Clase Vectores
-
Upload
jacky-caicedo -
Category
Documents
-
view
225 -
download
5
description
Transcript of Clase Vectores
![Page 1: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/1.jpg)
EXAMEN CORTO RFLPSBiología Molecular
![Page 2: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/2.jpg)
1
2
![Page 3: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/3.jpg)
VECTORES DE CLONACIÓN Y EXPRESIÓNBiología Molecular
![Page 4: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/4.jpg)
![Page 5: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/5.jpg)
CLONACIÓN GENICA
La clonación genica o clonación molecular, es la introducción de un fragmento de ADN denominado inserto dentro de una molécula de ADN denominada vector, que puede replicarse de manera autónoma e independiente del genoma de la célula hospedera
![Page 6: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/6.jpg)
¿ QUÉ ES UN VECTOR DE CLONACIÓN?
Es una molécula pequeña de ADN que puede replicarse de manera autónoma en un huésped. ( célula bacteriana o de levaduras )Se utilizan en la clonación por que pueden seguir su desarrollo normal a pesar de que secuencias adicionales de ADN sean incorporados en su material genético.
Se auto replican utilizando la maquinaria de la célula huésped.
![Page 7: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/7.jpg)
![Page 8: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/8.jpg)
PLÁSMIDO
Los plásmidos son moléculas de ADN circulares, originalmente aisladas de bacterias y que pueden extraerse de las mismas e incorporarse a otras, a través del proceso de transformación.
Los plásmidos fueron modificados por los investigadores para ser empleados como “vectores”.
Así, el gen de interés puede insertarse en el plásmido-vector e incorporarse a una nueva célula.
![Page 9: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/9.jpg)
![Page 10: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/10.jpg)
![Page 11: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/11.jpg)
![Page 12: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/12.jpg)
![Page 13: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/13.jpg)
PLÁSMIDOPara seleccionar las células (bacterias o células animales o vegetales) que recibieron el plásmido, éste lleva, además del gen de interés (por ej., el gen de la insulina humana), un gen marcador de selección (por. ej., de resistencia a un antibiótico), que le otorga a la célula que lo lleva la capacidad de sobrevivir en un medio de cultivo selectivo (medio con antibiótico, en este ejemplo).
Las células que sobreviven se dividen y generan colonias, formadas por bacterias idénticas
http://www.iesalbayzin.org/descargas/AnimacionesBio-Geo/WebBiologia08/cloning%5b1%5d.swf
![Page 14: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/15.jpg)
![Page 16: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/16.jpg)
![Page 17: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/17.jpg)
![Page 18: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/18.jpg)
![Page 19: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/19.jpg)
VECTORES DE AMPLIFICACION
![Page 20: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/20.jpg)
VECTORES DE EXPRESION
![Page 21: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/21.jpg)
![Page 22: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/22.jpg)
![Page 23: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/23.jpg)
![Page 24: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/24.jpg)
![Page 25: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/25.jpg)
BACTERIÓFAGO LAMBDA
• Son virus que infectan naturalmente bacterias y se comportan como parásitos intracelulares obligados que se multiplican haciendo uso de la maquinaria biosintética
• El bacteriófago lambda es el fago más utilizado como vector de clonación
• Presentan cola y son incapaces de replicarse autónomamente por lo que necesitan infectar a la célula para poder hacerlo.
![Page 26: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/26.jpg)
TRANSFECCIÓN
![Page 27: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/27.jpg)
BACTERIÓFAGO LAMBDA
Su genoma consiste de una molécula lineal de aproximadamente 45000 pb, cuyos extremos son 12 nucleótidos, que contienen secuencias complementarias entre sí, denominados sitios cos, que utiliza para “circularizar” su genoma a través de la acción de una ligasa de la célula huésped.
![Page 28: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/28.jpg)
![Page 29: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/29.jpg)
![Page 30: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/30.jpg)
CÓSMIDOSSon vectores híbridos combina las ventajas de plásmidos y fagos
Proporciona la secuencia “cos” que permite el empaquetamiento en cápside vírica
Secuencias plasmidicas de replicación y de genes de resistencia a antibióticos
Emplean la habilidad de las partículas infecciosas del bacteriófago lambda para empaquetar piezas lineales de ADN e introducirlas en las bacterias.
Son vectores que se reproducen de igual manera que los plásmidos en las bacterias.
![Page 31: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/31.jpg)
PASOS EN LA CLONACIÓN DE UN CÓSMIDO
![Page 32: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/32.jpg)
CROMOSOMAS ARTIFICIALES DE BACTERIAS
BACs: contienen genes que reducen su capacidad de copia, es más estable y no sufre reordenamientos
![Page 33: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/33.jpg)
![Page 34: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/34.jpg)
CROMOSOMAS ARTIFICIALES DE LEVADURA
YACs: contiene secuencias de centrómero, telómeros y un origen de replicación
![Page 35: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/35.jpg)
![Page 36: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/36.jpg)
![Page 37: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/37.jpg)
![Page 38: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/38.jpg)
![Page 39: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/39.jpg)
![Page 40: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/40.jpg)
![Page 41: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/41.jpg)
![Page 42: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/42.jpg)
APLICACIONES
![Page 43: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/43.jpg)
Obtención de proteínas de interés médico, comercial, etc...(insulina, hormona del crecimiento, factores de coagulación)
![Page 44: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/44.jpg)
Obtención de vacunas recombinantes(alternativa al uso de organismos patógenos inactivos)
La levadura fabrica las proteínas víricas con poder inmunológico
Inyección de proteínas víricas en un chimpancé
plásmido bacteriano
Integración del plásmido híbrido en el núcleo de una célula de levaduraADN
Extracción del ADN del virus
![Page 45: Clase Vectores](https://reader034.fdocument.pub/reader034/viewer/2022052603/563db7d6550346aa9a8e687e/html5/thumbnails/45.jpg)
Plantas transgénicas
tumores
célula vegetal
Proliferación de hormonas crecimiento. Se forman tumores en las zonas de la lesión
Plásmido Ti
núcleo
cromosoma
cromosoma
Agrobacterium
inductor de tumorescontiene oncogenes(genes onc)
Ingeniero genético natural tras sutitución de genes onc por genes de interés
Transgénesis= introducción de ADN extraño en un genoma, de modo que se mantenga estable de forma hereditaria y afecte a todas las células en los organismos multicelulares.
Agrobacterium tumefaciens es patógena de plantas.Produce tumores