BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI

PS. SKed

BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI

LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK

( TAHUN AKADEMIK 2018/2019 )

DISUSUN OLEH :

dr. Novi Khila Firani, M.Kes., Sp.PK dr. Dian Sukma H., Sp.PK., M.Biomed

dr. Siti Fatonah, Sp.PK dr. I Putu Adi Santosa, Sp.PK

dr. Singgih Pudjo Wahono, Sp.PK Dr. dr. Hani Susianti, Sp.PK(K)

Prof. Dr. dr. Kusworini, M.Kes. Sp.PK dr. Indah Adhita Wulanda, Sp.PK, M.Biomed dr. Catur Suci Sutrisnani, M.Biomed, Sp.PK

NAMA MAHASISWA : ...............................................

NIM : ................................................

KELOMPOK :.................................................

LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK

FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS BRAWIJAYA M A L A N G

2019

PS. SKed

i

KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan kehadirat Allah SWT, karena atas perkenan-Nya buku

Penuntun Praktikum Patologi Klinik untuk mata kuliah Hematologi Program Studi

Kedokteran Tahun Ajaran 2018 / 2019 dapat terselesaikan.

Buku penuntun praktikum ini merupakan salah satu unsur penunjang dalam

proses pembelajaran mahasiswa pendidikan sarjana kedokteran untuk mencapai

kompetensinya, khususnya untuk lebih memahami dasar-dasar pemeriksaan

laboratorium di bidang hematologi. Tim Penyusun berharap buku ini dapat

dimanfaatkan dengan sebaik-baiknya oleh mahasiswa selama proses belajar.

Kami mengucapkan terimakasih kepada semua staf Laboratorium Patologi Klinik

Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya, yang terlibat baik langsung maupun tidak

langsung dalam penyusunan buku penuntun praktikum ini.

Penyusun mohon maaf apabila masih banyak kekurangan dalam penyusunan

buku ini. Saran dan kritik kami butuhkan untuk perbaikan dan peningkatan mutu buku

penuntun praktikum ini. Semoga di masa yang akan datang penyusunan buku ini dapat

menjadi lebih baik. Semoga buku penuntun praktikum ini bermanfaat bagi mahasiwa,

staf pengajar, serta seluruh komponen yang terlibat pada proses pembelajaran

pendidikan sarjana kedokteran.

Malang, 2 Januari 2019

Tim Penyusun

PS. SKed

ii

DAFTAR ISI

LABORATORIUM PATOLOGI KLINIK .................................................................................................. i

KATA PENGANTAR .................................................................................................................................... i

TIM PENYUSUN .......................................................................................................................................... v

TATA TERTIB PESERTA PRAKTIKUM .............................................................................................. vi

PEMERIKSAAN KADAR HEMOGLOBIN ............................................................................................. 1

PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 1

TUJUAN ..................................................................................................................................................... 1

PRAKTIKUM PENGUKURAN KADAR Hb DENGAN METODE SAHLI.................................. 2

Prinsip : ................................................................................................................................................ 2

Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 2

Pelaksanaan : ..................................................................................................................................... 2

Interpretasi ......................................................................................................................................... 4

LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ......................................................................................................... 5

PEMERIKSAAN HEMATOKRIT ............................................................................................................. 6

PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 6

TUJUAN ..................................................................................................................................................... 6

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HEMATOKRIT (Metode Wintrobe cara Makro) ............. 6

Prinsip : ................................................................................................................................................ 6

Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 6

Pelaksanaan : ..................................................................................................................................... 7

Interpretasi ......................................................................................................................................... 7

LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ......................................................................................................... 8

PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH ................................................................................................ 9

PENDAHULUAN ..................................................................................................................................... 9

TUJUAN ..................................................................................................................................................... 9

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN LED (Metode Westergren) ..................................................... 9

Prinsip : ................................................................................................................................................ 9

Alat dan Bahan : ................................................................................................................................ 9

Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 10

Interpretasi ...................................................................................................................................... 10

LAPORAN HASIL PRAKTIKUM ...................................................................................................... 11

PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT ......................... 12

PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 12

TUJUAN .................................................................................................................................................. 12

PS. SKed

iii

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT .............................................................................................................................................. 12

Prinsip : ............................................................................................................................................. 12

Alat dan Bahan : ............................................................................................................................. 12

Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 13

A. Membuat sediaan hapusan darah .......................................................................... 13

B. Membuat pewarnaan Wright pada sediaan hapusan darah ........................ 14

C. Pemeriksaan mikroskopik sediaan hapusan darah ........................................ 15

D. Pemeriksaan hitung jenis leukosit pada sediaan hapusan darah .............. 15

Interpretasi ...................................................................................................................................... 16


PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER DAN INTERPRETASINYA ..................................................................................................................... 19

PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 19

TUJUAN .................................................................................................................................................. 19

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER .................................................................................................................................. 19

Prinsip : ............................................................................................................................................. 19

Alat dan Bahan : ............................................................................................................................. 19

Pelaksanaan : .................................................................................................................................. 20

Interpretasi ...................................................................................................................................... 21


PEMERIKSAAN MASA PERDARAHAN (BLEEDING TIME) ....................................................... 23

PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 23

TUJUAN .................................................................................................................................................. 23

PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PERDARAHAN (METODE DUKE) .......................... 24

Alat dan Bahan : ............................................................................................................................ 24

Prosedur : ......................................................................................................................................... 24

Interpretasi ...................................................................................................................................... 24


PEMERIKSAAN MASA PEMBEKUAN (CLOTTING TIME) .......................................................... 26

PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 26

TUJUAN .................................................................................................................................................. 26

PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PEMBEKUAN (Cara Modifikasi LEE & WHITE) 27

