Cromatografía líquida -...
Transcript of Cromatografía líquida -...
Cromatografía líquida
Clasificación
Cromatografía líquida convencionalAdsorciónRepartoCambio iónicoExclusiónAfinidad
HPLC (CLAR)
Cromatografía líquida planaCapa finaPapel
Cromatografía líquida convencional
eluyente
capa protectora(arena, papel de filtro)
relleno
disco de vidrio sinterizado
vacío
a) b)
.
Cromatografía líquidaADSORCION (CLS)
Adsorbentes: gel de sílice (SiO2.xH2O)(activación)
alúmina (Al2O3.xH2O)
Disolventes: serie eluotrópica (ordenación según la capacidad relativapara desplazar solutos de un adsorbente dado. Ej (gel de sílice)agua>metanol>acetona>ac. etilo>cloroformo>benceno>tolueno> etc
REPARTO (CLL)Normal: fase estacionaria polar; Inversa: fase estacionaria no polar
Soportes sólidos: gel de sílice, tierra de diatomeas, celulosa,almidón, microbolas de vidrio
Fase estacionaria: agua (para muchos compuestos orgánicos)
Eluyentes: cloroformo, Cl4C, hidrocarburos, etc.
Cromatografía de cambio iónico
R-H+ + M+ <--> R-M+ + H+ Kd = [M+]R [H+] / [M+] [H+]R
Resinas de cambio iónico
Resinas ácidas y básicas
Exclusión molecular
Exclusión molecular
Exclusión molecular
Separación de proteínas
Geles
.
CH2=CH–CONH2 (CH2=CH–C–NH–)2CH2
O=
Acrilamida NN'-metilenbisacrilamida
CONH2
CONHCH2
CONH2
CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–
CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH
CONH
CONH
CONH
CH2CONH
CONH2
CONH2
CONH
CH2
CONH
–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CONH2
CONHCONH
– –
–
Cromatografía de afinidad
C de A: fundamento
Equipo HPCL
Cromatógrafo HPLC
Bomba recíproca
Bomba recíproca
Bomba de desplazamientoVálvula
de entradaVálvulade salida
ColumnaEluyente
Cámara conteniendeluyente
Detector de índice de refracción
Detector electroquímico
Detector de fluorescencia
Derivatización
Columna
Bomba
Reactivo
Bucle
Baño de agua
Detector
.
.
Cromatografía plana
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en papel
Cromatografía en papel
Cromatografía de fluidos supercríticos
10
20
30
40
50
60
70
80
–80 –60 –40 –20 0 20 40
Sólido
Líquido
Gas
Punto triple (–56.4 ºC, 5.11 atms.)
Punto crítico(31.3ºC, 72.9 atms.)
Zonasupercrítica
P, atms.
t, ºC