EXAMEN DE MEDIO CURSO

Apellidos y nombres: Salcedo Yupanqui, Jean Carlos

1. Manejo integrado del nematodo de los cítricos

Fenología de los cítricos y momentos de control.

El control del nematodo de los cítricos se realiza antes del transplante,

utilizando como porta injertos a especies resistentes como Poncirus trifoliata e

inmunes como Severina buxifolia, con estas especies no tendríamos problemas

con los nematodos, porque el mayor daño en los cítricos se da cuando se

transplantan las cítricos jóvenes en plantaciones antiguas de cítricos.

Ciclo de vida

Corresponde a un nematodo cuyo ciclo de vida está conformado por un estado

de huevo, 4 estados juveniles y el adulto, hembras y machos. La hembra adulta

es sedentaria. En los sectores de la raíces que se encuentran parasitados,

generalmente se localizan muchas hembras agregadas y cubiertas con una

matriz gelatinosa conteniendo muchos huevos de los que eclosan las larvas

correspondientes al segundo estado juvenil. La eclosión se produce cuando las

condiciones de humedad, temperatura y aireación son adecuadas. Se ha

observado que la eclosión normalmente ocurre cuando existe agua libre en el

suelo y una temperatura sobre los 18º C. (MATAMALA, S. 2006)

La hembra adulta joven penetra la raíz a lo largo de su esófago. El resto del

cuerpo permanece fuera de la raíz y comienza a engrosar, aumentando de 25 a

30 veces su diámetro, en un breve lapso. La reproducción es partenogenética,

produciéndose huevos que dan origen a juveniles de ambos sexos. El macho

no se alimenta y demora de 7 a 10 días en llegar a adulto. Se ha determinado

que hasta un 50% de la población pueden ser machos. Una generación ocurre

normalmente entre 6 a 9 semanas, con una temperatura del suelo de 24-26º C.

(MATAMALA, S. 2006)

Control del nematodo de los cítricos

Portainjertos resistentes. Existen especies de portainjertos resistentes

tales como Poncirus trifoliata e inmunes como Severina buxifolia.

Algunos híbridos, como Carrizo y Troyer Citrange, son tolerantes a

algunos biotipos de Tylenchulus semipenetrans. (MATAMALA, S. 2006)

Temperatura. Prácticamente todos los nemátodos fitoparásitos son

eliminados a temperaturas entre los 44º C y 48º C. Tratamientos como

calentamiento del suelo con vapor o calor seco, solarización y

sumergimiento en agua caliente de las raíces infestadas son empleados

para reducir las poblaciones de nematodos. (MATAMALA, S. 2006)

Control biológico. Los nemátodos son atacados por numerosos

organismos, tales como hongos de los géneros Arthrobotrys, Dactylaria,

Dactylella y Trichothecium. También los nemátodos saprófitos, ácaros,

collembolos y amebas, pueden destruir nematodos fitoparásitos.

(MATAMALA, S. 2006)

Materia orgánica. La incorporación de materia orgánica, (guano de

gallina, cabra, vacuno) causa una disminución substancial de las larvas

del nematodo de los citrus a los 90 días de la aplicación. Por lo general

es recomendable combinar una aplicación de nematicida (en primavera)

con una de guano (en invierno), para obtener los mejores resultados.

(MATAMALA, S. 2006)

Barbecho. Consiste básicamente en dejar un suelo sin cultivar por un

cierto período, principalmente durante los meses de primavera y verano.

Todo ello, por supuesto, removiéndolo periódicamente. (MATAMALA, S.

2006)

Control químico. El control químico con fumigantes y no fumigantes fue

la primera estrategia de control que se utilizó en California. La

fumigación de preplantación con 1,3 dicloropropeno se recomienda

cuando un cultivo se arranca y en los tres años siguientes se establece

un cultivo susceptible o tolerante. Otros químicos como bromuro de

metilo y cloropicrina pueden también usarse en viveros o alguna zona

puntual o donde además hay problemas de hongos. Dentro de los

nematicidas no fumigantes se encuentran el grupo químico de los

organofosforados como fenamiphos (Nemacur) y etoprofos (Mocap), así

como también el grupo de los carbamatos, entre los cuales se

encuentran aldicarb (Temik), oxamil (Vydate) y carbofuran (Furadan).

