Espiroquetas Borrelia y Brachyspira 2013 BREVE
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ESPIROQUETAS
M.V. Aurico Sousa Fonseca Departamento de Patología Veterinaria Cátedra de Microbiología e Inmunología
TAXONOMÍA Y NOMENCLATURA
• Actualmente se describen en la sección XXV del volumen 5 de la 2da. Edición del Manual Bergey de Bacteriología sistemática
• Se incluyen en: • Clase Spirochaetes • Orden Spirochaetales
CARACTERÍSTICAS MORFOLOGÍCAS
• Bacterias móviles • Forma de hélice • 0,1 a 3,0 μm de
diámetro • longitud de 5 a 250
μm • Gram negativas • Microscopia óptica
• Técnicas para aumentar grosor
• Difíciles de colorear, se observan con microscopía de campo oscuro y/o contraste de fases.
• Impregnación argéntica (Técnica de Levaditi)
• Tinción negativa con nigrosina o tinta china (Fontana-Tribon-deau)
• Wright, Romanowsky y Giemsa
• Inmunoperoxidasa
• Anticuerpos Fluorescentes
CARACTERÍSTICAS DE CRECIMIENTO
• Son quimioheterótrofos
• Fuentes de carbono y energía:
• Aminoácidos, largas cadenas de ácidos grasos y largas cadenas de alcoholes grasos
• Se pueden comportar como anaerobios, aerobios, anaerobios facultativos o microaerófilos
CARACTERÍSTICAS DE CRECIMIENTO
• Algunos géneros se pueden cultivar en medios artificiales de laboratorio, siendo su crecimiento lento
• Se desarrollan bien en medios enriquecidos con suero de conejo o hemoglobina
• Entre los medios más adecuados para espiroquetas se encuentran
• Stuart, Fletcher, Noguchi, Korthof, Reiter y Ramme, Chang, Li-Yan Po y el medio sólido de Cox y Larson
• Treponema se ha logrado cultivar hasta por dos generaciones en líneas celulares
• Se multiplican por fisión binaria (división transversal)
• Hábitat
• Son ubicuas y de distribución cosmopolita
• Formas bacterianas de vida libre en:
• aguas dulces y saladas, Tierras, lodos y fango
• Saprofitas en el suelo en descomposición
• Simbiontes en:
• Cavidad bucal y aparato genital del ser humano y de los animales. Aparato digestivo de mamíferos (rúmen bovino) y de moluscos (género Cristispira)
• Patógenos intracelulares
• Treponema
• Agentes Zoonóticos
• Borrelia y Leptospira
• Patógenos animales de trascendencia económica
• Brachyspira
ECOLOGÍA
• Transmisión
• La transmisión natural ocurre por vía
• Oral o digestiva
• Aerógena
• Por contacto
• Mediante vectores hematófagos
• Garrapatas e insectos
ECOLOGÍA
• Microorganismos lábiles que muestran sensibilidad a:
• Calor
• Luz
• Desecación
• Acidez
• Sustancias químicas como:
• Arsenicales
• Mercuriales
• Bismuto
• Lisozima
• Antibióticos como:
• Penicilina, tetraciclina, estreptomicina y tilosina
• Resistencia
• rifampicina
GÉNEROS DE INTERÉS EN
MEDICINA VETERINARIA
• Familias
• Spirochaetaceae
• Borrelia
• Treponema
• Serpulinaceae
• Brachyspira
• Leptospiraceae
• Leptospira
• Generalidades
• Comprende especies patógenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros)
• Agentes productores de zoonosis
• Características morfológicas y estructurales
• Morfología helicoidal
• Espiras amplias, irregulares y escasas
• Extremos del cilindro protoplasmático son afilados
• El interior del citoplasma no presenta túbulos
• Cubierta externa presenta un lipopolisacárido tóxico diferente a la endotoxina de las Gram negativas
• Tamaño entre 0,2 y 0,5 µm de diámetro y 3-20 µm de longitud
• Posee entre 7 y 30 filamentos axiales
Género Borrelia
• Generalidades
• Comprende especies patógenas para el ser humano y los animales (aves, vacas, ovejas, caballos y perros)
• Agentes productores de zoonosis
• Características morfológicas y estructurales
• Morfología helicoidal
• Espiras amplias, irregulares y escasas
• Extremos del cilindro protoplasmático son afilados
• El interior del citoplasma no presenta túbulos
• Cubierta externa presenta un lipopolisacárido tóxico diferente a la endotoxina de las Gram negativas
• Tamaño entre 0,2 y 0,5 µm de diámetro y 3-20 µm de longitud
• Posee entre 7 y 30 filamentos axiales
