Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare,...
Transcript of Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare,...
![Page 1: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/1.jpg)
Bakterilerin
Üretilmesi
Dr. Banu SANCAK
![Page 2: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/2.jpg)
Mikrobiyal Üreme
Üreme = Hücrelerin sayısında artma
![Page 3: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/3.jpg)
Bakteri üremesi icin gerekli olan faktörler
nelerdir?
![Page 4: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/4.jpg)
BAKTERİ ÜREMESİ İCİN GEREKLİ
OLAN FAKTÖRLER
A.Fiziksel faktörler: 1. Sıcaklık
2. pH
3.Ozmotik basınç
B. Kimyasal faktörler 1. Karbon
2. Nitrojen, sülfür, fosfor
3. Oksijen
4. Mineraller: K, Mg, Ca…
5. Büyüme fakterleri: vitaminler,
a.a.ler, pürin, pirimidin
![Page 5: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/5.jpg)
Bakterileri laboratuvar koşullarında
üretebiliyor muyuz? Neden?
![Page 6: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/6.jpg)
1. Canlı Ortamlar
1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun.
2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,
embryo.
3) Hücre kültürleri: Hep-2, HeLa, Vero
![Page 7: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/7.jpg)
2. Cansız Ortamlar
Besiyerleri
![Page 8: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/8.jpg)
Fiziksel özelliklerine göre Besiyerleri
Katı besiyerleri
Yarıkatı besiyerleri
Sıvı besiyerleri
![Page 9: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/9.jpg)
Agar
Experimented with medium to grow bacteria on.
He tried gelatin, but it did not work.
Wife of colleague recommended agar (a gelatin-like product derived from seaweed).
Didn’t melt, and bacteria couldn’t digest it.
He could also add various nutrients necessary to grow certain organisms.
Koch (pronounced Coke) originated use of a two part dish for growing bacteria (______ ______ named after Julius Petri, a German bacteriologist), and a technique for isolating pure bacterial colonies.
1843 – 1910
ROBERT KOCH
![Page 10: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/10.jpg)
Agar
• Kompleks polisakkarit
• 100°C :sıvı, ~40°C katılaşır
Katı (%2-3 agar)
Yarıkatı (%0.3-0.5 agar)
![Page 11: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/11.jpg)
Fiziksel özelliklerine göre Besiyerleri
Katı (%2-3 agar) : Koloni oluşumu
Yarıkatı (%0.3-0.5 agar): Hareket
Sıvı:Tortu, zar oluşması, bulanıklık
![Page 12: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/12.jpg)
Besiyerleri
![Page 13: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/13.jpg)
Katı besiyeri
• Kolonilerin değerlendirilmesi
![Page 14: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/14.jpg)
Yarı-katı besiyeri Hareket özelliği
• Non motile bacteria will only be found at the site of inoculation
• Motile bacteria swim around go everywhere
![Page 15: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/15.jpg)
Sıvı Besiyeri
It is used as
• enrichment media
• biochemical testing media
• Blood culture media
![Page 16: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/16.jpg)
1. Temel (basit) 2. Zenginleştirici 3. Seçici 5. Ayırt edici 6. Transport 7. Saklama
Amaçlarına göre besiyerleri
![Page 17: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/17.jpg)
1. Temel/Basit besiyeri
♪ Buyyon (nutrient broth) Pepton %1, et suyu %1, NaCl %0.05
♪ Adi agar (nutrient agar) %2-3 agar eklenmiş buyyon
![Page 18: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/18.jpg)
İstenmeyen bakterilerin inhibisyonu
Antibiyotik, safra tuzu, boya …
2. Seçici besiyeri