(MATAMALA, S. 2006)

2. Diagnóstico del nemato de los cítricos.

Daño y sintomatología

El nematodo de los cítricos causa síntomas poco específicos y difíciles de

diagnosticar. La presencia del nematodo puede ser confirmada por análisis

microscópico de suelo o de raíces. Cuando las raíces tienen un alto grado de

infestación se presentan llenas de incrustaciones de suelo difíciles de lavar con

agua corriente, situación que es provocada por el material gelatinoso que la

hembra secreta durante la producción de los huevos. (MATAMALA, S. 2006)

A medida que la población se incrementa, se aprecian síntomas en la parte

aérea, tal como brotes más cortos, mayor pérdida de hojas, clorosis, falta de

vigor, todo lo cual se traduce en rendimientos menores y pérdida de calidad.

Estos síntomas son normalmente más marcados en la parte superior de las

plantas. (MATAMALA, S. 2006)

El daño producido por T. semipenetrans normalmente es incrementado por la

presencia de otros organismos en el suelo que invaden los sitios de infección,

tal como Fusarium oxysporum, F. solani y Phytophthora spp. Generalmente las

condiciones ambientales que afectan a las plantas, como baja fertilidad,

salinidad o fluctuaciones extremas de humedad incrementan el daño producido

por el parasitismo del nematodo de los cítricos. En suelos salinos, las plantas

atacadas absorben una mayor cantidad de Na y disminuye la absorción de

elementos menores como Zn, Mn y Cu. (MATAMALA, S. 2006)

El efecto más serio y rápido de los nemátodos sobre el crecimiento y

producción de los cítricos, ocurre cuando árboles jóvenes se plantan sobre

antiguos suelos de cítricos altamente infestados con el nematodo. Estos

árboles jóvenes muestran síntomas claros de decaimiento. Cuando el

nematodo coloniza nuevos suelos de cítricos, es posible que la infestación no

se detecte en muchos años (10-50). Cuando el suelo ha sido fumigado, los

síntomas del nematodo se notan a partir de diez años después. (MATAMALA,

S. 2006)

Considerando que no todos los huertos citrícolas son económicamente

dañados por este parásito, se debe a que la actual reducción en las

producciones de cítricos en el mundo debido a Tylenchulus semipenetrans

fluctúa entre 8,7 a 12,2%.(MATAMALA, S. 2006)

Nivel critico

El nivel crítico de infestación para el “nematodo de los citrus” (Tylenchulus

semipenetrans) en limoneros, naranjos, pomelos y mandarinos adultos, es de

alrededor de 7000 ejemplares juveniles por 250 gramos de suelo. Sobre este

nivel comienza una restricción del crecimiento en las raicillas con

desprendimiento de corteza radicular, muerte de ramillas terminales, clorosis

en hojas, defoliación, frutos pequeños y disminución de la producción.

(MATAMALA, S. 2006)

Nivel poblacional de Tylenchulus semipenetrans en las variedades de mandarinas Satsuma, Kara y malvasito

Fuente: DULANTO, P. & CARBONELL, E. 1999. Niveles poblacionales de

Tylenchulus semipenetrans en el cultivo de mandarina del sector Esperanza

Baja, Huaral, Lima, Perú. Revista Peruana de Entomología. 47: 97-102.

3. Control biológico de nematodos con hongos y bacterias.

Hongos nematófagos

Los hongos nematófagos son microorganismos con la capacidad de atacar,

matar y digerir nematodos (adultos, juveniles y huevos). Aparte de su habilidad

nematófaga, muchos de estos hongos pueden también vivir saprofíticamente

en materia orgánica muerta, atacar a otros hongos (micoparásitos) y colonizar

raíces de plantas como endófitos. Hay más de 300 especies de hongos

nematófagos descritos, encontrados por todo el mundo, incluyendo las

regiones polares. (PIEDRAS, 2007)

Los hongos son habitantes del suelo; generalmente son más frecuentes en

suelos con elevado contenido en materia orgánica. La mayoría de los

nematodos fitopatógenos vive en el suelo y ataca a las raíces de plantas. La

posibilidad de usar hongos nematófagos para el control biológico de nematodos

fitopatógenos está siendo por tanto investigada. (PIEDRAS, 2007)

¿Cómo atacan los hongos nematófagos a los nematodos?

