Etanol metanol
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Venenos Volátiles
Mario Ariel Aranda
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Que vamos a Ver?
• Generalidades de los Venenos volátiles
• Análisis cualitativos y cuantitativos
• Tipos de muestras para el análisis
• Toma correcta de muestra
• Etanol
• Metanol
• Formaldehido
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Análisis Cualitativo
Aislamiento
Cuantificación
Presencia o ausencia del analito positivo
Neg
ativ
o
Pruebas suplementarias o se descarta la presencia del toxico
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Aislamiento del Toxico
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Ensayos físicos
• Aspecto
• Olor
• pH
Acidosis Metabólica
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Ensayos Químicos
Compuesto Reductor Alcoholes, aldehídos y cetonas+- Valor Analítico
Carácter Reductor
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Ensayos Químicos cualitativos
Propiedad Oxidante
Acción sobre el Diamino plata
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Ensayos Químicos cualitativos
Aldehídos, cloroformo, fenol y paraldehido
Alcoholes
+
-
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Identificación de Formaldehído
Reacción con ácido Cromotrópico en sulfúrico 75%
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Etanol
Sinonimia: alcohol, alcohol etílico, etanol
Características fisicoquímicas* Líquido incoloro* Punto de ebullición: 78,5 ºC* Densidad : 0,8 g/ml (20ºC)* Miscible con agua y algunos solventes orgánicos
Usos más comunes* Disolvente* Antiséptico
Fuentes del tóxico* Bebidas alcohólicas* Alcohol medicinal* Perfumes* Cosméticos* Antisépticos* Gotas óticas
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Administración-Absorción
• Absorción:Vía inhalatoriaDigestivaParenteralRectal
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Absorción
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Factores que afectan la Absorción gástrica
• Ayuno A mayor contenido graso, mas lento es la absorción
• Tipo de graduación alcohólica:Gasificada Cerveza Whisky• Sexo ADH mas activa en Hombres que en Mujeres
• Edad Desarrollo del metabolismo
• Integridad de la mucosa gástrica Mayor absorción en mucosa dañada
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Eyeballing
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Tampodka
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Metabolismo-Hepático
Agudo
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Metabolismo-Hepático
Crónico
Recordar que el ROH esinductor de su propio metabolismo
Mayor cantidad de ROH puede ser metabolizado
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Metabolismo
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Excreción
* Orina: 5-10% como ETOH* Saliva* Sudor* Bilis* Aire espirado : correlación con laconcentración en sangre* Leche materna* Atraviesa Barrera Placentaria* Eliminación: 30 ml en 3 horas
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Relación entre el aire espirado y el contenido en sangre de alcohol
Aparece en sangre 5-10 min desaparece de la sangre: 8-10 hsPico máximo: 30-90 min
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Calculo retrospectivo
CCO = CC1 + β x t
Donde:CCO: concentración en el momento del accidente
CC1: concentración en el momento de la toma de muestra
t: tiempo desde el accidente y la toma de la muestra
Β: Factor de Widmark: 0,12 – 0.15 g/dl/hs
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Adicción
• Incluye:
Compulsión Deseo de consumo
Tolerancia Efectos producidos a mayores concentraciones
Dependencia Psíquica y física
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Alcoholismo
Estado de dependencia al alcohol caracterizado por un consumo anormal y compulsivo de éste, el cual frecuentemente persiste a pesar de las adversas consecuencias personales y sociales y sirve al propósito de experimentar ciertos efectos psíquicos o evitar los efectos adversos provocados por su ausencia
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Etanol-Efectos sobre el organismo
• SNC: depresor no selectivo, se pierde el autocontrol y se afecta el comportamiento
• Estomago: gastritis, úlceras
• Corazón: miocardiopatias
• Aparato genito-urinario: infertilidad, impotencia sexual en el hombre
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Etanol-Efectos sobre el organismo
• Hígado: hepatitis toxica - cirrosis
• Páncreas: pancreatitis aguda
• Efectos teratogénicos: Síndrome alcohólico fetal
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Efectos
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Síndrome fetal alcohólico
