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Criopreservação do sêmen canino
Criopreservação do sêmen canino
UENFProfª Isabel Candia Nunes da Cunha
Inseminação ArtificialInseminação Artificial
Refrigeração e Congelamento de SêmenRefrigeração e Congelamento de Sêmen
Obtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIVObtenção dos Oócitos, MIV, FIV e CIV
Criopreservação de oócitos e embriõesCriopreservação de oócitos e embriões
Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides Injeção Intracitoplasmática de Espermatozóides
Conservação dos ováriosConservação dos ovários
Biotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução caninaBiotecnologias que podem ser aplicadas à reprodução canina
Inseminação artificialé a biotécnica mais
procurada por
proprietários de cães
Inseminação artificialé a biotécnica mais
procurada por
proprietários de cães
Possibilita reprodução entre animais com alterações de comportamento
Supera particularidades raciais que possam dificultar a monta
Possibilita a utilização de técnicas de reprodução assistida
Favorece o melhoramento genético rápido e eficiente
Proporcionar acasalamentos genéticos dirigidos
VantagensVantagensda IA em da IA em
cãescães
Controle de doenças
Prevenção de acidentes que podem ocorrer com a fêmea quando o macho é muito pesado ou agressivo
Uso de machos com problemas adquiridos e impossibilitados de efetuarem a monta
Possibilita acasalamento entre animais que vivem em regiões distantes
Aumento do número de descendentes de um cão
Uso de machos após a morte
VantagensVantagensda IA em da IA em
cãescães
Sucesso em uma IASucesso em uma IA
Óvulo
EspermatozóideEspermatozóide
Encontro dos gametas
Fertilização
Fases do Ciclo EstralFases do Ciclo Estral
Proestro
Estro
Diestro
Anestro
Ciclo Estral nas CadelasCiclo Estral nas Cadelasespermatozóides são capazes de fertilizar por mais de 4 - 6 dias
proestroproestro estro (dias)estro (dias) diestrodiestro0 \ 1 \ 2 \ 3 \ 4 \ 5 \ 6 \ 7 \ 8
proge
steron
a
estrógeno
pico LH
2 diasOvulações ocorrem durante 24 - 96 h
Ovócitos primários levam de 24 - 48 h para se capacitar
Cada óvulo é fertilizável por um período de 12 a 24h
Adaptado de Nelson e Feldman (1996)
Métodos de Detecção da ovulação
Métodos de Detecção da ovulação
Comportamento
Citologia Vaginal
Vaginoscopia
Dosagem de progesterona
Ultra-sonografia
Inseminação Artificial em Cães
Inseminação Artificial em Cães
É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea
sêmen fresco
sêmen refrigerado
sêmen congelado
Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco
Inseminação Artificial com Sêmen à Fresco
Sêmen não diluídoforma mais comumtaxa de concepção de 75 a 80%
Sêmen diluídoenriquecimento do sêmen para prolongar a sua viabilidade para 12 a 48hAumenta o volume do ejaculado
Protocolo para IA com sêmen à fresco
Protocolo Protocolo para IA com sêmen à frescopara IA com sêmen à fresco
detecção do momento da ovulaçãodetecção do momento da ovulação•inseminar no pico céls. Superficiais•repetir a cada 48h
•avaliação• volume de 5 a 10 ml •dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis
coleta e avaliação do sêmen coleta e avaliação do sêmen
•posteriores da fêmea elevados durante 15 minutos
inseminação no fundo de vagina inseminação no fundo de vagina
Inseminação Artificial em Cães
Inseminação Artificial em Cães
É a deposição do sêmen no interior do É a deposição do sêmen no interior do trato reprodutivo da fêmeatrato reprodutivo da fêmea
sêmen fresco
sêmen refrigerado
sêmen congelado
Finalidades da criopreservaçãoFinalidades da criopreservação
Baixa metabolismo espermático
Aumenta sobrevida do sêmen
Utilização do sêmen no momento desejado
Refrigerado ou CongeladoRefrigerado ou Congelado
Utilidade do sêmen criopreservado
Utilidade do sêmen criopreservado
Mercado PET
Animais que vivem em locais distantes
Utilização de material genético de alto valor zootécnico
Reserva biológica de machos melhoradores
Utilidade do sêmen criopreservado
Utilidade do sêmen criopreservado
Preservação animal
Reserva biológica do país
FrozenZoo
Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cão
Menores danos à integridade da célula
Sêmen de cão reaquecidoSêmen de cão reaquecido
Alta fertilidadeAlta fertilidadeCurto tempo de preservação!Curto tempo de preservação!
Congelação do sêmen de cãoCongelação do sêmen de cão
Longo período de conservação
Maiores danos à integridade da célula
Sêmen de cão descongeladoSêmen de cão descongelado
Baixa fertilidadeBaixa fertilidadeCurto tempo de utilização!Curto tempo de utilização!
