Espectrofotometría Para Calcular Concentración y Pureza Del ADN

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utilización de la espectrofotometría para el cálculo de muchas variables de concentración de sustancias

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Espectrofotometra para calcular concentracin y pureza del ADN

PROBLEMA 1Pregunta1

Se extrae y purifica ADN de una muestra de tejido vegetal, la cual se resuspende en un volumen final de 50l de agua ultrapura. Se toman 10l para realizar el anlisis espectrofotomtrico en una celdilla de 1ml, el cual arroja las siguientes lecturas: A260 de 0.520, A280 de 0.305, A310 de 0.028. Cul es la concentracin de ADN de la muestra? (Debes incluir las unidades. Para el smbolo miu -como en micra- utiliza una u, ejemplo ul para microlitros)Respuesta: 2600 ug/ml

Pregunta2

Cul es el cociente de la muestra del problema 1 (para calcular la pureza respecto a ARN, protenas y compuestos fenlicos)?Respuesta: 1,7049

Pregunta3

De acuerdo con el cociente resultante para esta muestra, puedes concluir que...Seleccione una:a. Tiene pureza aceptableb. Est contaminada por protenas o compuestos fenlicosc. Est contaminada por ARN

Retroalimentacin

Recuerda que si el cociente es...1.7 - 2.0 la muestra tiene pureza aceptableMenor a 1.7 la muestra est contaminada por protenas o compuestos fenlicosMayor a 2.0 la muestra est contaminada por ARNLa respuesta correcta es: Tiene pureza aceptable

Pregunta4Cul es el porcentaje de carbohidratos que presenta esta muestra?Respuesta: 5.3846

PROBLEMA 2Pregunta5

Se extrae y purifica ADN a partir de un cultivo bacteriano; la muestra se resuspende en un volumen final de 50 l de agua ultrapura. Se toman 10 l y se llevan a un volumen final de 1000 l para analizar en el espectrofotmetro: A260 de 0.415, A280 de 0.183, A310 de 0.00Cul es la concentracin de ADN en esta muestra? Recuerda escribir las unidades.Respuesta: 2075 ug/ml

Pregunta6

Realiza los clculos necesarios para determinar la pureza de esta muestra. Entonces, la muestra...Seleccione una:a. Tiene pureza aceptableb. Est contaminada por protenas o compuestos fenlicos

Est contaminada por ARN. La respuesta correcta es: Est contaminada por protenas o compuestos fenlicos.

Pregunta7

Ya calculaste la concentracin de la muestra. Ahora calcula la cantidad total de ADN que queda en los 40ul de muestra que se conserva.

Respuesta: 83 ug/ml

PROBLEMA 3Pregunta8

Se extrae y purifica ADN y se resuspende en un volumen final de 50l. Se toman 20 l y se llevan a un volumen final de 1000 l para analizar en el espectrofotmetro. Las lecturas resultantes son las siguientes: A260 de 0.725, A280 de 0.680, A310 de 0.154. Cul es la concentracin de ADN de la muestra?Respuesta: 1812,5 ug/ml

Pregunta9

Realiza todos los clculos necesarios para poder determinar cules son los contaminantes presentes en esta muestra...Seleccione una:a. No est contaminadab. Est contaminada por protenas y/o compuestos fenlicosc. Est contaminada por ARNd. Est contaminada por carbohidratose. Est contaminada por protenas y compuestos fenlicos, y adems por carbohidratosf. Est contaminada por ARN y carbohidratos

Pregunta10

Ya obtuviste la concentracin para la muestra del tercer problema, pero cul es el rendimiento de ADN en los 50ul de muestra que se recuperaron? Escribe las unidades correspondientes, y recuerda utilizar coma en lugar de punto (ejemplo 0,0)Respuesta: 90,95 ug