Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na...
Transcript of Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na...
![Page 1: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/1.jpg)
Bojenje po Gramu
![Page 2: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/2.jpg)
Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida.• Gram-pozitivne bakterije imaju ćelijski zid koga čine debeli (višeslojni)
sloj peptidoglikani (50-90 %). Peptoglikani zadržavaju boju (kristalviolet) unutar ćelije i nakon ispiranja alkoholom.
• Gram-negativne bakterije imaju tanji sloj peptidogilkana (10 %), te se kristalviolet ispire alkoholom. Gram-negativne bakterije imaju i dodatnu spoljnu membranu koja sadrži lipide.
![Page 3: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/3.jpg)
Postoje neki mikroorganizmi koji se drugačije ponašaju po Gramu:• Gram-neosetljive bakterije su vrste bakterija koje se ne mogu obojiti
postupkom bojanja po Gramu (spirohete).• Gram-varijabilne bakterije su vrste bakterija koje u različitim uslovima
rasta mogu pokazati osobine i gram-pozitivnih i gram-negativnih bakterija.
![Page 4: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/4.jpg)
1844. god Hans Kristian Gram
film
![Page 5: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/5.jpg)
Bojenje po Gram-u
Omogućava razlikovanje:
- Gram-pozitivnih bakterija (plavo-ljubičasto obojene)
- Gram-negativnih bakterija (crveno obojene)
* razlika u bojenju je posledica razlika u građi ćelijskog zida
![Page 6: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/6.jpg)
Ćelijski zid Gram pozitivnih bakterija
![Page 7: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/7.jpg)
Ćelijski zid Gram negativnih bakterija
![Page 8: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/8.jpg)
Princip bojenja po Gramu
• Gram+ bakterije ne omogućavaju prodor alkoholu u ćelijski zid pa ostaju plavo ljubičaste
• Gram- bakterije propuštaju alkohol koji oboji gencijana violet a zatim zadržavaju karbol-fuksin i vide se kao crvene
![Page 9: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/9.jpg)
Bojenje po Gram-u
Gram pozitivnebakterije
Gram negativnebakterije
Genciana violet
Rastvor joda
Alkohol (etanol)
Voda
Karbol fuksin / safranin
Voda
![Page 10: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/10.jpg)
GRAM
![Page 11: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/11.jpg)
Faze bojenja po Gramu
• Bojenje kristal violet-om• Stabilizacija boje jodom• Dekolorizacija actonom i alkoholom• Kontra-bojenje safraninom
![Page 12: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/12.jpg)
Postupak bojenja po Gramu
- Fiksacija preparata
- Gencijana violet 3 min
- Lugolov rastvor 2min
- 96% alkohol pa dest voda
- Karbofuksin 30sek
- Ispere vodom i osuši
![Page 13: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/13.jpg)
PRIPREMA PREPARATA
Fikiranje preparata
– zaustavljanje enzimatske aktivnosti bakterija, ubijanje ćelija i lepljenje ćelija za pločicu.
Razmaz bakterija se fiksira brzim prenošenjem pločice kroz plamen nekoliko puta (toplotna fiksacija).
Trajni preparati- kanada balzam + pokrovno staklo
![Page 14: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/14.jpg)
![Page 15: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/15.jpg)
Sterilan rad obezbeđuje odsustvo svih drugih mikroorganizama osim ispitivanog
![Page 16: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/16.jpg)
![Page 17: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/17.jpg)
Staphylococcus spp.,S. aureus
Streptococcus spp., S. PneumoniaeB group streptococcus
Micrococcus spp.
Gram-pozitivne koke
![Page 18: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/18.jpg)
Gram pozitivni bacili
Debeli : Clostridium spp., C. Perfringens,C. septicum C. tetanomorph
TaListeriaTanki
Razgranati: Actinomycetes i Nocardia, A. israelii
![Page 19: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/19.jpg)
Gram-negativne koke
Diplococci: Neiseria spp.N. meningitidis
: Acinetobacter spp., mogu biti Gram-positivniCoccobacilli ili Gram-negativni, često Gram-variabilni
![Page 20: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/20.jpg)
Gram-negativni bacili
Coccobacilli: Haemophilus spp., H. influenzae
Zakrivljeni: Vibrio spp.; Campylobactor spp., V. Cholerae, C. jejuni
Tanki: Enterobacteriaceae, E. Coli
![Page 21: Bojenje po Gramu · 2020. 4. 9. · Metoda po Gramu je bojenje kojim se razvrstavaju bakterije na Gram(+) i Gram(- )na osnovu osobenosti ćelijskog zida. • Gram-pozitivne bakterije](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022071502/61215572bb705202cc3fa889/html5/thumbnails/21.jpg)
Bojenje po Gram-u