BIOLOGICAS CIENCIAS DE BIBLIOTECA
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
“Efecto de la temperatura en el ciclo de desarrollo de
Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae).”
TESIS PARA OBTENER EL TÍTULO
DE BIÓLOGO
AUTOR: Br. Robert Anthony Marquina Bazan
ASESORA: Dra. Aida Esther Carbajal De Wilson
TRUJILLO – PERU
2016
Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo
Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No comercial-Compartir bajo la misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licenses/by-ns-sa/2.5/pe/ . No olvide citar esta tesis.
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DEDICATORIA
A mi padre Enrique, por su apoyo
incondicional, por su ejemplo de
constancia, perseverancia, y por
el valor mostrado para salir
adelante.
A mi hermana Katherin, por ser
una gran amiga para mí y una de
los seres más importantes en mi
vida.
A mi madre Delia, por haberme
apoyado en todo momento, por
sus consejos, sus valores, por la
motivación constante que me ha
permitido ser una persona de bien,
pero más que nada, por su amor.
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AGRADECIMIENTO
A Dios por la vida, por la salud, por ser el amigo por excelencia, por demostrarme
tantas veces su existencia y con ello darme fuerzas para salir delante de cada tropiezo.
A mi asesora, Ms. C. Aída Esther Carbajal de Wilson, por su paciencia, por la atención
prestada, por los conocimientos transmitidos y por su incondicional ayuda en la
realización de este trabajo de investigación.
A mi Jurado Dictaminador Ms. C. Roberto Rodríguez Rodríguez. Ms. C. José
Luis Polo Corro y Ms. C. Aída Esther Carbajal de Wilson, por sus aportes, comentarios
y sugerencias, que orientaron el perfeccionamiento de este informe de tesis.
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AUTORIDADES DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. Orlando Gonzáles Nieves
RECTOR DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
Dr. Rubén Vera Véliz
VICE – RECTOR ACADÉMICO
Dr. Steban Ilich Zerba
SECRETARIO GENERAL DE LA UNIVERSIDAD NACIONAL DE
TRUJILLO
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AUTORIDADES DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
Dr. Freddy Rogger Mejía Coico
DECANO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS:
Dr. Willian Zelada Estraver
PROFESOR SECRETARIO DE LA FACULTAD DE CIENCIAS
BIOLÓGICAS
Dr. Freddy Peláez Peláez
DIRECTOR DE LA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
CIENCIAS BIOLÓGICAS
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PRESENTACIÓN
Señores miembros del jurado dictaminador.
En cumplimiento con las disposiciones emanadas del reglamento vigente para la
obtención de Grados y Títulos de la Escuela de Ciencias Biológicas de la Facultad de
Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, me es honroso someter a
vuestra consideración y criterio la presente tesis titulada: Efecto de la temperatura en
el ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L (Lepidoptera: Pyralidae), con el
propósito de obtener el Título Profesional de Biólogo.
Dejo a vuestro criterio la respectiva aprobación.
Trujillo, noviembre del 2016
________________________________
Robert Anthony Marquina Bazán
Br. en Ciencias Biológicas
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MIEMBROS DEL JURADO
Los que suscriben, miembros del Jurado Dictaminador, declaramos que el presente
informe de tesis reúne los requisitos fundamentales exigidos; por lo que ha sido
aprobada por UNANIMIDAD.
_____________________________
Ms. C. Roberto Rodríguez Rodríguez
Presidente del Jurado
_____________________________
Ms. C. José Luis Polo Corro
Secretario del Jurado
_____________________________
Ms. C. Aída Carbajal de Wilson
Vocal del Jurado
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DE LA ASESORA
La que suscribe, profesora asesora de la presente tesis.
CERTIFICA
Que la presente tesis ha sido desarrollada con conformidad con su respectivo proyecto
y con las orientaciones necesarias brindadas al tesista.
En lo referente al informe final, este ha sido revisado acogiendo las observaciones y
sugerencias alcanzadas, por lo que autorizo al Br. Robert Anthony Marquina Bazán
continuar con los trámites correspondientes.
________________________________________
Ms. C. Aída Carbajal de Wilson
Profesora Principal del Departamento de Ciencias Biológicas
Sección Zoología
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ÍNDICE
DEDICATORIA ii
AGRADECIMIENTO iii
AUTORIDADES iv
PRESENTACIÓN vi
MIEMBROS DEL JURADO vii
DE LA ASESORA viii
ÍNDICE ix
RESUMEN x
I. INTRODUCCIÓN 1
II. MATERIAL Y MÉTODOS 6
III. RESULTADOS 9
IV. DISCUSIÓN 23
V. CONCLUSIONES 28
VI. RECOMENDACIONES 29
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 30
ANEXOS 38
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RESUMEN
El objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la temperatura en el ciclo
de desarrollo de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae), en condiciones de
laboratorio. El trabajo se realizó en el Laboratorio de Crianza de insectos de La
Facultad de Ciencias Biológicas de la Universidad Nacional de Trujillo, de febrero a
agosto del 2016.Se utilizaron los adultos y huevos de G. mellonella, se acondicionaron
cámaras climatizadas para regular las temperaturas de 25° C, 29° C, 33° C y a
temperatura ambiente 21° C, con tres repeticiones por cada una de las temperaturas.
