Cuaderno Inmunología General Otoño 2010
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Transcript of Cuaderno Inmunología General Otoño 2010
InmunologíA
GeneraL
Por: Francisco Riveros N.
Otoño 2010
Universidad Mayor
16/03/10
Evaluaciones:
3PP's
o 1° 25%
o 2° 25%
o 3° 30%
Seminarios (entran como materia en pp's) 10%
Promedio controles de lectura 10%
Powerpoints
o hasta el jueves en la mañana el profe revisará las presentaciones, después de eso no
Buscar cosas en google académico o en dominios con .edu
Las pruebas de inmunología general son los lunes en la tarde, durante la hora de seminario
Inmunología:
Ciencia que estudia todos los mecanismos fisiológicos de defensa, específicas e inespecíficas, a fin de mantener la integridad y homeostasis (balance, equilibrio) del organismo animal, identificando y diferenciando lo propio de lo extraño (antígeno) y destruyendo éste último
Anteriormente ligado a la microbiología
Identificación: o reconocimiento del cuerpo, lo propio
o se diferencia lo extraño
El 95% de los linfocitos creados son eliminados naturalmente por el cuerpo
Solo el 5% son inmunológicamente maduras y activas
El sistema inmune tiene que ser tolerante con lo propio, no existe tolerancia con lo extraño
Enfermedades autoinmunes ---> se pierde la tolerancia a lo propio
Leucocitosis: alza en n° de leucocitos
Leucopenia: baja en n° de leucocitos
Fagocito de primer ataque
o rápido, peón, muchos, débiles, Polimorfo nuclear NEUTROFILO
Fagocitos de segundo ataque
o más lento, caballería, MONOCITO
Células más inmaduras son normalmente más grandes, con núcleos más claros
Respuestas Inmunes:
Inmunidad innata ---> natural o inespecífica
Inmunidad adaptativa ---> específica
La primera fase de cualquier respuesta inmune consiste en el reconocimiento [del agente agresor] del patógeno o del material extraño, a fin de iniciar reacción para eliminarlo
Células del Sistema Inmune: (se generan en la médula ósea – tejido hematopoyético)
Eosinofilia:
Aumento de eosinofilos en la sangre
Frecuente en alergias y parasitismos
Kuppfer:
Importante porque el hígado trae en la sangre desechos que deben ser eliminados
Células Mieloides: Granulociticas
-neutrofilos (fagocitos) -basófilos (inflamatorio no fagocito) -eosinófilos (inflamatorio citotoxico) Monociticas
-macrofagos (tejidos) -langerhans (piel) -kuppfer (hígado) -Células dentríticas?
Células Linfoides: Linfocitos T
-helper -citotóxicas
-supresoras
Linfocitos B
-células plasmáticas
Células dentríticas?
22/03/10
Componentes del Sistema Inmune
*Acción contra lo propio ---> Lupus ---> ataca al Colágeno, la cual es una proteína estructural, en muchas (casi todas) las células. Los anticuerpos atacan al colágeno y también a trozos de éste. Acción del Sistema Inmune Benéficos:
Protección contra agentes invasores
Eliminación de células propias alteradas
Deletéreo:
Inflamación
Acción contra lo propio (autoinmunidad) ‡ tolerancia inmunológica ---> tolera propio
Sobrerreacción (hipersensibilidad) – Alergia tipo 1
Sobrerreaciones:
Rash cutáneo: enrojecimiento en pintita en la piel
Shock anafiláctico: inflamación sistémica por hipersensibilidad
Puntos cardinales de la inflamación:
Dolor
Rubor
Tumor (aumento de volumen)
Calor
Pérdida de función
Vacunas polivalentes:
Tienen diferentes antígenos
Con éstas vacunas se corre el riesgo de que el organismo no actúe con la misma eficiencia ante el antígeno
*Estrés ---> libera sustancias, entre ellas corticodes, los cuales afectan la respuesta inmune. Cuando el estrés es muy fuerte, pueden proliferar células cancerígenas. *El corticodes tiende a generar retención de líquidos
Innato (inespecifico o natural)
Humoral -serie de moleculas
-complemento: mecanismo de defensa
-interferón
-factor necrotico tumoral -lisozima (lagrimas
Celular -macrofagos
-neutrofilos fagocitosis
Adaptativo (especifico)
Humoral -anticuerpos o inmunoglobulinas
Celular -linfocitos T
-más otras células efectoras que colaboran con gran asociación
23/03/10
Inmunidad Innata v/s Adaptativa
Innata: -independiente Ag (antígeno) -inmediata
-Ag inespecífico
-sin memoria inmunológica
Adaptativa: -dependiente Ag (sin antígeno, no hay respuesta inmune adaptativa) -periodo latencia (varía según edad, estado de salud, etc.) -Ag específico
-memoria inmunológica
Neutrófilo Macrófago
Multiplicación y especialización (linfocitos B en celulas plasmáticas producen inmunoglobulinas)
Componentes del Sistema Inmune
*Los camélidos tienen eritrocitos nucleados!!
Mecanismos Efectores – Innata
Lugar Componente Función
Piel Células escamosas, glándulas sebáceas y sudoríparas
Descamación, ácidos grasos
Tracto Gastro-intestinal (GI) Células columnares Peristalsis, pH, sales biliares, ácidos grasos
Pulmón Mucus, cilios Clearance ciliar, surfactante
Ojos – Nasofaringe Mucus, saliva, lagrimas Flushing, lisozima (enzima preformada, destruye
peptidoglicanos bacterianos)
Sangre – Órganos linfoides Fagocitosis, células K, NK / LAR (células activadas por
linfoquinas ---> citoquinas provenientes de linfocitos)
Fagocitosis / destrucción intracelular, citolisis directa y
dependiente de Ac (anticuerpos)
Innato Adaptativo
Barreras físicas -piel, vellos intestinales, cilios pulmonares, etc.
Factores solubles -citoquinas (mensajeras), interferón, complemento (preformadas), etc.
Células -fagocitos*, células NK, eosinofilos (citotóxicas), células K
*Función de fagocitosis
-macrófagos -neutrófilos
Killer (citotóxica) tiene una condición: el antígeno debe estar rodeado de inmunoglobulinas
Cualquier célula que tenga receptores para la región FC (fracción cristalizable) de las inmunoglobulinas puede actuar como célula K
No
Inmunoglobulinas
Linfocitos T y B
Suero y líquidos tisulares Lactoferrina, transferrina (transportadores de fierro)
Deprivación de fierro (Muchas bacterias usan fierro para multiplicarse, así que si se les quita el fierro, tienen
menos posibilidades de proliferar)
Interferón, FNT-a (factor necrótico tumoral α)
Proteínas antivirales y activación fagocítica
Fibronectina / complemento Opsonización, fagocitosis aumentada, inflamación
Opsonización: proceso por el cual un agente bacteriano que puede generar una agresión del sistema, es rodeado por “opsoninas” (Ac, etc.), y producto de ello la célula fagocítica incrementa su apetito, la cual se incrementa en forma inespecífica en una inflamación. ---> Como ketchup a las papas fritas.
En la superficie de los linfocitos B, hay inmunoglobulinas de membrana (son chasconas)
Van hacia afuera las regiones FAB (hipervariable), la cual interactúa directamente con el antígeno
El linfocito T para reconocer el antígeno necesita una Célula Presentadora de Antígeno (CPA), el cual podría ser un linfocito B, pero no es su función principal ser CPA (la cual es dar lugar a las células plasmáticas para la producción de inmunoglobulinas)
El macrófago podría ser CPA, pero las Células Dendríticas Interdigitales son las CPA por excelencia
Hemobartonella felis ---> parásito intracelular
Litiasis (cálculos) biliares ---> obstruye paso de salida de la bilis, causando hiperbilirrubinemia, a su vez causando ictericia, sin necesariamente ser un problema hepático.
29/03/10
Se debe volver a la homeostasis (con apoptosis) después del crecimiento y derrota de los antígenos para evitar una inflamación crónica que daña progresivamente el tejido de manera irreparable.
Tipos de Respuesta Inmune Adaptativa
*CPA: célula dendrítica interdigitante
Suero es la parte que contiene proteínas solubles en el plasma sanguíneo
TCR ---> receptor de los linfocitos T ---> interactúa con un macrófago (CPA), formando un complejo, para generar moléculas de coestimulación, para poder activar a un linfocito T helper.
El helper libera sustancias ---> linfoquinas (citoquinas provenientes de linfocitos T) hacia un receptor de linfoquina del macrófago, y así se estimula la actividad y capacidad fagocítica del macrófago, estimula la capacidad de la liberación de sustancias.
Después de la lisis, los viruses se liberan, para que actúen las inmunoglobulinas, ya que no pueden actuar intracelularmente.
Células linfoides:
1. Linfocitos B
2. Linfocitos T Helper (Th) o colaboradoras
3. Linfocitos T Citolíticas (Tc) 4. Linfocitos Grandes Granulares (LGG)
*95% de Natural Killers (NK) son LGG
*Cáncer ---> reacciones citotóxicas celulares predominan en su combate.
Inmunidad Humoral
Bloquea infecciones y elimina a los microbios extracelulares
Inmunidad mediada
por células
Linfocito T Helper
+
Macrófago
Activación de macrófagos para matar a los microbios fagocitados
Lisis de células autólogas para interrumpir el ciclo de reproducción del virus al destruir su reservorio de infección
Célula autóloga infectada por virus
+
Linfocito T citolítica
30/03/10 Linfocitos: Células B:
Cada linfocito B está programado genéticamente para codificar un receptor de superficie específico de un antígeno determinado.
