy bizmut szulfit

szelektív táptalajra.

Biokémiai azonosítás: Laktóz (-), dextróz fermentáció

gáz termeléssel vagy anélkül, H2S (+)

Szerológiai azonosítás:

Tárgylemez agglutináció specifikus antitestekkel S.

typhi jelenlétének kimutatása a sejtekben.

Vér szerológia:

=> Gruber-Widal reakció : (Ag = 'H' és 'O' antigének a

S. typhi törzsek) specifikus antitestek jelenlétét vagy

emelkedését mutatjuk ki a beteg szérumából.

Salmonella typhibismutsulfit táptalajon

Gruber-Widal reaction

+ -Salmonella typhi O antigén

meghatározása tárgylemez

agglutinációval

•Kezelés

Antibiotikum érzékenységi vizsgálatot követően: S. typhi törzsek

rendszerint érzékenyek ampicillinre, sulfomethoxazole +

trimethoprimre, vagy 3.dik generációs cephalosporinokra.

Megelőzés

- Aspecific kezelés a krónikus hordozást kontrollálja.

- Aktív immunizálás acetonnal elölt baktérium szuszpenzióval

parenteralisan adagolva nagy rizikójú egyének esetén

alkalmazható.

- Oralisan adagolt védőoltás élő avirulens S. typhi mutánssal

szintén jelentős védelmet jelent.

“Hordozás”

A hastyphust túlélők 3 %-a hordozókká válnak, az epehólyagban,

epeutakban vagy húgyutakban élhet túl a kórokozó.

SALMONELLOSIS

Salmonellosis (gastroenteritis) egyébként egészséges

egyénekben.

Invazív fertőzések (sepsis, meningitis) nagyon

fiatalokban vagy nagyon öregekben, és

inmmunkompromittált betegekben.

Pathogenesis:

-A humán fertőzések rezervoárja: szárnyas, sertés,

rovarok, szarvasmarha, háziállat.

- Orálisan kerül be a kórokozó az emberbe,

kontaminált élelmiszer vagy innivaló útján.

-Gyulladásos léziókat hoz létre a vékony és a

vastagbélben.

Mikrobiológiai diagnózis

Klinikai minta:

széklet: pozitív első héttől, és több hétig pozitív marad

vér hemokultúrához: csak 2-4 %-ban pozitív

liquor és élelmiszer maradék

Direkt kenet nincs diagnosztikus értéke.

Tenyészet: S. typhi tenyészetre jellemző.

Szerológiai azonosítás: tárgylemez agglutináció

specifikus antitestekkel azonosítjuk a kórokozót

Fág tipizálás: közegészségügyi céllal végzik.

Salmonella

Antimikróbás terápia

Enterális láz – leggyakrabban chloramphenicolt

használnak. Rezisztens törzsek tűntek fel, ezért az

antibiotikum érzékenységi vizsgálat nélkülözhetetlen.

Gastroenteritis – általában nem igényel antimikróbás

kezelést. Folyadék és elektrolit pótlásra van szükség.

Klebsiella Virulencia faktorok

Tok

Adhezinek

Vas kötő kapacitás

Klinikai jelentősége

Pneumoniát okoz, többnyire immunokomprimált egyénekben.

Permanens tüdősérülés talaján jelentkezik (ritka más

baktériális pneumoniák esetén)

Nozokomiális fertőzések fő okozója septicemia és meningitis

Klebsiella pneumoniaeNormál bélflóra tagja

Patogenitás:

Extraintestinális fertőzések:

- lobáris pneumoniae (Friedländer-pneumonia)

- húgyúti,- epeúti- fertőzések, sinusitis, otititis media

Klebsiella oxytoca:iatrogén fertőzések

Klebsiella ozaenaeozaenae

tokos Klebsiella india ink festéssel

(negatív festés)

www.icbm.de

Klebsiella pneumoniae

Mucoid telepek– tok képzés

Biokémiai azonosítás: Laktóz (+), ureáz (+), indol (-),

H2S (-), citrát (+)

Szerológiai azonosítása a baktériumnak :

- Neufeld-féle tok duzzadás (Quellung) reakció

- tokantigén ellenes specifikus antitestekkel

Kezelés és megelőzés

Antibiotikumok: érzékenységi vizsgálattól függ.