El registro de la temperatura se realizó por medio de un Termohigrómetro VWR, se
empleó el diseño experimental completamente al azar. Los resultados mostraron que la
duración del ciclo de desarrollo de G. mellonella fue de 87.8 días a temperatura
ambiente y de 45.85 días a 33° C, la duración del periodo de incubación, estado larval,
estado de pre-pupa y pupa a mayor temperatura fue de 6.91, 27.16, 1.21 y 10.57 días a
33° C y a menor temperatura fue de 12.85, 51.89, 2.53 y 20.53 días a temperatura
ambiente. La mortalidad de larvas de G. mellonela L fue mayor con 58.60 % a 33° C y
menor en el estado de pupa con 5.5 % a temperatura ambiente. Con respecto al análisis
de varianza y la prueba de Duncan al 95% de significación, se observó que existe
diferencia significativa entre cada una de las temperaturas.
Palabras Clave: Ciclo de desarrollo, Galleria mellonella L, temperatura, mortalidad
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SUMMARY
The aim of this study was to determine the effect of temperature on the development
cycle Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae) in laboratory conditions. The
work was performed at the Laboratory of Insect Breeding Faculty of Biological
Sciences of the National University of Trujillo, from February to August 2016.We used
adults and eggs of G. mellonella, they were conditioned air chambers to regulate
temperatures 25 ° C, 29 ° C, 33 ° C and environment 21 ° C, with three replicates for
each temperature temperatures. The temperature record was held by a hygrometer
VWR, the experimental design was used completely random. The results showed that
the cycle of development of G. mellonella was 87.8 days at room temperature and 45.85
days at 33 ° C, the duration of the incubation period, larval, pupal state of pre-higher
temperature and pupa was 6.91, 27.16, 1.21 and 10.57 days at 33 ° C and lower
temperature was 12.85, 51.89, 2.53 and 20.53 days at room temperature. The mortality
of larvae G. mellonela L was greater with 58.60% at 33 ° C and lower in the pupal
stage with 5.5% at room temperature. Regarding the analysis of variance and Duncan
test at 95% significance it was observed that there are significant differences between
each of the temperatures.
Keywords: Development cycle, Galleria mellonella L, temperature, mortality
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I. INTRODUCCIÓN
Galleria mellonella L. (Lep.: Pyralidae) “polilla mayor de la cera”, se distribuye
ampliamente en todo el mundo, excepto en climas muy fríos y en grandes altitudes
(Root, 1976). La actividad de los adultos comienza en primavera y continúa gran parte
del verano, aunque en países tropicales puede continuar desarrollándose durante todo
el año (Neira y Manquian, 2004). Las polillas ovipositan preferentemente en lugares
oscuros, con poca ventilación o en colmenas débiles, presentando preferencia por los
panales viejos y oscuros (Cornejo, 1993). Es considerada una de los mayores enemigos
de las colonias de abejas, ya que en su fase larvaria destruye, de forma significativa,
los panales y se encuentra distribuida en todas las regiones de mundo donde se practica
la apicultura (Llorente, 2004).
Las larvas de G. mellonella, son utilizadas como hospederos alternativos para
la producción de parasitoides y otros enemigos naturales de plagas perjudiciales para
los agroecosistemas (Gallo et al., 1988), debido a que tienen una alta calidad
nutricional, tal como lo indica Smith (1997), durante el estado larval, es un interesante
alimento debido a que el contenido de lípidos, es de 22.11%, el porcentaje de los ácidos
grasos saturados son mayores que los insaturados representando el 53.1 y 54.44 % del
total de ácidos grasos. La calidad de proteínas en los alimentos está determinada por su
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contenido de aminoácidos esenciales, las larvas de esta especie son ricas en
aminoácidos esenciales a excepción de la metionina e histidina.
A pesar de la importancia de la “polilla mayor de la cera” en la industria apícola,
también se investiga mucho más como un organismo modelo para estudios en
Fisiología de insectos, la Genómica, la Proteómica, entre otros. Williams (1990),
menciona que la “polilla mayor de la cera” es considerada un insecto útil, ya que sus
larvas son comercializadas en Estados Unidos y Europa para la alimentación de peces
y aves.
La exigencia cada vez mayor del uso racional y selectivo de pesticidas por parte
de los mercados internacionales ha impulsado el desarrollo de un programa de manejo
integrado en el que se emplea prácticas agronómicas, etológicas y biológicas en este
rubro la crianza de insectos (Rijo y Barrios, 1996).
Chávez et al. (2013), evaluaron el efecto sinérgico y septicémico entre Bacillus
thuringiensis Berliner y Photorhabdus luminescens (Thomas et Poinar) en larvas de G.
mellonella. Torrez et al. (2012), evaluaron la patogenicidad de aislamientos
monospóricos nativos de Metarhizium anisopliae sobre larvas de esta especie. Crisanto
(2016), utilizó las larvas del V estadio de G. mellonella para evaluar la capacidad de
propagación de Heterorhabditis bacteriophora Poinar. Harding et al. (2013),
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utilizaron las larvas de G. mellonella para caracterizar la patogénesis de Legionella
pneumophila, incluyendo la inoculación, la medición de la virulencia bacteriana y la
replicación, así como la extracción y el análisis de hemocitos infectados.
En Cuba, Hoffmann (1996), evaluó el desarrollo del parasitoide Lydella
minenese (Dip.: Tachinidae) en larvas del VI estadio. Y también en Brazil, Ravelo
(2015), utilizó larvas del V estadio para la producción artificial de Lixophaga diatraeae
(Towns).