Si reconoce al antígeno, se multiplica y diferencia a célula plasmática para la producción de inmunoglobulinas (anticuerpos)
Células T: según función
Th: interacción con célula B (multiplicación, diferenciación, producción anticuerpos)
Th: interacción con fagocitos mononucleares (destruyen patógenos intracelulares)
Tc: destrucción célula huésped infectadas por virus u otro patógeno intracelular
LGG: reconocen células huésped que carecen o han perdido expresión de ciertas moléculas (antígenos) CMH (células tumorales infectadas por viruses)
Maduración de los Linfocitos:
*Linfocitos B ---> Inmunidad adaptativa humoral *Linfocitos T ---> Inmunidad adaptativa celular ---> Existe maduración también (no solo en el Timo) sino que en la piel y en el epitelio intestinal ---> Aves ----> se encuentran en la Bursa de Fabricio en la cloaca
La maduración de los linfocitos ocurre en gran parte en el tejido linfático asociado a la piel
La maduración implica que el linfocito esté listo para poder defender
Clases de Linfocitos:
Linfocito B ---> neutralización, fagocitosis, activación del complemento ---> (respuesta adaptativa)
Linfocito T Helper ---> activación de macrófagos
---> inflamación (neutrófilo) (respuesta adaptativa) ---> activación de linfocitos T y B (diferenciación)
Linfocito T Citolítica ---> matar células infectadas intracelularmente ---> (respuesta adaptativa)
Natural Killer ---> matar células infectadas intracelularmente ---> (respuesta innata)
Linfocitos T:
Para su activación deben reconocer al antígeno (con el uso del CPA: célula presentadora de antígeno – CMH)
CMH: moleculas especializadas codificadas en un conjunto de genes denominado complejo de mayor (o principal) histocompatibilidad
Linfocito T posee receptor específico TCR que reconoce: péptido Ag-CMH ---> activación linfocito T por moleculas de coestimulación
Linfocito activado libera citoquinas (proteínas solubles): transmisión de señales a otras células o interactúa directamente con otras células
*Reticulocitos: eritrocitos nucleados por inmadurez
*Encontrar compatibilidad sanguínea es más fácil que encontrar compatibilidad de órganos, ya que la sangre tiene sus antígenos de membrana mucho menos especializadas que los órganos
Célula autóloga ---> CMH I CPA ---> CMH I y CMH II ---> pueden de tener un péptido antigénico para llevarlo a la membrana CMH II
La célula autóloga, si está infectada, puede expresar un CMH I con una anormalidad, gracias a péptidos virales adheridos a sus antígenos de membrana normales, los cuales toman contacto con las NK, y al no poder expresar su inhibidora de apoptosis (como normalmente lo haría, en un caso normal), la NK detecta un problema y la lisa
Células Citotóxicas:
Linfocito T Citotóxico (Tc)
Linfocito granular grande (LGG)
Células natural killer (NK)
Polimorfonucleares eosinófilos
Todas éstas células destruyen a las células afectadas o alteradas a través de la liberación de sustancias de los gránulos intracelulares en la cercanía de ella (los citotóxicos liberan también sustancias tóxicas contenidas en el citosol).
*Cél K ---> Adcc (citotoxicidad dependiente del Ac.) ---> ~~ Antibody dependent on citotoxic cells
Células mediadoras de Inflamación:
Basófilos (circulantes) / Mastocitos o células cebadas (tisulares):
Contienen gran cantidad de gránulos
Pueden sintetizar y secretar mediadores que controlan las respuestas inmunes
Mastocitos están cercanos a vasos sanguíneos y ejercen función sobre endoteliocitos
Plaquetas: trombogénesis o Ag-Ac induce activación con liberación de mediadores de la inflamación
*Células cebadas ---> ej. Adventicia conectiva de arteriolas
Fx: quimiotaxis leucocitaria y de mediadores solubles hacia el punto de infección
Mediadores liberan histamina a los mastocitos en sus receptores H1, el cual causa relajación (vasodilatación), aumentando la permeabilidad a su vez causando edema (exceso de líquido intersticial).
Mediadores solubles: (sérico ---> suero sanguíneo, plasma sin elementos figurados que coagulan)
Inmunoglobulinas
Citoquinas
Proteínas de fase aguda
Complemento
*Las citoquinas son liberadas hacia el hígado para sintetizar las proteínas de fase aguda, la cual es inflamatoria (ej. PCR). * Las inmunoglobulinas, las proteínas de fase aguda y el complemento son las moléculas que promueven la fagocitosis, es decir, se comportan como opsoninas.
05/04/10
Antígeno: o cuerpos extraños al organismo o toda respuesta inmune comienza con un reconocimiento del antígeno o incapaz por sí mismo de unirse a un BCR o un TCR, pero si puede unirse a un linfocito T
activado
Inmunógeno: o cuerpo capaz de activar una respuesta inmune, de despertar o capaz de unirse a un BCR o TCR (receptores de linfocitos B y T)
Hapteno: o molécula muy pequeña o incapaz de desencadenar una respuesta inmune o antígeno, pero no inmunógeno
Epítopo o Determinante Antigénico: o son algunos sectores de un antígeno que inducen reacción inmune o H1N1 ---> gripe porcina // H1N5 ---> gripe aviar o en un mismo microbio, pueden haber más de un tipo de epítopo
Anticuerpo: o glicoproteína o la producen células plasmáticas o éstas células las producen cuando hay presencia de inmunógenos
Tolerógenos: o antígeno reconocido para que ya no se reaccione ante su presencia
Factores que influencian la inmunogenicidad del inmunógeno
Carácter de extraño (inmunógeno) o Xeno (de especies distintas) ---> xenoantígeno
injerto de piel de cerdo a un humano o Alo (de la misma especie, de un individuo distinto) ---> aloantígeno
injerto de piel de un humano a otro o Auto (del mismo individuo) ---> autoantígeno
injerto de piel del mismo individuo
Tamaño o macromoléculas
Composición Química
o Estructura primaria ---> determinante de secuencia
o Estructura secundaria Proteínas o Estructura terciaria Determinantes conformacionales o Estructura cuaternaria
Forma Física o Particuladas > soluble o Denaturada > nativa
Degradabilidad o Ag procesado por CPA o Hidratos de carbono no son degradables
Factores que influencian la inmunogenicidad
Contribución del Sistema Biológico
Genética o especies o individual
Edad o lentitud al tener muy poca edad o vejez
Factores que influencian la inmunogenicidad
Método de Administración
Dosis y Ruta o > subcutánea > intragástrica
Adjuvante o sustancias que aumentan la respuesta inmune a Ag
Naturaleza Química de los Inmunógenos
Proteínas (las mejores)
Polisacáridos
Ácidos nucleicos
Lípidos (los peores) o algunos glicolípidos y fosfolípidos pueden ser inmunogénicos (células T)
Tipos de de Antígenos
T – Independientes
Si el Ag es capaz de activar directamente sin linfocito T helper es un T – independiente
Polisacáridos
Propiedades
o estructura polimérica (se repite el epítopo en los monómeros) o activación policlonal células B:
positivo ---> tipo 1 (TI – 1) ---> capaz de activar muchos linfocitos B
negativo ---> tipo 2 (TI – 2) ---> monoclonal u oligoclonal o resistente a la degradación
o ejemplos: polisacárido pneumococo, lipopolisacárido
flagelos
Tipos de de Antígenos
T – Dependientes
Protéicos
Estructura
o epítopos son diferentes
Degradables
Ejemplos: o proteínas microbianas
o proteínas extrañas o propias alteradas
Conjugados Hapteno – Carrier
Definición: se tiene que unir a una macromolécula que le da la estructura y complejidad (carrier)
Estrucura
o determinantes nativos
o determinantes hapténicos
Depende del carrier, si es polisacárido o proteína si es T – independiente o T – dependiente
El carrier puede tener determinantes nativos (propios de la proteína o polisacárido), y además se puede tener determinantes de los haptenos conjugados con el carrier
Los haptenos se unen al carrier para poder generar una respuesta inmunológica
Determinantes Antigénicos
Reconocidos por Células B y Ac
Composición
o proteínas, polisacáridos, ácidos nucléicos
o determinantes de secuencia (lineares) o determinantes conformacionales
BCR las reconoce todas
TCR solo reconoce los determinantes de secuencia
06/04/10
Determinante Antigénico Reconocidos por células B y Ac.
Número o límitado (epítopos inmunodominantes) o superficies externas de los Ags.
Determinante Antigénico Reconocidos por células T
Composición o proteínas (algunos son lípidos) o determinantes de secuencia o procesado (no es directo) o presentación MHC ---> presentación de lípidos por MHC – like CD1
*solo los CPA expresan MHC II
Tamaño o 8 – 15 residuos
Número o ilimitado a aquellos que se puedan unir a MHC
*Un hepatocito tiene el gen del MHC II pero no lo expresa
Superantígenos
Definición o Antígeno capaz de producir una reacción enorme en el sistema inmune, en
comparación con otros antígenos o normalmente un antígeno activa una respuesta inmune de 1:104 linfocitos
o un super antígeno activa 1:4 linfocitos
Determinantes Reconocidos por el Sistema Inmune Innato
Sistema inmune adaptativo o determinante discreto o reacciona con patógeno específico
Sistema Inmune Innato o amplio patrón molecular o reacciona con una variedad de patógenos o patrón molecular asociado a patógeno (PMAP o PAMP (en inglés)) o patrón de reconocimiento de receptores (PRR)
Afinidad: o fuerza de enlace que se establece entre el antígeno y el anticuerpo
Avidez: o fuerza de unión debido a enlaces multivalentes
Anticuerpos se unen a antígenos por uniones no-covalentes; a mayor distancia entre ellos, menor afinidad
A mayor kd (constante de disociación) menor afinidad
Inmunoglobulinas
La mayoría son γ-globulinas, pero pueden ser α o β con
Función General de Inmunoglobulinas
Unión a Ag o puede ser protectiva o Valencia: sitio de unión de un Ac. con un epítopo (si es un punto de unión, la valencia es
1; si son dos puntos de unión, la valencia es 2; etc.)
Funciones efectoras o fijación del complemento o unión a varias células o inmunidad al feto o inmunidad de mucosa o hipersensibilidad inmediata o regulación de la respuesta inmune
Estructura Básica de Ig.
Ig – heterogéneos
Mieloma proteínas – homogéneas
Cadenas pesadas y ligeras
L = 23 – 25 kD
H = 5 – 77 kD
Puentes disulfuro o intercadena (intercatenarios) o intracadena (intracatenarios) o H 450 – 550 aa's; 3 – 15% carbohidratos o L 220 aa's; no contiene carbohidratos
Región variable y constante o VL y CL
o VH y CH
Región de Bisagra
Estructura de la Región Variable
Hipervariable (HVR) o región determinante de complementaridad (CDR)
Región de entramado
Fragmentos de las Ig.