Prinsip : ............................................................................................................................................. 27

Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 27

Prosedur : ......................................................................................................................................... 27

PS. SKed

iv

Interpretasi ...................................................................................................................................... 27


PEMERIKSAAN TRANSFUSI DARAH ............................................................................................... 29

PENDAHULUAN .................................................................................................................................. 29

TUJUAN .................................................................................................................................................. 30

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH CARA SLIDE ..................................... 30

Prinsip : ............................................................................................................................................. 30

Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 30

Prosedur : ......................................................................................................................................... 31

Interpretasi ...................................................................................................................................... 31

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN REAKSI SILANG ........................................................................ 31

Prinsip ................................................................................................................................................ 31

Alat dan Bahan: .............................................................................................................................. 32

Prosedur: .......................................................................................................................................... 32

Interpretasi: ..................................................................................................................................... 33


DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................................................. 35

PS. SKed

v

TIM PENYUSUN

1. Ketua : dr. Novi Khila Firani, MKes, SpPK

2. Anggota :

1. dr. Dian Sukma H., Sp.PK., M.Biomed

2. dr. Siti Fatonah, Sp.PK

3. dr. I Putu Adi Santosa, Sp.PK

4. dr. Singgih Pudjo Wahono, Sp.PK

5. Dr. dr. Hani Susianti, Sp.PK(K)

6. Prof. Dr. dr. Kusworini, M.Kes. Sp.PK

7. dr. Indah Adhita Wulanda, Sp.PK, M.Biomed

8. dr. Catur Suci Sutrisnani, M.Biomed, Sp.PK

3. Analis : Widi Astuti, A.Md

4. Administrasi : Saiful Aripin, S.Si

PS. SKed

vi

TATA TERTIB PESERTA PRAKTIKUM

1. Setiap mahasiswa peserta praktikum (praktikan) wajib hadir paling lambat 15

menit sebelum praktikum dimulai.

2. Praktikan sudah mempelajari materi praktikum yang akan dilaksanakan pada

hari itu.

3. Praktikan wajib mengikuti seluruh materi praktikum yang telah dijadwalkan.

4. Praktikan wajib menandatangani presensi kehadiran.

5. Sebelum praktikum akan diadakan pre-test. Praktikan yang terlambat

mengikuti pre-test, tidak diberikan waktu tambahan.

6. Setiap praktikan wajib membawa:

Jas Laboratorium (sudah dipakai dengan benar dan rapi sebelum

memasuki ruangan laboratorium)

Buku Penuntun Praktikum

Alat tulis

Sarung tangan (handscoen)

7. Selama praktikum, praktikan tidak diperkenankan makan, minum dan

melakukan kegiatan di luar kegiatan praktikum.

8. Setelah melakukan praktikum, praktikan diwajibkan membersihkan alat-alat

yang dipakai dan mengembalikan pada tempat semula dalam keadaan

bersih. Praktikan wajib menjaga kebersihan laboratorium.

9. Setiap kelompok atau praktikan wajib mengganti alat yang rusak atau hilang

selama praktikum.

10. Laporan hasil praktikum dikumpulkan setelah praktikum.

11. Praktikan wajib mengikuti praktikum dengan tertib.

PS. SKed

1

PEMERIKSAAN KADAR HEMOGLOBIN

PENDAHULUAN

Hemoglobin (Hb) terkandung di dalam sel darah merah, yang berperan

penting sebagai pengangkut oksigen dari paru-paru keseluruh tubuh. Hemoglobin

merupakan senyawa kompleks antara metalloporfirin (heme) dan protein

(globin). Sintesis Hb membutuhkan berbagai nutrisi, antara lain asam amino

untuk sintesis globin maupun porfirin, mineral (zat besi) dalam bentuk ion Fe2+

yang bertindak sebagai pengikat oksigen (O2), dan vitamin B12 serta asam folat

yang penting untuk maturasi sel darah merah.

Kelainan akibat kadar hemoglobin dalam darah yang lebih rendah dari

harga normal disebut anemia. Penyebab anemia bermacam-macam, antara lain

anemia akibat defisiensi fe, defisiensi asam folat, defisiensi vitamin B12, anemia

hemolitik, anemia karena penyakit kronis ataupun perdarahan. Mengingat

pentingnya fungsi hemoglobin diatas, maka bila kadarnya kurang akan

mengganggu transportasi oksigen, sehingga berpengaruh pada kinerja sel-sel

tubuh.

Metode pengukuran kadar hemoglobin pada prinsipnya adalah

menggunakan sifat hemoglobin sebagai pigmen berwarna. Adapun metode

pemeriksaan hemoglobin antara lain metode fotometri dengan mengukur

Cyanmethemoglobin, dan metode manual lain yang sederhana yaitu

menggunakan alat hemoglobinometer dengan metode Sahli. Meskipun cara

penetapan kadar hemoglobin dalam darah yang dianjurkan bukanlah memakai

hemoglobinometer menurut Sahli, namun metode yang sederhana ini masih

berguna dalam laboratorium kecil. Pada praktikum ini menggunakan metode Sahli

untuk pengukuran kadar Hb.

TUJUAN

Mahasiswa diharapkan dapat :

1. Memahami cara pengukuran kadar Hb

2. Melakukan pengukuran Hb dengan metode Sahli

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran kadar Hb dengan

metode Sahli

PS. SKed

2

PRAKTIKUM PENGUKURAN KADAR Hb DENGAN METODE SAHLI

Prinsip : Hemoglobin bereaksi dengan larutan HCl 0,1N menjadi asam hematin.

Warna yang terjadi dibandingkan secara visual dengan warna batang standar

pada alat hemometer Sahli.

