Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e ... Portera-cusmibio-2014.pdf ·...
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Dott. Giorgio Portera
Dip. di Biotecnologie Mediche e Medicina Traslazionale
Università degli Studi di Milano
““““Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito Biologia e genetica di popolazioni in ambito forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime forense, dalla traccia biologica alle ultime
metodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR'smetodiche per lo studio dei polimorfismi STR's””””
www.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.it
Laboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia ForenseLaboratorio di Biologia Forense
• Ispezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelliIspezione: ricerca tracce (sangue, saliva, sperma,capelli………….).).).)
• Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)Estrazione (resine magnetiche, colonnine, fenolo/cloroformio)
• Quantificazione (rtQuantificazione (rtQuantificazione (rtQuantificazione (rt----pcr)pcr)pcr)pcr)
• Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)Amplificazione (multiplex)
• Tipizzazione (310Tipizzazione (310Tipizzazione (310Tipizzazione (310----3130XL)3130XL)3130XL)3130XL)
PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA PROFILI GENOTIPICI PER LA RICOSTRUZIONE DELLA DINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSADINAMICA DELITTUOSA
Tipologia di repertiTipologia di repertiTipologia di repertiTipologia di reperti
Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti Vestiti con evidenti tracce ematichetracce ematichetracce ematichetracce ematiche
Vestiti con minime Vestiti con minime Vestiti con minime Vestiti con minime tracce ematichetracce ematichetracce ematichetracce ematiche
Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti Ricerca di tracce ematiche da reperti ripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimineripuliti dopo il crimine
Indumenti usati per Indumenti usati per Indumenti usati per Indumenti usati per travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati travisare il viso,investigati per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e per la ricerca di saliva e
residui epitelialiresidui epitelialiresidui epitelialiresidui epiteliali
www.biologiaforense.it
Ricostruzioni parentali daRicostruzioni parentali daRicostruzioni parentali daRicostruzioni parentali da
resti cadaverici o osseiresti cadaverici o osseiresti cadaverici o osseiresti cadaverici o ossei
TEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIETEST GENERICI E DI SPECIE
Utili nellUtili nellUtili nellUtili nell’’’’identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico identificazione del tipo di fluido biologico
TEST GENERICITEST GENERICITEST GENERICITEST GENERICI
• combur test combur test combur test combur test ���� sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)sangue (test colorimetrico)
• amilasi amilasi amilasi amilasi ���� saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)saliva (test colorimetrico)
• psa psa psa psa ���� sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)sperma (immunocromatografico)
TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE TEST DI SPECIE
• obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate obti test: specifico per sangue di primate (immunocromatografico)(immunocromatografico)(immunocromatografico)(immunocromatografico)
• semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in semelogenina: specifico per sperma umano (proteina secreta in
vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)vescicole seminali, immunocromatografico)
COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST ---- ComburComburComburCombur3333 TestTestTestTest®®®®EEEE (ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)
Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine, Commercializzato per la diagnosi clinica delle urine,
saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine saggio colorimetrico per il livello di glucosio, proteine
e eritrocitie eritrocitie eritrocitie eritrociti
sostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidinasostanza: tetrametilbenzidina
il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza il tampone reagisce colorandosi di verde in presenza
di attivitdi attivitdi attivitdi attivitàààà perossidasica dellperossidasica dellperossidasica dellperossidasica dell’’’’emoglobinaemoglobinaemoglobinaemoglobina
FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,FALSI POSITIVI: perossidasi vegetali,
ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.ruggine, ossidanti vari, ecc.