Los hongos nematófagos se dividen en cuatro grupos, dependiendo de su

modo de infectar nematodos fitoparásitos. El resultado de la infección es

siempre el mismo: un nematodo completamente digerido. Los nutrientes

provenientes de los nematodos son utilizados para formar nuevas estructuras

fúngicas (hifas, esporas, etc.). (PIEDRAS, 2007)

Hongos atrapadores de nematodos: Estos hongos forman varios tipos

de órganos atrapadores en sus hifas. Son medios o buenos saprotrofos,

y en muchos casos la formación de las trampas debe ser inducida por

los propios nematodos. Hay dos mecanismos diferentes en la función de

las trampas: adhesivos y mecánicos. Sea cual sea el mecanismo, el

hongo penetra la cutícula del nematodo por la trampa y forma el bulbo

de infección dentro del nematodo, a partir del cual las hifas tróficas

crecen dentro del cuerpo y digieren sus contenidos. Géneros comunes

de hongos atrapadores de nematodos son Arthtrobotrys y

Monacrosporium. (PIEDRAS, 2007)

Hongos endoparásitos: Los endoparásitos utilizan sus esporas para

infectar nematodos. Estos hongos son a menudo parásitos obligados de

nematodos, y fuera del cuerpo infectado del nematodo aparecen solo

como estructuras de diseminación. Las esporas de estos hongos pueden

ser zoosporas móviles (como las de Catenaria spp.) que se enquistan

sobre el nematodo, adhiriéndose a él y penetrando la cutícula, conidios

adhesivos (por ejemplo en Drechmeria coniospora) o conidios que son

ingeridos (Harposporium spp.) por los nematodos bacteriófagos. Algunos

ejemplos son los: Hongos productores de toxinas: el hongo más común

de este grupo es el descomponedor de madera Pleurotus ostreatus (seta

yesquera) y otros Pleurotus spp. Las hifas de estos hongos, unos “tallos”

cortos que contienen una gota de toxina, tras ponerse en contacto con la

toxina, el nematodo es rápidamente inmovilizado y las hifas del hongo

crecen quimiotrópicamente (dirigidas) a través de la boca del nematodo,

que como en el caso de los anteriores hongos nematófagos, es digerido.

(PIEDRAS, 2007)

Otros resultados más recientes:

Recientemente, los estudios sobre control biológico se han ampliado al

nematodo de los cítricos, Tylenchulus semipenetrans. Una prospección

realizada en la zona citrícola de Cataluña, para determinar los enemigos

naturales asociados a T. semipenetrans ha puesto de manifiesto la presencia

de hongos parásitos de hembras, huevos o larvas del nematodo en el 69% de

estas; hongos depredadores formadores de trampas en el 29% de las parcelas,

y Pasteuria en el 50% de las parcelas. (PIEDRAS, 2007)

Las especies fúngicas encontradas más frecuentemente como parásitas de

huevos han sido Fusarium solani, Cylindrocarpon cylindroides y Paecilomyces

lilacinus. Esta especie es la más frecuente y abundante en cítricos y el único

enemigo natural de nematodos que se produce comercialmente. En la

actualidad, se investiga el potencial de estos hongos parásitos de huevos como

agentes de control biológico de T. semipenetrans, así como el efecto

antagonista de los metabolitos secundarios que producen. Se ha desarrollado

un modelo que predice el máximo nivel de parasitismo que podría alcanzarse

en las parcelas infestadas por T. semipenetrans en la zona citrícola de

Cataluña, el cual predice que este es 45% y sucede cuando los niveles de

hembras son máximos y los niveles de huevos son mínimos. Esta situación

tiene lugar en primavera y verano en la zona estudiada. (PIEDRAS, 2007)

4. Diagnóstico de densidad poblacional del nematodo de los cítricos, incluir cuadro o grafica de intensidad de daño o punto crítico

