Biopsia coloraciones y aspiracion de medula osea
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Julon Flores Yanet Mejía Ávila Beatriz
ESTUDIO DE LA MEDULA OSEA
MEDULA OSEA
1era MO primitiva aparece en el feto en el 2do mes de vida
intrauterina Función: hematopoyesis, es decir la producción de 3 tipos de células de la sangre como células rojas o hematíes, células blancas o leucocitos y plaquetas.
Tejido conectivo especializado
Adulto: 1.300 – 1500 g.
HEMATOPOYESIS
Es el proceso de formación, desarrollo y maduración de los elementos de la sangre.Las células madre son las responsables de formar
todas las células y derivados celulares que circulan por la sangre.
Las células sanguíneas son degradadas por el bazo y los macrófagos del hígado
HEMATOPOYESIS FETAL Y EMBRIONARIA
1er mes aparecen cel. Sanguíneas en el mesénquima del saco vitelino
6ta. Semana : hígado Mitad de la vida fetal :
bazo
Finales de la vida fetal : medula ósea
HEMATOPOYESIS POSNATAL
ASPECTO MACROSCOPICO MO Hematopoyéticamente activa
El color rojo viene del contenido de los E. y la Hb
En los RN, toda la cavidad medular es roja
Predomina en la infancia
Hematopoyéticamente inactiva El color amarillo viene de la presencia de
abun células adiposas ( alto contenido de carotenos)
Predomina en los adultos
MO ROJA
MO AMARILLO
6
MEDULA OSEAEs el sitio de formación y maduración de las células sanguíneas
Es el mismo tanto para la MO ROJA como para la MO AMARILLA
Compuestosinusoides
Incluye células hematopoyéticas
Columnas irregulares entre los vasos
MEDULA OSEA
sexo edad Estado fisiológico
localización
El estudio semicuantitativo y cualitativo del estado de la Hematopoyesis, varia:
Sangre periférica
Celularidad de la medula (hemograma medular)
Rto. Completo de células
sanguíneas Plaquetario reticulocitosDebe realizarse el mismo
día del estudio de la medula
Expresa según la relación entre el Vol CH y el Vol total del espacio medular
Datos deben incorporarse al informe
No hay regla fija e inamovible que determinen cual es el paciente que requerirá un examen de medula ósea
INDICACIONES PARA UN ESTUDIO DE MEDULA
OSEA
El examen de medula ósea no se precisa en los casos de anemia cuya etiología es
evidente
índices eritrocitarios
otras pruebas de lab
niveles bajos de Hierro y ferritina en suero
anemia ferropenica
y los niveles bajos de vitamina B12 Y Folatos
anemia megaloblastica
Cada caso debe evaluarse a la luz de toda información clínica y de laboratorio para determinar si este procedimiento invasivo es necesario. Ejm
anomalías de varias líneas celulares en sangre periférica
INDICACIONES PARA UN ESTUDIO DE MEDULA
OSEA
Pacientes pancitopenicos, Excepto en quienes reciben
tratamiento supresor
Presencia de Blastos circulantes
Excepto en los lactantes y en los RN que presentan una
infección
Estadificar el linfoma de Hodgkin, el linfoma no de Hodgkin y el Carcinoma
Citopenias: en ocasiones revelara la presencia de leucemia u otra neoplasia
hematologica.