Fab (fracción que se une al antígeno) o unión al antígeno o valencia = 1 o especificidad determinada por VH y VL
Fc (fracción cristalizable) o funciónes efectoras o *cadenas pesadas son identicas entre sí
Clases de Ig.
IgG – Gamma cadenas pesadas
IgM – Mu cadenas pesadas
IgA – Alpha cadenas pesadas
IgD – Delta cadenas pesadas
IgE – Epsilon cadenas pesadas
Tipos de Ig. (cadenas ligeras)
Kappa
Lambda: o Lambda 1 o Lambda 2 o Lambda 3 o Lambda 4
Nomenclatura Ig.
IgM (kappa)
IgA1 (lambda 1)
IgG
Heterogéneos
IgG
Propiedades: o alta concentración sérica o mayor concentración en espacio extravascular o transferencia placentaria o la más versátil
IgM
Estructura: o pentómero (19s) normalmente o dominio extra (CH4) o cadena J
Propiedades: o 3era Ig sérica o primera Ig sintetizada por el feto y las células B vírgenes o fija complemento o opsonizante
*Sólo los antígenos que no son polisacáridos pueden activar a las células B para producir más de una clase distinta cada vez que vuelva el antígeno, y quede el linfocito de memoria para clonación. Esto se llama conmutación de clase
o Ig aglutinante o se une a receptores Fc o Ig de superficie de células B
IgA
Sérico – monómero
Secreciones (sIgA) o dímero (11s) o cadena J o componente secretorio
2da Ig sérica
Mayor Ig de secreción (inmunidad de mucosas o local)
IgD
Monómero
Porción hidrofóbica (extremo ácido)
No fija complemento
IgE
Monómero
Dominio extra (CH4)
La menor proporción en el suero
Une a basófilos y células cebadas (no requiere unirse a Ag)
Reacción Alergica
Infecciones parasitarias (particularmente helmintos) o unión a receptor Fe de eosinófilos
no fija complemento
Isotipos, Alotipos e Idiotipos
Isotipos o variabilidad isotípica
Hay variaciones estructurales en la secuencia de aa. en la región constante de las cadenas H y L
Cadenas ligeras = kappa, lambda
Cadenas pesadas = mu, alpha, gamma.... Isotipos:
Son los determinantes antigénicos que caracterizan las clases y subclases de las cadenas pesadas y los tipos y subtipos de las cadenas ligeras
Importancia: o cuantificación de los isotipos o caracterización de tumores de células B o inmunodeficiencias
Alotipos:
Son determinantes antigénicos específicos para formas alélicas de los genes de Ig
Variabilidad genética entre individuos de la misma especie
Alotipos representan pequeñas diferencias de secuencia el aa L y H
Frecuencia: en algunas personas solamente
Genética (alelos) o co-dominancia, genes autosomales
Exclusión alélica: la decisión de un linfocito de seguir un alelo especifico por el resto de su existencia y ningún otro
Importancia: o monitoreo trasplantes de médula o medicina forense o test de paternidad
Estructura Básica de una Inmunoglobulina
Intracatenarios
Intercatenarios
Extremo amino Extremo ácido
Vh
Vh
Vl
Vl
Ch1
Ch2 Ch3
Ch1
Ch2 Ch3
Cl Cl
Dominio variable de cadenas pesada y ligera (V)
Unión a receptores
Dominio constante de cadenas pesada y ligera (C)
12/04/10 *Imprimir powerpoint para el profe! Inmunología a escala zoológica
Todos los organismos tienen algún sistema de defensa inmunológica
Unicelulares: marcadores de membrana y formación de geles de defensa
Invertebrados: innato
o celular celomocitos o hemomocitos
nódulos y encapsulación
citotoxicidad inespecífica (carece de memoria) o humoral
opsoninas, aglutininas
pentraxinas ---> proteína C reactiva
Vertebrados: o barreras fisico-quimicas
piel reflejo de la tos, estornudo, mucus
Evolución órganos linfoides
o timo: a partir de los condrictios
o ganglios linfáticos: reptiles ---> también parten los linfocitos T helper o aves y mamíferos: células de membrana
Ciclóstomos: complemento
Proteínas de fase aguda ---> opsoninas
Interferón: limita reproducción viral
Anfibios ---> solo tienen IgY (por peso molecular)
Lisozimas se han encontrado en insectos, moluscos, y equinodermos
13/04/10 Idiotipos:
Definición o determinantes antigénicos, únicos presentes en una molécula individual o en moleculas
de especificidad idéntica (mismas regiones hipervariables) o variabilidad del dominio variable, tanto la cadena pesada como la ligera o determinan especificidad del paratopo (Vh Vl) o idiotipos privados y públicos de reacción cruzada o idiotipo – Anticuerpo anti-idiotipo
Importancia o marcadores de región variable o regulación de la respuesta inmune o vacunas o tratamiento de tumores de células B
Vacunas
El objetivo de toda vacuna es inducir inmunidad especifica que evite la invasión de microorganismos, eliminar a los que han entrado y neutralizar las toxinas microbianas, la inmunidad debe ser duradera
Que sean inocuas, que sean baratas, fácil almacenaje, no puede producir autoinmunidad, ni hipersensibilidad
Dosis apropiada
Características químicas Inmunidad protectiva
Vía de administración
Tipos de vacunas Vacunas elaboradas por Biotecnología
1. Aislar gen específico e insertarlo en el ADN de ciertos microbios o células de mamíferos, se
convierten en “fábricas” que producen el antígeno deseado *a microorganismos muertos *a microorganismos atenuados Lo clásico (Mejor, pero con el peligro de presentar la patología) 2. Insertar gen o genes del antígeno deseado en el ADN de un virus vaccinia (ej. virus pox del
canario) y se inyecta, se produce respuesta tanto al virus como al antígeno que codifica los genes introducidos (vacunas recombinantes)
3. Vacunas de ADN: se localizan los genes de un antígeno de un antígeno, se clonan, insertan en
un plásmido y se inyectan, la célula del huésped expresará el antígeno deseado
Plásmido: molécula extracromosomal de ADN doble helicoidal, se replican en forma independiente
Transfección: transferencia del ADN del virus al de una célula propia (muscular, etc.)
4. Síntesis química de antígenos al conocer el gen que codifica un determinado inmunógeno se conoce la secuencia exacta de aminoácidos que lo componen (vacunas de subunidad) lo que constituye un antígeno purificado
5. Vacunas anti-idiotipo, el paratopo es un reflejo tridimensional del epítopo de un antígeno
(espejo)
Se usa el anti-idiotipo como vacuna porque da la respuesta inmune para producir los anti-anti-idiotipos, que también funcionan para los primeros antígenos, sin necesidad de tener el original
Génetica en la Inmunología
Historia
La misma región C se puede asociar con muchas regiones V
o IgG posee diferentes especificidades
La misma región V se puede asociar a muchas regiones C
o mismo idiotipo en IgG e IgM
Regiones C y V se codifican por genes separados
H y L son codificados por 3 familias de genes
Para H: para kappa y para lambda
Genes Familiares Cadena Ligera
Organización línea genética germinal
*genes cadena ligera lambda: n=30
*genes cadena ligera kappa: n=300
Reordenamiento y expresión genética
Genes Familiares Cadena Pesada
Organización línea genética germinal
*genes cadena pesada; Vn=1000 , Dn=15
Exones que codifican para dominios de cadena H están separadas por intrones
Reordenamiento y expresión genética
19/04/10 Inmunidad en Neonatos y Vacunaciones Polivalentes
Neonato: periodo e mayor riesgo, tiempo varía según especie
Inmunidad fetal o formación timo y órganos linfoides secundarios
o aparición de los linfocitos B e Ig's
o Gato: linfocitos maduros a los 42 dias
La vía por la que llegan las Ig maternas al feto depende de que tipo sea la placenta (en relación al grado de invasión de la placenta en el tejido materno), esto es porque si es, por ejemplo, una placenta hemocorial (primates, roedores) las Ig's de la madre pasarán directamente de su sangre a la sangre del feto.
Infecciones intauterinas: toxoplasmosis, lengua azul, rinotraqueitis infecciosa bovina, rubeola
Inmunidad neonatal o inmunidad pasiva (propia) o sistema inmune completo, pero inmaduro
o ayuda muchisimo el calostro (primera leche que secreta la madre, conteniendo muchos Ig's)
El cachorro solo recibirá las Ig's contra las enfermedádes que la madre haya sido inmunizada
Vacunas
o inmunización activa sintetizada
o hay vacunas inactivadas o vivas atenuadas (más fuertes)
Vacunas polivalentes
o triple (gato), sextuple (perro) y octuple (sextuple plus) o 6ta a 8va semana ---> inicio del calendario de vacunación
o últimos avances ---> vacunas recombinantes
20/04/10
Mecanismos de Reordenamiento del ADN
Secuencia de señales de recombinación (RSS o SSR en español) o nonámero o heptámero o 1 o 2 señales de vuelta
RAG-1 y RAG-2
Kappa: o 1 exón C o corriente abajo de exón V ---> RSS tipo 1 o corriente arriba de exón J ---> RSS tipo 2
Porque una célula B individual produce una sola clase de Ig de una misma cadena L y de una misma H
Porque una célula B produce una Ig de una especificidad
Puede cambiar el isotipo pero no el idiotipo (conmutación de clase
*Cuando el antígeno es un hidrato de carbono, no hay conmutación de clase
Porque hay exclusión alélica
Heptámero Nonámero
CACAGTG – 23hp – ACAAAAACC
GTGTCAC – 23hp – TGTTTTTGG
Heptámero Nonámero
TGTTTTTGG – 23hp – GTGTCAC
ACAAAAACC – 23hp – CACAGTG
2 turnos
RSS
1 turno
RSS 2 1
Orden de Expresión de Genes de Ig
Célula B progenitora
Gen Cadena Pesada
Reordenamiento Productivo
Si
V-D-J recombinación
Transcribe
Cadena Pesada
No
Apoptosis
2do
+
–
1ro
Materno Paterno o
Célula Pre-B
Gen Cadena Ligera
Reordenamiento Productivo
Si
Transcribe
Cadena Ligera
V-J recombinación
–
Célula B Madura
No
Apoptosis
4to
+
1ro kappa 2do kappa 3ro lambda
Orígen de la Diversidad Ac
Historia
Definición: diversidad (repertorio) es el total de todas las especificidades de Ac que el organismo es capaz de expresar
Teorías o teoría de la línea germinal o teoría de la mutación somática
Conceptos actuales
Múltiples genes V
Uniones VJ y VDJ
Recombinación variable (o imprecisas)
Inserción de regiones N: enzima terminal transferasa o mutación somática o conversión génica o combinación por asociación o multiespecificidad
Receptor Célula T
Heterodímero de una cadena alfa y otra beta
Estructura y expresión genética de cadena alfa análoga a cadena ligera de la Ig
Estructura y expresión genética de la cadena beta, análoga a cadena pesada de la Ig
*Tiene cadenas variables y constantes porque son análogas
No presenta mutación somática en la células T
Órganos Linfoides
Primarios: Timo y Médula ósea (Bolsa de Fabricio) o maduración (linfopoyesis): adquieren receptores específicos para cada tipo de Ag o selección de linfocitos: autotolerancia
Secundarios o Periféricos: Ganglios linfáticos, Bazo, Tejidos linfáticos asociados a mucosa (MALT).
o interacción entre células (linfocitos, CPA, células accesorias) y reconocimiento del Ag o diseminar la respuesta inmune al resto del organismo
*Vías respiratorias tienen MALT porque constantemente antígenos entran, y deben ser reconocidos
*La mucosa intestinal tiene millones de bacterias (flora bacteriana), y si hay permeabilidad del intestino, puede ocurrir translocación de bacterias y finalmente, sepsis.