Elsősorban b-laktám antibiotikumok

Yersinia

Három fontos humán pathogén

Yersinia pestis –pestis kórokozója

Yersinia enterocolitica – enteropathogén

Yersinia pseudotuberculosis – enteropathogén

Yersinia enterocoliticaY. pseudotuberculosis

Fertőzés kontaminált élelmiszerrel vagy vizzel

Láz, hasi fájdalom

Y. enterocolitica vizes hasmenést Bejut a bélrendszer epithelium sejtjeibe az M sejteken keresztül.

M sejteken átjutva bazális felszínre jut

Penetrálnak a lymphoid szövetbe, ahol gyulladást hoz létre

extrém fájdalomért felelős (akut appendicitishez hasonlít)

mesenterialis nyirokcsomókba jutnak, mesenterialislymphadenitist okozva

Reaktiv arthritis léphet fel Y. enterocolitica fertőzést követően.

keresztreagáló T sejtek vagy antitestek

V. cholerae osztályozása

Én vagyok a vibrio!

O1 vagy O139 törzs

www.forth.go.jp/tourist/ panf/cholerae.html

NEM-TOXIKUS TOXIKUS

Lehet, hogy nem O1,

vagy O139 vagyok!(de én is tudok

problémát okozni)

Osztályozás

Toxigenic V. cholerae

O1Felosztás 2 biotípusba

inaba ogawa hikojima

A & B(A kicsi C) Antigének

A & C

O139

A, B, C

Mindegyik O1 biotípusnak

lehet 3 szerotípusa

Klasszikus El Tor

Designed using information presented in review by NS Crowcroft. 1994. Cholera: Current Epidemiology. The

Communicable Disease Report. 4(13): R158-R163.

Ribotípusokba osztás

Felosztás 2 epidemiológiai szerotípusba

Biokémiai tulajdonságok

Gram-negatív

Egyenes vagy csavart

alakú pálcák

Oxidáz pozitív

Fermentáló és oxidatív

metabolizmus

Pathogenesis

Fecális-orális úton terjed

Vékonybélben tapad, és kolonizál

Toxin regulált pilusok (TCP)

Kolera enterotoxint (CT)

cAMP szint emelkedést okoz

Terjedés lehetőségei

Víz (fertőző dózis = 109)

Élelem (fertőző dózis = 103)

Emberről emberre

The 19th-century illustration depicting the spirit of death at a pump was taken from

http://news.nationalgeographic.com/news/2004/06/0614_040614_tvcholera.html

Klinikai manifesztáció

www.who.int/entity/water_sanitation_health/dwq/en/admicrob6.pdf

CT TOXIN

CT egy A-B típusú toxin

V. cholerae toxicitása

1. CT felelős a hatásért. A kórokozó soha sem jut be a sejtbe, csak TOXINHATÁS

2. Az A alegység cAMP szint emelkedést okoz.

3. A magas ic cAMP eredményezi a klorid ion, bikarbonát és víz szekréciót.

Lencer, Wayne. 2001. Microbes and Microbial Toxins: Paradigms for Microbial-Mucosal Interactions. V. cholerae: invasion of the

intestinal epithelial barrier by a stably folded protein toxin. Am J Physiol. Gastrointest Liver Physiol. 280: G781-G786.

Pathogenézis

Az emelkedett cAMP okoz:

Mucosalis sejtek pumpálnak nagy mennyiségű Cl-

bélrendszerbe

Víz, Na+, és más elektrolitok is vándorolnak az

ozmotikus és az ion gradiensnek megfelelően

Hasmenést eredményez, amely a kolera klasszikus

tünetegyütteséhez vezet.

Diagnózis

Súlyos vizes hasmenés

“rizslé –szerű széklet ürítés”

Dehidráció

Csökkent vizeletürítés

Sokk

Folyékony székletet natív kenetben lehet

mikroszkóposan vizsgálni.

Kolera ágy

Kolera kezelése

REHIDRÁCIÓ

Intravénás vagy

Orális

Antibiotikumos kezelés másodlagos

Kezelés: Oral Rehidrációs Só (ORS)

• Oral Rehidrációs Só

csomagok

• WHO, UNICEF osztja

• 1 L vízben lehet feloldani

• NaCl, KCl, NaHCO3, glükoz

Kezelés: Hogy működik az ORS?

• A Na+ transzport a

glükoz transzporthoz

kapcsolt a vékonybélben

• A glükóz elősegíti a

hatékonyabb folyadék és

só felszívódást

• A kálium passzívan

szívódik fel

Dehidrált beteg kezelés előtt

Rehidráció– dehidrált beteg kezelés után

Védőoltások

• Lokális mucosalis immunválasz szükséges

• Orális vakcina

• Két típusa elfogadott:

• Elölt egész sejtes

• Élő attenuált

Köszönöm szépen a figyelmet!