www.biologiaforense.it
COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST COMBUR TEST ---- ComburComburComburCombur3333 TestTestTestTest®®®®EEEE (ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)(ROCHE)
AMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TEST
test per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acutatest per diagnosi clinica della pancreatite acuta
• sostanza: 2sostanza: 2sostanza: 2sostanza: 2----clorocloroclorocloro----4444----nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a nitrofenolo legato a
maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce maltotrioso indicatore colorimetrico che reagisce
con lcon lcon lcon l’’’’α----amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si amilasi della saliva,in presenza di saliva si
colora di giallocolora di giallocolora di giallocolora di giallo
• FALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporeiFALSI POSITIVI: sudore, urina, altri fluidi corporei
AMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TESTAMILASI TEST
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PSA TESTPSA TESTPSA TESTPSA TEST
• test per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, delltest per diagnosi clinica del tumore alla prostata, dell’’’’iperplasia iperplasia iperplasia iperplasia
prostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggioprostatica benigna (bph) e delle infezioni alla prostata; saggio
immunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dellimmunologico semiquantitativo per la determinazione dell’’’’antigene antigene antigene antigene
specifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasmaspecifico prostatico nel sangue, siero e plasma
•sostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidalesostanza: anticorpi anti antigene psa coniugati a oro colloidale
utilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di spermautilizzato per identificare tracce di sperma
•falsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionafalsi positivi: in donne utilizzatrici di pillole anticoncezionalililili
OBTI TESTOBTI TESTOBTI TESTOBTI TEST: anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle anticorpi anti hb umani coniugati a particelle
cromogene (blu)cromogene (blu)cromogene (blu)cromogene (blu)
utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie utilizzato per la diagnosi specie ---- specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati specifico per il sangue dei primati
superiori.superiori.superiori.superiori.
TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (TEST PER SEMELOGENINA: specifico per sperma umano (α-
semelogeninasemelogeninasemelogeninasemelogenina ,proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)proteina secreta in vescicole seminali)
TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI TEST SPECIFICI
LAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPELAMPADA CRIMESCOPElampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza lampada con luce monocromatica a lunghezza
dddd’’’’onda variabile (415onda variabile (415onda variabile (415onda variabile (415----650 nm)650 nm)650 nm)650 nm)
Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra Principio: differente assorbimento/emissione tra fluidi biologici e substratifluidi biologici e substratifluidi biologici e substratifluidi biologici e substrati
SLIP con tracce di SLIP con tracce di SLIP con tracce di SLIP con tracce di spermaspermaspermasperma
FODERA di una giacca FODERA di una giacca FODERA di una giacca FODERA di una giacca con tracce di sudorecon tracce di sudorecon tracce di sudorecon tracce di sudore
22R
22 O
22Q
22N
22P
22I
22L
22M
Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree Esempio di un reperto con numerose aree luminescentiluminescentiluminescentiluminescenti
LuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolLuminolreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: lreazione di chemioluminescenza: l’’’’energia energia energia energia
proviene dallproviene dallproviene dallproviene dall’’’’ossidazione dellossidazione dellossidazione dellossidazione dell’’’’emoglobina emoglobina emoglobina emoglobina
Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che Le reazioni di chemioluminescenza del luminolo che avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un avvengono in una soluzione basica generano un intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente intermedio energeticamente ricco con conseguente emissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dellemissione di luce da parte dell’’’’acido 3acido 3acido 3acido 3----aminoftalico . aminoftalico . aminoftalico . aminoftalico .
Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una Per ottenere chemioluminescenza dal luminolo in una soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il soluzione acquosa serve un reagente ossidante come il perossido di idrogenoperossido di idrogenoperossido di idrogenoperossido di idrogeno
La CATALISI avviene con la presenza di ioni metallici del tipo: Fe (III) o Cu (II), …o da enzimi come la perossidasi
ReazioneReazioneReazioneReazione
Ferro emoglobinaFerro emoglobinaFerro emoglobinaFerro emoglobina
08 Agosto 1997 Omicidio di Sergio CAFASSO 19
Impronte di piedi rilevate con il luminolImpronte di piedi rilevate con il luminol
Comparazione di un’ impronta di piede insanguinato con quella di uno dei due indagati
Internal part of carInternal part of carInternal part of carInternal part of car
Car trunkCar trunkCar trunkCar trunk
Spare tireNEGATIVE
Internal part of car trunkNEGATIVE
Metal area of car trunk with luminol
C.S. reconstruction
( car trunk cover was changed by coachworker!!!)
ESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNAESTRAZIONE DEL DNA
• RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU COLONNA –––– DNA affine alla DNA affine alla DNA affine alla DNA affine alla resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, resina, rimane legato nella membrana della colonna, successivamente viene eluitosuccessivamente viene eluitosuccessivamente viene eluitosuccessivamente viene eluito
• RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE RESINE AGLI OSSIDI DI SILICIO SU BIGLIE MAGNETICHE –––– stessa stessa stessa stessa chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina chimica del precedente metodo, ma la resina èèèè libera in soluzione. libera in soluzione. libera in soluzione. libera in soluzione. Viene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluitoViene poi recuperata con un magnete e il DNA eluito
• RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA RESINE SINTETICHE AFFINI AL DNA PER CARICA ELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH delELETTROSTATICA: il DNA si lega alla resina al variare del pH della la la la soluzionesoluzionesoluzionesoluzione
ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON ESTRAZIONE CON RESINA MAGNETICARESINA MAGNETICARESINA MAGNETICARESINA MAGNETICA
• metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che metodo di estrazione del DNA che ne sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativane sfrutta la carica negativa
• metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a metodica veloce e modulabile a seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia seconda del tipo di traccia ((((possibilitpossibilitpossibilitpossibilitàààà di aumentare il numero di aumentare il numero di aumentare il numero di aumentare il numero dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi dei lavaggi, estrazione da diversi volumivolumivolumivolumi) ) ) )
• estrazione estrazione estrazione estrazione automatizzabileautomatizzabileautomatizzabileautomatizzabile
resina +resina +resina +resina +
DNA DNA DNA DNA ----
resina resina resina resina ----DNA DNA DNA DNA ----
QUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONEQUANTIFICAZIONE
• fase fondamentale per la traccia forense (spesso priva di storia) COSA SI È ESTRATTO e QUANTO DNA USARE per amplificare;
• anche test per la DIAGNOSI DI SPECIE, viene amplificata una sonda specifica umana, come alfa-satellite del chr. 17 per metodo QUANTIBLOT o h-tert transcrittasi inversa per QUANTIFILER Human in real-time. DNA batterico non determina errori di valutazione perché non viene rilevato
• valutazione di una eventuale inibizione attraverso l’amplificazione contemporanea di 2 DNA: templato (FAM) dell’estratto e IPC (internal pcr control, VIC);
• possibilità di quantificare usando una sonda genomica umana (h-TERT, human telomerase reverse transcriptase su chr. 5) ed una sonda umana maschile (SRY, sex reversal, utile per violenze sessuali)
QUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIMEQUANTIFICAZIONE CON REAL TIME
I campioni vengono quantificati con STANDARD con DNA noto e privo di inibizione
importanza dell’IPC nella lettura della quantificazione dei campioni per valutare la qualità del DNA estratto (eventuale PURIFICAZIONE)
INIBIZIONE: non èpossibile valutare la
presenza o assenza di DNA. PURIFICAZIONE
Real Real Real Real ----TimeTimeTimeTime
IPC dei campioni e standard, curva molto simile
IPC inibito
• Amplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare lAmplificare e tipizzare l’’’’intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile intero genoma sarebbe improponibile per costi e tempoper costi e tempoper costi e tempoper costi e tempo
• Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori Studi di popolazioni hanno permesso di individuare marcatori con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:con le seguenti caratteristiche:
1.1.1.1. POLIMORFICI POLIMORFICI POLIMORFICI POLIMORFICI anche in popolazioni isolate (lo stesso marcatore deve presentare diverse varianti nella popolazione)
2.2.2.2. STABILISTABILISTABILISTABILI alle mutazioni (importanza della scelta dei primers)
3.3.3.3. EQUILIBRIOEQUILIBRIOEQUILIBRIOEQUILIBRIO con la legge di Hardy-Weinberg
4.4.4.4. INDIPENDENTIINDIPENDENTIINDIPENDENTIINDIPENDENTI
AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE AMPLIFICAZIONE caratteristiche di un marcatore forense
Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)Microsatelliti STR (Short Tandem Repeat)
•GATA è la sequenza del core-repeat
•Il microsatellite in questione è un tetranucleotidico
•Le varianti (allelialleliallelialleli) hanno un numero diverso di repeat
...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...
8 ripetizioni
...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...
9 ripetizioni
...ACAGAT GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA GATA TGT...
10 ripetizioni
STRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STRSTRUTTURA DI UN STR
...ACAGATGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATAGATATGT..