Órganos Primarios Timo
2 lóbulos (en humano) – lobulillos (trabéculas conectivas)
Lobulillo tímico: timocitos
o corteza (gran densidad célular – inmaduras)
o médula (menor densidad celular – maduras)
Estroma tímico: varios tipos celulares no linfoides
o epiteliales o células dendríticas interdigitantes (límite córtico-medular) o macrofagos (localización similar a células dentríticas)
Células del estroma expresan en su superficie MHC I y/o II y participan en la maduración y selección de linfocitos T maduros
*Células procedentes de la médula ósea entran a timo – división activa en corteza – 95% mueren por apoptosis – 5% va a la médula (maduración) – salen del timo como células T vírgenes maduros (inmunocompetentes) por venas postcapilares
Interacción células T con células estromales induce selección de timocitos: o selección positiva: generan TCR que reconozcan MHC propio o selección negativa: de ellos, se eliminan los autorreactivos
Médula Ósea
Los linfocitos B se desarrollan en islotes de células hematopoyéticas
La médula ósea además de linfocitos B, presenta células T maduras y abundantes células plasmáticas (órgano linfoide secundario)
En aves, los linfocitos B se desarrollan en la Bolsa de Fabricio, que contiene folículos (corteza y médula)
Órganos Secundarios
1. Capsulados
a. Ganglios: capturan Ag de la piel y de superficies internas b. Bazo: captura Ag desde la sangre
2. No capsulados: asociados a mucosas (MALT) o (> 50% del tejido linfoide total) protección frente a Ag que penetran por epitelios
mucosos (1er encuentro – iniciación) como tracto gastrointestinal, tracto respiratorio y genitourinario, siendo su principal mecanismo efector la secreción de IgA (más abundante)
3. Acúmulos difusos (no capsulados): dispersos por todo el cuerpo Ganglio Linfático
Corteza: rica en células B 1. Folículos primarios: B maduros reposo (sin reacción) 2. Folículos secundarios: estimulación antigénica con centro germinal y manto (células que
reaccionaron)
Paracorteza: rica en células T y células dendríticas interdigitantes
Gradiente de diferenciación
Médula: células B, T, plasmáticas, abundantes macrófagos
Seno subcapsular: donde van Ag timo-independientes
En su recorrido permite interacción Ag con macrófagos y otros CPA (procesan Ag y presentan conjunto con MHC II) – activación linfocitos Th – en centro germinal hay activación, proliferación y diferenciación de linfocitos B (células plasmáticas y de memoria: manto)
Linfa sale por eferente (rico en Ac y linfocitos: tanto los que proliferaron más lo que ingresaron desde la sangre por las vénulas postcapilares del endotelio alto (HEV)
Bazo
Captación y reservorio, cápsula conectiva – trabéculas + más red reticular
Cada compartimiento: pulpa blanca y pulpa roja o Pulpa blanca: tejido linfoide, zona más densa alrededor de las arteriolas: capa linfoide
periarteriolar (CLP), constituye la zona T (células CPA – MHC II – Th); por fuera del CLP zona más difusa rica en células B y macrófagos (folículos primarios, células B vírgenes y secundarios centro germinal)
o Pulpa roja: red de sinusoides venosos y cordones celulares que contienen macrófagos residentes especializados: hematocateresis (destruir, y recuperar material de linfocitos viejos, y son fagocitados)
27/04/10
Tejido linfoide asociado a mucosas (MALT) Intestino:
Placas de Peyer; agrupadas pero no capsuladas
Compartimientos Celulares
Lámina Propia:
Células T CD4+
Macrófagos, células dendríticas
Pocas células T CD8+
Muchas células productoras IgA
Mastocitos, eosinófilos Membrana Epitelial:
Células T CD8+
Células T CD4+
Células T CD4–, CD8– Pocas
Células no-TCD3–, CD7+ *Inflamación Basófilos Mecanismo de Desgranulación ¿Cómo? vasodilatación (Liberación de Histamina) Células M: Facilita la captación de antígenos y los permite avanzar, in hacerles nada, hacia el lugar donde están las células del MALT
Organización del Sistema Inmune
Órganos, tejidos y células ampliamente difundidos por el organismo
Órganos ---> vasos sanguíneos y linfáticos – transporte celular (linfocitos)
Primario: proliferación y maduración de linfocitos
Secundario: captura e interacción con el antígeno
Hematopoyesis:
Célula madre ~~ stem cell ---> células sanguíneas
saco vitelino (en embrión) – hígado /bazo --- médula ósea (en adultos)
médula ósea: las células madre son 1 en 10.000 son autorregenerativas
*maduración mieloide y linfoide: microambiente dado por la matriz celular del estroma + factores de crecimiento
Cada tipo celular tiene regulación diferente (ej. vida media de eritrocitos: 120 dias; PN: pocos días; algunos linfocitos T: más de 30 días)
*Regulación fase estacionaria: citoquinas propias del estroma
*Hematopoyesis inducible: (en caso de infección o hemorragia) citoquinas producidas por macrófagos y linfocitos Th activados – células específicas – migran al foco de infección
Muerte Celular Programada o Apoptosis: Características:
Programada genéticamente como respuesta adaptativa
Reducción de tamaño celular y citoesqueleto (pliegues en membrana celular)
Condensación cromatínica y fragmentación nuclear (nucleasas)
Descomposición celular en fragmentos llamados “cuerpos apoptóticos” rodeados por membrana, contienen gránulos intactos
Macrófagos y PMN fagocitan y degradan los cuerpos apoptóticos sin inducir respuesta inflamatoria ---> deben tener receptores para antígenos de superficie
myc, p53 (inductores ; bcl y otros (inhibidores) Marcadores de Superficie de Leucocitos
Se producen en órganos linfoides primario (1000 millones al día), de ahi van a órganos linfoides secundarios y a espacios tisulares
Adultos (humano) existe 1 billón de linfocitos (2% peso corporal)
Representan el 20% – 30% de leucocitos totales
Existen 3 poblaciones de linfocitos funcionalmente distintos, difícil de diferenciar morfológicamente, caracterizada por un juego de marcadores de superficie (T, B, NK)
Los linfocitos T y B (específicos)
NK (innato) Linfocitos T y B Vírgenes
Son pequeños (6μ) poco citoplasma con cromosomas condensados (heterocromatina)
Pocas mitocondrias y poco RER y Golgi
En ausencia de antígeno tienen vida media corta (días a pocas semanas) y fácilmente sufren apoptosis
En contacto con el antígeno, se origina linfoblasto (15μ) – citoplasma con Golgi bien desarrollado; estas proliferan y se diferencian en 2 subpoblaciones 1. Células efectoras: vida corta
2. Células de memoria: vida larga (algunas toda la vida del individuo) Linfocitos B
Generado en médula ósea (mamíferos), Bursa de Fabricio (aves)
Reconocen al antígeno por medio de Ig de membrana (aprox. 150.000 moléculas de IgM, clases M y D con la misma especificidad antigénica), que forman la parte del receptor de membrana (BCR)
Poseen otros marcadores de superficie MHC II, receptores del complemento: CD35 (CR1), CD21 (CR2), receptor para IgG exógena CD32 (FcgR II)
Si hay contacto con antígeno, selección y proliferación clona en dos subpoblaciones: células plasmáticas productoras de Ac y otra célula de memoria (pero con reconocimiento de Ag)
Células Plasmáticas
Carecen de Ig de membrana y poseen más citoplasma que las B
Gran síntesis de Ac. (RER) con idéntica especificidad antigénica que B original
No circula por sangre ni por vasos linfáticos (en órganos linfoides secundarios y en zonas de respuesta inmunológica)
Son células en fase terminal, carecen de capacidad mitótica – apoptosis (viven pocos días)
Linfocitos B (cebadas; proviene de tener mucho apetito) de memoria pueden vivir en reposo (20 – 30 años), reexpuestas al antígeno, respuesta inmunitaria rápida, intensa y mayor afinidad
Linfocitos T
Diferenciación temprana en Timo – regresión y diferenciación posterior en piel y mucosa intestinal
Posee receptor de membrana TCR, solo interactúa con antígeno asociado no covalente al complejo CD3
Reconocimiento del antígeno por TCR, solo interactúa con Ag presentado en superficie de células asociado a moléculas de MHC (esto es una diferencia con el BCR)
Existen 2 tipos de TCR: TCR (delta-gamma: 5-10%) y el TCR2 (alfa-beta unido S-S: 90-95% células T)
TCR1: no son circulantes, localizadas en epitelios (intestinos): reconocimiento de ciertos patógenos que ingresan vía mucosa
TCR2 se subdivide a su vez en 2 tipos: 1. TCR2CD4+: funcionan como células cooperadoras (Th), reconocen el Ag expuesto por el
MHC II propio de células presentadoras de antígenos (CPA): se activan y proliferan clonalmente, liberan citoquinas para activar otras células (T, B, macrófagos, etc.)
