Cromatografia de Exclusion Molecular 2010

8/2/2019 Cromatografia de Exclusion Molecular 2010

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AnlisisAnlisis InstrumentalInstrumental

Facilitador:

Fausto Sols

Por:

Jocelin Prez Pea

Leonardo Matute Tiffer


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CromatografCromatografa de exclusion Moleculara de exclusion Molecular

ADN

ARN

PROTEINA


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Cromatografa

Es un mtodo de separacin en el que se aprovechan lasEs un mtodo de separacin en el que se aprovechan lasdiferencias en el comportamiento de particin entre unadiferencias en el comportamiento de particin entre una

fase mvil y una fase estacionaria para separa losfase mvil y una fase estacionaria para separa los

componentes de una mezcla.componentes de una mezcla.


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Cromatografa de Exclusion Molecular

EsEs unun mtodomtodo dede cromatografacromatografa enen lala queque laslasmolculasmolculas enen solucinsolucin estnestn separadosseparados porpor susu

tamao,tamao, yy enen algunosalgunos casoscasos porpor elel pesopeso

molecularmolecular..

SeSe realizarealiza enen columnascolumnas cilndricascilndricas rellenasrellenas

concon algunosalgunos dede loslos gelesgeles queque sese fabricanfabrican concon

esteeste finfin..

SeSe aplicaaplica generalmentegeneralmente aa laslas molculasmolculas

grandesgrandes oo complejascomplejas macromolecularesmacromoleculares talestales

comocomo protenasprotenas yy polmerospolmeros industrialesindustriales..


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CuandoCuando unauna solucinsolucin acuosaacuosa sese utilizautiliza parapara transportartransportar

lala muestramuestra aa travstravs dede lala columna,columna, lala tcnicatcnica sese conoceconocecomocomo cromatografacromatografa dede filtracinfiltracin enen gel,gel,

Cromatografa de Exclusion Molecular
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Gel

Se hallan constituidos por grnulos (partculas) de unSe hallan constituidos por grnulos (partculas) de unmaterial esponjoso hidratado, que contiene poros con unmaterial esponjoso hidratado, que contiene poros con untamao de dimetro determinado.tamao de dimetro determinado.

Las sustancias que se van a separar se aplican sobre elLas sustancias que se van a separar se aplican sobre ellecho de gel, previamente dispuesto como relleno de unalecho de gel, previamente dispuesto como relleno de unacolumna, y posteriormente secolumna, y posteriormente se eluyeneluyen con un disolventecon un disolventeapropiado.apropiado.


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Tipos De Geles

DextranosDextranos con enlacescon enlacescruzados (cruzados (sephadexsephadex))

Agarosa (Agarosa (sepharosesepharose,, BioBio--gelgelA)A)

Poliacrilamida (Poliacrilamida (BioBio--gel B)gel B)

sephacrylsephacryl


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PrincipioPrincipio


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Es un mtodo ampliamente utilizado para la caracterizacinEs un mtodo ampliamente utilizado para la caracterizacinpolmeros debido a su capacidad para proporcionar buenas masaspolmeros debido a su capacidad para proporcionar buenas masas

molares de de distribucin como resultados para los polmeros.molares de de distribucin como resultados para los polmeros.


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La matriz de la columna esta formada por un polmeroLa matriz de la columna esta formada por un polmero

entrecruzado con poros de tamaos determinados.entrecruzado con poros de tamaos determinados.

Cromatgrafo de permeacin en gelCromatgrafo de permeacin en gel


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