Salmonella-Shigella agar
Mc Conkey agar, EMB agar, Endo agar
![Page 19: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/19.jpg)
2. Seçici besiyeri
Salmonella-Shigella agar
![Page 20: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/20.jpg)
gr/L Sığır eti özütü:……… 5 Pepton:……………………. 5 Laktoz:……………………. 10 Safra tuzları…………. 8.5 Sodyum sitrat………. 8.5 Sodyum tiyosülfat… 8.5 Ferrik sitrat:…………. 1 Nötral kırmızısı:…… 0.025 Brillant yeşili:………. 0.33 mg Agar………………………… 13.5
Lactose Lactose fermenter
Acid Neutral red
Pink colonies
Ferrous sulfide Black precipitate
H2S + Ferric ammonium citrate
![Page 21: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/21.jpg)
EMB (Eosin Methylene Blue) dyes inhibit Gram (+) bacteria
selects for Gram (-) bacteria
G.I. Tract infections caused by Gram (-) bacteria
2. Seçici besiyeri
Gram negatif bakterileri üretir
![Page 22: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/22.jpg)
Belli özelliklere göre bakterilerin
birbirinden ayırt edilmesini sağlar
3. Ayırt edici besiyeri
![Page 23: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/23.jpg)
gr/L Pepton: …………………… 10
Laktoz: ……………. 10 K2HPO4: …………………. 2 Eozin Y:…………………… 0.4 Metilen mavisi:……… 0.06 Agar: ……………………… 15 pH:6.8
![Page 24: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/24.jpg)
Eosin Methylene Blue (EMB) Agar
http://www.cat.cc.md.us/courses/bio141/
labmanua/lab3/embeacolony.html E. aerogenes
S. Typhimurium
P. aeruginosa
E. coli
ASİT oluşumu: pembe koloni (Enterobacter aerogenes)
ASİT: metalik refle (E. coli)
Laktoz fermentasyonu (-): renksiz (S. typhimurium)
![Page 25: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/25.jpg)
MacConkey's (MAC)
MacConkey’s media is both selective & differential.
1. Selective because it only grows Gram-negative bacteria. Inhibits the growth of Gram-positive bacteria. 2. Differential because neutral red (pH-sensitive
dye) and lactose (type of sugar) have been added to media.
- Bacteria that use lactose for food (lactose fermenters), produce acidic metabolites that trigger the pH sensitive dye to turn pink.
- So lactose fermenting bacteria will grow in bright pink colonies while non-lactose fermenters will be colorless and clear. Enteric bacteria are the most frequently encountered
bacteria isolated from many types of clinical specimens. They are most commonly lactose fermenters.
![Page 26: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/26.jpg)
3. Ayırt edici besiyeri
EMB, Endo by: Laktoz (+) ve (-) bakterilerin ayrımı
![Page 27: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/27.jpg)
3. Ayırt edici besiyeri
27
Kanlı agar: Hemoliz özelliği kullanılarak beta ve alfa hemolitik Streptokokların ayrımı
![Page 28: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/28.jpg)
Blood agar (BAP)
Most specimens received in a clinical microbiology lab are plated onto Blood Agar. It is an enriched medium that will grow even fastidious bacteria.
Also contains 5% sheep blood.
This media is not selective. It is enriched and differential: Certain bacteria produce enzymes called ___________that
act on red cells to produce either:
* ______ hemolysis: Enzymes lyse the blood cells completely, producing a clear area around the colony.
* _______ hemolysis: Incomplete hemolysis produces a greenish discoloration around the colony.
* _______ hemolysis: No effect on the red cells. Blood agar is usually inoculated from a patient’s throat swab. Microbiologist are trying to detect Group A beta hemolytic
Streptococcus pyogenes (a Gram-positive cocci-shaped bacteria that causes Beta hemolysis on blood agar.)