2. TCR2CD8+: funcionan como células citotóxicas (Tc), reconocen el Ag expuesto en moléculas MHC I, de células propias del huésped, infectadas con un virus o neoplásicas, que en conjunto con la acción de citoquinas específicas, se activan, proliferan clonalmene, diferenciándose a linfocitos T citotóxicos, citolíticos.
Células Natural Killer
Carecen de especificidad y memoria, maduración extratímica
Sus marcadores distintivos son CD16 y/o CD56. Carecen de CD3
En su mayoría, morfológicamente corresponden a LGG
Poseen gránulos azurófilos densos con membranas, mitocondrias y ribosomas libres, poro RER, gran aparato de Golgi
Existen 2 tipos de funciones: citotóxica y regulación de la respuesta inmune (a través de citoquinas). Inducen apoptosis a células infectadas o células tumorales (menor expresión en superficie MHC I)
NK es activada por IFN-γ (interferón gamma) e Il-2 (interleukina-2) generándose una célula LAK (lymphokine activated killer cell)
*El interferón y la interleukina son citoquinas (proteínas/mensajeras)
04/05/10 Células mieloides: 1. Fagocitos: PMN y Monocito – Macrófago 2. Células Dendríticas 3. Eosinófilos 4. Basófilos 5. Mastocitos o células cebadas PMN Neutrófilos:
95% de los granulocitos – cientos de millones al día
Núcleo multilobulado (2-5 lóbulos), gránulos en citoplasma: azurófilos (inmaduros) contienen hidrolasas ácidas proteasas, mieloperoxidasas y lisozima / secundarios (específicos) que contienen lactoferrina, cofactores NADPH oxidasa
Después de salir de la médula espinosa, circulan de 7-10 horas, luego pasan a tejidos, donde mueren a los 2-3 días
Los circulantes son los primeros fagocitos atraídos por quimiotaxis al foco de infección
Ingieren los microorganismos, quedando en fagosomas luego se unen a lisosomas conformando el fagolisosoma: encargado de destruir al agente
Pueden ser activadas por IC en liberación de sustancias desde sus gránulos e inducen acción citotóxica (hipersensibilidad tipo II)
*Neutrófilos en banda: precursores de PMN neutrofilo; médula las manda cuando no alcanza a producir toda la demanda *Piogénico: productor de pus ---> Detritos celulares + PMN neutrófilos muertos = Pus Fagocitos Mononucleares: Monocitos: Características:
Vida más larga (semanas a meses), con abundante RER y gran cantidad de mitocondrias y enzimas
Destruyen viruses, bacterias, protozoos intracelulares
Pertenecen al sistema inmune innato (fagocitosis y producción de citoquinas) pero participan activamente en el sistema adaptativo
10-18μ diámetro, núcleo en forma de herradura
Citoplasma con gránulos azurófilos: que contienen peroxidasas e hidrolasas ácidas para la destrucción del patógeno, Golgi bien desarrollado
Adherencia e ingestión a través de receptores especializados (ciertos carbohidratos de la pared bacteriana, o a IgG y el complemento que recubren al patógeno)
Aprox. 8 horas de haber abandonado la médula, migran a los tejidos – macrófagos
Célula circulante
Macrófago: 1. En tejidos:
Kuppfer: sinusoides hepáticos
Células mesangiales en glomérulos renales
Macrófagos alveolares en pulmón
Macrófagos de serosas (peritoneo)
Células de microglía en cerebro
Osteoclastos en huesos
Sinoviocitos A en articulaciones
Histiocitos en tejido conectivo 2. Libres:
Estratégicamente ubicados en órganos linfoides secundarios: macrófagos de sinusoides esplénicos (bazo) y senos medulares (ganglios linfáticos)
Mecanismos de Destrucción – O2 Dependiente:
Los PMN neutrófilos producen H2O2 para destruir Ag
Radicales libres de oxigenos de la H2O2 son tóxicos para las células
H2O2 + O2
Glucosa + NADP+
G6P deshidrogenasa
Pentosa
+ NADPH
NADPH + O2
+ O2
NADP+
2O2 + 2H+
Superóxido dismutasa
Citocromo b558
2O2 + H2O2 OH + OH + O2
Activación
Mieloperoxidasa cataliza reacción entre peróxido y cloro para formar un aluro, muy tóxico celularmente
Se inactiva por el peligro de si la célula muere y el peróxido se libera al medio y mata el tejido propio
Mecanismos de Destrucción – NO:
Óxido nítrico (NO) la producen las células endoteliales como sustancia vasodilatadora
NO sintetasa ---> O2 + L-Arginina → NO + Citrulina cofactor: tetrahidrobiopterina
Esto la estimula el FNT-α e interferón gamma
El linfocito Th produce el interferón gamma y el FNT-α lo produce el mismo macrófago
Rol del Fagocito en Respuesta Inmune Especifica:
1. Como CPA: péptidos Ag se asocian con CMH II, y en la superficie son reconocidos por linfocitos Th, e induce su activación
2. Macrófagos activados por linfocitos Th: aumenta capacidad fagocítica y destructiva: celula efectora, en especial sobre cuerpos opsonizados (IgG's – complemento)
*Participa en reconocimiento, presentación y fase efectora *Si bien el macrófago es una célula del sistema innato, puede ser considerada una célula efectora del sistema inmune adaptativo
H2O2 + Cl-
Mieloperoxidasa OCl- + H2O
OCl- + H2O O2 + Cl- + H2O
2O2 + 2H
Superóxido dismutasa
H2O2 + O2
2H2O2
Catalasa
H2O + O2
Inactivación
Células Dendríticas:
1. Células Dendriticas Interdigitantes:
Línea mieloide, presentes en intersticio de la mayor parte de los órganos: corazón, pulmón, riñón, tracto GI
Prototipo: células de Langerhans de piel, rica en CMH II; en contacto con Ag migra por vasos linfáticos eferentes a paracorteza de ganglios regionales, se convierten en CD interdigitantes, alli presentan el Ag a linfocito Th
Éstas células son las más potentes inductoras de respesta inmune relacionada con CMH II 2. Células Dendriticas Foliculares:
No derivan de la médula ósea (no se relaciona con la interdigitante)
Gran cantidad de receptores para complemento
Presentes en folículos secundarios de áreas ricas en células B de los ganglios y bazo, y en folículos linfoides de mucosa
No tienen moléculas CMH II en su superficie, pero presentan gran cantidad de receptores para FcgR
Parece que tienen rol en el desarrollo de células B
Eosinófilos:
Granulocito, PMN, en sangre y tejidos (1-3% de los leucocitos)
Poseen núcleo bilobulado, abundantes gránulos de contenido básico (se tiñen bien con colorantes ácidos) rodeados de membrana con cristaloide en su interior
Migran desde la sangre a los tejidos por acción quimiotáctica
Acción fagocítica mínima, mayor rol corresponde a defensa inespecífica frente a grandes parásitos (ej. Helmintos: se unen a las larvas recubiertas por IgE o IgG y luego se desgranulan, vierten la toxina (proteína básica) y enzimas que controlan la respuesta inflamatoria, hidrolizan factores anafilacticos liberados por mastocitos
Puede actuar como célula K dadas las condiciones (presencia de Ig) ya que tiene función citotóxica y receptores de la región Fc para Ig's
También en sus gránulos contienen histaminasa regulando la inflamación
Alto n° en casos de parasitismos y alergias; complejo granuloma eosinofílico (felinos)
Basófilos y Mastocitos:
Nucleo bi o multilobulado (basófilo) y redondeado (mastocito)
Poseen abundantes y densos gránulos azul-violeta
Carecen de función fagocítica (< 1% de leucocitos)
Basófilos son circulantes y mastocitos están en los tejidos
Ambos poseen abundantes receptores FcrRI (fracción cristalizable IgE)
Papel preponderante en la hipersensibilidad tipo I o inmediata (Ag – IgE en la superficie de la célula, liberan sustancias vasoactivas como la histamina, responsable de los síntomas en alergias
Función natural: protección frente a parásitos multicelulares
10/05/10
Sangre y Transfusiones en Caninos
Sangre:
Tejido Líquido
Plasma y elementos figurados
Función: transporte, regulación de la temperatura, regulación de sales y electrolitos
Elementos figurados: trombocitos, eritrocitos, leucocitos
Compatibilidad Sanguínea:
Aloanticuerpos
Grupos Sanguíneos:
DEA: dog erythrocite antigen
Se han tipificado 8 de 15 antígenos de membrana en la sangre
DEA1 (A):
Más antigénico
Si no posee ningúno de la 3 antígenos es A-
A- se considera un donador universal
Bazo: pulpa roja ---> hemocaterésis
Volumen sanguíneo: volemia
Anemia: Disminución de hemoglobina, eritrocitos, y la baja cantidad de O2 en sangre para transporte de tejidos
VCA: recuento eritrocitario en una muestra sanguínea
Cross Match: No debe tener muestras de aglutinación en una compatibilidad
11/05/10
Complemento:
Descubierto por Bordet en 1895
Representan actividad lítica en suero fresco
Su actividad lítica se destruye cuando se calienta a 56° por 30’’
Proteínas ---> Enzimas ---> Zimógenos
Funciones:
Benéficos: o Opsonización (fagocitosis) o Atracción y activación fagocítica o Lisis de bacteria y de células infectadas o Regulación de la respuesta inmune humoral innata o Remoción de complejos inmunes (Ag-Ac) o Remoción de células apoptósicas
Deletéreas: o Inflamación [cuando es crónica], anafilaxia (reacción alérgica sistémica)
Proteínas del sistema del Complemento (nomenclatura)
C1(qrs), C2, C3, C4, C4, C5, C6, C7, C8, C9
Factores B, D, H, I, properdina (P)
Lectina que liga manosa (MBL), MBL asociado a serina proteases (MASP-1, MASP-2)
Inhibidor de C1 (C1-Inh, serpina), proteína fijadorea de C4 (C4-BP) factor acelerador de la degradación (DAF o CD55)
Receptores del C (CR1-CD35; CR2-CD21), proteína S
Productos Activados de Proteínas del Complemento
Componentes activados siguen a menudo una sustancia número-alfabética (C1qrs)
Cuando se rompe enzimáticamente, la porción más grande se une al complejo de activación, y el péptido más pequeño se libera al microambiente
La letra “b” usualmente se agrega al péptido más grande que se une a la membrana y “a” se designa al péptido más pequeño (ej. C3b/C3a, C4b/C4a, C5b/C5a) EXCEPTO C2 (el más grande, ligado a membrana es C2a: el más pequeño es C2b)
Activación del Complemento
Generación de C3 convertasa en Vía Clásica:
IgG y IgM activan tradicionalmente el complemento
Parátopos de inmunoglobulinas con C1qrs para su activación
Para que se active el complemento se requiere de un agente extraño
C1s activa (corta, escinde y separa la molecula) a la siguiente molécula (C4)
Luego, C1s activa también a C2
Quedan en el microambiente el C4a y C2b; mientras que C4b y el C2a y se unen a la membrana
C4b2a (conocido como cabeza) es C3 convertasa de la vía clásica
Una vez que se activa C3, se forma el C4b2a3b o C5 convertasa, lo cual conduce a la formación del CAM
Vía Clásica Vía de Lectinas Vía Alternativa
Dependiente de Anticuerpo
Vía Clásica
Independiente de Anticuerpo
Activación de C3 y Generación de C5 convertasa
Activación de C5
Complejo de Ataque a
la membrana
Componentes de la Vía de Lectinas (unión a manosa):
MBL (manose binding lectine) interactúa con azúcares de membrana de bacteria, activándose
Llega la MASP-1 y MASP-2 uniéndose la MBL
Este complejo se parece mucho estructuralmente al C1qrs
Éste activa al C4 (C4b a la membrana, C4a al microambiente)y luego al C2 (C2a a la membrana, C2b al microambiente)
C4b2a es C3 convertasa; conduce a la formación de C5 convertasa
Componentes de la Vía Alternativa:
C3, B, P, D, H2O…
Activación Espontánea de C3:
C3 se une con H2O ---> por hidrólisis obtenemos C3i como molécula partidora
C3i se une con factor B y en ese mismo momento factor D corta a B
Se forma el complejo C3iBb ---> C3 convertasa inicial (partidora)
C3iBb tiene una vida muy corta ---> se une a C3 y se sigue la cadena
Circuito de Amplificación:
Si es generación espontánea
De una mínima cantidad se puede generar constantemente en pequeñas cantidades
Anafilotoxinas: C3a, C4b, C2b patentes estimuladores de monocitos, músculos, desencadenan reacción anafiláctico
*IC: inmunocomplejo (Ac-Ag)
*CAM o MAC: complejo de ataque a membrana
*DAF: factor acelerador de la degradación
Control de Activación Espontánea de C3 vía DAF:
DAF impide la unión del factor B a C3b
CR1 es receptor de C3b, se fija en la membrana (linfocitos B; células dendríticas foliculares)
DAF disocia al factor Bb unido al C3b
Control de Activación de C3 vía CR1:
Factor H hace sinergia con DAF para poder disociar a la C3 convertasa
Estabilización de C3b y Activación de C5:
C3b encuentra un activador (protector) de membrana
C3b se une a B y luego D corta a B y se forma C3 convertasa
Una molécula estable para proteger, estabilizar: P
C3BBbC3b ---> C5 convertasa estable en la vía alternativa
C5 convertasa:
C5 convertasa para la vía clásica y la vía de lectinas ---> C4b2a3b
C5 convertasa para la vía alternativa ---> C3bBbC3b
Vía Lítica:
Generación de C5 convertasa conduce a la formación del complejo de ataque a membrana (CAM)
C5,
C6, C7, C8, C9
Activación C5, Ensamblaje CAM, Inserción del CAM a membrana:
C5 convertasa vía clásica y/o lectina
C5b de acopla a C6 y se unen a C7
El complejo C5b67 se transforma a una molécula hidrofóbica para poder pegarse a la membrana del agente extraño
C8 se une (inserción de complejo de ataque a membrana en una membrana celular para ayudar en acople a la membrana
C9 son monómeros que se van polimerizando, produciendo poros, causando cambios osmóticos desfavorables en la célula invasora
*Se puede proteger de los CAM al endocitar a las perforinas
17/05/10
Diferencias Inmunológicas entre Cerdos y Aves
Cerdos
Ganglios
Bazo
T. Linfoide o placas de peyer o tonsilas
Aves
Médula ósea
Bazo
T. Linfoide
BALT
GALT (placas de peyer y tonsilas cecales)
Linfocito Null:
Sin marcadores de superficie
Sin función
LGG
Cerdo
Heterófilos:
Reemplazo neutrófilos en aves
Restringe crecimiento bacteriano
Igs:
Aves: o IgY (IgG) o IgM o IgA
Cerdos: o IgG o IgM o IgD o IgA o IgE
*IgY tiene un dominio extra en relación a IgG, reconoce otras moléculas
18/05/10
Vía Lítica – Cam
Inserción del complejo de ataque a membrana celular
Desequilibrio osmótico a crear un poro por el cual sale líquido celular
Rompimiento C1qrs:
C1 inhibidor escinde a C1qrs en C1r y C1s
Deficiencia inhibidor C1 ---> angioedema hederitaria
C2b:
Proquinina que da origen a la bradiquinina
Potente mediador inflamatorio que produce vasodilatación y aumento de permeabilidad
C5a:
Quimiotácticamente muy fuerte
Activación neutrófilos, monocitos, macrófagos ---> liberan FNT-α
Adhesión neutrófilos
Anafilotoxinas
Mastocitos o desgranulan sustancias vasoactivas:
histamina, heparina, serotonina, bradiquinina; lo que produce:
aumento de permeabilidad vascular y estimulan musculatura lisa, un ejemplo de ello:
o asma ---> contracción de bronquios por ésta causa
C3b ---> formación convertasas ---> opsonina
C4a: hermana menor
C3a: hermana del medio Hacen lo mismo, pero en distintos grados
C5a: hermana mayor
C5a67: quimiotaxis, adhesión a otras membranas ---> proteína S (vitronectina) como reguladora
Anticuerpos Monoclonales:
Misma clase, altamente específica, pero no absoluta
Detección de una molécula dentro de una mucho más grande, por parte de un anticuerpo
1 antígeno – 1 anticuerpo
Hibridomas – año 1975
Mieloma: plasmocitoma (célula tumoral de célula plasmática)
Cultivo de células secretoras de Ac. monoclonales con especificidad predefinida, pudiendo mantenerse indefinidamente, y en grandes cantidades
HAT (Hipoxantina, Aminopterina, Timidina) ---> precursores de ácidos nucleicos
Estimula crecimiento de linfocitos B, pero no del tumor
Mieloma Linfocito B
Hibridoma
Inmortalidad –
capacidad para niveles altos
Producción de Ac –
niveles bajos
Producción de anticuerpos / Inmortal – niveles altos
25/05/10
Cooperación Celular:
Interacción LT y LB
IL-2 ---> inductor de la proliferación de la LB y LT
IL-4 ---> inductor de activación de la proliferación de LB
La interacción hace que las células B inicien el ciclo celular, desarrollo de los centros germinales y de las respuestas de anticuerpos frente a antígenos
Respuesta de los LB al Ag.
El desarrollo de la respuesta inmune humoral va a depender de: o el tipo de Ag: antígeno T-dependiente o antígeno T-independiente o el tipo de célula presentadora de antígeno o la exposición previa o no al mismo antígeno
Mecanismo de Activación
Unión del Ag. con BCR con otras moléculas accesorias y correceptores llevarán a una estimulación de tirosina quinasas que bajo procedimientos de fosforilación activan la fosfolipasa C que generarán compuestos intermediarios para activar a la proteína quinasa C para que junto a la participación de otras quinasas se traducirán en la activación de los factores de transcripción nucleares.
Interacción Ag. T-dependiente
La activación del LB requiere de dos señales de activación proporcionados por el LTh: reconocimiento ligado y moléculas coestimuladoras (CD154 y CD28)
Activación del LB por parte del LTh
CD40 (reposo) + CD154 (activadas) = señal necesaria para inicio celular de LB y generar receptores de IL-2, IL-4 e IL-5
CD28 + CD80/CD86 ausentes en células en reposo, solo activadas = llevan a la expresión máxima de CD154 y secreción máxima de IL-2
Señales de Activación de LB
1. Reconocimiento entre las dos células a través del Ag. ligado al CMH II (reconocimiento ligado)
2. Moléculas coestimuladoras
Interacción Ag. T-independiente
Fases de la Respuesta al Ag.