Alat dan Bahan : Hemometer Sahli

Tabung Sahli dan pengaduk gelas

Pipet Sahli

Pipet Pasteur

Kertas tissue

HCl 0,1 N

Aquades

Sampel darah EDTA

Gambar alat dan bahan pemeriksaan Hb Sahli

Pelaksanaan : 1. Masukkan HCl 0,1 N ke dalam tabung Sahli sampai tanda angka 2 g%

(sekitar 5 tetes).

2. Hisap darah dengan pipet Sahli sampai dengan tanda batas 20μL.

3. Hapuslah darah yang melekat pada sebelah luar ujung pipet dengan kertas

tissue.

4. Kelebihan darah dalam pipet dikeluarkan dengan cara menyentuh ujung

pipet dengan memakai kertas tissue

PS. SKed

3

5. Segera alirkan darah dari pipet ke dalam dasar tabung pengencer dengan

jalan meniupnya, tetapi jangan sampai terjadi gelembung udara

6. Pipet dibilas dengan cara menghisap dan meniup larutan HCI 2 atau 3 kali.

7. Kocoklah tabung aqar darah dan HCl bereaksi membentuk asam hematin

yang berwarna coklat tua

8. Encerkan dengan aquades tetes demi tetes sambil diaduk dengan

pengaduk gelas, sambil dibandingkan dengan warna standar pada alat

hemometer Sahli.

9. Persamaan warna campuran dengan warna standar harus dicapai dalam

waktu 3-5 menit setelah saat darah dan HCI dicampur.

10. Bacalah kadar hemoglobin dengan satuan gram/dL

Keuntungan dari metode Sahli yaitu murah, praktis dan mudah dilakukan.

Namun kekurangan metode Sahli untuk pengukuran kadar Hb yaitu kurang teliti.

Kesalahan-kesalahan yang bisa terjadi pada penetapan kadar hemoglobin cara

Sahli yaitu :

1. Tidak tepat mengambil 20 ul darah.

2. Sisa darah yang menempel pada pipet Sahli tidak dihapus

3. Darah dalam pipet tidak sempurna dikeluarkan semua ke dalam larutan HCl

, dan tidak dibilas.

4. Tidak sempurna saat mengaduk campuran darah dan HCl.

5. Tidak memperhatikan waktu yang seharusnya berlalu saat melakukan

pembandingan warna.

6. Ada gelembung udara di permukaan pada waktu membaca.

7. Membandingkan warna pada cahaya yang kurang terang.

PS. SKed

4

Gambar Prosedur pemeriksaan Hb Sahli

Interpretasi Kadar Hb normal : Pria dewasa : 14-18 g/dL

Wanita dewasa : 12-16 g/dL

HCL

1

1

1

PS. SKed

5

LAPORAN HASIL PRAKTIKUM

Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil Pemeriksaan Kadar Hb :

Kesimpulan :

Dosen Pembimbing Mahasiswa

________________________ _______________________

PS. SKed

6

PEMERIKSAAN HEMATOKRIT

PENDAHULUAN

Hematokrit (Hct) adalah prosentase endapan eritrosit terhadap volume

darah semula.

TUJUAN


1. Memahami cara pengukuran hematokrit

2. Melakukan pengukuran hematokrit dengan metode Wintrobe (cara

makro)

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran hematokrit

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HEMATOKRIT (Metode Wintrobe cara Makro)

Prinsip : darah-EDTA dalam tabung tertentu diputar dengan kecepatan tertentu dan dalam

waktu tertentu, akan terjadi endapan eritrosit.

Alat dan Bahan : Tabung Wintrobe (panjang 100 mm)

Centrifuge

Sampel darah EDTA

Gambar alat dan bahan pemeriksaan hematokrit

PS. SKed

7

Pelaksanaan : 1. Darah EDTA dimasukkan kedalam tabung Wintrobe sampai tanda 100.

2. Tabung Wintrobe yang sudah berisi darah EDTA disentrifus/ dipusingkan

dengan kecepatan 3000 rpm selama. 30 menit.

3. Amatilah pada tabung Wintrobe :

a. Warna plasma yang di bagian atas.

b. Tebalnya lapisan putih diatas eritrosit (buffycoat), yang terdiri atas

lekosit dan trombosit, bila tebalnya 1 mm sesuai dengan 10.000

lekosit/mm3 .

c. Volume sel-sel eritrosit.

4. Bacalah nilai hematokrit dengan melihat volume eritrosit dan hasilnya

dilaporkan dalam satuan %.

Interpretasi Hematokrit normal : Pria : 40-48 %

Wanita : 37-43 %

PS. SKed

8


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil Pemeriksaan Hct metode Wintrobe (makro) :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

9

PEMERIKSAAN LAJU ENDAP DARAH

PENDAHULUAN

Laju endap darah (LED) atau erithrocyte sedimentation rate (ESR) adalah

kecepatan sedimentasi eritrosit dalam darah yang belum membeku, dengan

satuan mm/jam. Pada orang sehat pengendapan eritrosit ini berlangsung secara

konstan. Kecepatan laju endap darah dipengaruhi kadar albumin, globulin dan

fibrinogen.

LED dijumpai meningkat selama proses inflamasi akut, infeksi akut dan

kronis, kerusakan jaringan (nekrosis), penyakit kolagen, rheumatoid, malignansi,

dan kondisi stress fisiologis (misalnya kehamilan). Sebagian ahli hematologi

beranggapan LED tidak handal karena merupakan uji yang tidak spesifik, dan

dipengaruhi oleh faktor fisiologis yang menyebabkan temuan tidak akurat.

Namun, beberapa dokter masih mengharuskan uji LED bila ingin membuat

penilaian kasar mengenai proses penyakit, dan bermanfaat untuk mengikuti

perjalanan penyakit.