El comportamiento y desarrollo de las poblaciones de insectos, tanto de
hospederos como parasitoides, están influenciados por varios factores abióticos entre
ellos la temperatura, humedad y luz y bióticos como los organismos herbívoros, la
calidad y las características de las plantas hospederas (Minkenberg y Helderman,
1990). Entre los factores abióticos, uno de los más importantes es la temperatura. Ésta
es la que determina los límites de las actividades biológicas de los insectos, de tal
manera que las temperaturas óptimas y los umbrales máximos y mínimos pueden ser
estimados para todos los procesos principales de la vida de los insectos. Sin embargo,
los requerimientos térmicos pueden ser diferentes según las especies y las etapas de
desarrollo (Minkenberg, 1990; Gilbert y Raworth, 1996; Roy et al., 2002). La
temperatura influye sobre el desarrollo de los insectos y ha sido estudiada para varias
especies (Ferreira y Parra 1985; Foerster, 1996; Chagas y Parra, 2000). Este factor
influye sobre la tasa de desarrollo de los insectos con límites inferior y superior, la
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mortalidad de los estados inmaduros, la fecundidad y longevidad de los adultos
(Tauber y Tauber, 1973).
Diversos trabajos han sido realizados para evaluar el efecto de la temperatura
en el ciclo de vida de muchos insectos. Álvarez-Amador et al. (1998), presenta el
ejemplo de la “polilla mayor de la cera”, evaluando el efecto de tres temperaturas 15°
C, 20° C y 25° C sobre sus estadios larvarios, fecundidad, longevidad y tasa de
oviposición. Estos datos sirvieron para estimar el potencial de reproducción de la
especie y proponer su uso como huésped alternativo de Billaea claripalpis Wulp. Por
otro lado, Cardoso et al. (2007), evaluaron el efecto de tres temperaturas 22° C, 27° C
y 32° C sobre el desarrollo de las larvas de G. mellonella L. Lo que sirvieron para
determinar el estadio larval y proponer el uso de Bacillus thuringiensis como agente de
control de larvas de la “polilla mayor de la cera”.
Ozer (1962), menciona que el ciclo de desarrollo de G. mellonella, a
temperatura de 26° C es de 68.25 días. Abid et al (1979), informa que a 22 °C, la
duración del estado larval según El-Sawaf (1950) a una temperatura de 22° C fue de
40,4 días y Mishra (1971) a 32°C fue de 23,4 días. Brar et al (1996), menciona que la
duración del estado de pupa a 22°C fue 18,2 días, a 27° C fue de 15 días y a 32°C fue
de 12,2 días.
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Neira (2006), registra que el ciclo biológico de G. mellonella varía de acuerdo
a las condiciones de temperatura, pudiendo ser de 30 a 60 días a 22° C. Realpe et al
(2007), afirma que la duración del ciclo de vida de G. mellonella disminuye a medida
que se incrementa la temperatura.
Se debe considerar que el conocimiento sobre los efectos de la temperatura
sobre los diferentes estados de desarrollo de los insectos es un elemento importante
para la definición de las estrategias de crianza y control. Este conocimiento, cuando se
aplica a G. mellonella, permitirá determinar el tiempo de desarrollo a diferentes
temperaturas. Por lo que el objetivo del presente trabajo fue determinar el efecto de la
temperatura en el ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L., en condiciones de
laboratorio.
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II. MATERIAL Y MÉTODOS
1. Lugar de ejecución del trabajo
El trabajo se llevó a cabo, en el Laboratorio de Crianza de insectos.
Pabellón “Antonio Samanamud Romero” 304. Ciudad Universitaria – UNT.
Av. Juan Pablo II s/n., distrito de Trujillo, provincia de Trujillo, departamento
de La Libertad, entre los meses de febrero a agosto del 2016.
2. Obtención del material biológico
Los adultos y huevos de G. mellonella que se utilizaron en el trabajo de
investigación provienen de crianza masal del laboratorio de control biológico
del Servicio Nacional de Sanidad Agraria - SENASA.
3. Preparación de la dieta
En un recipiente se colocó el alimento de mascota “Mimaskot” molida
junto con el afrecho de trigo, al cual se le agregó miel de azúcar rubia agitando
constantemente hasta obtener una mezcla ligosa (Anexo 3).
4. Efecto de la temperatura
Los experimentos fueron realizados en laboratorio, donde se
acondicionó cámaras climatizadas para regular las temperaturas de 25° C, 29°
C y 33° C y a temperatura ambiente con tres repeticiones por cada una de las
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temperaturas. El registro de la temperatura se realizó por medio de un
Termohigrómetro VWR.
5. Ciclo de desarrollo
5.1. Colecta de posturas y acondicionamiento de huevos
Se colectó a diario huevos de G. mellonella y se acondicionaron en
recipientes de plástico de 500 mL, aproximadamente de 0,4 g de huevos con 4
g de polen por un período de 8 días, cumplido el tiempo se agregó 500 g de
dieta por un período de 7 días.
Para determinar el período de incubación de G. mellonella, se inició con
una unidad experimental constituida por 20 huevos recién ovipositados,
ubicados en una placa petri sobre un papel filtro húmedo. Éstos se incubaron a
las diferentes temperaturas 25° C, 29° C, 33° C y a temperatura ambiente, hasta
su eclosión, para cada temperatura o tratamiento se tuvo tres repeticiones.
5.2. Crianza de larvas
Para las observaciones sobre el estado de larva de G. mellonella, se
colocó una larva de un día de edad en un recipiente con la dieta preparada, lo
que constituye la unidad experimental. El experimento se inició con 20 larvas
para cada temperatura y diariamente se tomó la medida de la longitud de su
cuerpo, la cual se midió con la ayuda de una regla milimetrada, para este estado
se registró el tiempo que tomó la larva en cambiar de estadio.
