COLORAÇÃO DE GRAM
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COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE GRAMGRAM
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HISTÓRICOHISTÓRICO
• 1884, HANS CRISTIAN GRAM, DESCOBRUI QUE AS BACTÉRIAS PODIAM SER DIVIDIDAS EM DOIS GRANDES GRUPOS, PARTINDO DA CAPACIDADE QUE TÊM AS CÉLULAS CORADAS DE RESISTITEM OU NÃO A UMA DESCOLORAÇÃO PELO ÁLCOOL.
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•ESSA AÇÃO, PROVAVELMENTE, OCORRE PELA MAIOR QUANTIDADE DE LIPÍDIOS NA PARADE CELULAR DAS BACTÉRIAS.
•A PAREDE DA CÉLULA GRAM NEGATIVA TÊM UM CONTEÚDO LIPÍDICO MAIS ELEVADO QUE AS CÉLULAS GRAM POSITIVAS.
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FINALIDADEFINALIDADE
É UM MÉTODO USADO PARA DIFERENCIAR AS BACTÉRIAS:
• GRA-POSITIVA
• GRAM-NEGATIVAS
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ESTRUTURA ESTRUTURA BACTERIANABACTERIANA
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ESTRUTURA BACTERIANAESTRUTURA BACTERIANA
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ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA
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ESTRUTURA GRAM POSITIVAESTRUTURA GRAM POSITIVA
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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM POSITIVAPOSITIVA
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ESTRUTURA GRAM NEGATIVAESTRUTURA GRAM NEGATIVA
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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA
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ESTRUTURA GRAM ESTRUTURA GRAM NEGATIVANEGATIVA
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DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E DIFERENÇA ENTRE GRAM POSITIVA E GRAM NEGATIVAGRAM NEGATIVA
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CORANTES E REAGENTESCORANTES E REAGENTES
CRISTAL VIOLETA (VIOLETA DE METILA).
LUGOL.
ÁLCOOL.
SAFRANINA.
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MÉTODO DA MÉTODO DA COLORAÇÃO DE COLORAÇÃO DE
GRAMGRAM
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COLORAÇÃO PRIMÁRIACOLORAÇÃO PRIMÁRIA
ESFREGAÇO FIXADO COM SOLUÇÃO SOLUÇÃO DE CRISTAL VIOLETADE CRISTAL VIOLETA DURANTE 1 MINUTO.
LAVAR COM ÁGUA CORRENTE.
AS CÉLULAS NESTE ESTÁGIO ADQUIREM TONALIDADE AZUL-ESCURA OU PÚRPURA.
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MORDENTEMORDENTE
ESFREGAÇO É COBERTO POR UMA SOLUÇÃO DE IODOSOLUÇÃO DE IODO.
CRISTAL VIOLETA É FIXADO À CÉLULA PELO MORDENTE.
COMPLEXO VIOLETA-IODO É FORTEMENTE RETIDO POR UM GRUPO DE BACTÉRIAS.
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DESCOLORAÇÃODESCOLORAÇÃO
APLICAR ÁLCOOL ETILÍCOÁLCOOL ETILÍCO NO ESFREGAÇO.
A FUNÇÃO DO ÁLCOOL É DESIDRATAR OS CARBOITRADOS EXISTENTES NA PAREDE CELULAR DE BACTÉRIAS GRAM-POSITIVAS, RETENDO O CORANTE PRIMÁRIO.
AS GRAM-NEGATIVAS, ATRAVÉS DA DISSOLUÇÃO DOS LIPÍDIOS, TÊM A POROSIDADE OU PERMEABILIDADE DA PAREDE CELULAR AUMENTADA, EVITANDO QUE O COMPLEXO CORANTE SEJA RETIDO.
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CONTRASTECONTRASTE
FUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINAFUCSINA DILUÍDA OU SAFRANINA CONSTITUI O CORANTE SECUNDÁRIO.
SE AS CÉLULAS PERMITEM O DESCORAMENTO PELO ÁLCCOL, ELAS FIXAM O CORANTE SECUNDÁRIO NESTA SEGUNDA ETAPA.
COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE ROXO: GRAM-POSITIVAS.
COLORAÇÃO DAS BACTÉRIAS DE VERMELHO: GRAM-NEGATIVAS.
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PASSOS PARA COLORAÇÃO DE PASSOS PARA COLORAÇÃO DE GRAMGRAM
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RESULTADOSRESULTADOS
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RESULTADORESULTADO
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RESULTADORESULTADO
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PRANCHAS PRANCHAS COLORIDASCOLORIDAS
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GRAM POSITIVASGRAM POSITIVAS
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GRAM NEGATIVASGRAM NEGATIVAS
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CLASSIFICAÇÃO CLASSIFICAÇÃO DAS BACTÉRIASDAS BACTÉRIAS
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AERÓBIOSAERÓBIOS
1) COCOS
GRAM-POSITIVOS: Staphylococcus, Streptococcus.
GRAM-NEGATIVOS: Neisseria.
2) BACILOS
GRAM-POSITIVOS: Corynebacterium, Lactobacillus, Listeria,etc.
GRAM-NEGATIVOS: Enterobactérias (Escherichia, Proteus, Klebsiella, Salmonella, Shigella), Pseudomonas, Bordetella, Haemophilus, etc.
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ANAERÓBIOSANAERÓBIOS
1) COCOS
GRAM-POSITIVOS: Peptococcus, etc.
GRAM-NEGATIVOS: Veilonella, etc.
2)BACILOS
GRAM-POSITIVOS: Clostridium, etc.
GRAM-NEGATIVOS: Bacteroides, etc.
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OBSERVAÇÃOOBSERVAÇÃO
REGRA GERAL:REGRA GERAL:
OS COCOS, COM EXCEÇÃO DA Neisseria, SÃO GERALMENTE GRAM (+).
OS BASTONETES, COM EXCEÇÃO DAS CORINEBACTÉRIAS, Listeria, Bacillus E CLOSTRÍDIOS, GRAM (-).
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