TUJUAN


1. Memahami cara pengukuran laju endap darah

2. Melakukan pengukuran laju endap darah dengan metode Westergren

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran laju endap darah

dengan metode Westergren

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN LED (Metode Westergren)

Prinsip : Bila darah dengan antikoagulan diletakkan dalam tabung dalam posisi vertikal

pada waktu tertentu, maka sel-sel eritrosit akan mengendap dan plasma akan

terletak diatas.

Alat dan Bahan : Tabung Westergren

Rak tabung Westergren

Bola Hisap

Larutan NaCl 0,9%

Sampel darah EDTA

PS. SKed

10

Gambar Alat dan bahan pemeriksaan LED

Pelaksanaan : 1. Darah EDTA dilakukan pengenceran terlebih dahulu dengan larutan NaCl

0,9%, yaitu 1 volume NaCl 0,9% untuk 4 volume darah EDTA.

2. Hisaplah darah ke dalam tabung Westergren hingga garis tanda 0 mm.

3. Letakkan tabung Westergreen pada rak tabung Westergren secara vertikal

/ tegak lurus

4. Bacalah laju endap darah dengan mengamati mengamati penurunan

meniskus eritrosit selama 1 jam

5. Hasil pemeriksaan laju endap darah dilaporkan dalam mm/ 1 jam.

Interpretasi LED normal : Pria : kurang dari 10 mm/1 jam

Wanita : kurang dari 15 mm/1 jam

PS. SKed

11


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil Pemeriksaan LED metode Westergren :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

12

PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT

PENDAHULUAN

Leukosit (sel darah putih) merupakan salah satu jenis sel darah. Fungsinya

sebagai pertahanan tubuh, yaitu membunuh benda asing / patogen yang masuk

ke dalam tubuh. Ada beberapa jenis sel lekosit yang normal berada di darah tepi,

yaitu eosinofil, basofil, netrofil stab, netrofil segmen, limfosit, dan monosit.

Pemeriksaan evaluasi hapusan darah tepi bermanfaat untuk mengetahui

morfologi sel-sel darah, yaitu eritrosit, leukosit, dan trombosit. Selain itu juga

dapat digunakan untuk menaksir jumlah leukosit dan trombosit. Abnormalitas

jumlah sel leukosit maupun hitung jenis leukosit dapat menggambarkan kelainan

atau proses penyakit dalam tubuh, antara lain infeksi, inflamasi, alergi, maupun

keganasan. Sehingga melalui pemeriksaan hapusan darah tepi maupun hitung

jenis leukosit dapat diketahui penyakit pada tubuh seorang pasien.

TUJUAN


1. Mahasiswa mampu membuat sediaan hapusan darah tepi

2. Mahasiswa mampu melakukan pewarnaan Wright

3. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan evaluasi hapusan darah tepi

menggunakan mikroskop

4. Mahasiswa mampu melakukan hitung jenis leukosit

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN HAPUSAN DARAH TEPI DAN HITUNG JENIS LEUKOSIT

Prinsip : Pembuatan hapusan darah tepi dan pengecatan Wright yang memenuhi syarat

untuk dilakukan evaluasi hapusan darah tepi dan hitung jenis leukosit.

Penghitungan jenis sel leukosit pada sediaan hapusan darah dengan

menggunakan mikroskop sampai ditemukan 100 sel dari 10 lapang pandang atau

lebih.

Alat dan Bahan : Gelas objek

Kaca penggeser

PS. SKed

13

Rak pewarnaan

Pipet

Mikroskop

Minyak emersi

Pewarna Wright

Larutan buffer pH 6,4

Sampel darah EDTA

Pelaksanaan :

A. Membuat sediaan hapusan darah Cara kerja:

1. Letakkan gelas objek dengan posisi mendatar diatas meja/permukaan yang

datar

2. Kocoklah sampel darah EDTA, ambil 1 tetes darah dan letakkan di sisi kanan

gelas objek

3. Kaca penggeser dipegang dengan tangan kanan, diletakkan di sebelah kiri

tetes darah tadi pada posisi miring, dengan sudut antara 25º-30º, dan

digerakkan ke kanan hingga mengenai tetes darah, ditunggu hingga tetes

darah menyebar pada sudut kaca penggeser

4. Setelah tetes darah menyebar pada sudut kaca penggeser, maka segera

dorong kaca penggeser ke arah kiri hingga terbentuk hapusan darah. Sediaan

hapusan darah yang baik adalah sediaan rata, tidak berlubang-lubang,

panjang ½ hingga 2/3 panjang gelas objek, ada bagian yang cukup tipis

sebagai “counting area” (eritrosit tidak bertumpukan dan leukosit tersebar

merata).

5. Sediaan hapusan darah dibiarkan kering di udara

6. Pada bagian sediaan yang tebal ditulis identitas menggunakan pensil.

PS. SKed

14

Gambar sediaan hapusan darah

B. Membuat pewarnaan Wright pada sediaan hapusan darah Cara kerja:

7. Letakkan gelas objek berisi sediaan hapusan darah yang sudah kering diatas

rak pengecatan.

8. Sediaan hapusan darah ditetesi dengan cat Wright 12 tetes menggunakan

pipet dan biarkan selama 2 menit.

9. Dilanjutkan dengan larutan buffer sama banyak, dicampurkan dengan cara

ditiup-tiup sampai muncul warna metalik, kemudian dibiarkan selama 20

menit.

10. Bilas larutan pewarna tadi dengan menyiram air ke gelas objek dengan posisi

gelas objek mendatar (jangan sampai miring).