Muestreo

Una vez se haya observado síntomas en el cultivo de cítricos que indican una

posible o probable infestación con nematodos, el paso siguiente es tomar

muestras de las plantas afectadas y del suelo alrededor de las raíces de las

mismas. Posteriormente, éstas se llevan a analizar al laboratorio para

determinar que nematodos se encuentran presentes, y si es posible, determinar

también sus densidades poblacionales. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Las características del suelo que se relacionan a continuación tienen

implicaciones en la forma de realizar el muestreo y por tanto se deben tener en

cuenta:

La distribución en agregados de los nematodos debido al sistema radical

de la planta huésped y el comportamiento estacional del nematodo.

Historial del mismo

Áreas plantadas con diferentes variedades

Humedad del suelo

Compactación del suelo

Tipo de suelo

Temperatura y cambios estaciónales.

Herramientas para el muestreo

Entre ellas, pala, azada, pala de mano, destornillador, barreno, cuchillos (para

cortar raíces), tijeras, bolsas de plástico de polietileno, etiquetas. El barreno

debe tener una caña de 20–30 cm de longitud y 20–25 mm de diámetro, puede

ser completamente cilíndrico o semi-cilíndrico. Los barrenos semi-cilíndricos

facilitan el sacar del barreno la muestra de suelo recogida. También se necesita

rotuladores para etiquetar las bolsas de las muestras, lápiz y cuaderno para

anotar los datos. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Número de muestras

Tomar un número suficiente de muestras para asegurarse de que son

representativas de la situación del campo. Cuanto mayor sea el número de

sub-muestras /barrenos combinadas por cada muestra que se tome en un

campo, mayor exactitud tendrá la evaluación. Sin embargo, es preciso alcanzar

un equilibrio entre el tiempo necesario para tomar las muestras y los medios

disponibles. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

El procedimiento de muestreo y el número de muestras tomadas debe tener en

cuenta la variación o agregación del nematodo. De un área de 0,5 hectáreas,

tomar un mínimo de 10 sub-muestras y como máximo de 50. Combinar las sub-

muestras para conseguir una muestra compuesta que represente el área del

campo muestreada. Al combinar las muestras de esta forma se facilita su

conservación ya que se mantiene la temperatura y humedad de las mismas.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Diseño del muestreo

Los nematodos raramente están distribuidos de forma uniforme en el campo, y

por tanto las muestras deben tomarse de varias zonas del campo. Recoger

muestras por separado de zonas con crecimiento pobre y de zonas con

crecimiento relativamente bueno donde estas diferencias sean obvias para

poder compararlas. Seguir siempre el mismo procedimiento y modelo en la

recogida de muestras durante los muestreos y experimentos para que las

comparaciones entre campos, parcela, tratamientos, etc. tengan significado.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

El procedimiento de muestreo puedes ser al azar o sistemático. El muestreo al

azar no se adecua a la distribución natural del nematodo en manchas o

parches y solo es representativo si el área de muestreo es pequeña. El

muestreo sistemático representa un modo más estructurado de tomar muestras

ya que considera la naturaleza del campo y la distribución del nematodo.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Época de muestreo

La época o momento óptimo de muestreo en el cultivo de cítricos está

relacionada con la fase de crecimiento del cultivo y el objetivo del muestreo

(predictivo o diagnóstico). El muestreo predictivo se realiza al principio de la

estación, antes de plantar o justo en el momento de plantar, o bien, al finalizar

el cultivo precedente para determinar el número de nematodos (densidad

poblacional). (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Muchas especies de nematodos incrementan sus densidades poblacionales

hasta alcanzar niveles altos durante la campaña de los cítricos y éstas

densidades poblacionales se reducen durante los periodos de verano (estación

seca). Por tanto, las muestras deberán tomarse idealmente a mitad de la

campaña y/o al finalizar la cosecha con fines de diagnóstico. Los cítricos se

pueden muestrear durante el periodo de crecimiento activo de la planta o árbol,

es decir, durante la estación lluviosa/crecimiento para identificar el problema.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Para Tylenchulus se realiza una recolección de muestras de raíces

Las raíces se pueden recolectar al mismo tiempo y de los mismos puntos que

las muestras de suelo, y en general, se deben guardar en la misma bolsa que

el suelo, ya que de esta forma, el suelo ayuda a conservar las raíces evitando

su desecación. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Generalmente, 25–100 g de raíces por muestra compuesta son suficientes.