• Incidencia 1: 300- 1: 2000
Microcefalia y retardo mentalRetraso en el crecimientoDisformismo facialTembloresSucción débil y mal coordinadaDéficit de atención-hiperactividad y problemas de aprendizajeCardiopatía congénita
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Síndrome fetal alcohólico
El Bebe lo que tú Bebes
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Etanol-Efectos sobre el organismo
• Altera el metabolismo de Glúcidos:
Hipoglucemia
Hiperlacticidemia
• Altera el metabolismo de los lípidos:
Aumenta la síntesis de ácidos grasos y Tg
Cetonemia y cetonuria
Deposito de grasas en tejidos
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Etanol
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ETANOL Y COMPORTAMIENTO
Concentración de
Etanol en sangre (g/l)
Efectos
0,22 Cambio de carácter
Empeoramiento de la
coordinación motora
0,50 Empeoramiento de la atención
Aumento del riesgo de
accidentes automovilísticos
1,00 Ataxia intoxicación
2,20 Pérdida de la conciencia
5,00 Muerte
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Etanol- Muestras
CUANTIFICACIÓN DE ETANOL* Muestra: sangre entera, plasma, suero- Jeringa sin cámara de aire- Tubo sin cámara herméticamente cerrado* Anticoagulante:citrato, fluoruro de sodio, (heparina, EDTA)
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Métodos para análisis
1- Métodos Químicos: Microdifusión
2- Métodos enzimáticos
3- Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
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Método Químico- Microdifución
Muestra a investigar
Solución Cr2O7K2 0,4N (SO4H2 10N)
Sol. Sat. CO3K2
Cr2O7= reducido (Cr3+)
Valoración por retorno
Tiempo2 horas: 50ºC6 horas: 37ºC10 horas: 25ºC
Procesar un blanco en forma paralela
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Cr2O7= reducido (Cr3+)
Valoración : + IK 3N Titilación: S2O3Na2 0.1N (+Almidón)
FUNDAMENTO de la TITULACIÓN
Método de Winnick:
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ESPECIFICIDAD de los MÉTODOS QUÍMICOS
• NO SON ESPECÍFICOS
• INTERFIEREN: otros alcoholes, aldehídos, cetonas y compuestos reductores
• NO INTERFIEREN: cloroformo, benceno, Tetracloruro de carbono, tricloroetileno
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Métodos Enzimáticos
Kirk
Teller
Leric
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ESPECIFICIDAD DE MÉTODOS ENZIMÁTICOS
• NO SON ESPECÍFICOS
• Otros alcoholes son sustrato con menor velocidad de reacción
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Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
Método Head-space
[EtOH] gas ~ área del pico
Muestra Biológica + ClNa
Equilibrio a 37ºC durante 30 minutos1- Metanol 5- t-butanol (St.I.)2- Etanol 6- Metil etil cetona3- Acetona 7- 2-butanol4- Isopropanol
Método sensible y especifico
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Para no marearnos
Métodos Ventajas Desventajas
Microdifusión Bajo costo
Limitado Nº de muestras
Baja sensibilidad
Tiempo
Interferentes
Métodos
Enzimáticos
Alta sensibilidad
Menos interferentes
Alto costo reactivo
Vencimiento del Kit
AxSym
(Inmunológicos)
Alto Nº de muestras
Menos interferentes
Alto costo reactivos
Consignación Equipo
CG-FID Alta sensibilidad
Específico
Curva de calibración
Analista capacitado
Alto Costo Equipo
Tiempo
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Toma de muestra para Cuantificación Legal de Etanol en
sangre
• Muestra de elección: Sangre
• Tubo seco Suero
• Nunca usar Alcohol como antiséptico
• Sin cámara de aire o cerrado herméticamente
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Hepatitis alcohólica
Aparecen después de una intoxicación aguda importante. Se caracteriza por una lesión inflamatoria con infiltración del hígado por leucocitos, necrosis hepatocelular y balonización de células. La clínica es muy variable, existen formas asintomáticas y formas muy agudas que pueden abocar en una insuficiencia hepática letal. Los signos clínicos simulan a los de las hepatitis virales o tóxicas: anorexia nauseas, malestar general, dolores abdominales, enflaquecimiento. Puede haber fiebre en la mitad de los casos. La hepatoesplenomegalia se puede encontrar en un tercio de los casos. También puede aparecer ictericia. En ocasiones ascitis y síndrome hemorrágico cutaneo mucoso y encefalopatia con una mortalidad del 60-80%. La citolisis se traduce por una elevación de las transaminasas, colostasis ictérica o anictérica manifestada con aumento de la bilirrubina, de las fosfatasas alcalinas, de la gamma-GT, también alargamiento del tiempo de Quick y del factor V, hipoalbuminemia, hiperleucocitosis.