![Page 29: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/29.jpg)
29
selective &
differential
media
![Page 30: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/30.jpg)
4. Zenginleştirici besiyeri
30
Üreyebilmek için kan, serum gibi maddelere ihtiyaç gösteren
Özellikle nazlı bakteriler için
Kanlı agar Çikolata agar: Haemophilus influenzae, Neisseria spp
Kanlı agar (%5 kan) Selenit F besiyeri
Çikolata agar
![Page 31: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/31.jpg)
5. Transport besiyeri
Amies besiyeri Stuart besiyeri Cary- Blair besiyeri
![Page 32: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/32.jpg)
gr/L
Sodyum tiyoglikolat…… 1.5
Sodyum Klorür……………. 5
Disodyum Fosfat……….. 1.1
Agar……………………………… 5
pH: 8.5 V.cholerae transportunda kullanılabilir
Amies
Stuart
![Page 33: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/33.jpg)
gr/L Pepton……………………… 10 Sodyum Klorür……….. 10 pH: 8.5
Kültür gecikecekse (> 6 saat) Cary Blair
tercih edilmeli
![Page 34: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/34.jpg)
6. Saklama besiyerleri
Gliserollü triptik soy buyyon
Gliserollü beyin kalp infüzyon buyyon
![Page 35: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/35.jpg)
Major Contribution to Culture
Media
![Page 36: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/36.jpg)
Besiyerlerine ekim yöntemleri
nelerdir?
![Page 37: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/37.jpg)
Ekim Yöntemleri
• Plak üzerine tek koloni ekim yöntemi
• Tüpte sıvı besiyerine ekim yöntemi
• Tüpte yarıkatı besiyerine ekim yöntemi
• Tüpte katı besiyerine ekim yöntemi
![Page 38: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/38.jpg)
İnokulasyonda kullanılan araçlar
Öze – Yuvarlak (Katı besiyerine ekim)
– İğne (tüpte sıvı ve katı besiyerlerine ekim)
– Çengel (küf cinsi mantar ekimi)
Eküvyon
![Page 39: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/39.jpg)
Streak Plate
![Page 40: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/40.jpg)
Tek koloni ekim yöntemi
![Page 41: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/41.jpg)
Tek koloni ekim yöntemi
![Page 42: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/42.jpg)
Tek koloni ekim yöntemi
![Page 43: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/43.jpg)
1. Aerop ve fakültatif anaerop kültür yöntemleri
• Etüv (normal atmosfer)
• Karbondioksitli etüv (%5-10CO2)
• Mumlu kavanoz (%5-10 CO2)
– 18-24 saat, 37 °C’de
![Page 44: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/44.jpg)
2. Mikroaerofilik bakterilerin üretilmesi
Mumlu kavanoz
Grow best under reduced O2 levels and increased CO2 levels Normal Atmosphere:21 % O2, 0.3 to .03 % CO2
%1-4 O2
%5-10 CO2 (KAPNOFİLİK)
Mikroaerofiller Brucella abortus Campylobacter jejuni
![Page 45: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/45.jpg)
1 .Redükleyici madde
(Tiyoglikolatlı besiyeri)
2. Anaerobik kavanoz
3. Anaerobik kabin
3. Anaerobik Kültür Metodları
![Page 46: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/46.jpg)
• O2 girişini önlemek için redükleyici ajanlar içerir – Tiyoglikolik asit, sistein,
– Birçok mikroorg.nın üremesi için zengin besiyeri
• O2 tüpün 1/3 üst kısmına kadar penetre olmaktadır
• Tiyoglikolik asit (TGA): organik bir bileşik: HSCH2CO2H.
• thiol (mercaptan) + carboxylic acid ‘den mg.
• HAVA VARLIĞINDA okside olur:[SCH2CO2H]2.
3. Anaerobik Kültür Metodları
Tiyoglikolatlı besiyeri
![Page 47: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/47.jpg)
Anaerobik kabin
3. Anaerobik Kültür Metodları
![Page 48: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/48.jpg)
3. Anaerobik Kültür Metodları
Anaerobik kavanoz
![Page 49: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/49.jpg)
Üreme Özellikleri
![Page 50: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/50.jpg)
Sıvı besiyerinde üreme özellikleri 1. Yüzeyde halka ya da
zar (ring or pellicle) oluşumu
2. Flokülent (küçük parçalar)
3. Bulanıklık
4. Sediment
![Page 51: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/51.jpg)
Katı besiyerinde üreme özellikleri
nedir?
![Page 52: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/52.jpg)
Koloni Özellikleri
• Koloni büyüklüğü
• Koloni biçimi
• Koloni yapısı
• Koloni rengi
• Koloni kokusu
• Hemolitik aktivitesi
![Page 53: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/53.jpg)
FYI
![Page 54: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/54.jpg)
54
Colonial Morphology
Shape
Edge
Elevation
Size
Chromogenesis
Opacity
Surface
Consistency
Emulsifiability
Odor
![Page 55: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/55.jpg)
55
Shape Edge Elevation
![Page 56: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/56.jpg)
Koloni Tipleri S (Smooth) düzgün koloni
– Düzgün kenarlı, yuvarlak, homojen görünümlü, hafif kabarık koloniler.
– Örnek: Staphylococcus aureus
![Page 57: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/57.jpg)
Koloni Tipleri
R (Rough) kaba koloni – Düzgün olmayan, kenarları girintili, yüzeyi
buruşuk veya granüllü koloniler
– Örnek: Mycobacterium tuberculosis
![Page 58: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/58.jpg)
Koloni Tipleri
M (Mucoid) koloni – Düzgün,yapışkan, parlak koloniler
– Örnek: Klebsiella pneumoniae
![Page 59: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/59.jpg)
59
• Bacillus subtilis – Colony shape and size: irregular
Margin (edge): undulate (wavy)
Elevation: umbonate
Color: white, dull
Texture: dry (or rough).
• Staphylococcus aureus – Colony shape and size: circular
Margin (edge): entire
Elevation: corvex
Color: yellow
Texture: butyrous (buttery)
![Page 60: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/60.jpg)
Bakterilerin hemoliz özelliği
• Alfa hemoliz – Koloni çevresinde yeşilimsi renk değişikliği
• Beta hemoliz – Koloni çevresinde şeffaf
renk değişikliği
![Page 61: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/61.jpg)
Bakterilerin hemoliz özelliği
• Gama hemoliz – Koloni çevresinde renk değişikliği
görülmemesi
![Page 62: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/62.jpg)
![Page 63: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/63.jpg)
Crystal violet
Gram's iodine
Decolorise with acetone
Counterstain with e.g. methyl red
Gram-positives appear purple
Gram-negatives appear pink
The Gram Stain
![Page 64: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/64.jpg)
Gram boyama
Etil alkol ile dekolorizasyon
Preparat hazırlama
Tüm hücreler boyayı alırlar
Tüm hücreler mavi-siyah boyanır
Lugol ile boyama
Kristal viyole ile boyama
Karşıt boya ile boyama-
Sulu fuksin
![Page 65: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/65.jpg)
![Page 66: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/66.jpg)
Gram pozitif Gram negatif
![Page 67: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/67.jpg)
Gram Staining Steps
1. Crystal violet acts as the primary stain. Crystal violet may
also be used as a simple stain because it dyes the cell wall of any bacteria.
2. Gram’s iodine acts as a mordant (Helps to fix the primary dye to the cell wall).
3. Decolorizer is used next to remove the primary stain (crystal violet) from Gram Negative bacteria (those with LPS imbedded in their cell walls). Decolorizer is composed of an organic solvent, such as, acetone or ethanol or a combination of both.)
4. Finally, a counter stain (Safranin), is applied to stain those cells (Gram Negative) that have lost the primary stain as a result of decolorization 67 Dr.T.V.Rao MD
![Page 68: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/68.jpg)
Gram staining
• Named after Hans
Christian Gram,
differentiates
between Gram-
positive purple and
Gram-negative
pink stains and is
used to identify
certain pathogens. 68 Dr.T.V.Rao MD
![Page 69: Bakterilerin - ha · PDF file1. Canlı Ortamlar 1) Deney hayvanları: Kobay, fare, sıçan, hamster, tavşan ve maymun. 2) Embryonlu yumurta: Sarı kese, amniyotik zar, allantoik boşluk,](https://reader030.fdocument.pub/reader030/viewer/2022021422/5a7872987f8b9aa2448c1484/html5/thumbnails/69.jpg)
69
Staining
• cationic dyes - basic, with positive charges on the chromophore
• anionic dyes - acidic, with negative charges on the chromophore
• surfaces of microbes are negatively charged and attract basic dyes – positive staining.
• negative staining – microbe repels dye & it stains the background