EXAMEN
DE
MEDULA
ÓSEA
INDICACIONES PARA UN ESTUDIO DE MEDULA
OSEA
Anemias microcitica : la evaluación de las reserva de He+ y de los sideroblastos permite clasificar la
anemia
Anemias macrociticas : Proceso megaloblastico o no
Anemias normociticas (o macrociticas ) sin un aumento en el índice de produccion de reticulocitos , la medula se evalua para detectar las anomalias cuantitavtivas y cualitativas de la eritropoyesis ejm aplasia celular pura de la serie roja o mielodisplasia
Anormalidades Ig.: Puede confirmarse el Dx de mieloma de celulas plasmáticas o
macroglobulinemia si se detectan infiltraciones anormales de celulas plasmaticas o linfocitos
EXAMEN
DE
MEDULA
ÓSEA
Problema medular hay presencia de:
Normocitos o Macrocitos.• Siendo las anemias por
enfermedades crónicas, las forma mas común de Anemia Normocitica
Parámetros de evaluación para la descripción del aspirado de medula ósea
MEDULA OSEA
1.-Indices2.-Extendido de sangre periférica (frotis(Celularidad))3.-Biopsia en cilindro4.-Aspirado seco5.- Apariencia de la sangre Aspirada6.-Resistencia ósea7.-CC de Hierro8.- Numero de Sideroblastos9.- relación mieloideeritroide(M/E)
10.- maduración de la serie mieloide,11.- maduración de la serie eritroide, 12.- porcentaje de eosinófilos, basófilos y células cebadas, 13.- número de megacariocitos, 14.- presencia de otras células como linfocitos, células plasmáticas, histiocitos, etc., 15.- anormalidades del estroma: granulomas, fibrosis, necrosis, etc., 16.- contenido de hemosiderina, 17.- anormalidades de los vasos sanguíneos, 18.- anormalidades óseas.
RECUENTOS DIFERECIALES DE LA MEDULA OSEA
TIPOS CELULARES
AL NACER(Media,DE)
1 MES(Media,DE)
18 MESES(Media,DE)
INFANCIA(Media,limites)
EDAD ADULTA(Media, limites)
Normoblastos t 14,48±7,24
8,04±5,00 8,21±3,71 23,1 21,5(14,2-30,4)
pronormoblastos
0,02±0,06
0,10±0,14 0,08±0,13 0,5 (0,0-1,5) 0,6 (0,2-1,4)
Basiofilo n. 0,24±0,25
0,34±0,33 0,50±0,34 1,7(0,2-4,8) 2,0 (0,7-3,7)
Policromaticos n
13,06±678
6,90±4,45 6,97±3,56 18,2(4,8-34,0)
12,4 (12,2-24,2)
Ortocromaticos n
0,69±0,73
0,54±1,88 0,44±0,49 2,7(0,0-7,8) 6,5 (2,0-22,7)
Neutrofilos totales
60,37±8,66
32,35±7,68
36,06±7,40 57,1 56,0 (45,1-66,5)
Mieloblastos 0,31±0,31
0,62±0,50 0,06±0,08 1,2 (0,0-3,2 1,0 (0,5-1,8)
Promielocitos 0,79±0,91
0,76±0,65 0,64±0,59 1,4(0,0-4,0) 3,4 (2,6-4,6)
Mielocitos 3,95±2,93
2,50±1,48 2,49±1,39 18,3(8,5-29,7)
11,9 (8,1-16,9)
Metamielocitos 19,37±4,84
11,30±3,59
12,42±4,15 23,3(14,0-34,2)
18,0 (9,8-25,3)
Bandas 28,89±7,56
14,10±4,63
14,20±5,23 11,0 (8,5-20,8)
Segmentados 7,37±464 3,64±297 6,31±3,91 12,9(4,5-29,0 10,7(8,0-16,0)
TIPOS CELULARES
AL NACER(Media,DE)
1 MES(Media,DE)
18 MESES(Media,DE)
INFANCIA(Media,limites)
EDAD ADULTA(Media, limites)
Eosinofilos 2,70±1,27 2,61±1,40
2,70±2,16 3,6 (1,0-9,0) 3,2 (1,2-6,2)
Basófilo 0,12±0,20 0,07±0,16
0,10±0,12 0,06 (0,0-0,8)
<0,1(0,0-0,2)
Linfocitos t 15,6 49,0 45,5 16,0 (4,8-35,8)
15,8 (10,8-22,7)
De transición 1,18±1,13 1,95±0,94
1,99±1,00
Pequeños 14,42±5,54
47,05±9,24
43,55±8,56
Células plasmáticas
0,00±0,02 0,02±0,06
0,06±0,08 0,4 (0,2-0,6) 1,8 (0,2-2,2)