11. Sediaan hapusan darah dikeringkan di udara.

PS. SKed

15

C. Pemeriksaan mikroskopik sediaan hapusan darah Cara kerja:

1. Pemeriksaan dengan lensa objektif 10 kali, untuk mengamati :

- Kualitas sediaan hapusan darah. Sediaan hapusan darah yang baik tidak

mengandung endapan cat, terdapat “counting area” yang cukup luas,

eritrosit dan leukosit terwarnai dengan baik

- Menaksir jumlah leukosit :

Bila terdapat 20-30 leukosit per lapangan pandang sesuai dengan jumlah

leukosit 5.000/mm3

Bila terdapat 40-50 leukosit per lapangan pandang sesuai dengan jumlah

leukosit 10.000/mm3

2. Pemeriksaan dengan lensa objektif 100 kali (menggunakan satu tetes minyak

emersi), untuk mengamati :

- Keadaan eritrosit : ukuran (mikrositik, normositik, makrositik, anisositosis)

bentuk (sel pensil, sel sigar, fragmentosit, sel target, sferosit, poikilositosis)

kromasi (hipokrom, normokrom)

- Keadaan leukosit : kesan jumlah leukosit, dan hitung jenis lekosit

- Keadaan trombosit : kesan jumlah trombosit dan ukuran

D. Pemeriksaan hitung jenis leukosit pada sediaan hapusan darah Cara kerja:

1. Pemeriksaan dengan pembesaran lensa objektif 100 X dengan minyak

emersi

2. Mulailah menghitung pada pinggir atas sediaan dan berpindahlah ke arah

pinggir bawah dengan menggunakan mikromanipulator mikroskop.

3. Pada pinggir bawah geserlah lapangan ke kanan agak iebih banyak dari

lebarnya lapangan imersi, kemudian ke arah pinggir atas lagi.

4. Sesampai di pinggir atas geserlah ke kanan lagi dan kemudian ke arah pinggir

bawah.

5. Lakukanlah pekerjaan itu terus-menerus sampai 100 sel leukosit dihitung

menurut jenisnya.

6. Melaporkan hasil hitung jenis hendaknya mengikuti urutan yang pasti;

mulai dengan sel eosinofil, kemudian basofil, neutrofil (stab dan segmen),

limfosit dan terakhir monosit.

PS. SKed

16

7. Buatlah tabel seperti contoh

8. Setiap kali menemukan jenis sel tertentu, buat turusnya pada tiap-tiap baris

tabel tersebut; kalau sudah tercapai 10 turus pada sebuah baris, lanjutkan ke

baris berikutnya. Jadi, kalau kesepuluh baris sudah terisi, berarti sudah

memeriksa 100 leukosit. Selanjutnya, hitung jumlah turus total per kolom.

Tabel hitung jenis leukosit

Eosinofi

l

Basofi

l

Sta

b

Segme

n

Limfosi

t

Monosi

t

Jumla

h

1 I IIIII I II II 10

2 IIIII III II 10

3 IIIII

IIIII 10

4 IIIII

III I II 10

5 dst dst

6

7

8

9

10

Jumla

h

(%)

1 0 0 70 25 4

Total 100

Interpretasi Nilai normal:

Eosinofil / Basofil / stab / segmen / limfosit / monosit

1- 3% / 0 - 1% / 2 - 6% / 50 - 70% / 20 - 40% / 2 - 8%

PS. SKed

17

Gambar jenis-jenis leukosit

Eosinofil Basofil

Neutrofil Segmen

Neutrofil Stab

Limfosit Monosit

PS. SKed

18


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil Pemeriksaan :

A. Evaluasi hapusan darah tepi :

1. Eritrosit :

2. Leukosit :

3. Trombosit :

B. Hitung Jenis :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

19

PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER DAN INTERPRETASINYA

PENDAHULUAN

Untuk mendapatkan hasil pemeriksaan darah lengkap yang akurat dan

mendapatkan hasil pemeriksaan yang cepat dan tepat dapat menggunakan alat

hematology autoanalyzer. Penggunaan alat analisis darah secara otomatis

(hematology autoanalyzer) dapat mengukur beberapa parameter hematologi,

antara lain hemoglobin, hematokrit, lekosit, trombosit, hitung jenis lekosit dan

indeks eritrosit.

TUJUAN


1. Memahami cara pemeriksaan Darah Lengkap menggunakan alat

hematology autoanalyzer

2. Melakukan pemeriksaan Darah Lengkap menggunakan alat hematology

autoanalyzer

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran darah lengkap

menggunakan alat hematology autoanalyzer

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN DARAH LENGKAP DENGAN ALAT HEMATOLOGY AUTOANALYZER

Prinsip : Pemeriksaan parameter sel-sel darah dengan prinsip flowsitometri dengan

impedansi elektrik dan spektrofotometri

Measurements and Computation

Impedance change for WBC, RBC, PLT

Spectrophotometry for HGB

Impedance change for LYM%, MON%, GRA%

Computation from stored Data that was directly measured for MCV, MCH,

MCHC, RDW, MPV, LYM#, MON#, GRA#

Alat dan Bahan : Alat hematology autoanalyzer

Sampel darah EDTA

PS. SKed

20

Pelaksanaan : 1. Siapkan sampel darah EDTA

2. Nyalakan alat hematology autoanalyzer

3. Jalankan sampel :

a. Masukkan identitas pasien

b. Tekan tombol “save”

c. Ketik nomor sampel

d. Tekan tombol “OK”

e. Sampel darah EDTA dihomogenkan terlebih dahulu dengan

membolak-balik vacutainer / tabung penampung sampel darah

f. Buka tutup tabung penampung sampel darah, masukkan sampel

yang telah dihomogenisasi ke dalam “sampel probe”