Evitar tomar muestras de plantas muertas o aquellas que estén en avanzado

estado de senescencia, ya que los nematodos habrán emigrado de estas

plantas a otras fuentes de alimento. En el caso de cultivos con escaso porte,

todo el sistema radical de una planta puede constituir una sub-muestra.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Arrancar la planta del suelo con sus raíces con la ayuda de una pala o azada

de forma que al levantar las raíces una porción considerable del sistema radical

permanezca intacto y teniendo cuidado de no romperlas, depositarlas en la

tierra. Después de sacudir el suelo de las raíces, tomar al azar sub-muestras

de las raíces con un cuchillo o tijeras. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Extracción de nematodos

El paso siguiente en el proceso es extraer los nematodos de las muestras. Las

extracciones deben realizarse tan pronto como sea posible después de haber

recolectado las muestras dado que éstas se deterioran con el paso del tiempo.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Existen cuatro técnicas básicas de extracción:

Bandejas de extracción

Maceración de las raíces y hojas

Tamizado

Incubación.

Manipulación de los nematodos

Los nematodos son difíciles de manipular debido a su tamaño microscópico

particularmente para principiantes. Casi siempre es necesario manipularlos en

un medio líquido, generalmente, agua. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

La utilización de una lupa de disección en lugar de un microscopio ayuda en el

proceso. Es preciso seleccionar los nematodos individualmente para establecer

cultivos puros o para realizar preparaciones para su identificación, y por tanto,

es preciso “pescarlos”. Cuando se manipula nematodos procedentes de

cultivos puros, se pueden transferir tandas de especimenes con una pipeta

capilar de crital. Incluso, se pueden manipular y transferir nematodos

individualmente estrechando la punta de la pipeta capilar utilizando un mechero

Bunsen. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Recuento de los nematodos

Los nematodos extraídos se pueden observar y contar utilizando una lupa

binocular o un microscopio el tener acceso a ambos es lo ideal. Es fundamental

disponer de una buena iluminación de calidad (luz transmitida situada debajo

de la platina). Un aumento de 40 veces generalmente es adecuado (p.e. un

objetivo de 4x combinado con un ocular de 10×), pero también se puede utilizar

un microscopio (p.e. utilizando un objetivo de 10×) para cuando los nematodos

están en malas condiciones o son difíciles de identificar. Las lupas de disección

permiten mayor capacidad de maniobra y profundidad de foco, especialmente

para muestras sucias. Los nematodos que no puedan identificarse en la

cámara de recuento al aumento que se utiliza para contar, o a mayor aumento

utilizando el microscopio, se deben pescar individualmente y montarlos sobre

un porta-objetos para su identificación al microscopio utilizando mayores

aumentos. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Las muestras concentradas a 5 ml se pueden contar en su totalidad, pero si la

densidad poblacional del nematodo es muy alta o la muestra está muy sucia,

se contará una porción (alícuota) de la misma diluyendo con agua tantas veces

como sea necesario. Sin embargo, se debe tener cuidado y asegurarse de que

se ha contado una porción representativa del total de la muestra, lo cual se

consigue mezclando concienzudamente la muestra antes de tomar la alícuota.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Estimación de las densidades poblacionales de los nematodos

Extraer los nematodos de un peso conocido de material vegetal o

volumen de suelo mediante uno de los métodos descritos anteriormente.

Concentrar la suspensión extraída en un determinado volumen conocido

utilizando una probeta o vaso graduado (p.e. 10 ml).

Agitar la suspensión inmediatamente antes de tomar una alícuota de la

misma.

Utilizar una pipeta con el extremo ancho para tomar las alícuotas para

evitar que los residuos la obturen. Se puede cortar las puntas de las

pipetas si estas son demasiado estrechas.

Pipetear la alícuota con cuidado en la cámaro o placa de recuento

evitando las salpicaduras.

