Mayo 2013

Laboratorio de ChagasInDRE

Agenda

• Etiología

• Diagnóstico

• Experiencia1. Pruebas serológicas utilizadas en México para

identificación de anticuerpos anti-T. cruzi

2. Tiras reactivas, eficiencia diagnóstica en suero o plasma

Algoritmo de Diagnóstico Serológico

Enfermedad de Chagas

• Enfermedad de Chagas

Enfermedad parasitaria, crónica, causada por el protozoario flagelado:

Carlos Chagas1879 – 1934

Rodnius prolixus

Triatoma dimidiata

ReservorioVector

Trypanosoma cruzi

Agente causalVectorReservorioEnfermedad

Ciclo de vida: Trypanosoma cruzi

Formas en el intestino del vector

Fuente: José Rodrigues Coura. CURSO DE CAPACITAÇÃO DOS MICROSCOPISTAS DE MALÁRIA E

DOS LABORATORISTAS DA REDE PÚBLICA PARA DETECÇÃO DO Trypanosoma cruzi. Laboratório de Doenças

Parasitárias Medicina Tropical IOC-FIOCRUZ. 2008.

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2Enfermedad de Chagas: ciclo de vida

• De cada 10 casos:

– 1-2 agudos (menores de edad,

ancianos, mortal)

– 3-4 indeterminados

(seropositivos)

– 3-4 desarrollan lesiones

crónicas (megas cardíacos 95%

y digestivos 5%)

Enfermedad de Chagas

Agenda

• Importancia Global

• Etiología

• Diagnóstico

• Experiencia1. Pruebas serológicas utilizadas en México para

identificación de anticuerpos anti-T. cruzi

2. Tiras reactivas, eficiencia diagnóstica en suero o plasma de población mexicana

• Algoritmo de Diagnóstico Serológico

Diagnóstico de la enfermedad

Historia de exposición (estancia en zona endémica,

hijos de madre con infección por Chagas), clínica

(ausente en la mayoría de los casos) y pruebas de

laboratorio.

Diagnóstico de laboratorio

Caso clínico

Producto clínico

Identificación directa

-Morfología microscópica

-Aislamiento e identificación

-Identificación de antígenos

-Identificación de genes

Identificación indirecta

Anticuerpos IgG

CASO

CONF.

EPIDEMIOLOGICO

CLINICO

LABORATORIO

Historia Natural de la Enfermedad

AnticuerposParasitemia

Meses Años

Fase aguda Fase crónica

Freilij, WHO 2007

Selección de pruebas

• Fase aguda• Transmisión vectorial

• Transfusión sanguínea

• Accidente de laboratorio

• Transmisión oral

• Reactivación por inmunosupresión

• Transmisión congénita

• Fase crónica

– Asintomática

– Sintomática• Cardiaca

• Digestiva

Presencia de parásitos en

el 100% de los casos

Presencia de anticuerpos en

el 95% a 98% de los casos

Diagnóstico de laboratorio

• Existen diversos métodos – Xenodiagnóstico

– Hemocultivo

– Frotis sanguíneo

– Microstrout

– PCR

– Detección de anticuerpos

La sensibilidad

incrementa

La especificidad

decrece

La facilidad de uso

incrementa

1913 RFC Guerreiro y Machado

1960 HAI Cerisola, 1962

IFI IgG Camargo, 1966

IFI IgM Camargo, 1974

HAI-RFC Almeida y Fife 1974

1975 ELISA Voller, 1975

1978 ANTÍGENOS 2ª. gen Autores diversos

1985 MULTICÉNTRICOS Camargo 1987

Moncayo, 1989

1998 PRUEBAS RÁPIDAS Bealy, 1998

Pruebas de diagnóstico serológico

PRUEBAS

CONVENCIONALES

Selección de pruebas

Normatividad

• OMS 1991: Par serológico (sensibilidad 98-99.5%)

• Normas MT Mercosur (Res 42/00): Par serológico

• OMS 2002 (WHO-TRS 905; 2002: pp30):

– Tamizaje: 1 método de alta sensibilidad (>99%)