Refrigeração do sêmen de cãoRefrigeração do sêmen de cãoManutenção do sêmen a uma temperatura de 5ºC por no máximo 72h
Ideal para o transporte de sêmen
Menores danos à integridade da célula
Taxas de concepção de aproximadamente 80%
Manejo do ciclo estral e técnica de inseminação mais fáceis e baratos
Inseminação Artificial com Sêmen Congelado
Inseminação Artificial com Sêmen Congelado
Manutenção do sêmen a temperatura de -196ºC por período de tempo indefinido
Baixas % de motilidade ao descongelamento
Diluídor adequado que deve conter crioprotetor
Dose inseminante de 150 milhões de sptz. viáveis
Sobrevida de 18 a 24 horas após o descongelamento
Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela
Técnicas de deposição do Sêmen no Trato Reprodutivo da cadela
Fundo de Vagina- com pipeta plástica rígida e seringa plástica *
Transcervical – catéter Norueguês *
Endoscopia - utilizado para a cateterização cervical*
Intra uterina - laparoscopia ou laparotomia*
Taxas de concepção com sêmen congelado
Taxas de concepção com sêmen congelado
IA intra vaginal - 0 a 60%
IA intrauterina - 46 a 83%
Preparo do sêmen canino para o transporte
Preparo do sêmen canino Preparo do sêmen canino para o transportepara o transporte
Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigeradoSoluciona problemas de distância entre a Matriz e o Reprodutor
Possibilita várias inseminações em um mesmo ciclo com uma coleta de sêmen
Mais de uma cadela pode ser inseminada com uma mesma remessa de sêmen
Amplia a diversidade racial e familiar em uma região longínqua do país
Transporte do sêmen refrigeradoTransporte do sêmen refrigerado
Evita a quarentena e diminui o contágio de doenças
Possibilita o transporte de sêmen de animais de cativeiro entre zoológicos.
Possibilita remessa de sêmen para análise em centros distantes de onde se encontra o macho
Diluidores para transporte de sêmen canino
Diluidores para transporte Diluidores para transporte de sêmen caninode sêmen canino
TRIS sem glicerol
Glicina Gema sem Glicerol
Meio á base de leite desnatado e glicose
(Cunha, 1997; Rota, 1997)
Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)
Diluidor á base de leite desnatado e glicose Diluidor á base de leite desnatado e glicose (Kenney, 1975)(Kenney, 1975)
Glicose..........................................................4,9gLeite Molico...................................................2,4gBicarbonato de sódio (solução a 7,5%).........2mlSulfato de gentamicina (50mg/ml).................2mlÁgua destilada..............................................92ml
Osmolaridade = 375 ± 2pH= 6,99 ± 0,02
Cuidados com o equipamento para o transporte sêmen
Cuidados com o equipamento para o transporte Cuidados com o equipamento para o transporte sêmensêmen
O sêmen deve ser acondicionado em recipientes resistentes.
A temperatura do equipamento de transporte não pode ser NUNCA inferior a zero.
Deve haver um sistema de refrigeração para manter e a temperatura entre (0 a 18ºC).
O equipamento de transporte deve indicar o seu conteúdo diminuindo o risco de que este seja violado.
Transporte de sêmen
refrigerado
Transporte de Transporte de sêmen sêmen
refrigeradorefrigerado
Transporte de sêmen refrigerado
Transporte de sêmen Transporte de sêmen refrigeradorefrigerado
Os tubos de transporte devem ser devidamente
marcados com:
Doador (nome do certificado)
Raça
Diluidor utilizado
Data e hora da coleta
Local da coleta
Veterinário responsável
Identificação do sêmen para o transporte sêmen
Identificação do sêmen para o Identificação do sêmen para o transporte sêmentransporte sêmen
O Veterinário responsável pela O Veterinário responsável pela
refrigeração deverá expedir um relatório refrigeração deverá expedir um relatório
detalhado do processo de refrigeração, detalhado do processo de refrigeração,
facilitando, desta forma, a correta facilitando, desta forma, a correta
utilização do sêmen pelo Veterinário que utilização do sêmen pelo Veterinário que
realizará as IAs.realizará as IAs.
O doador de sêmen e a matriz deverão atender as
exigências genéticas, zootécnicas, sanitárias
(Brucelose e Leptospirose com validade de 30 dias) ,
andrológicas e de identificação segundo o CBKC.
O doador e a matriz devem ter certificado de DNA
expedido por laboratório credenciado pelo CBKC.
Exigências do CBKC para o transporte sêmen
Exigências do CBKC para o Exigências do CBKC para o transporte sêmentransporte sêmen
CBKC – Confederação Brasileira de Cinofilia
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*Slide 22
LaparotomiaLaparotomiaLaparotomia
LaparoscopiaLaparoscopiaLaparoscopia
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