5.3. Acondicionamiento de pre-pupa y pupa
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Se colocó una pupa en un recipiente de 4.5 x 4.6 x 2.3 cm sobre un papel
filtro, el experimento se inició con 20 pupas por cada temperatura o tratamiento
y se registró el tiempo de duración de este estado.
6. Análisis estadístico
El diseño experimental empleado fue completamente al azar, aplicándose el
análisis de varianza para evaluar el efecto de la temperatura en el ciclo de desarrollo
de G. mellonella, así como la prueba de Duncan para establecer las diferencias entre
cada tratamiento con un nivel de significancia del 95%.
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III. RESULTADOS
En la Tabla 1 y Fig. 1, se presentan la duración promedio del ciclo de desarrollo
de G. mellonella L. Se observó que el ciclo de desarrollo de G. mellonella es más corto
a medida que se incrementa la temperatura, siendo el mayor promedio de duración de
87.80 días a 21° C y el menor promedio de duración de 45.85 días a 33° C,
respectivamente.
En la Tabla 2 y Fig. 2, 3 y 4, se presenta la duración promedio de cada estado
de G. mellonella. Se observó que el periodo de incubación varia de 6.91 a 12.85 días a
33° C y temperatura ambiente. El menor tiempo de duración del estadio de pupa fue de
1.21 días a 33° C.
En la Tabla 3 y Fig. 5, se presenta la duración promedio de cada estadio larval
de G. mellonella. Se observó que 33° C el desarrollo de cada estadio fue en menor
tiempo a comparación a la de 21° C que tuvo mayor tiempo de desarrollo.
En la Tabla 4 y Fig. 6, se presentan el porcentaje de mortalidad de los diferentes
estados de G. mellonella. Se observó que la mayor mortalidad ocurre en estado larvario
a 33° C fue de 58.60% y la menor mortalidad ocurre a 21° C fue de 29.70%.
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En la Tabla 5, según el análisis de varianza existe diferencia significativa entre
la temperatura y los días de desarrollo de G. mellonella. En la Tabla 6, se muestra la
prueba de comparación de rangos múltiples de Duncan, con un nivel de significancia
del 95%, la cual muestra que existe diferencia significativa entre cada temperatura.
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Tabla 1. Duración promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L.
a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
Tratamiento Promedio ± DS
T. ambiente (21° C) 87.80 ± 2.92
25° C 70.36 ± 2.57
29° C 60.81 ± 2.38
33° C 45.85 ± 2.27
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Fig. 1. Duración promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L. a
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
87.8
70.36
60.81
45.85
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
Días
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Tabla 2. Duración promedio en días de los estados de desarrollo de Galleria mellonella
L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
ESTADO T. ambiente
21° C
25° C 29° C 33° C
Huevo 12.85 ± 0.75 10.90 ± 0.54 8.93 ± 0.68 6.91 ± 0.37
Larva 51.89 ± 3.01 41.92± 2.94 37.01 ± 2.88 27.16 ± 2.80
Pre Pupa 2.53 ± 0.27 2.23± 0.21 1.85 ± 0.17 1.21 ± 0.11
Pupa 20.53 ±2.01 15.31 ± 1.88 13.02 ± 1.67 10.57 ± 1.51
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Fig. 2. Duración promedio en días del estado de huevo de Galleria mellonella L. a
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
12.85
10.9
8.93
6.91
0
2
4
6
8
10
12
14
T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
Días
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Fig. 3. Duración promedio en días del estado de larva de Galleria mellonella L. a
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
51.89
41.92
37.01
27.16
0
10
20
30
40
50
60
T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
Días
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Fig. 4. Duración promedio en días del estado de pre-pupa y pupa de Galleria
mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
2.53 2.23 1.85 1.21
20.53
15.31
13.02
10.57
0
5
10
15
20
25
T. ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
Pre-pupa Pupa
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Tabla 3. Promedio de la duración en días de cada estadio larval de Galleria mellonella
L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
ESTADIO T. ambiente
21° C
25° C 29° C 33° C
Larva I 9.61 6.42 4.51 3.51
Larva II 8.65 8.14 7.27 5.28
Larva III 7.85 5.57 6.61 5.74
Larva IV 8.93 7.21 6.39 4.28
Larva V 7.20 6.74 6.40 4.41
Larva VI 9.65 7.84 5.83 3.94
Suma 51.89 41.92 37.01 27.16
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Fig. 5. Promedio de la duración en días de cada estadio larval de Galleria mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y
33°C.
9.61
8.65
7.85
8.93
7.2
9.65
6.42
8.14
5.57
7.216.74
7.84
4.51
7.27
6.61 6.39 6.45.83
3.51
5.285.74
4.28 4.413.94
0
2
4
6
8
10
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Larva I Larva II Larva III Larva IV Larva V Larva VI
T. Ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
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Tabla 4. Porcentaje de mortalidad de los diferentes estados de desarrollo de Galleria
mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
TEMPERATURA
(° C)
MORTALIDAD (%)
HUEVO LARVA PUPA
T. Ambiente (21° C) 17.10 29.70 5.50
25° C 24.61 36.70 6.87
29° C 27.10 41.30 8.89
33° C 29.87 58.60 12.51
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Fig. 6. Porcentaje de mortalidad de los diferentes estados de Galleria mellonella L. a
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
17.1
24.6127.1
29.8729.7
36.741.3
58.6
5.5 6.87 8.8912.51
0
10
20
30
40
50
60
70
T. Ambiente (21° C) 25° C 29° C 33° C
HUEVO LARVA PUPA
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Tabla 5. ANOVA para el promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria
mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
Origen de las
variaciones
Suma de
cuadrados
Grados
de
libertad
Promedio
de los
cuadrados
F Probabilidad Valor
crítico
para F
Entre
grupos
33.93 3 11.31 10.93 0.001 3.49
Dentro de los
grupos
12.42 12 1.04
Total 46.36 15
P.E.: 0.05
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Tabla 5. Prueba de Duncan para el promedio en días del ciclo de desarrollo de Galleria
mellonella L. a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33°C.