Si hubiera muy pocos nematodos en la muestra, contar todo el volumen

de la suspensión.

Si la densidad poblacional del nematodo es alta, contar los nematodos

en una alícuota (p. e. en 1 o 2 ml). En ocasiones es necesario diluir la

suspensión para facilitar el recuento, por ejemplo, doblando el volumen

de la misma.

Contar todos los nematodos en la cámara de recuento siguiendo

sistemáticamente el mismo recorrido con la ayuda de la cuadrícula

marcada en el fondo de la placa.

Algunas veces los nematodos flotan en la superficie de la suspensión,

esperar a que sedimenten, o bien, añadir, una gotita muy pequeña de

jabón líquido para solucionarlo.

Utilizar un contador (idealmente un contador múltiple) para contar los

diferentes géneros de nematodos presentes en la muestra, y si no se

dispone de un contador, anotar en un papel los nematodos contados

haciendo una raya o trazo.

Después del recuento, devolver la alícuota contada a la suspensión de

donde se tomó.

Repetir el recuento utilizando 2–3 alícuotas por muestra y después

calcular la media de las alícuotas contadas antes de calcular el número

total de nematodos por muestra.

La media del número de nematodos contados en cada alícuota se debe

multiplicar por el volumen total de la suspensión para calcular el número

total nematodos presentes en el volumen de suelo o peso de material

vegetal a partir del cual se realizó la extracción (p.e. 100 ml de suelo o 5

g de raíces).

Estimación de los síntomas de daño en la planta

El daño causado por el nematodo se puede evaluar al mismo tiempo que se

recolectan las muestras en el campo. La cantidad de raíces dañadas se estima

visualmente (como un porcentaje) utilizando un índice para su estimación.

Generalmente, existe una buena correlación entre la estimación del daño y las

pérdidas de producción. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

La estimación del daño proporciona una indicación rápida de ese daño en el

preciso momento en que se realiza la estimación. En aquellos lugares donde

no existe un equipamiento básico de nematología, esta estimación puede ser el

único medio de evaluar el daño. La estimación del daño también puede ser de

ayuda en la identificación de resistencia o tolerancia en ensayos de evaluación

de variedades. (COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

El número de plantas a evaluar puede ser desde una o dos hasta 25 o más,

dependiendo del cultivo y del área que se está evaluando, y también depende

de si agricultor quiere asumir un riesgo bajo o alto en el proceso de evaluación.

La estimación la debe realizar una sola persona o un número reducido de

personas para que el resultado de la estimación sea consistente. Se

recomienda la utilización de un índice que refleje el criterio de estimación para

consultarlo regularmente y mantener así la consistencia de la estimación.

(COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010)

Nivel crítico del nematodo de los cítricos

El nivel crítico de infestación para el “nematodo de los citrus” (Tylenchulus

semipenetrans) en limoneros, naranjos, pomelos y mandarinos adultos, es de

alrededor de 7000 ejemplares juveniles por 250 gramos de suelo. Sobre este

nivel comienza una restricción del crecimiento en las raicillas con

desprendimiento de corteza radicular, muerte de ramillas terminales, clorosis

en hojas, defoliación, frutos pequeños y disminución de la producción.

(MATAMALA, S. 2006)

BIBLIOGRAFÍA

COYNE, D. & CLAUDIUS, B. 2010. Nematología práctica: Una guía de campo

y laboratorio. Instituto Internacional de Agricultura (IITA). 93 p.

DULANTO, P. & CARBONELL, E. 1999. Niveles poblacionales de Tylenchulus

semipenetrans en el cultivo de mandarina del sector Esperanza Baja, Huaral,

Lima, Perú. Revista Peruana de Entomología. 47: 97-102.

MATAMALA, S. 2006. Determinación del efecto de los Elicitores Quitosano y la

proteína HARPIN en limoneros afectados por Tylenchulus semipenetrans, en la

localidad de Panquehue. Universidad de Chile. Tesis. Ing. Agrónomo. Chile –

Panquehue. 47 p.

PIEDRAS, R. 2007. Manejo biológico de nematodos fitoparásitos con hongos.

Tecnología en Marcha. Vol. 21-1. P. 123-132