g. Tekan START

h. Proses analisis dimulai

4. Bacalah hasil cetakan pemeriksaan darah dengan alat hematology

autoanalyzer

Gambar Panel alat hematology autoanalyzer ABX Micros 60

PS. SKed

21

Gambar Hasil cetakan dari alat hematology autoanalyzer ABX Micros 60

Interpretasi

Parameter Reference

Hb P: 13,4 – 17,7 g/dL W: 11, 4 – 15,1 g/dL

Eritrosit P: 4,0-5,5 x 106/µL W: 4,0-5,0 x 106/µL

Lekosit P: 4,3 – 10,3 x 103/µL W: 4,7 – 11,3 x 103/µL

Trombosit 142-424 x 103/µL

MCV 80-93 fL

MCH 27-31 pg

MCHC 32-36 g/dL

RDW 11,5-14,5 %

Hct 38 – 42 %

Diff. count Eo: 0-4% Baso: 0-1% Stab: 0-5% Segmen: 50-70% Limfosit: 20-40% Monosit: 1-6%

PS. SKed

22


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil Pemeriksaan:

Parameter Kadar

Hb

Eritrosit

Lekosit

Trombosit

MCV

MCH

MCHC

RDW

Hct

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

23

PEMERIKSAAN MASA PERDARAHAN (BLEEDING TIME)

PENDAHULUAN

Hemostasis adalah proses tubuh secara fisiologis untuk menghentikan

perdarahan dari tempat yang cedera, dan sekaligus mempertahankan darah

dalam keadaan cair di dalam kompartemen vaskular. Pada proses hemostasis

terdapat beberapa komponen yang berperanan, yaitu sistem pembuluh darah,

trombosit, sistem koagulasi, serta sistem fibrinolysis.

Pemeriksaan masa perdarahan merupakan salah satu pemeriksaan fungsi

hemostasis. Pemeriksaan ini bertujuan untuk mengetahui fungsi kapiler serta

fungsi trombosit.

Kelainan berupa pemanjangan masa perdarahanan dapat terjadi pada

beberapa kondisi, antara lain penurunan jumlah trombosit (trombositopenia),

kelainan fungsi trombosit, setelah minum aspirin, penyakit Von Willebrand, dan

penyakit hati yang berat.

Ada 2 metode pengukuran masa perdarahan, yaitu metode Duke dan metode

Ivy. Pada praktikum ini dilakukan pengukuran masa perdarahan dengan

menggunakan metode Duke.

TUJUAN


1. Memahami cara pengukuran masa perdarahan

2. Melakukan pengukuran masa perdarahan dengan Duke

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran masa perdarahan

dengan metode Duke

4. Menjelaskan macam-macam penyebab pemanjangan masa perdarahan

PS. SKed

24

PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PERDARAHAN (METODE DUKE)

Alat dan Bahan : 1. Pencatat waktu (Stop watch)

2. Blood lancet steril

3. Kapas alkohol

4. Kertas saring

Prosedur : 1. Desinfeksi anak daun telinga dengan alkohol 70%

2. Pegang anak daun telinga dengan ibu jari dan jari telunjuk

3. Tusuk pinggir anak daun telinga dengan lancet sedalam ±2 mm

4. Bila terlihat darah keluar, mulai tekan Stop Watch.

5. Isaplah darah yang keluar dengan kertas saring, setiap 30 detik. Hindari

jangan sampai kertas saring kontak/menekan luka.

6. Tes berakhir bilamana tidak nampak lagi darah yang terisap.

7. Tekan Stop Watch, catat menit saat itu.

8. Bersihkan luka, tutup dengan kasa steril/plester.

Interpretasi Nilai Normal : 1-3 menit

PS. SKed

25


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil pemeriksaan masa perdarahan :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

26

PEMERIKSAAN MASA PEMBEKUAN (CLOTTING TIME)

PENDAHULUAN

Hemostasis adalah proses tubuh secara fisiologis untuk menghentikan

perdarahan dari tempat yang cedera, dan sekaligus mempertahankan darah

dalam keadaan cair di dalam kompartemen vaskular. Pada proses hemostasis

terdapat beberapa komponen yang berperanan, yaitu sistem pembuluh darah,

trombosit, sistem koagulasi, serta sistem fibrinolysis.

Pemeriksaan masa pembekuan merupakan salah satu pemeriksaan fungsi

hemostasis. Pemeriksaan ini bertujuan untuk menentukan lamanya waktu yang

diperlukan darah untuk membeku sebagai ukuran aktifitas faktor-faktor

koagulasi darah terutama faktor-faktor yang membentuk tromboplastin dan

faktor yang berasal dari trombosit. Pemeriksaan masa pembekuan juga dapat

digunakan untuk memantau penderita yang mendapat terapi dengan heparin.

Bermacam-macam kesalahan teknik cenderung memperpendek masa

pembekuan, antara lain percampuran darah dengan tromboplastin jaringan,

pungsi vena yang tidak segera berhasil baik, terjadinya busa dalam semprit atau

dalam tabung, menggoyang-goyangkan tabung yang tidak sedang diperiksa,

semprit dan tabung kotor, dan sebagainya. Selain itu, diameter tabung yang

dipakai juga berpengaruh pula terhadap hasil pemeriksaan masa pembekuan,

semakin lebar tabung semakin lama masa pembekuan

Kelainan berupa pemanjangan masa pembekuan dapat terjadi pada

beberapa kondisi, antara lain penurunan jumlah trombosit (trombositopenia),

kelainan fungsi trombosit, setelah minum aspirin, penyakit Von Willebrand, dan

penyakit hati yang berat.

