COPAS™ & BioSorter® 大きなサンプルのためのフローサイトメーター・ソーター

1500 um までの細胞クラスターの解析とソーティングが可能！従来のフローサイトメーターはシングルセルが主な解析対象で、大きく壊れやすい細胞や細胞クラスターに対応していません。一方、顕微鏡下のマニュアルソーティングでは時間がかかり、解析サンプル数も制限されます。UnionBiometrica 社の COPASTM および BioSorter® はこのような問題を解決した、大きなサンプルをハイスループットに解析できるフローサイトメーター・ソーターです。液滴荷電によるソーティングを行わないため、サンプルにもダメージを与えません。

特長・大口径フローセルと独自の流体力学により、最大 1500 um のサンプルを解析可能・エアソーティング方式（特許）によりダメージレスでサンプル回収・TOF（長さ）、OD（厚さ）、蛍光（同時 3 色）を検出可能・24, 48, 96, 384 ウェルプレートとバルク容器に分取可能・データはテキストおよび LMD フォーマット（多くのフローサイトメトリー解析ソフトと互換性）で保存

サンプル例・肝細胞、脂肪細胞、心筋細胞、プロトプラスト・幹細胞クラスター、胚様体、がんスフェロイド、ニューロスフェア・膵島、集合尿細管・マイクロキャリアビーズ、ハイドロゲルビーズ・小さなモデル生物（線虫、ハエ、ゼブラフィッシュなど）、シロイヌナズナの種

COPASTM BioSorter®

サンプル導入

シースフロー

フローの収束

シースフロー

レーザー励起

蛍光検出

光学密度とサイズの検出

不要なサンプルの回収

ソーティングサンプルの回収

24、48、96、384 ウエルマイクロプレート

COPASTM

COPASTM (Complex Object Parametric Analyzer and Sorter) は、薬剤スクリーニング分野における線虫のハイスループット解析用として 1998 年に発売されました。それ以来、通常のフローサイトメーターでは困難な細胞塊等の大きなサンプル、弱いサンプルの解析とソーティングに使用されています。解析する対象のサイズに応じて、フローセル内径の異なる 4 種類のモデル（下表）から選択して頂けます。サンプルの種類と最適なモデルの対応は、次ページの表（BioSorter フローセルおよび COPAS モデル選択）をご参照ください。

流路システム部仕様モデル BIOSORT SELECT PLUS XL

フローセル内径 250 μ m 500 μ m 1000 μ m 2000 μ m解析対象サイズ * 40 (10)-200 μ m 40 (20)-400 μ m 40 (30)-750 μ m NA (30-1500) μ m解析速度 * 35 (150) eps 25 (100) eps 15 (100) eps NA (20) epsバルク容器への分注速度 * 15 (25) eps 10 (20) eps 5 (10) eps NA (2) eps96 ウェルへの最短分注時間 (1 object/well) 1.5-2 分 /plate

分注精度 (1/well)ウェルの 98% (XL は 95%) 以上に 1 個以上の対象が分注される。2 個以上の対象が含まれる割合は 5%以下。

1well 当りの最大滴下数(96-well プレート ) 570/well 400/well 40/well 10/well

分注容器 24, 48, 96, (384：BIOSORT のみ ) ウェルプレート、静置バルク容器サンプルリカバリー容器 オプション励起レーザー 最大 3 個 (488 nm 固体レーザー + オプション最大 2 個）検出光学 吸光 ( 長さ、OD) + 蛍光 3PMTs ( 緑、黄、赤など )。ソフトウェア COPAS software (Windows ベース )本体　寸法、重量 0.5m(W) x 0.6 m(D)、40kg推奨設置スペース 2.0m(W) x 0.6 m(D)価格 カスタム製品の為、内容により異なります。お問い合わせください。

eps: events per second*( ) 内は AAP（Advanced Acquisition Package）実装機器でのデータ

製品コード（例） モデル フローセル内径 励起レーザー 備考COPAS-PLUS-1 PLUS 1000 μ m 488 nm レーザーはオプションで最大 2 個まで追加可能