Per convenzione gli alleli degli STR vengono chiamati in base al numero di repeat
NOME DEL MARCATORE
POTENZIALI ALLELI; IDENTIFICATI CON IL NUMERO DI RIPETIZIONI DEL CORE REPEAT
SCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STRSCELTA DEGLI STR
Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 Studi di genetica di popolazione hanno permesso di isolare 13 specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis specifici marcatori STR, denominati Loci Codis
CSF1PO
D5S818
D21S11
TH01
TPOX
D13S317
D7S820
D16S539 D18S51
D8S1179
D3S1358
FGA
VWA
AMEL
AMEL
Studi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci CodisStudi di popolazione 13 Loci Codis
MULTIPLEX
• I 13 loci Codis vengono amplificati in un’unica reazione di PCR, spesso con aggiunta di altri loci per aumentarne il potere discriminante
• gli attuali kit di amplificazione caratterizzano contemporaneamente 15 loci STR (Multiplex)
• le attuali multiplex permettono di amplificare concentrazioni di estratto inferiori ai 50 pg/µl
• DNA nucleare cellula diploide ~ 6 pg, 50/6= 8 cellule/µl
20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!20 cellule x reazione!!!
TIPIZZAZIONE
I frammenti vengono separati e caratterizzati tramite elettroforesi capillare utilizzando un sequenziatore automatico
(310, 3100, 3130XL), leggendo i segnali dei diversi DYE che discriminano i frammenti overlappanti
RAW DATA – DATO GREZZO
PROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATOPROFILO GENETICO ELABORATO
•un profilo secondo gli standard FBI (codis) e’ formato da 13 marcatori
•poniamo che ogni marcatore presenti alleli la cui frequenza e’ pari a 0,1
nella popolazione di riferimento
•poniamo che ogni marcatore presenti lo stesso allele su entrambi i
cromosomi (omozigosi)
•la probabilita’ di ottenere la combinazione data per ogni marcatore e’ pari a
0,1*0,1=0,01
•la probabilita’ di ottenere la combinazione data per tutto il profilo e’
0,01*0,01*…0,01 (13 volte) ovvero 10-26, 1 su miliardi di miliardi di
individui……..
DIMOSTRAZIONE D’IDENTITA’’’’
IL PROFILO PUO’ ESSERE RITENUTO UNICO
indiziato
vittima
sperma vestaglia
tampone vaginale
tampone vaginale
indiziato
vittima
vestaglia
tampone vaginale
indiziato
vittima
vestaglia
tampone vaginale
indiziato
vittima
vestaglia
INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI INTERPRETAZIONE DI UN PROFILO MISTO CON CONTRIBUTO DI TRE SOGGETTITRE SOGGETTITRE SOGGETTITRE SOGGETTI
VITTIMAVITTIMAVITTIMAVITTIMA
PRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUOPRIMO INDIVIDUO
SECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUOSECONDO INDIVIDUO
Test di PaternitTest di PaternitTest di PaternitTest di Paternitàààà
L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%L.R.= 99,9999%www.biologiaforense.it
Test di paternità= storie di vita!
- richieste test paternità da padri, che a seguito di tradimento scoperto o crisi famigliare mettono in dubbio propria paternità
- richieste test paternità da madri con dubbio partner
- richieste test paternità da figli.
Compatibilità parziale tra profilo tracce
e proprietario appartamento
Compatibilità parziale tra profilo tracce
e proprietario appartamento
Compatibilità parziale tra profilo tracce
e proprietario appartamento
LABORATORIO DI DATTILOSCOPIA FORENSE
IDENTITA’ CON 18 PUNTICONFRONTO IN B/N
BPA : Bloodstain Pattern AnalysisSTUDIO DELLE TRACCE EMATICHE
-morfologia
-quantità
-posizione
-direzione
-distribuzione
ricostruzione della scena del crimine
www.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.itwww.biologiaforense.it
Studio delle quantita’ e delle direzioni d’impatto
ANALISI DI LABORATORIO DEI DATI RACCOLTI
Punto di convergenza Punto d’origine
Dott. Giorgio PorteraDott. Giorgio PorteraDott. Giorgio PorteraDott. Giorgio Portera