Género Borrelia
• Se visualizan mejor al microscopio tras coloraciones con anilina que las otras espiroquetas
• Son Gram negativas, pero se colorean mejor con Giemsa, Wright y Naranja de acridina
• Resisten varias semanas en los coágulos sanguíneos a temperatura ambiente, algunos meses a 4 oC y por tiempo indefinido a -20 oC
• Atraviesan la placenta • Se eliminan por la leche y la
orina
Género Borrelia
• Aislamiento e identificación
• El cultivo es difícil y lento (7-8 días)
• Tasa promedio de generación: 18 a 20 horas
• Especies que han podido ser aisladas en vitro son microaerófilas
• Antes se cultivaban y aislaban en
• Huevos embrionados de gallina
• Animales de experimentación (ratón recién nacido)
• Pases sucesivos en vectores artrópodos
Género Borrelia
• Aislamiento e identificación
• Ahora se emplean medios artificiales como:
• Noguchi y Li-Yan-Po
• Medio BSK II (Barbour-Stoenner y Kelly)
• Suero de conejo, 5 fluorouracilo y kanamicina
• Medio CM RL 1066
• Glutamina
• Temperatura de incubación
• 33 a 35 °C
Género Borrelia
• Hábitat
• Parásitos obligados que se encuentran distribuidos por el torrente circulatorio
• Presentan la misma distribución geográfica que sus vectores
Género Borrelia
• Transmisión
• Artrópodos hematófagos
• Garrapatas de los géneros Argas, Ixodes, Rhipicephalus, Margaropus, Boophilus y Ornithodoros
• Adquieren las Borrelia al alimentarse de los animales enfermos
• Hombres, aves, vacas, ovejas, caballos y perros
• o los reservorios
• Aves migratorias, roedores, ciervos, vacas, ovejas y caballos
• Se ha demostrado transmisión transovárica
Género Borrelia
• Especies de interés
• Borrelia anserina
• Borreliosis o espiroquetosis aviar
• Borrelia theileri
• Fiebre recurrente en vacas. También en ovejas y equidos
• Borrelia coriaceae
• Aborto epizoótico en bovinos
• Borrelia burgdorferi
• Enfermedad de Lyme
• Borrelia afzelii
• Enfermedad de Lyme
• Borrelia garinii
• Enfermedad de Lyme
Género Borrelia
• Diagnóstico serológico
• Elisa
• Posibles falsos positivos con
cepas OX-2 y OX-K de Proteus
• Inmunofluorescencia indirecta (IFI)
• Western blot
• Diagnóstico molecular
• PCR (Reacción en cadena de la
Polimerasa)
Género Borrelia
• Tratamiento
• Tetraciclina, penicilina, eritromicina,
amoxicilina, kanamicina y ceftriaxona
• Medidas profilácticas
• Evitar el contacto con los vectores que
sirven de vehiculo a Borrelia
• Uso de productos frente a las garrapatas
• Eliminar roedores
• Existen bacterinas y vacunas de
subunidades para perros
Género Borrelia
Género Treponema
• Generalidades
• Catarsis taxonómica
• Inicialmente Treponema (T. hyodysenteriae)
• En 1991 Stanton et al., la reclasifican como Serpula
• En 1992 Stanton et al., la reclasifican como Serpulina
• En 1997 Ochiai et al., reporta una homología mayor de 96% con Brachyspira
Género Brachyspira
• Especies de interés
• Brachyspira aalborgi
• Especie tipo del género
• Brachyspira hyodysenteriae
• Disenteria porcina intensa
• Brachyspira innocens
• No patógena
• Brachyspira pilosicoli
• Espiroquetosis intestinal porcina débil
• Brachyspira alvinipulli
• Enteropatógena para el pollo.
• Produce diarrea
Género Brachyspira
• Hábitat
• Reservorio: intestino del cerdo
• Perros y roedores son sensibles al microorganismo
• Transmisión
• Fecal-oral
Género Brachyspira
• Diagnóstico
• Toma de muestra
Género Brachyspira
• Características morfológicas y estructurales
• Bacteria móvil, helicoidal
• B. hyodysenteriae
• Mide 8-10 µm de longitud y 0,3-0,4 µm de diámetro
• Presenta de 14 a 18 endoflagelos
• La mitad se inserta en cada uno de los extremos
• B. pilosicoli
• Mide 4-8 µm de longitud y 0,2-0,3 µm de diámetro
• Presenta de 10 a 12 endoflagelos
Género Brachyspira
Género Brachyspira • Aislamiento e identificación
• Crecen en condiciones de anaerobiosis en agar sangre soja tripticasa a 38 °C
• Se pueden usar el medio de agar sangre modificado complementado con espectinomicina y rifampicina