Monocitos 0,88±0,85 1,01±0,89
2,12±1,59 1,8 (0,2-2,8)
Megacariocitos 0,06±0,15 0,05±0,09
0,07±0,12 <0,1 (0,0-0,2)
Células reticulares
0,3 (0,0-0,6)
Relación M/E 42 4,0 4,4 2,9 (1,2-5,2) 2,5 (1,2-5,0)
RECUENTOS DIFERECIALES DE LA MEDULA OSEA
se puede obtener por: aspiración a través de una
Aguja biopsia por trepanación
percutánea
BIOPSIA Y ASPIRADO DE LA MO
ADULTOS
NIÑOS Y NEONATOS
En la Tibia
ADULTOS Cresta ilíaca Esternón Espina ilíaca anterior o
posterior. Huesos largos
Rojo: Hiperplasia eritroblastica
Oleoso: aplasia medular
Negruzco: melanoma
metastatizado
Blanco: hiperplasia
medular
ASPECTOS DEL ASPIRADO
Deben ser gruesas (acero inoxidable) longitud: 7-8 cm (provistas
de un fiador que se ajuste perfectamente y un dispositivo de seguridad ajustable.)
AGUJAS DE PUNCIÓN MEDULAR
1. Agujas de Rosenthal
2. Agujas de Jamshidi
Guantes quirúrgicos Laminas portaobjetos Jeringa de 10ml – 20 ml. Yodo povidona Lidocaína al 2%, líquido de transporte de biopsia
(formol al 10%)
MATERIALES PARA LA TOMA DE MUESTRA DE MO
Decubito lateral o esternal
PUNCION: Parte dorsal del íleon
Decubito supino
PUNCION: linea media de la esternebra
decubito lateral
PUNCION: superficie planaadyacente a la tuberosidad dorsal
Decúbito lateral
PUNCION: unión costocondral, en dirección ascendente al eje longitudinal
Decubito lateral
PUNCION: fosa trocanterica (cara medial)
CRESTA ILIACA
ZONAS DE PUNCION PARA MO
COLOCACION DEL PACIENTE
COSTILLA
ESTERNON HUMERO
FEMUR
PROCEDIMIENTO
El paciente se coloca en decúbito lateral derecho o izquierdo
Limpiar la piel con yodo povidona Infiltrar: piel, tejido subcutáneo, musculo
y periostio con lidocaína al 2%, en cantidad de 2 a 5 ml
Introducir la aguja (3-5 mm en el hueso)
Retirar fijador conectar una jeringa de 10 o 20 ml y
aspirar el contenido medular para realizar las extensiones
Realizar las extensiones sin demora (máximo 30 '')
Informar al pct y fam.de la técnica que se le va a realizar, el familiar firmara la solicitud para poder realizar el procedimiento
TOMA DE MUESTRA
ASPIRADO DE MO
EXTENCIONES DE MEDULA: Pueden realizarse de forma similar a un
extendido de sangre. Las partículas grises de la M.O se ven a
simple vista Son el mejor material para la preparación de
buenas extensiones y sirven de indicadores para el examen microscópico de los frotis teñidosEXTENSIONES DIRECTAS:
Se coloca una gota de medula sobre un porta objeto a poca distancia de uno de los extremos.
Con un esparcidor se realiza una extensión de 3cm a 5 cm no + de 2cm de anchura, arrastrando las partículas pero sin aplastarlas
IMPRESIONES: Se recoge una o mas
partículas visibles con una pipeta capilar, con la punta rota de un depresor de madera y se lleva inmediatamente a un portaobjetos adhiriéndolas mediante un ligero movimiento de unción.PREPARACIONES APLASTADAS:
colocar una gota en el portaobjeto cerca de uno de sus extremos. Se coloca otro portaobjetos cuidadosamente sobre el primero. Se ejerce una ligera presión para aplastar las partículas y se separan
ambos portaobjetos deslizando uno sobre otro en dirección paralela a sus superficies.