![Page 43: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/43.jpg)
Factores de la coagulación Marcadores de daño hepáticos
![Page 44: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/44.jpg)
Tratamiento
• Sintomático o de soporte
• No hay antídoto
• Hemodiálisis en casos muy graves
• Dar solución glucosada para la hipoglucemia
![Page 45: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/45.jpg)
Dos borrachos en un auto, caen de un precipicio y mueren.
Camino al otro lado, uno le dice al que manejaba: - ¿no viste el cartel? -
Sí, lo ví clarito, decía: FERNET BRANCA......
- Nooooooooooo... tarado!!! Decía: FRENE, BARRANCA !!!!!
![Page 46: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/46.jpg)
METANOL
Sinonimia: alcohol metilico, alcohol de la madera
Características fisicoquímicas* Líquido incoloro* Punto de ebullición: 64,7 ºC* Densidad : 0,791 g/ml (20ºC)* Miscible con agua y algunos solventes orgánicos
Usos más comunes* Disolvente Industrial* Solvente para Lacas, Pinturas, Barnices* Componente de Removedores* Limpiadores de vidrio* Adulterante de Bebidas Alcohólicas
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CAMBIO DE ETANOL POR METANOL
Intoxicación masiva por metanol:Argentina (Febrero 1993) vinos Soy Cuyano Adulteración de vinos con metanol 43 muertos, cientos de afectado
INTOXICACIÓN POR METANOL* ES GRAVE* RIESGO DE MUERTE* SECUELAS IRREVERSIBLES
Dosis tóxica: 10 a 30 ml (0,4 ml /Kg en niños)Dosis letal: > 60 ml (0,8 ml/Kg en niños)
![Page 48: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/48.jpg)
Absorción-Metabolismo
• Absorción:
Vía inhalatoria
Digestiva: rápida absorción
Cutánea
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Metabolismo
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Eliminación
• Orina 5-10% inalterado
• Aire espirado
• Metabolitos
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Intoxicación
• Periodo de latencia: 12-24 hs• Depresor del SNC• Trastornos digestivos: nauseas , vómitos• Dificultad respiratoria• Acidosis metabólica severa (anion gap )• Alteraciones visuales: daño en la retina y atrofia
del nervio óptico• Secuelas permanentes: neuropatías y
encefalopatias
![Page 52: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/52.jpg)
Manifestaciones Clínicas
La intoxicación por metanol se caracteriza por el desarrollo de tres estadios progresivos.
El primer estadio se presenta con una mínima disminución de la actividad del sistema nervioso central, debilidad, sensación vertiginosa y náuseas. Tras un periodo de latencia que es asintomático
Aparece una segunda fase, que coincide con el desarrollo de una acidosis metabólica que se caracteriza por vómitos, dolor abdominal, desorientación y alteraciones visuales con fotofobia, visión borrosa, midriasis bilateral arreactiva a a la luz y ceguera ocasional.
En la tercera fase, en relación directa con el grado de acidosis metabólica alcanzada, se produce lesión neuronal, con necrosis retiniana y de los ganglios basales del encéfalo. En esta fase hay hipotensión, coma profundo y respiración de Kussmaul. El desarrollo de apnea y convulsiones aparece en la etapa final
![Page 53: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/53.jpg)
Tratamiento
• Tratamiento de soporte o sintomatico
• Antidoto: Etanol oral o endovenoso 4-metil pirazol inhibidor de la ADH
• Monitorizar etanolemia ( 1- 1,5 g/l)
• Hemodiálisis en casos graves
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Etanol
Metanol Etilenglicol
Glicolaldehído
Ác.GlicólicoAcetaldehído
CO2 + H2O
Formaldehído
Ác.Fórmico
ADH
Tratamiento intoxicación por Metanol:ETILTERAPIA
![Page 55: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/55.jpg)
Diagnostico de laboratorio
• Metanol en sangre• Metanol en orina• Formiato en orina• Estado acido base: pH < 7,20• Brecha anionica• Anion gap: (Na++K+)-( Cl-+HO3-)
• Brecha osmolar Gap osmolar: osmolaridad medida- osmolaridad calculada
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Toxicodinamia del MetanolELIMINACIÓN* Orina: 5-10% inalterado* Aire espirado
INTOXICACIÓN AGUDA:* Depresión del SNC: cefalea, vértigo, confusión* Trastornos digestivos: nauseas , vómitos* Acidosis metabólica severa* Dificultad respiratoria: respiración en boca de pescado* Alteraciones visuales, daño en la retina y atrofia delnervio óptico Secuelas permanentes: ceguera, encefalopatía, parkinsonismo, polineuropatía
Concentración en sangre
0-0,20 g/l Usualmente
0,20-0,50 g/l Requiere tratamiento
> 0,8 g/l Potencialmente fatal
Niveles >0,20 g/l sontóxicos requieretratamiento
![Page 57: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/57.jpg)
Cuantificación de Metanol
Muestra: sangre entera, plasma, suero- Jeringa sin cámara de aire- Tubo sin cámara, herméticamente cerrado* Anticoagulante: Citrato, fluoruro de sodio
Metodologías:* 1- Métodos Químicos: Desproteinización y Microdifusión* 2- Método Cromatografía gaseosa (CG-FID)
![Page 58: Etanol metanol](https://reader035.fdocument.pub/reader035/viewer/2022081415/5586164ad8b42a0e4a8b4792/html5/thumbnails/58.jpg)
1- METODO QUÍMICO: Oxidación con KMnO4
Aislamiento: DesproteinizaciónMÉTODO DE WILLIAMS
Fundamento:El metanol es oxidado por el KMnO4 a formaldehido, elcual forma complejo coloreado con el ácido cromotrópico
Interferentes: EDTA, heparinaDesproteinización con ácido Tricloroacético en solución sulfúrica al 10% p/v
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Método de Williams
1- Muestra
2- Desproteinizante TCA en H2SO4 10% v/vTransferir a otro tubo sobrenadante
3- KMnO4 5% p/v
4-Eliminar exceso de KMnO4 (Na2SO3)
5-Ácido cromotrópico 0.5% + H2SO4 cc6-BM hirviente 5 minutos7-Espectrofotómetro a 570 nm8-Comparar con curva de calibración
Sensibilidad: 0,03 g/lInterferencias: Heparina, EDTA, Formalina
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Reacción de Williams
* Blanco de Reactivos* Blanco de Muestra: NO KMnO4
* Muestra
Fundamento de la Cuantificación
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COMPLEJO COLOREADO con el ÁCIDO CROMOTRÓPICO
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METODO QUÍMICO: Oxidación con KMnO4
Aislamiento: Microdifusión
Método de Feldstein-Klendshoj: + reacción con ácido cromotrópico
Rvo Fijador: H2SO4 10%
Rvo Liberador: CO3K2 sol sat
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Cuantificación de etanol y metanol cuando están presentes enla misma muestra de sangre
Deben realizarse las pericias por los vinos adulterados Soy Cuyano,donde en forma intencional se le adicionó alcohol de quemar,provocando la intoxicación de varias personas con los siguientessíntomas: visión borrosa, confusión mental y debilidad, muchos deellos presentaron marcada acidosis metabólica y se les efectuó etilterapia
* Microdifusión etanol
metanol+
* Técnica de Williams metanol
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Como se hace?
Mediante la técnica de etanol por microdifusión calculamos los Eq. totales (etanol + metanol)
Mediante la técnica de Williams para metanol se obtiene la concentración en g/l
Una vez obtenidos los equivalentes de metanol, por diferencia se sacan la concentración de Etanol (g/l)
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N S2O32- = 0,1199
VB = 1,52 ml VM = 0,3 ml Vsangre = 0,5 ml
Mediante la técnica de etanol por microdifusión calculamos los Eq. totales (etanol + metanol)
Eq. Totales = 0,29 eq/lCálculo de los equivalentes
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Mediante la técnica de Williams para metanol se
obtiene la concentración en g/l
Cc= 0.74 g/l
deben ser transformados a eq./l de la siguiente manera
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Una vez obtenidos los equivalentes de metanol
Eq. Totales = Eq. Etanol + Eq. MetanolEq. Etanol = Eq. Totales Eq. Metanol
Eq. Etanol = 0,29 - 0,09 = 0,20 eq/l etanol
pasar los eq./l de etanol a g/l de la siguiente manera
RESULTADO FINAL: 2,30 g/l de etanol 0,74 g/l de metanol
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