Tratamiento Casos Media Grupos Homogéneos
T. Ambiente (21° C) 4 *1.24 X
25° C 4 *1.63 X
29° C 4 *1.75 X
33° C 4 *2.18 X
* Indica diferencia significativa
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IV. DISCUSIÓN
En la Tabla 1 y Fig. 1, se observa, el tiempo total de duración de los estados
biológicos de G. mellonella a temperatura ambiente fue de 87.80 días, a 25° C fue
70.36 días, estos resultados se asemejan a los obtenidos en Cuba, donde se encontró
que el ciclo de desarrollo de G. mellonella a 20° C y 25° C y tuvo una duración total
de 89.10 y 71.25 días, respectivamente (Marston et al, 1985). A temperatura de 29° C
fue de 60.81 días muy cercano con Ozer (1962), que menciona que a 29° C el ciclo de
desarrollo fue de 59.67 días. A la temperatura de 33° C tuvo un promedio de duración
de 45.85 días. En los resultados obtenidos, se ha encontrado una relación inversamente
proporcional entre la temperatura y la duración del ciclo de desarrollo tal como lo
indica Bazzocchi et al. (2003).
En la Tabla 2 se observa, que el período de incubación de la polilla tuvo un
promedio de 12.85, 10.90, 8.93 y 6.91 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C y
33° C respectivamente, estos resultados son similares a los registrados por Abid et al.
(1979) quienes registraron que la duración del estado de huevo fue de 13.6 días a 22°
C. Ozer (1962) menciona que el período de incubación a 26° C fue de 10.01 días.
Asimismo, Cardoso et al. (2007) mencionan que el período de incubación fueron de
8.3 días a 29° C y de 6.8 a 32° C.
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El estado larval fue influenciado por la temperatura y tuvo un promedio de
54.42, 44.15, 38.86 y 28.37 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C
respectivamente (Tabla 2), estos resultados son similares a los registrados por Marston
y Campbell (1973), quienes evaluaron el crecimiento larvario de G. mellonella en
dietas alternativas expuestos a diferentes temperaturas y registraron que la duración del
estado larvario es de 56.97, 41.07 y 30,4 días a temperatura ambiente, 21° C, 29° C y
33° C respectivamente. De igual manera, El-sawaf (1950) registró que la duración del
estado larvario a 24° C, fue de 40.4 días. Por lo contrario Mishra (1971), cuando evaluó
el ciclo biológico de G. mellonella en condiciones controladas de temperatura y
fotoperíodo de 16:8 horas de oscuridad: luz, demostró que la duración del estadio
larvario fue de 74.41, 50.27 y 23.4 días a temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C
respectivamente, probablemente, en este estudio las larvas estaban expuestas a un
periodo de luz lo cual pudo afectar el desarrollo larvario, por ser G. mellonella un
insecto de hábitos nocturnos (Ceballos, 1974).
En la Tabla 3, se presenta la comparación en la duración de los diferentes
estadios larvales en las temperaturas evaluadas, se observó que las larvas de G.
mellonella pasaron por seis estadios, resultados semejantes a los obtenidos por Zenner
y Posada (1992) quienes en su investigación observaron que las larvas de esta especie
pasaron por seis estadios a 25° C, 29° C y 33° C; Realpe et al. (2007), cuando utilizaron
larvas para la producción de nematodos entomopatógenos observaron que esta especie
pasaron por seis estadios. Sin embargo este dato difiere con los datos obtenidos por
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Cardoso et al. (2007), en el cual las larvas fueron alimentadas con harina de trigo,
levadura, miel procesada y cera sólida; y observaron que a 20° C las larvas de G.
mellonella pasaron por siete estadios, mientras que a 25 y 30° C pasaron por ocho
estadios, probablemente esta dieta tendría un alto valor nutricional ya que se utilizaron
ingredientes que forman parte de la dieta natural de G. mellonella. Sin embargo, Lyon
(2007), evaluó el efecto de diferentes dietas en la producción de larvas, registro que G.
mellonella paso por siete estadios larvarios. Cabe anotar que el número de estadios en los
insectos puede variar como respuesta a factores como la disponibilidad, la cantidad y
calidad de alimento ya que de esto va a depender el estado nutricional y tendrían un
efecto directo sobre el rendimiento y la calidad de las larvas (Bustillo, 1976).
En el estado biológico de pre-pupa y pupa, la tendencia general de la duración
en estos estados es igual a la observada en el estado de huevo y larva, con una
disminución en días a medida que aumenta la temperatura. La duración del estado de
pre-pupa fue de 2.53, 2.23, 1.85 y 1.21 días para temperatura ambiente, 25° C, 29° C
y 33° C, y la duración del estado de pupa fue de 20.53, 15.31, 13.02 y 10.57 días para
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C, respectivamente, estos resultados se
asemeja al obtenido por Brar et al. (1996) encontraron que la duración del estadio de
pupa es de 18.2 días a 22° C y 12.2 días a 31° C. No obstante, esos datos difieren de
los obtenidos por Molina y López, (2001) encontraron que la duración de este periodo
es de 6.5 a 7.8 días a una temperatura de 32° C.