オプション、アクセサリーAdvanced Acquisition Package (AAP) ・XL に標準装備、全てのモデルに推奨・高解像度で迅速なデータ取得を可能にする、ハード・ソフト両方のアップグレードです。標準ソフトに比べ 32 倍詳細なシグナルが得られます（5 um のサイズの違いや、微弱な蛍光シグナルを検出可能）。サンプル処理速度は 4 倍速くなります。

Profiler II・全てのモデルに対応（AAP の装備が必要）・標準ソフトでは、1 個の解析対象に対して各パラメーターごとに 1 つのシグナル値のみが取得できますが、Profiler II では、1 個の解析対象あたり最大 8000 データポイントからなるプロファイルを、同時に 4 つの光学パラメーター（吸光＋蛍光 3 チャネル）について取得および記録できます。シグナルを連続したピークとしてデジタル表示できるので、解析対象がフローセルを通過する際のシグナル強度変化を直接トレースできます。それにより個々の解析対象内における、微細なシグナルやパターンの差も見分けることができます。また、プロファイルのピーク強度、幅、位置、数をもとに最大 21 種類のソーティング基準を追加することができます。

ReFLx Sampler・BIOSORT/SELECT に対応・96-well plate に分注されたサンプルを解析するための、組み込み型サンプルインジェクションシステムです。プレートの振とう後にサンプルを吸引して COPAS のフローセルに導入します。解析されたサンプルは新しいプレートに分注されます。

High Throughput Screening Option (HTS)・XL に標準装備、全てのモデルに対応（AAP の装備が必要）・ハイスループットスクリーニング用のハード・ソフト両方のアップグレードです。多数のマルチウェルプレートにサンプルを自動でソーティングすることが可能です。

フローセル ( 交換可能 )FOCA-FS

(Forward Scatter)FOCA-250 FOCA-500 FOCA-1000 FOCA-2000

フローセル内径 250 μ m 250 μ m 500 μ m 1000 μ m 2000 μ m解析対象サイズ 1-200 μ m 10-200 μ m 20-400 μ m 30-750 μ m 30-1500 μ m推奨解析対象サイズ 1-40 μ m 30-150 μ m 40-300 μ m 200-700 μ m 500-1500 μ m最大解析速度 1000 eps96 ウェルへの分注時間 (Coin-cidence Check 有 )

105 ± 15 sec/plate (1 object/well), 180 ± 30 sec/plate (5 objects/well)

分注精度 (1/well) >98% が 1 個以上の対象を含む。<5% が 2 個以上の対象を含む。

>95% が 1 個以上の対 象 を 含 む。<5%が 2 個以上の対象を含む。

サンプルカップ 50 ml コニカルチューブ ( オプション：750 ml、2L)分注容器 24, 48, 96, 384 ウェルプレート、チューブ、静置バルク容器励起レーザー 最大 4 個 (488 nm + 固体レーザー最大 3 個 (405, 445, 561, 640, 660 nm, ほか ))

検出光学吸光 (TOF、OD) + 蛍光 3PMTs。FlowPilot-ProTM オプションにより、peak intensity, peak width, peak location, peak count の測定が可能。

ソフトウェア FlowPilotTM または FlowPilot-ProTM (Windows ベース )本体　寸法、重量 1.14 m(W) x 0.54 m(D) x 0.62 m(H)、70kg推奨設置スペース 1.83 m(W) x 0.92 m(D) x 0.92 m(H)価格 カスタム製品の為、内容により異なります。お問い合わせください。

BioSorter®

BioSorter® は通常のフローサイトメーターでは困難な細胞塊等の大きなサンプル、弱いサンプルの解析とソーティングを行えます。 COPASTM の上位機種でフローセルが交換可能なため、全てのサイズレンジに対応できる汎用モデルとなっています。サンプルに応じたフローセルの選択については下表を参照ください。