– Diagnóstico: Par serológico

• Argentina:

– Tamizaje y diagnóstico por Par serológico

• Brasil:

– Hasta 2002: Tamizaje y diagnóstico por Par serológico

– Desde 2003: Tamizaje por 1 ELISA

– 2005: Diagnóstico con Par serológico

• México:

– NOM-032-SSA2-2010: Confirmación del diagnóstico por laboratorio. “…al menos dos pruebas serológicas diferentes positivas.” Par serológico

Practicas

Sensibilidad y Especificidad

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Se= 0.90 (0.89 – 0.91) Ep= 0.98 (0.98 – 0.98)

• Importancia Global

• Etiología

• Epidemiología

• Diagnóstico

• Experiencia1. Pruebas serológicas utilizadas en México para

identificación de anticuerpos anti-T. cruzi

2. Tiras reactivas, eficiencia diagnóstica en suero o plasma

• Algoritmo de Diagnóstico Serológico

Agenda

Reactivos utilizados por la Red Nacional de Laboratorios de Salud Pública

reactivos distintos

Fuente: Laboratorio de Chagas, InDRE.

La especificidad de las pruebas es alta durante la fase crónica (s&a)

Fuente: Laboratorio de Chagas, InDRE.

Sensibilidad en asintomáticos y en sintomáticos

La sensibilidad de las

pruebas en la fase

crónica asintomática

es variable

Fuente: Laboratorio de Chagas, InDRE.

• Etiología

• Diagnóstico

• Experiencia1. Pruebas serológicas utilizadas en México para

identificación de anticuerpos anti-T. cruzi

Tiras reactivas, eficiencia diagnóstica en suero o plasma

• Algoritmo de Diagnóstico Serológico

Agenda

• No demanda reactivos externos, equipo e instrumentos.

• No requieren refrigeración.

• Pueden ser almacenadas a temperatura ambiente por varios años.

• Fácil de usar en campo y en unidades médicas rurales.

• Se pueden utilizar con diferentes tipos de muestra en volúmenes pequeños.

• Se pueden realizar por personal sin destreza en el laboratorio con un entrenamiento menor.

• Presentadas en estuches especiales (Tira o cartucho).

• Presentación en empaques individuales.

• Aceptación científica, local o internacional.

Ventajas del uso de RDTs

Laboratorio de Chagas, InDRE.

Una prueba bajo control estadístico

y operación óptima

Requerimientos

Requerimientos

Laboratorio de Chagas, InDRE.

Pruebas rápidas para ECh

Desempeño

Laboratorio de Chagas, InDRE.

Ep

Se

• Importancia Global

• Etiología

• Epidemiología

• Diagnóstico

• Experiencia1. Pruebas serológicas utilizadas en México para

identificación de anticuerpos anti-T. cruzi

2. Tiras reactivas, eficiencia diagnóstica en suero o plasma

• Algoritmo de Diagnóstico Serológico

Agenda

a

b

MARCO ANALÍTICO EXISTENTE EN 2012 EN LA RNLSP PARA EL PARA EL DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE CHAGAS

Fuente: Archivo LECH-InDRE

ALGORITMO DE REFERENCIA DIAGNÓSTICO SEROLÓGICO DE CHAGAS

1)

2)

3)

4)

5)

6)

ALGORITMO DE DIAGNÓSTICO

Se=98 a 99.5

Hay que considerar:

— Los anticuerpos IgG tienen valor si persisten después de los 8 meses de vida.

— La IgM y la IgA no son útiles para el diagnóstico.

— Todo niño hijo de madre con enfermedad de Chagas está infectado si el examen

parasitológico es positivo o se detectan anticuerpos después de los 8-9 meses de

edad, independiente si es sintomático o no.

Técnica del microhematocrito

Variantes de visualización

Torrico et al. Rev Soc Bras Med Trop.

2005;38 Suppl 2:58-61.

Schneider et al. An Pediatr

Contin. 2008;6(6):369-74.

Freilij et al. J Clin Microbiol.

1983;18:327-30.

Mayo 2013

Laboratorio de ChagasInDRE