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En la Tabla 4 se presenta el porcentaje de mortalidad de los diferentes estados
de G. mellonella. A temperatura ambiente, la mortalidad fue de 17.10%, 29.7% y
5.50% en los estados de huevo, larva y pupa; a 25° C fue de 24.61%, 36.7% y 6.87%;
a 29° C fue de 27.10%, 41.3% y 8.89% y a 33° C fue de 29.87%, 58.6% y 12.51%.
Estos resultados son similares a los registrados por Samsinakova et al, (1983), quienes
indican que en el estado larvario, la mortalidad fue de 25.51% y 48.94 % a 21° C y 30°
C. De igual manera, Realpe-Arana et al. (2007), indican que la mortalidad fue de
18.8%, 22.00% y 32.8% a 20° C, 25° C y 30° C para el estado de huevo; 24.8%, 38.4%
y 49.3% a 20° C, 25° C y 30° C para el estado de larva y 4.2%, 6.2% y 13.8% a 20°
C, 25° C y 30° C para el estado de pupa. Se observó que la mortalidad del estado larval
fue mayor que el estado de huevo y pupa en todas las temperaturas. Debido que, a
temperaturas superiores, todos los estados evolutivos de los insectos mueren,
principalmente las larvas, ya que los insectos no pueden reducir su temperatura
corporal usando la transpiración o la respiración, por esto, las enzimas se desnaturalizan
ocasionando la parada de los procesos metabólicos y la biosíntesis; y por consiguiente
los insectos mueren por coagulación de las proteínas en su cuerpo (Hartfelder et al.,
2013).
Con respecto al análisis de varianza y la prueba de Duncan al 95% de
significación en la Tabla 5 y 6, se observa que existe diferencia significativa en cada
uno de los tratamientos, la mayor diferencia significativa se observa entre la
temperatura ambiente y 33° C, debido que el ciclo de desarrollo de G. mellonella es
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menor a medida que se incrementa la temperatura, así lo indica Fabrina et al. (2012),
cuando evaluaron la influencia de la temperatura y la humedad en el ciclo biológico y
comportamiento en Phyllocnistis citrella Stainton y Galleria mellonella L, obtuvieron
como resultado que el ciclo se completó en 11.5 días a 19° C y 50.15 días a 33° C; y
178.8 días a 19 y 62.4 días a 33° C, respectivamente, por lo que los resultados se
asocian a la importancia de temperatura y su incidencia sobre los procesos
bioquímicos; y a la capacidad del hospedero para suplir los requerimientos
nutricionales.
Las diferencias encontradas en el ciclo de desarrollo de G. mellonella a
temperatura ambiente, 25° C, 29° C y 33° C, se deben a factores físicos y biológicos
principalmente como se ha mencionado la temperatura, lo que también coincide con
Kopácek et al. (1995), que este factor determinaría el tiempo de duración del ciclo de
desarrollo. De igual manera Smith (1965), indica que otro factor que influiría seria los
estímulos químicos generados por el insecto tales como gradientes de temperatura.
Estas diferencias en el ciclo de desarrollo de G. mellonella también se pueden atribuir
a los mecanismos de defensa de cada insecto al estar expuestos a diferentes
temperaturas (Schuhmann et al., 2003).
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V. CONCLUSIONES
La duración del ciclo de desarrollo de Galleria mellonella L fue de 87.8 días a
temperatura ambiente a 21° C y de 45.85 días a 33° C.
La duración del periodo de incubación, a mayor temperatura fue de 6.91 días a
33° y a menor temperatura ambiente a 21° C fue de 12.85 días a temperatura
ambiente.
La duración del estado larval, a mayor temperatura fue de 27.16 días a 33° C y
a menor temperatura ambiente a 21° C fue de 51.89 días a temperatura
ambiente.
La duración del estado de pre-pupa y pupa, a mayor temperatura fue de 1.21 y
10.57 días a 33° C y a menor temperatura a 21° C fue de 2.53 y 20.53 días a
temperatura ambiente
La mortalidad de larvas de Galleria mellonela L fue mayor con 58.60 % a 33°
C y menor en el estado de pupa con 5.5 % a temperatura ambiente.
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VI. RECOMENDACIONES
Se debe buscar nuevas metodologías para producir larvas de Galleria
mellonella en condiciones de laboratorio.
Implementación de dietas artificiales para la crianza masiva de G. mellonella
considerando producirlas a nivel comercial.
Evaluación de los factores físicos como la humedad y el fotoperiodo que pueden
afectar la producción de Galleria mellonella.
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30
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Abid, M.K.; M.F. Shaarawy & M.K. El-Yassery. (1979). Studies on the biology of the
greater wax moth Galleria mellonella L., (Lepidoptera: Pyralidae). Iraq. Bull.
Nat. Hist. Res. Centre 7: 1-10.
Álvarez-Amador, S., C. García-Gutiérrez & E. Rivera-García. (1998). Producción de
Paratheresia claripalpis Wulp. En larvas de Galleria mellonella. Memoria XXI
Congreso Nacional de Control Biológico, Sociedad Mexicana de Control Biológico.
Río Bravo, Tamaulipas, México. 5-6 de Nov. pp. 18-20. INIFAP, México.
Bazzocchi, G.; Lanzoni, A.; Burgio, G.; Fiacconi, M. (2003). Effects of temperature
and host on the pre-imaginal development of the parasitoid Diglyphus isaea
(Hymenoptera: Eulophidae). Biological Control 26: 74-82.