Respuesta primaria: es la que se desarrolla tras la exposición por primera vez al antígeno
Respuesta secundaria: es la que se desarrolla tras exposiciones sucesivas al mismo antígeno
*La respuesta secundaria dependerá de la naturaleza del Ag del huésped
Conmutación de Isotipos
Está realizado el reordenamiento génico de ADN bajo la presencia de CD40 y citoquinas liberadas por la LTh, siendo la más importante la IL-2
Centros Germinales
Es el lugar donde ocurren los eventos más importantes de los LB y corresponden a los centros linfoides secundarios
Ocurren los fenómenos de proliferación celular y la selección positiva y negativa de los LB
Ocurre durante los primeros seis días de iniciado el contacto Ag-LT
Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC)
Introducción
Grupo de genes presentes en todos los mamíferos que codifican glicoproteínas (células MHC), fundamentales en el reconocimiento intercelular y discriminación de lo propio y lo ajeno
Rol fundamental en el desarrollo de la respuesta inmune
Genes MHC: se encuentran alineados en una región grande y contínua del genoma
Existen ciertas diferencias en la organización de los genes en las diferentes especies, sin embargo, en la mayoría se pueden apreciar 3 grandes zonas zonas que determinan 3 tipos de moléculas:
o genes de clase I (MHC I): glicoproteínas de membrana, células nucleadas, linfocitos Tc
o genes de clase II (MHC II): glicoproteínas de membrana, CPAs, linfocitos Th o genes de clase III (MHC III): proteínas plasmáticas relacionadas con el sistema
inmune (complemento, TNF y otras proteínas no relacionadas con la respuesta inmune)
*Dominio: secuencia aminoacídica específica
MHC I
3 dominios de cadena α, pleomórficos más 1 dominio β2 microglobulina, invariable
Interacción entre α1 y α2 se produce un surco, el cual se une el péptido a ser presentado
Se presenta ante un LTc (CD8+)
Cadena α tiene un tallo citoplasmático
MHC II
2 cadenas (1 α y otra β)
Ambas tienen tallo hidrofílico transmembrana
2 dominios α y 2 dominios β
Interacción entre α1 y β1 (dominios más distales de la membrana) dormán surco o hendidura para la presentación
Presentación es a LTh (CD4+)
Presentación de péptidos antigénicos de mayor tamaño
Ambas cadenas son codificadas por genes de MHC II, a diferencia de la MHC I que solo su cadena α es codificada y la β2 la codifica otro gen
Ambas cadenas en MHC II son variables, pleomórficas
Puede presentar alta gama de antígenos
MHC III
Complemento
FNT
Procesamiento y Presentación de Antígeno
Para el reconocimiento de una proteína extraña, debe ser degradada en péptidos pequeños que luego forman complejos con moléculas de clase I y/o II ---> procesamiento
Procesamiento y presentación del antígeno junto a una molécula clase I o II está determinado por la ruta de penetración del antígeno en la célula
o antígeno endógeno ---> MHC I o antígeno exógeno ---> MHC II
Restricción MHC
Linfocitos T reconocen a los antígenos unidos a las células y asociados a moléculas MHC
Moléculas MHC de clase I y II actúan como sistemas orientadores de los linfocitos T
Moléculas MHC restringen la especificidad del linfocito T, el que no reconoce a la molécula MHC o al fragmento peptídico, sino solo al complejo MHC-péptido específico
Antígeno Endógeno
Producido dentro de una célula autóloga
Siempre están unidas a MHC I
En el caso de un virus, se introduce en la célula, y altera su ADN, y a su vez los antígeno de membrana
Luego eso las anormalidades de las proteínas de membrana se detectan y la célula se intenta destruir, sin embargo, si no logra autodestruirse, una célula NK podrá venir a terminar el trabajo
Antígeno Exógeno
Se internaliza desde el exterior
Se produce la síntesis MHC II
En algún momento (en el citoplasma) se unen
Luego viaja hacia la membrana y se ancla
31/05/10
Mecanismos de Evasión de la Respuesta Inmune de la Influenza Aviar y la Gripe Porcina
Virus:
sin vida independiente
necesitan ADN de células ajenas
cápside protéica protege genoma viral
neuraminidasa y hemaglutinina
Influenza:
A y B (8 segmentos) o C (7 segmentos)
alta patogenicidad
A es de mayor riesgo pandémico
Mecanismos de Evasión:
NS1 proteínas o inactiva genes para citoquinas, quimioquinas o inhibición pkr o previene transcripción del gen del IFN-β
Inhibición nks ---> baja de citotoxicidad ---> aumento de unión de dos receptores inhibidores a las células infectadas
Variación antigénica, “drift”, acumulación de mutaciones
Virus recombinantes, “shift”, mezcla de ARN en caso de contacto con otro animal, se forma un nuevo virus:
o virus cerdos + virus aves + virus humanos = nueva cepa
1/06/10
La parte final el Golgi, la proteína invariante sufre escindación por parte de enzimas proteasas, quedando un “clip” taponando el surco de la molécula MHC (antígeno exógeno)
Comparación MHC clase I y II
Característica MHC I (HLA) MHC II (HLA)
Genes A, B, C DR, DP, DQ
β2m Si No
Cadenas Alfa Alfa – Beta
Expresión Constitutiva APC; Inducida
Células T CD8+ Tc CD4+ Th
N° Péptidos 8 – 9 aa 12 – 20 aa
Procedencia Ag. Citosol Fagocitosis
MHC y enfermedad
Algunas enfermedades se asocian a determinados alelos del MHC: o procesan autoinmunes o suceptibilidad a virus o alteraciones neurológicas o alergias
Polimorfismo del MHC: amplía la varieda de antígenos que se pueden reconocer y la protección frente a numerosos agentes infecciosos
o enfermedades afectan al polimorfismo del MHC
*Endogamia de guepardos; nuevos viruses atacan a leones
Hipersensibilidad
Respuesta inmune adaptativa exagerada o inadecuada que puede resultar en un daño al organismo (alergia, anafilaxis, atopía)
Respuesta inmunitaria normalmente beneficiosa que llega a provocar reacciones inflamatorias y lesiones tisulares con disfunción orgánica
Provocada por diferentes antígenos (alergenos)
Agentes con capacidad de provocar hipersensibilidad son diferentes en cada individuo
No se manifiesta en la primera exposición al antígeno, sino que suele aparecer tras un contacto posterior
la hipersensibilidad se refiere a los procesos patológicos que se deban a interacciones inmunitarias específicas, entre antígenos (endógenos y exógenos) y los anticuerpos humorales o linfocitos sensibilizados
Se describen 4 reacciones de HS (Coombs y Gell): tipos I, II, III, IV, de acuerdo al mecanismo inmunológico involucrado
En la práctica estas HS tienden a superponerse unas con otras
HS tipos I, II y III: mediadas por anticuerpos (HS humoral)
HS tipo IV: mediadas por linfocitos T y macrófagos (HS celular)
Hipersensibilidad tipo I
Reacción alérgica que aparece inmediatamente después de una segunda exposición a un alergeno
Las reacciones características se producen como consecuencia de la estimulación específica de los mastocitos sensibilizados con IgE
Se caracteriza por la producción de anticuerpos IgE contra proteínas ajenas presentes en el medio
El término alergia fue definido por “Von Pirquet” como: una capacidad alterada del organismopara reaccionar ante sustancias ajenas.”
Ahora se define como: “enfermedad debido a una respuesta del sistema inmune a un antígeno comúnmente inocuo.”
El término atopía está ligado a este fenómeno
Se define como una reacción inmunitaria de desarrollo rápido, que desencadena algunos minutos después de la combinación de un antígenos con un anticuerpo ligado a mastocitos y basófilos en el huésped, previamente sensibilizado
Mastocitos
Procedentes de la méddula ósea
Distribuida en los tejidos
Se encuentran cerca de los vasos sanguíneos y en localizaciones subepiteliales, donde tienen a producirse las reacciones locales tipo I
Citoplasma con gránulos rodeados de membrana, contienen mediadores químicos biológicamente activos
Posee receptores de Fc de IgE
Basófilos
No se encuentran habitualmente en tejidos
Circulantes en sangre en baja cantidad
Posee receptores Fc IgE
Citoplasma granulado
Son atraídos por focos inflamados
IgE
Glucoproteína que contiene dos cadenas ligeras y dos pesadas
Se encuentra presente en el suero y en los líquidos tisulares de todos los mamíferos
Es dintetizada por los linfocitos B, previa a una estimulación de linfocitos T
Posee receptores Fc, que pueden ser de alta o baja afinidad
Los mastocitos y basófilos tienen receptores de alfa afinidad para IgE
Mediadores Primarios
Liberados por la desgranulación del mastocito
Aminas biógenas: histamina y adenosina
Mediadores quimiotácticos o enzimas: proteasas, hidrolasas ácidas o proteoglicanos: heparina (anticoagulante fisiológico)
Mediadores Secundarios
lipídicos o leucotrienos o prostaglandina D2 mediadores inflamatorios o factor activador de plaquetas (FAP)
Citoquinas
Regulación por Citoquinas
Síntesis de IgE
Crecimiento de Mastocitos
Crecimiento y activación de eosinófilos
7/06/10
A mayor sensibilidad, mayor liberación de histamina por parte de los mastocitos
Mala perfusión de los tejidos por HS, es decir, shock anafiláctico
Histamina también estimula la secreción de glándulas respiratorias y broncoconstricción (en general, constricción del músculo liso)
Al haber una baja de presión sanguínea rápida, gracias a la rápida extravasación por histamina, se afecta mucho al tejido nervioso, pudiendo causar ceguera temporal o desmayos
Fasas de la HS
Respuesta inicial o se manifiestan entre los 5 a 30 minutos después del contacto con el alérgeno o actúa de inmediato el mastocito con sus gránulos de secreción
Respuesta tardía o reclutación de leucocitos por gránulos del mastocito o el más importante el eosinófilo, por su gran cantidad de mediadores
Anafilaxis
Reaccción sistémica o local mediada por IgE, que se produce en una persona previamnte sensibilizada que recibe al antígeno nuevamente
Sistémica: por administración de hormonas, enzimas y fármacos
Aparece picor, ronchas, eritema cutáneo (enrojecimiento de la piel), contracción de bronquiolos, insuficiencia respiratoria. Luego puede entrar en shock, incluso morir al cabo de una hora
Local: producida por alérgenos exógenos, como el polen, caspa de animales, polvo, pescado, etc.
Alergia atópica (predisposición genética) ---> alergia a muchos componentes por contacto
Urticaria
Angioedema
Rinitis alérgica o Fiebre del Heno
Asma
Tratamiento
Evitar el contacto con el alérgeno
Inmunoterapia con el alérgeno o producir una hiposesibilización (desensibilización), inyectando un extracto de alérgeno por vía subcutánea en dosis creciente
Antihistaminicos ---> prevención o casos leves
8/06/10
Hipersensibilidad tipo II
Citotoxicidad dependiente de anticuerpos, de clase IgG e IgM que se unen en forma específica a determinadas células o tejidos
Los anticuerpos dirigidos contra antígenos situados en superficies celulares o sobre tejidos interaccionan con el complemento o con una serie de células efectoras y provocan daño en la célula diana (célula blanco)
Consecuencias de la activación del complemento o fragmentos C3 y C5 atraen macrófagos y PMN y estimulan mastocitos y
basófilos o activación vía clásica del complemento, depósito de C3b, C3bi sobre la
membrana celular de la célula diana o tras activación vía clásica y vía lítica del complemento se forma complejo de
ataque a la membrana C5b9 o células efectoras se unen al complejo Ag-Ac mediante sus receptores de Fc o al
complemento o Adcc ---> antibody dependant cell citotoxicity
Hipersensibilidad tipo III
La interacción de antígenos con su correspondiente anticuerpo circulante conduce a la formación de complejos Ag-Ac
Los inmunocomplejos circulantes se depositan en los tejidos
Se desencadenan diversos procesos inflamatorios o interacción con el sistema del complemento (formación de C3a y C5a) o estimulación a los macrófagos (liberación de citoquinas) o interacción directa de los inmunocomplejos con basófilos y plaquetas
(mediante receptores Fc) e inducción a la liberación de aminas vasoactivas
Los inmunocomplejos circulantes se depositan entre las membranas endoteliales y membrana basal
Los neutrófilos son llamados por el complemento a la pared del vaso sanguíneo, pero como no puede fagocitarlo, solo libera su batería de enzimas, dañando los tejidos
Etapa 1
Se forma una gran cantidad de complejos Ag-Ac en sangre y no pueden ser completamente eliminados por los macrófagos
*Un ejemplo es de las enfermedades del glomérulo renal, el cual es un manojo de capilares, y los inmunocomplejos se depositan allí por el proceso de filtración que allí ocurre.
Etapa 2
Los complejos Ag-Ac se depositan en el lecho capilar entre las células endoteliales y la membrana basal
Etapa 3
Los complejos Ag-Ac activan el complemento por la vía clásica produciendo vasodilatación
Etapa 4
Las proteínas del complemento y los complejos antígeno-anticuerpo atraen leucocitos al sitio de lesión
Etapa 5
Los leucocitos descargan sus mediadores de lisis y promuevan masivamente en inflamación local
Esto puede producir daño de tejido y hemorragia
Hipersensibilidad tipo IV
3 tipos o por contacto o de tipo tuberculínico o granulomatosa
Las dos primeras se presentan dentro de las primeras 72 horas del desafío antigénico
La reacción granulomatosa se desarrolla en un período de 21 a 28 días
Puede haber más de un tipo de reacción de un antígeno y éstos pueden superponerse
Los linfocitos T causan un daño directo a reacciones DTH o atacando células blanco
Sus reacciones se deben a células Th1 efectores Ag-Ac
Peptide
mediators of inflamation, phagocyte recruitment
C4a, C3a, C5a
Removal of inmune complexes
Opsonization of pathogens
Binds to complement
receptors on phagocytes
C3b
Linfocitos T, CD8+ y CD4+ activan macrófagos (IFN-gamma) e inducen inflamación (TNF)
Los CD8+ citolíticos matan directamente a las células blanco (MHC I)
El daño tisular es producido por macrófagos activados (hidrolasas, radicales de oxígeno, óxido nítrico, citoquinas proinflamatorias)
Las células endoteliales vasculares de las lesiones pueden expresar MHC II y moléculas de adhesión elevadas
Las reacciones crónicas producen fibrosis por incremento de citoquinas y factores de crecimiento
*Se estimulan los fibroblastos, que reemplazan tejido funcional por colágeno del tejido conectivo (fibrosis)
Hipersensibilidad por Contacto
Las células de Langerhans internalizan y procesan el hapteno y se lo presentan a células T-antígeno dependientes
Las citoquinas producidas por células inmunocompetentes (queratinocitos, células de Langerhans, células T) reclutan células T no-antígeno específicas y macrófagos
Hipersensibilidad a Tuberculina
El desafío intradérmico con tuberculina, activa células T antígeno-específicas, que secretan TNF-α y linfotoxínas (TNF-β); los que actúan sobre las células endoteliales induciendo secuencialmente, moléculas de adhesión: E-selectiva, ICAM1, VCAM1, los que reclutan leucocitos al sitio de reacción
Intervienen inicialmente neutrófilos a las 4 horas, monocitos a las 12 horas y células T
Reacciones Granulomatosas
Hay un balance entre inmunidad protectora y daño a tejido tisular mediado por células T dirigidas hacia antígeno insoluble
Un ejemplo es la lepra tuberculoide
La persistencia del antígeno conduce a la diferenciación de macrófagos a células epiteloides y a fusión para formar células gigantes (células de Langans)
La reacción granulomatosa lesiona tejidos
*Aparato bucal de garrapatas que queda en la piel es un antígeno que causa una reacción granulomatosa
Técnicas Inmunológicas
La vacuna del clostridium (tetano) está hecha de un suero hiperinmune de equino
Este suero hiperinmune tiene anticuerpos policlonales
Interacción Ag-Ac
Interacción reversible a través de enlaces no-covalentes
“In vitro”
Interacción primaria: no visualizable (se puede marcar el Ag o Ac mediante unión covalente, moléculas como fluorocromo, isótopos radioactivos o enzimas: inmunofluorescencia, RIA, ELISA)
Interacción secundaria: aparición de fenómeno visible como aglutinación o precipitación (para que esto ocurra es indispensable determinadas concentraciones y características de los Ag-Ac
Inmunodifusión Simple
Permite identificar (cualitativamente) clases de anticuerpos o antígenos solubles presentes en el suero (muestras biológicas)
Matriz semisólida de Agar (algas de Agar agar), en donde se encuentra disuelto el anticuerpo específico se adiciona en una celdilla central de Ag y en las celdillas que rodean diferentes muestras biológicas a estudiar
Método simple y económico
Inmunodifución Radial
Permite cuantificar anticuerpos (clases) o antígenos solubles presentes en el suero (muestras biológicas)
Matriz semisólida de Agar, en donde se encuentra disuelto el anticuerpo específico
La muestra biológica se agrega en celdillas y a medida que el Ag difunde en forma radial se alcanza la relación Ag-Ac que permite la precipitación visible
Curva de calibración (muestra patrones de concentración conocida)
R del precipitado es proporcional a la concentración de Ag
Test simple y económico
Inmunoelectroforésis
Técnica cualitativa que permite la identificación de diferentes componentes protéicos presentes en distintas muestras biológicas (suero, orina, etc.) a través de arcos de precipitación
Gel agarosa o de poliacrilamida, acetato de celulosa
Etapas: 1° separación electroforética; 2° precipitación de proteínas con Acs específicos
15/06/10
Inmunofluorescencia
Permite detectar Ag tisulares, celulares nucleares, caracterizar poblaciones celulares (citometría de flujo), etc.
Puede ser directa o indirecta
Requiere equipamiento sofisticado (microscópio epifluorescencia, equipo lector computacional (citómetro: células en suspensión))
Similitud técnica con la inmunoperoxidasa (microscopio óptico)
Técnica directa: 1Ag-1Ac mareado con fluorcromo
Técnica indirecta: 2Ac (primero es AntiAg, no está marcado; segundo es AntiAc, marcado) 1Ag ---> les permite amplificar la reacción, aumenta la sensibilidad
Inmunoperoxidasa
Más barata
Más simple, colorante de enzimas
Inmunoanálisis: ELISA
Utiliza anticuerpos marcados por una enzima (ej. peroxidasa) para visualizar reacción Ag-Ac
Se usa tanto para la determinación de Ags como de Acs
La reacción se puede cuantificar mediante la lectura de D.O. a través de un espectrofotómetro
Método muy sensible y económico
Permite realizar gran cantidad de determinaciones en corto tiempo
Los antígenos se pueden determinar mediante pruebas de tipo “sándwich” o competitivas
Western Blot
Permite identificar Ag-Ac – muy sensible
Etapas:
Separación electroforética de proteínas en geles de poliacrilamida
Transferencia (blotting) de dichas proteínas a un soporte sólido (membrana de nitrocelulosa)
Detección de una o más bandas identificadas por Acs específicas
Migración depende fundamentalmente de PM (peso molecular) de sus péptidos
Prueba comúnmente usada como confirmación, corroboración para pacientes VIH ELISA+
Autoinmunidad
Proceso patológico que se genera porque el sistema inmune reacción frente a los Ags propios (autoantígenos).
Se alteran los mecanismos responsables de la autotolerancia
Mecanismos efectores: o anticuerpos contra Ag propios o células efectoras y sus productos
Clasificación General
Local: afectan a un órgano o tejido específico (endocrino, muscular, etc)
Sistémico: afectan a varios órganos o tejidos (Ac. contra diferentes componentes tisulares, nativos o alterados: ADN, colágeno, células sanguíneas, etc.)
Predisposición Genética
Modelos animales y observaciones en humanos sugieren que existe predisposición genética para la manifestación de enfermedades autoinmunes
Asociación entre ciertos antígenos HLA y enfermedades autoinmunes: HLA: B8, B27, DR2, DR3, DR4, DR5, etc.
Etiología
La etiología exacta patologías. AI no se conoce
Teorías
Exposición Ag ocultos: AutoAg de desarrollo tardío (no expuestos durante diferenciación de células T) o confinaados a tejidos protegidos (testículo, cerebro, etc.) pueden estimular respuesta inmune y autoinmunidad al ser liberadas por acción injuria traumática o quirúrgica (ej. por cambios moleculares: epítopos nuevos en proteínas de membrana normales ---> hepatitis crónica canina, factor reumatoide (Ac antiFc Ig: LES, artritis reumatoídea, etc)
Escape clones autorreactivos: selección negativa de linfocitos a nivel del Timo puede no reconocer todos los Ag propios o algunos no haber sido apropiadamente procesados y/o presentados
Reacción cruzada Ags: (mimetismo molecular) Ags de ciertos patógenos poseen determinantes que presentan reacción cruzada con autoAgs y la respuesta inmune contra dichos determinantes puede conducir a células efectoras o Ac contra Ag tisulares (propias)
Mecanismo Daño Tisular
Autoanticuerpos
Linfocitos T autorreactivos
Inmunocomplejos
Tipo de Reacción: Reacciones de HS
HS II
Anemia hemolítica autoinmunitaria (citotoxicidad)
Púrpura trombocitopénica (destrucción trombocitos)
Células tiroides: Tiroiditis (inflamación, gran infiltración celular)
Receptor de acetilcolina: Miastenia gravis
Receptor de insulina: Diabetes
HS III
Ac. + AutoAg
SLE: glomerulonefritis membranoproliferativa
Artitis reumatoídea: Ac. contra estructuras articulares: membrana sinovial, cartílago, etc.
HS IV
Provocada por Tc o esclerosis múltiple (humana) o diabetes mellitus insulinodependiente
Destrucción del páncreas
Hipotiroidismo (Hashimoto)
Gran infiltración leucocitaria – linfoide
Tejido ya no funcional