A medida que se extiende el material, la aparición de grasa en forma de huecos irregulares en la extensión garantiza que se ha obtenido medula y no sangre
Preparación del material aspirado para el examen
BIOPSIA DE M.O POR TREPANACION utilizando un movimiento
de rotación hacia delante y hacia atrás para extraer un trozo de tejido.
Una muestra típica tiene alrededor de 1,9 cm L. por 0.15 a 0.14 cm de D y pesa unos 150 mg
Se obtiene insertando la aguja de biopsia en el hueso
Es útil para evaluar:
• Linfomas Hodgkin y no Hodgkin
• Mieloma Múltiple• Tumores
metastásicos• Amiloide y
Granulomas
Enfermedades que
producen lesiones
Focales en M.O. Tales
como:
La Biopsia en cilindro o por trepanación
Es obligatoria para la denominada “punción seca” Esto puede ser resultado de una hipocelularidad verdadera (Anemia Aplásica) un proceso de Fibrosis
un exceso de células que “Tamponan” la cavidad de la Médula (Leucemia ) que impide tomar una muestra
TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS DE BIOPSIA DE M.O POR TREPANACIÓN
La biopsia se fijan en una solución de acético de senker durante 6 a 18 horas.
Un tiempo excesivo con el fijador produce fragilidad histica
El tejido se procesa habitualmente para su inhibición en parafina se hacen cortes de 4um y se tiñe habitualmente con (H&E)
Las tinciones periódicas de Giemsa y de acido de Schiff son frecuentemente útiles .
Para observar espiculas oseas, que se tiñen de color azul oscuro o púrpura
Se busca presencia de megacariocitos y células anormales
para determinar si la MO es
OBSERVACIÓN DE LAS EXTENSIONES DE M.O
Baja resolución (10x)
A continuación se seleccionan áreas en las extensiones donde las células de la medula
o Hipocelularidado Normocelularidad o Hipercelular
no aparecen diluidas con células sanguíneas
están separadas suficientemente
extendidas para permitir una identificación optima.
Estas áreas están generalmente justo por detrás de las partículas de
medula en extensión directa o cerca de las partículas en las
extensiones aplastadas
OBSERVACIÓN DE LAS EXTENSIONES DE M.O
Identificar todas las etapas de maduración de las células mieloides eritroides.
Realizar Rto dif. utilizando las categorías de células Eritroides Mieloides Linfoides plasmáticas y «otras»,
anotando simultáneamente cualquier anomalía morfológica.
Valorar el contenido férrico de los macrófagos y buscar los gránulos de hierro en las células eritroides en una extension teñida con el colorante de Perls
Alta resolución (40 x ,100x inmersión)
Esto se consigue más fácilmente comenzando con los eritrocitos maduros y
retrocediendo hasta las células más inmaduras
Repetir el proceso para la serie mieloide comenzando con los neutrófilos maduros.
En condiciones normales por lo general se encuentran muchos tipos celulares ,como el patrón de distribución puede ser irregular es preferible contar de 300 a 500 celulas nucleadas
CELULARIDAD DE LA M.O
Se expresa como la relación del volumen de células hematopoyéticas con el volumen total del espacio medular (células mas grasas y otros elementos del estroma)
varia con la edad
el promedio de Células en:
vertebras 75%, esternon60% cresta iliaca 50% costillas 30%.
% hipercelular % hipocelular
el lugar
por ejm a los 50 a.