TUJUAN


1. Memahami cara pengukuran masa pembekuan

2. Melakukan pengukuran masa pembekuan

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pengukuran masa pembekuan

4. Menjelaskan macam-macam penyebab pemanjangan masa pembekuan

PS. SKed

27

PRAKTIKUM PENGUKURAN MASA PEMBEKUAN (Cara Modifikasi LEE & WHITE)

Prinsip : Mengukur waktu pembekuan darah, dimulai saat darah masuk spuit sampai

darah membeku.

Alat dan Bahan: 1. Tabung berdiameter 8 mm sebanyak 3 buah

2. Spuit 5 cc

3. Stop watch

4. Kapas alkohol

Prosedur : 1. Lakukan pungsi vena

2. Segera setelah darah masuk dalam semprit, catat waktu atau tekan Stop

Watch. Angkatlah jarum semprit, kemudian alirkan perlahan 1 ml darah ke

dalam tabung dalam posisi miring, dimana darah mengalir lewat dinding

tabung. Lakukan pada ke-3 tabung.

3. Tabung 1 tiap 30 detik diangkat dari rak, dimiringkan, lihat adanya bekuan.

4. Setelah darah dalam tabung 1 beku, baru periksa tabung 2 demikian juga tiap

30 detik. Sampai ada pembekuan, baru saat ini “catat waktunya”

5. Tindakan sama untuk tabung 3.

Interpretasi Normal : darah membeku dalam 5-15 menit

PS. SKed

28


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil pemeriksaan masa pembekuan :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

29

PEMERIKSAAN TRANSFUSI DARAH

PENDAHULUAN

Transfusi darah adalah salah satu terapi medik yang berpotensi

menimbulkan penyulit terbesar terhadap resipien, baik dalam jangka pendek

seperti reaksi transfusi, jangka menengah berupa penularan penyakit dan dalam

jangka panjang seperti reaksi imunologis. Oleh karena itu sebelum transfusi

dilaksanakan harus dipertimbangkan bahwa manfaatnya jauh lebih besar

daripada risikonya, apalagi jika masih ada cara lain untuk menaikkan komponen

darah maka sebaiknya tidak diberiksan transfusi.

Pada anemia, transfusi baru layak diberikan jika pasien menunjukkan

tanda kekurangan oksigen seperti rasa sesak, mata berkunang, berdebar

(palpitasi), pusing, gelisah atau kadar Hb < 6 g/dl.

Jenis golongan darah tergantung jenis antigen yang terdapat pada dinding

eritrosit. Telah diketemukan 25 jenis golongan darah seperti ABO, Rhesus, Kell,

Duffy, Lewis, MNS, Lutheran, Diego, P, I, dan lain-lain, tetapi yang paling penting

dalam transfusi darah adalah golongan darah ABO dan Rh karena

imunogenitas/antigenitas keduanya yang paling kuat.

Tabel 2. Frekuensi golongan darah ABO

Genotip

Diaglutinasi oleh

Aglutinin dalam serum

Golongan darah

Insiden %

A1A1, A1O A2A2, A2O BB, BO A1B A 2B OO

anti-A,anti-A1 anti-A anti-B anti-A, anti-A1 anti-B anti-A, anti-B None

anti-B anti-B anti-A --- --- anti-A anti-A1 anti-B

A1 A2 B A1B A2B O

35 } } 45 10 } 8 2,5 } } 3 0,5 } 44

PS. SKed

30

Sebelum pelaksanaan transfusi darah reaksi silang mutlak harus

dikerjakan antara darah donor dan darah resipien yang telah sesuai golongan

darah ABO dan Rh nya.

Pemeriksaan ini bertujuan untuk :

1) Konfirmasi apakah golongan darah donor dan resipien telah sesuai.

2) Memberi keyakinan akan manfaat transfusi yang maksimal bagi

penderita

3) Mencegah kejadian reaksi transfusi hemolitik

Reaksi silang terdiri atas:

A. Reaksi silang mayor (Eridonor + serumresipien)

B. Reaksi silang minor (serumdonor + eriresipien)

Reaksi silang mayor memeriksa ada tidaknya antibodi resipien yang dapat

merusak eritrosit donor pada pelaksanaan transfusi. Sedangkan reaksi silang

minor memeriksa ada tidaknya antibodi donor yang dapat merusak eritrosit

resipien.

TUJUAN


1. Memahami cara pemeriksaan golongan darah dan reaksi silang

2. Melakukan pemeriksaan golongan darah dan reaksi silang

3. Melakukan interpretasi terhadap hasil pemeriksaan golongan darah dan

reaksi silang

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN GOLONGAN DARAH CARA SLIDE

Prinsip : Memeriksa antigen pada sel eritrosit yang disebut Cell-Grouping atau memeriksa

antibodi didalam serum / plasma yang disebut Serum-Grouping.

Alat dan Bahan: 1. Antisera anti-A,anti-B,anti-AB, dan anti D.

2. Suspensi 10% sel uji A, B dan O

3. Larutan NaCl 0,9% (Saline)

4. Sampel darah resipien.

5. Kaca objek atau porselen putih

6. Pengaduk dan pipet Pasteur

PS. SKed

31

Prosedur : 1. Pada kaca objek / porselen teteskan secara terpisah 1 tetes antisera anti-

A, anti-B, anti-Ab, dan anti D.

2. Dengan pipet Pasteur teteskan kepada masing-masing antisera 1 tetes

suspensi 10% darah sampel.

3. Aduklah masing-masing campuran dengan ujung pengaduk yang berbeda,

sehingga campuran melingkar pipih berdiameter 2 cm.

4. Sambil menggoyang-goyangkan kaca objek perhatikan reaksi yang terjadi.

Bila belum tampak reaksi (negatip) diamati sampai 5 menit.

5. Reaksi disebut positip bila ada aglutinasi atau hemolisis, dan reaksi disebut

negatip bila tidak menunjukkan adanya aglutinasi atau hemolisis.

6. Sambil menggoyang-goyangkan kaca objek perhatikan reaksi yang terjadi.

Bila belum tampak reaksi (negatip) diamati sampai 5 menit.

7. Reaksi disebut positip bila ada aglutinasi atau hemolisis, dan reaksi disebut

negatip bila tidak menunjukkan adanya aglutinasi atau hemolisis.

Interpretasi Bila reaksi positip, harus dinilai dan dicatat derajad aglutinasinya sebagai berikut:

4+ : Semua sel darah tampah menggumpal menyatu, sehingga cairannya

tampak jernih.

3+ : Semua sel darah menggumpal tetapi tidak menyatu, disekitarnya tampak

cairan jernih.

2+ : Gumpalan agak kasar tetapi tidak semua sel darah beraglutinasi,

disekitarnya tampak cairan keruh.

1+ : Gumpalan-gumpalan halus dan lebih banyak sel-sel darah yang bebas,

disekitarnya tampak cairan keruh.

Auto-control (campuran serum dengan selnya sendiri) pada serum grouping baik

cara kaca objek maupun cara tabung dalam keadaan normal akan selalu negatip.

PRAKTIKUM PEMERIKSAAN REAKSI SILANG

Prinsip Reaksi silang mayor memeriksa ada tidaknya antibodi resipien yang dapat

merusak eritrosit donor pada pelaksanaan transfusi. Sedangkan reaksi silang

minor memeriksa ada tidaknya antibodi donor yang dapat merusak eritrosit

resipien.

PS. SKed

32

Alat dan Bahan: 1. Bovin albumin 22%

2. Reagen Coombs

3. Sel Eritrosit Uji Coombs

4. Lar. NaCl 0,9% (saline)

5. Sampel darah resipien

6. Sampel darah donor

7. Tabung reaksi ukuran 10/12 x 75 mm.

8. Rak tabung

9. Pipet Pasteur

10. Kaca objek

11. Inkubator

12. Centrifuge

13. Mikroskop

14. Pengukur waktu (Timer)

Prosedur: 1. Siapkan serum/plasma dan suspensi 5% eritrosit resipien dalam saline

2. Siapkan serum/plasma dan suspensi 5% eritrosit donor dalam saline.

3. Sediakan 2 tabung reaksi, beri tanda I untuk Mayor dan tanda II untuk

Minor.

4. Dengan pipet Pasteur teteskan 2 tetes serum resipien dan 1 tetes suspensi

5% eritrosit donor kedalam tabung I (Reaksi silang mayor).

5. Dengan pipet Pasteur teteskan 2 tetes serum/plasma donor dan 1 tetes

suspensi 5% eritrosit resipien kedalam tabung II (Reaksi silang minor).

6. Kocok kedua tabung agar isinya tercampur rata.

7. Putar kedua tabung 3000 rpm selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1

menit

8. Amatilah reaksi pada kedua tabung secara makroskopik, apakah ada reaksi

aglutinasi atau hemolisis.

9. Bila ada reaksi aglutinasi atau hemolisis, berarti darah donor dan resipien

inkompatibel (tidak cocok).

PS. SKed

33

10. Bila tidak ada reaksi aglutinasi atau hemolisis, kedalam kedua tabung

tambahkan 2 tetes Bovine albumin 22%, kocoklah agar isinya tercampur

rata.

11. Inkubasi kedua tabung pada suhu 370 C selama 15 menit. Kemudian

putarlah kedua tabung 3400 rpm selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1

menit.

12. Amatilah reaksi pada kedua tabung secara makroskopik.

13. Bila tidak ada aglutinasi atau hemolisis, cucilah eritrosit dalam kedua

tabung denga saline 3 kali.

14. Tiap kali pencucian, supernatan dibuang sebanyak-banyaknya derngan

jalan membalik tabung.

15. Tambahkan 2 tetes serum Coombs pada sedimen eritrosit dalam masing-

masing kedua tabung, kocoklah kemudian kedua tabung diputar 3000 rpm

selama 15 detik atau 1000 rpm selama 1 menit.

Interpretasi: Amatilah secara makroskopik apakah ada reaksi aglutinasi.

1. Bila aglutinasi tidak jelas terlihat, tuangkan isi tabung pada kaca objek dan

lihatlah dibawah mikroskop.

2. Bila tampak aglutinasi berarti darah donor dengan resipien inkompatibel

PS. SKed

34


Hari, Tanggal : ……………………………………………………..

Hasil pemeriksaan golongan darah :

Hasil pemeriksaan reaksi silang :

Kesimpulan :


________________________ _______________________

PS. SKed

35

DAFTAR PUSTAKA

1. ABX Micros 60 Hematology Analyzer. User Manual Procedure. 2015.

2. McPherson & Pincus. Henry's Clinical Diagnosis and Management by

Laboratory Methods, 21st ed. W.B. Saunders Company. 2006.

3. Gandasoebrata, R. Penuntun Laboratorium Klinik. Dian Rakyat. Jakarta.

1984

4. Standarisasi Umum Usaha Transfusi Darah Palang Merah Indonesia, 1990

5. Manual DiaMed-ID Micro Typing System.

6. Technical Manual of the American Association of Blood Banks, 8Ed .

Washington DC. 1981.

7. Rowley M, Milkins C , 2006 Laboratory aspects of blood transfusion, in

Lewis SM, Bain BJ, Bates I Edit. : Dacie and Lewis Practical Hematology, 10

th Ed, Churchill Livingstone, Philadelphia.

BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI

Documents

Transcript of BUKU PENUNTUN PRAKTIKUM HEMATOLOGI