Brar, H.S.; B.S. Brar; G.S. Gatoria & H.S. Jhaj. (1996). Biology of greater wax moth,
Galleria mellonella L. infesting Apis mellifera L. colonies in Punjab. J. Insect
Sci. 9: 12-14.
Bustillo P. (1976). Diferencias en el ciclo de vida e incidencia en el número de ínstares
de Glena bisulca (Lepidoptera: Geometridae) a diferentes temperaturas
ambientales. Revista Colombiana de Entomología 2 (3): 99 - 103.
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BIBL
IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
31
Cardoso, A.; De La Prata, M.; Furlong, J. & Prezoto, F. (2007). Exigencias térmicas
de estadios inmaduros de Galleria mellonella L. (Lepidoptera: Pyralidae).
Ecology, Behavior and Bionomics. Neotropical Entomology. 36(5):657-661p.
Ceballos, Gonzalo. (1974). Introducción a la entomología general. 3a ed. Madrid:
Escuela Técnica Superior de Ingenieros de Montes. 330 p.
Chagas, M. C. & J. R. P. Parra. (2000). Phyllocnistis citrella Stainton (Lepidoptera:
Gracillariidae): Técnica de criação e biología em diferentes temperaturas. An.
Soc. Entomol. Brasil 29: 227-235.
Chávez T.; Fuentes A. A.; M. C. Tomás M. & F. Reyes. (2007). Criterios para la
utilización del artrópodo Galleria mellonella L. En: MINAG. Instituto de
Investigaciones de Sanidad Vegetal. “Producción y Manejo Agroecológico de
Artrópodos Benéficos”.
Cornejo, L. (1993). Apicultura práctica en América Latina. Servicios agrícolas de la
FAO. Roma. Bull. 105. 169 p.
Crisanto, K. I. (2016). Capacidad de propagación de Heterorhabditis bacteriophora
Poinar, en larvas de Galleria mellonella L., Spodoptera eridania Cramer y
Oxydia vesulia Cramer. Tesis para optar el título de biológo.
El-Sawaf, S.K. (1950). The life-history of the greater wax-moth Galleria mellonella L.
in Egypt, with special reference to the morphology of the mature larva. Bull.
Soc. Fouad. Ler Entomol. 34: 247-297
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CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
32
Fabrina P. Girard; Isabel Bertolaccini; Cristina Arregui; Juan C. Favaro; María C. Curis
& Daniel Sánchez (2012). Influencia de la temperatura y la humedad en el ciclo
biológico y comportamiento de la polilla de las coles, Phyllocnistis citrella y
Galleria mellonella. Departamento de Producción Vegetal, Facultad de
Ciencias Agrarias, Universidad Nacional del Litoral (FCA-U.N.L.). Kreder
2805 (3080). Esperanza, Santa Fe. Argentina.
Ferreira, M.J.M. & J.R.P. Parra. (1985). Biología de Mocis latipes (Guenée, 1852)
(Lepidoptera: Noctuidae) em diferentes temperaturas para determinação das
exigências térmicas. An. Soc. Entomol. Brasil 14: 75-88.
Foerster, L.A. (1996). Efeito da temperatura no desenvolvimento das fases imaturas de
Pseudaletia sequax Franclemont (Lepidoptera: Noctuidae). An. Soc. Entomol.
Brasil 25: 27-32.
Gallo, D.; O. Nakano; S. Silveira Neto; R.P.L. Carvalho; G.C. Batista; E. Berti Filho;
J.R.P. Parra; R.A. Zucchi; S.B. Alves & J.D. Vendramin. (1988). Manual de
entomología agrícola. 2° edição. Editora Agronômica Ceres Ltda., São Paulo,
649p.
Gilbert, N. & Raworth, D. (1996). Insect and temperature, a general theory. Can
Entomol 128:1–13.
Harding, C. R., Schroeder, G. N., Collins, J. W., Frankel, G (2013). Use of Galleria
mellonella as a Model Organism to Study Legionella pneumophila Infection. J.
Vis. Exp. (81), e50964, doi:10.3791/50964.
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BIBL
IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
33
Hartfelder, K.; Gentile Bitondi, M.; Brent, C.; Guidugli-Lazzarini, K. R.; Simões, Z.
L. P.; Stabentheiner, A.; Donato Tanaka, É.; Wang, Y. (2013). Standard
methods for physiology and biochemistry research in Apis mellifera. In V
Dietemann; J. D. Ellis; P. Neumann (Eds) The COLOSS BEEBOOK, Volume
I: standard methods for Apis mellifera research. Journal of Apicultural Research
52(1):4.
Hoffmann, Heinz. (1996). Tiempo de desarrollo de parasitoide Lydella minenese
(Dip.: Tachinidae) en larvas de Galleria mellonella. Agricultural Research
Service, US Department of Agriculture Technical Bulletin 1510: 15 pp.
Kopácek, P.; Weise, C.; Götz, P. (1995). The prophenoloxidase from the wax moth
Galleria mellonella: Purification and characterization of the proenzyme. Insect
Biochemistry and Molecular Biology
Llorente, J. (2004). Las enfermedades y enemigos de las colmenas. In: Quero, A. (ed).
Las abejas y la apicultura. Universidad de Oviedo. España. pp: 105 – 117.
Lyon, W. (2007). Rearing wax worm. Ohio State University Extension Fact Sheet.
Entomology. On line Internet. Disponible en: http://ohioline.osu.edu/hyg-
fact/2000/2131.html.
Marston, N. & Campbell, B. (1973).Comparison of nine diets for rearing Galleria
mellonella L. Annals of Entomological Society of America 66 (1): 132 - 136.
Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo
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BIBL
IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
34
Marston, N. L.; Campbell, B.; Boldt, P. (1985). Mass producing eggs of the greater
wax moth, Galleria mellonella L. Agricultural Research Service, US
Department of Agriculture Technical Bulletin 1510: 15 pp.
Mishra, S.C. (1971). Observations on the biology of wax moth Galleria mellonella L.
(Lepidoptera: Pyralidae). Indian For. 97: 573-576.
Minkenberg, O. (1990). On Seasonal inoculative Biological Control. Grafisch Bedrijf
Ponsen & Looijen B.V. Wageningen. 25-59.
Minkenberg, O. & Helderman, C. (1990). Effect of temperature on the life history of
Liriomyza bryoniae (Diptera: Agromizidae) on tomato. Journal of Economic
Entomology 83: 117-125.
Molina, J. P. & López, J. C. (2001). Producción in vivo de tres especies de
entomonematodos con dos sistemas de infección en dos hospedantes. Revista
Colombiana de Entomología 27 (1-2): 73 - 78.
Neira, M. (2006). Sanidad apícola, principales enfermedades y enemigos de las abejas
en Chile. Universidad Austral de Chile. Valdivia, Chile. 138 p.
Neira, M. & Manquian, N. (2004). Apuntes prácticos de apicultura. Material curso:
Apicultura básica (PSVE 232). Universidad Austral de Chile, Instituto de
Producción y Sanidad Vegetal. Valdivia, Chile. 111 p.
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BIBL
IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
35
Ozer, M. (1962). Arı kovanlarında önemli zarar yapan balmumu güvesi (Galleria
mellonella L.)’ nin morfoloji, biyoloji ve yayılışı üzerine araştırmalar. Bitki
Koruma Bülteni, 2: 26–36.
Realpe A., F. J.; Bustillo P., A. E. & López N., J. C. (2007). Optimización de la cría de
Galleria mellonella L. para la producción de nematodos entomopatógenos
parásitos de la broca del café. Cenicafé 58(2):142-157.
Rijo, E. & A. Barrios. (1996). Desarrollo de Galleria mellonella alimentada con dieta
a base de derivados de la industria azucarera. Cienc. Tec. Agric. Protec Plantas
12 : 61-69.
Root, A. (1976). ABC y XYZ de la apicultura. 10a edición. Argentina. A. I. Root
Company 670 p.
Roy, M.; Brodeur, J.; Cloutier, C. (2002). Relationship between temperature and
development rate of Stethorus punctillum (Coleoptera: Coccinellidae) and its
prey Tetranychus mcdanieli (Acarina: Tetranychidae). Environ Entomol
31:177–187.
Samsinakova, A.; Misikova, S. & Leopold, J. (1983) Action of enzymatic systems of
Beauveria bassiana on the cuticle of the greater wax moth larvae (Galleria
mellonella). Journal of Invertebrate Pathology.
Biblioteca Digital - Direccion de Sistemas de Informática y Comunicación - Universidad Nacional de Trujillo
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BIBL
IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
36
Smith, T. L. (1965). External morphology of the larva, pupa and adult of the wax moth
Galleria mellonella L. Journal of the Kansas Entomological Society 38: 287-
310.
Smith, T. L. (1997). Morphology of the larva, pupa and adult of the wax moth Galleria
mellonella L. Journal of the Kansas Entomological Society 38: 287-310.
Schuhmann, B.; Seitz, V.; Vilcinskas, A.; Podsiadlowski, L. (2003). Cloning and
expression of gallerimycin, an antifungal peptide expressed in immune
response of greater wax moth larvae, Galleria mellonella. Archives of Insect
Biochemistry and Physiology
Torrez R.; Jason R. Graham & Ashley Mortensen. (2012). Entomología General.
Instructivo de teoría y práctica. Palmira: Universidad Nal. Sede Palmira.
Colombia.
Trauber, M. J. & C. A. Trauber. (1973). Insect phenology: Criteria for analizing
dormancy and for forecasting postdiapause development and reproduction in
the field. Cornell Univ. Agr. Exp. Sta. 3(12): 1-16
Williams, J. (1990). Insects: Lepidoptera (moths) In: Morse, R y Nowogrodrki, R.
(eds). Honey bee pests, predators, and diseases. Sec. Edition. USA. pp: 96 –
120.
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IOTE
CA DE
CIENCIA
S BI
OLOGIC
AS
37
Zenner De P., I. & Posada, F. J. (1992). Manejo de insectos, plagas y benéficos, de la
palma africana. Bogotá, ICA, 124 p. (Manual de Asistencia Técnica No. 54).
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ANEXOS
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Anexo 1. Huevos de Galleria mellonella colocados en polen
Anexo 2. Preparación de la dieta de Galleria mellonella
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INGREDIENTES CANTIDAD UNIDAD
Alimento para mascota “Mimaskot”
Afrecho de trigo
Miel de azúcar
500
300
2000
g
g
mL
Anexo 3. Composición de la dieta de Galleria mellonella
Anexo 4. Larvas de Galleria mellonella en dieta artificial
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Anexo 5. Crianza de Galleria mellonella a temperatura ambiente
Anexo 6. Crianza de Galleria mellonella a 25° C
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Anexo 7. Crianza de Galleria mellonella a 29° C
Anexo 8. Crianza de Galleria mellonella a 33° C
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Anexo 9. Estadios larvales de Galleria mellonella a diferentes temperaturas
I II IV III V VI
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Anexo 10. Pre pupa de Galleria mellonella
Anexo 11. Pupa de Galleria mellonella
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