Universidad Nacional Autónoma de México.

Facultad de Estudios Superiores Cuautitlán.Bacteriologia y Micologia Veterinaria

Brucella melitensisAlumnos● Santiago Sánchez Brenda ● Aguilera Vázquez Luisa Fernanda● Gutierrez Gomez AdelaEquipo 8.

Importancia

La brucelosis ovina y caprina es causada por la bacteria Brucella melitensis provocando abortos con pérdidas económicas considerables, disminución de la productividad y las pérdidas comerciales en muchos países en desarrollo.

En los humanos, provoca una enfermedad grave, debilitante y algunas veces crónica que puede afectar diversos órganos. La mayoría de los casos se deben a la exposición ocupacional pero las infecciones también pueden ocurrir al ingerir productos lácteos contaminados.

Etiología

Brucella melitensis ● Cocobacilo o

bacilo corto● Gram negativo● Intracelular

facultativo.

B. melitensis posee tres biovariedades. Las tres biovariedades causan enfermedades en los pequeños rumiantes, pero su distribución geográfica varía.

Distribución geográfica

B. melitensis es especialmente común en el Mediterráneo. También aparece en el Medio Oriente, en Asia Central, en las cercanías del Golfo Pérsico, y en algunos países de América Central.

Se ha informado la presencia de este organismo en África e India, pero no parece ser endémico en el norte de Europa, América del Norte (excepto México), el sudeste de Asia, Australia o Nueva Zelanda.

Transmisión

En los animales B. melitensis se suele transmitir por el contacto con placenta, fetos, líquidos fetales y descargas vaginales e animales infectados. También se puede encontrar en la leche y el semen.

Los cabritos y corderos que maman de hembras infectadas pueden excretar el organismo en las heces.La mayoría de los animales se infectan por ingestión o a través de mucosas; orofaringe, tracto respiratorio superior y conjuntiva, y también a través de heridas en la piel.

Signos clínicos

Los signos predominantes en ovejas y cabras son:

● Abortos.● Nacimiento de crías débiles.

Por lo general abortan una sola vez, pero en la preñez posteriores se puede producir una nueva invasión del útero con excreción de los microorganismos.

● Epididimitis.● Orquitis.● Infertilidad (en machos). ● Ocasionalmente artritis en ambos sexos.

Muchas ovejas y cabras no gestantes permanecen asintomáticas.

Lesiones post mortem

A la necropsia se pueden hallar lesiones inflamatorias granulomatosas en el tracto reproductivo, ubre, ganglios linfáticos supramamarios y otros tejidos linfoides (algunas veces en las articulaciones y membranas sinoviales).Se ha encontrado orquitis necrotizante, epididimitis, vesiculitis seminal y prostatitis.

El feto puede estar autolisado, normal o presentar exceso de líquido con manchas de sangre en las cavidades corporales, junto con un agrandamiento del bazo y el hígado. Se observa una placentitis con edema y/o necrosis de los cotiledones, y el espacio intercotiledonario tiene aspecto áspero y engrosado.* Las lesiones no son patognómicas de brucelosis.

Control

El uso de la vacuna de B. melitensis Rev.1 se utiliza para control en las áreas infectadas. La vacuna puede provocar abortos en las hembras gestantes.Induce la interferencia con las pruebas serológicas, especialmente cuando se la inyecta de manera subcutánea, pero la administración por vía conjuntival a corderos y cabritos de 3 a 6 meses minimiza el problema.

Se elimina fácilmente mediante desinfectantes:

● Hipoclorito.● Etanol al 70 %.● Isopropanol.● Yodóforos.● Formaldehído y

glutaraldehído.● Xileno.

En la piel contaminada se pueden utilizar soluciones de etanol, isopropanol, yodóforos, fenoles sustituidos o hipoclorito diluido

Salud pública

B. melitensis es altamente patógena para los humanos. La vacuna con la cepa Rev.1 es patógena para los humanos y debe ser manipulada con precaución para evitar la inoculación accidental o la contaminación de las membranas mucosas o de la piel con abrasiones.La enfermedad es extremadamente variable y los signos pueden aparecer de forma insidiosa o súbita, el índice de mortalidad es bajo pero en las personas que no reciben tratamiento es de 2 a 5% (las muertes suelen ser causadas por la endocarditis o la meningitis.).

*Puede ser asintomáticas en los humanos.

Detección inmunohistoquímica de antígenos de Brucella melitensis en casos

de abortos naturales en ovejas.

El presente estudio se realizó para determinar por Inmunohistoquímica la presencia de antígenos de B. melitensis en 110 fetos de ovejas con abortados naturales. Se utilizaron secciones de pulmón, hígado, riñón y bazo de cada feto y se tiñeron con inmunoperoxidasa para detectar los antígenos. Se llegó a la conclusión de que la inmunohistoquímica de los tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina es una herramienta útil para diagnóstico de B. melitensis como causa de aborto espontáneo en ovinos.

El objetivo de este estudio fue detectar antígenos de Brucella melitensis en diferentes tejidos de fetos de ovejas abortados de forma natural, fijados con formalina, embebidos en parafina (formalin-fixed, paraffin-embedded; FFPE) con el complejo de avidina-biotina-peroxidasa (ABC), y mediante Inmunohistoquímica.

● Los tejidos utilizados en el presente estudio se obtuvieron de animales que no fueron vacunados previamente contra brucella.

Objetivo

Se utilizaron 110 fetos de ovinos abortados que fueron recolectados durante la temporada de parto de 2006-2007 en la región de Van en East Anatolia, Turquía. Los fetos provienen de diferentes rebaños, los cuales tenían un historial de falla reproductiva desconocida. ● Se tomaron muestras de tejido de los fetos incluidos

pulmón, hígado, bazo y riñón, y se fijaron en formalina tamponada al 10% y se incluyeron en parafina.

Método

● Las secciones de parafina se tiñeron con hematoxilina y eosina para examen histopatológico.

● Se utilizaron tinciones especiales para detectar bacterias; Brown-Hopps, Gram.

● La inmunohistoquímica se realizó usando el método ABC estándar con Sueros de conejos hiperinmunizados con la cepa.

Método

Resultados

De los 110 casos de fetos abortados investigados en 33, lo cual corresponde al 30%, se encontró el Antígenos de B. melitensis los cuales fueron detectados por IHC.

En las tinciones con Brown-Hopps, Gram se encontraron bacterias; ● Gram-negativo.● Cocobacilo.

Se observaron bacterias que se asemejaban a Brucella en los restos celulares necróticos y el citoplasma de macrófagos y neutrófilos

Entre los tejidos fetales disponibles para la tinción, se encontró la mayor cantidad de antígeno en el pulmón (22.7%) lo que está de acuerdo con los descrito por otros investigadores.

La alta incidencia de fetos ovinos abortados con bacterias intrapulmonares se atribuyó a la aspiración de líquido amniótico que contenía Brucella.

Por medio de la Inmunohistoquímica, los antígenos de B. melitensis se detectaron principalmente en macrófagos y neutrófilos pulmonares extracelularmente y / o intracelularmente en los infiltrados y en el citoplasma de los macrófagos del hígado.

a) Se observan antígenos de Brucella melitensis en el citoplasma de macrófagos y neutrófilos dentro de los alvéolos del pulmón, de color rojo con amino-etil carbazol.

b) Tinción en el citoplasma de macrófagos, neutrófilos y células de Kupffer del hígado

c) Macrófagos teñidos en el bazo d) Antígenos de Brucella melitensis, en el citoplasma de macrófagos intersticiales y células epiteliales tubulares del riñón

* Método de avidina-biotina-peroxidasa.

En los casos IHC-positivos se observaron lesiones: Macroscópicas: El tejidos subcutáneos de los fetos se observaba edematoso y las cavidades contenía un exceso de líquido sanguinolento. Microscópicas: ● Bronconeumonía en 21 fetos.● Neumonía broncointersticial en 4 fetos.

La infiltración de leucocitos periportales leves a moderados, la necrosis focal y las infiltraciones de neutrófilos estuvieron presentes en los hígados fetales.

Lesiones Encontradas

La serología, el aislamiento bacteriológico y la IHC son técnicas de laboratorio comunes para el diagnóstico de Brucella.Se demostró que la inmunohistoquímica para detectar antígenos de Brucella en los tejidos es precisa y se puede usar en tejidos FFPE

El diagnóstico de brucelosis requiere del aislamiento de Brucella en sangre, médula ósea u otros tejidos y puede ser tardado, riesgoso y no muy sensible ante tejidos en descomposición.

Conclusión

En conclusión, el IHC en tejidos FFPE es una técnica rápida, específica y útil para el diagnóstico del aborto por Brucella ovina. La incidencia de aborto por B. melitensis como se detectó en el presente estudio por IHC fue alta. Por lo tanto, se concluye que B. melitensis es una de las causas más importantes de aborto en la región.

Conclusión

Bibliografía●

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