流路システム部仕様

FOCA: Fluidics and Optics Core Assemblies, eps: events per second

製品コード（例） フローセル 励起レーザー 備考BIOSORTER-FOCA1000 1 個（FOCA-1000） 488 nm レーザーはオプションで最大 3 個まで追加可能

オプションProfiler II・ソフトウェアは FlowPilot –ProTM が必要になります。・標準ソフトでは、1 個の解析対象に対して各パラメーターごとに 1 つのシグナル値のみが取得できますが、Profiler II では、1 個の解析対象あたり最大 8000 データポイントからなるプロファイルを、同時に 4 つの光学パラメーター（吸光＋蛍光 3 チャネル）について取得および記録できます。シグナルを連続したピークとしてデジタル表示できるので、解析対象がフローセルを通過する際のシグナル強度変化を直接トレースできます。それにより個々の解析対象内における、微細なシグナルやパターンの差も見分けることができます。また、プロファイルのピーク強度、幅、位置、数をもとに最大 21 種類のソーティング基準を追加することができます。

BioSorter フローセルおよび COPAS モデルの選択BioSorter フローセル (FOCA) FS 250 500 1000 2000

COPAS モデル - BIOSORT SELECT PLUS XLサンプル

細胞

AdipocytesDuct cellsHepatocytesStem cells

細胞クラスターEmbryoid bodiesiPS cell clusterPancreatic islets

ビーズ Beads

植物 ProtoplastsPollen

細胞関連アプリケーション例Hepatocyte　・マウス肝細胞のサイズ分布と蛍光（Calcein による生細胞染色）の測定 1)

Adipocyte 　・マウス脂肪細胞のサイズ分布や脂肪含有量（Nile Red 染色）の測定 2)

　・培養脂肪細胞のサイズおよび形状分析とソーティング 2)

Cardiomyocyte　・心筋細胞の解析とソーティング 1)

Embryoid body　・胚様体のサイズおよび形状分析とソーティング 2)

　・マウス胚様体のサイズおよび蛍光分析とソーティング 1)3)

iPS cluster 　・ヒト iPS 細胞クラスターのサイズ・形状・蛍光分析とソーティング 4)16)

Neurosphere 　・ヒトニューロスフェアのサイズおよび形状分析 5)11)17)

Tumor Cell Cluster 　・3D Tumor model の解析とソーティング 12)13)

Pancreatic Islet 　・膵島の QC およびサイズ・形状・蛍光分析 6)

　・ヒト膵島のソーティングと機能解析 14)

　・マウス膵島細胞塊のソーティングと培養 15)

Duct Cells　・マウス腎臓集合尿細管の分離 1)

Beads, Microcarrier 　・ビーズ上で培養した幹細胞のソーティング 1)

　・マイクロカプセル化した微生物や細胞の解析とソーティング 7)

　・コンビナトリアルペプチドライブラリーによるハイスループットスクリーニング 8)

Plant 　・花粉のソーティング 9)

　・プロトプラストの解析とソーティング 10)18)

■ 製品カタログ　裏面　

SUBF-13-0286

Application Note1) QTN013(Large cells and cell clusters) 2) Analysis and sorting of Stem Cell Clusters and Adipocytes 3) QTN001(Embryoid Bodies) 4) QTN018(Human iPS cluster) 5) QTN016(Human neurospheres) 6) QTN014(Pancreatic islets) 7) QTN019(Alginate microsphere) 8) QTN003(TxRED beads_peptide library) 9) QTN007(Pinaceae pollen) 10) QTN021(Protoplasts)

Publication11) Gassmann K et al., 2012 Toxicology in Vitro, 26(6):993-1000 12) Li CY et al., 2013 Lab Chip, 13(10):1969-78 13) Ingram M et al., Biotech Histochem 2010, 85(4):213-29 14) Steffen A et al., 2011 Islets, 3(5):267-70 15) Kikugawa R et al., 2009 Diabetologia 52(4):645-52

Poster16) Wanek P et al., ISSCR2013 17) Gassmann K et al., ISSCR2012 18) Pulak and Malinouski_Protoplast2013