EDAD PROMEDIO DE CELULARIDAD(%)
INTERVALO DE VARIACION(%)
RECIEN NACIDO 100 80-100
1-3 MESES 80 80-100
NIÑOS >DE 1 AÑO
80 60-90
10 AÑOS 80 60-90
20 AÑOS 65 50-90
30 AÑOS 60 30-85
40 AÑOS 55 30-80
50 – 60 AÑOS 50 20-80
70 AÑOS 40 20-65
80 AÑOS 30 15-45
TECNICAS DE COLORACION
TINCION WRIGHT
FROTIS DE SANGRE PERIFERICA
MEDULA OSEA
Azul de metileno
Eosina
Componentes celulares
ácidos
Componentes celulares básicos
Núcleo (nucléolo)cromatinaCitoplasma (ribosoma)granulacion
es
Hb
TINCION TIPO ROMANOSWS
KY
MIELO PEROXIDASA (MXP)
LMA de la L. LINFOBLASTICA
AGUDAEs una enzima
que se encuentra en los gránulos
primarios
FUNDAMENTOCuando se encuentra el peróxido de hidrogeno, la MPO oxida los sustratos de tinción lo que crea una coloración negra a marrón rojiza.
Neutrófil
os Eosinofilo
s+ en serie mieloide - negativa en serie monocítica
SUDAN NEGRO B
Diferenciar LMA de la LLAPatrón de tinción es
bastante parecido a la MPX
Tiñe lípidos gránulos primarios y secundarios de los neutrófilos.
Esteroles grasas neutras fosfolípidos
y depende de la solubilidad de la coloración en la partícula lipídicas
FOSFATASA ALCALINA (FAL)
diferenciar la LMC de una reacción
leucemoide, en infecciones gravesEs una
enzima que se encuentra
en los gránulos
secundarios de los
neutrófilos
El sustrato es el naftol fosfato y es hidrolizado por la
enzima en presencia del pH
alcalino
FUNDAMENTO
FUNDAMENTO• El ac. Peryodico oxida al glucógeno,
mucoproteinas y otros carbohidratos.
Estos reaccionan con el reactivo incoloro de Schiff
Formando un precipitado rojo brillante
ACIDO PERYODICO DE SHIFF (PAS)
REACCION DE AZUL DE PRUSIA O PERLS
Dx de anemia carenciales y síndromes
mielodisplasicos
El He+ de deposito se encuentra en el
interior de las células
En la acción del Ac. clorhídrico para
liberar iones férricos, que reaccionan con el
ferrocianuro de K dando un precipitado
azul verdosos de ferrocianuro férrico
30-60% DE SIDEROBLASTOS CON 1 A4 GRANULOS EN LA SUPERFICIE
en forma de agregados de hemosiderina en los eritroblastos (sideroblastos)
algunos eritrocitos (siderocitos)
Macrofagos de MO, HIGADO, BAZO
detectable por la reacción de perls
FUNDAMENTO
Un # > indica disfunción del metabolismo del He+
Anemia refractaria sideroblastica (mitocondrias
NORMAL
TINCIONES CITOQUIMICAS ESPECIALES
TINCION LEUCEMIALINFOIDE
LEUCEMIAMIELOIDE
LEUCEMIAMONOCITICA
LEUCEMIA MIELO-MONOCITICA
PAAS + - - -
PEROXIDASA
- + - +FOSFATASA ALCALINA
- + + +
SUDAN NEGRO B
- + + +
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.http://www.seap.es/documents/228448/261577/CURSO+DE+M%C3%89DULA+%C3%93SEA.pdf2. INDICACIONES PARA UN ESTUDIO DE MEDULA3. Bernard H. J, Diagnostico y tratamiento clinico por el laboratorio 9na ed. 4. Todd – Sanford y davidsohn, Laboratorio 5. Manual de técnicas de laboratorio en hematología 2 ed.
6. http://hematologia.blogia.com/2003/122201-mielograma-parametros-que-debe-incluir-el-informe-e-interpretacion-del-mismo..php7.//notasylibrosdemedicina.files.wordpress.com/2012/04/11-medula-osea1.pdf8.//books.google.es/books?id=AyG5MzGyuo4C&pg=PA229&dq=MEDULA+OSEA&hl=es&sa=X&ei=26EEVbjxJMX-gwSDjoLwDg&ved=0CC8Q6AEwAw#v=onepage&q=MEDULA%20OSEA&f=false9.http://www.medigraphic.com/pdfs/actpedmex/apm-2010/apm104h.pdf
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS