FASB Faculdade do Sul da BahiaCURSO: Enfermagem 1 perodoDISCIPLINA: BiologiaProf. Luciana Biazon Rodolfo

Nome: ..................................................................................................................................

AULAS PRTICAS DE BIOLOGIA

2009.1

RECOMENDAES PARA AS AULAS PRTICAS DE BIOLOGIA

1. Cada aula prtica ter um roteiro que dever ser seguido e preenchido durante a aula pelo aluno.2. O aluno dever ter todos os roteiros para serem entregues ao professor da disciplina, na primeira aula prtica, encadernados, pois esses permanecero no laboratrio e sero utilizados de acordo com o tema proposto em cada aula.3. No ser permitido que o estudante saia com os roteiros ou deixe para finalizar a tarefa fora do laboratrio. No final de cada aula o professor recolher o material escrito de cada aluno para correes.4. Estes roteiros tero como objetivo elevar a qualidade das aulas prticas e facilitar a vida acadmica do aluno na disciplina de Biologia, no curso de Enfermagem da FASB.5. Para que as aulas prticas sejam efetuadas de maneira segura e eficiente, os alunos devem OBRIGATORIAMENTE:

-Comparecer pontualmente no horrio de sua prtica, trazendo consigo o material proposto pela professora. A tolerncia mxima para o atraso do aluno ser de 10 minutos. Aps este perodo, a participao do aluno na prtica ficar comprometida. O aluno no poder responder o roteiro da aula que ele esteve ausente.

-Uso obrigatrio de jaleco branco. O aluno no poder participar da aula prtica sem o jaleco.

- Oaluno dever tambm usar roupa branca, sapato fechado, cabelos presos. Deve-se evitar o uso de adornos (pulseiras, colares, brincos compridos) que possam atrapalhar o andamento das aulas.

-Todos os alunos devem participar ativamente da aula, o que no impede que haja intercmbio de idias e materiais.

-Seguir cuidadosamente o procedimento proposto em cada aula.

-Elaborar os relatrios seguindo as regras propostas.

-Utilizar os microscpios de maneira correta, evitando danific-los.

-Limpar a sua bancada ao trmino de cada aula, desligar os microscpios, deix-los na posio de descanso e cobri-los. Descartar os materiais utilizados nos locais indicados.

-No permitido comer, beber ou fumar no laboratrio.

-No retirar qualquer material do laboratrio sem o consentimento do professor ou responsvel.

Dimenses em Biologia E Instrumentos usadOs em Citologia.

As dimenses das estruturas biolgicas podem agrupar-se em dois grandes grupos, macroscpicas, isto , visveis ao olho nu e microscpicas, isto , invisveis ao olho nu, tendo como fronteira o poder de resoluo do olho humano. As unidades de medida utilizadas nestas dimenses esto, assim, adaptadas sendo as mais freqentemente utilizadas o micrmetro (m) para a microscopia ptica e o nanmetro (nm) e o angstrom () para a microscopia eletrnica. A sua relao com a unidade fundamental do sistema mtrico, o metro (m) e com o milmetro (mm) a seguinte:1 m = 10-6 m = 10-3 mm (0,001mm)1 nm = 10-9 m = 10-6 mm = 10-3 m (0,001 m)1 = 10-10 m = 10-7 mm = 10-4m (0,0001 m)

Na citologia a abordagem exclusivamente no mundo microscpico, que salvo algumas excees, invisvel aos nossos olhos. O limite de resoluo do olho humano de 0,1 mm. Portanto o uso do microscpio fundamental em nosso estudo. Em termos de formao da imagem importante conhecermos o significado de trs conceitos que so: o poder de ampliao, o poder de resoluo e o de limite de resoluo.Poder de ampliao: capacidade de um aparelho aumentar n vezes uma imagem. Na microscopia dado pelo produto entre a ampliao das lentes oculares e a ampliao das lentes objetivas.Poder de resoluo: capacidade de um aparelho fornecer imagens distintas de dois pontos distintos.Limite de resoluo: distncia mnima a que dois pontos podem estar para o aparelho os mostrar individualizados.O que determina a riqueza dos detalhes da imagem fornecida por um sistema de imagens o seu poder de resoluo e no o seu poder de ampliar o tamanho dos objetos. A capacidade de aumentar s tem valor prtico se for acompanhado de um aumento do poder de resoluo. Este limite de resoluo depende essencialmente da objetiva, j que as oculares no podem acrescentar detalhes a imagem, pois sua funo aumentar de tamanho essa imagem, que projetada no seu plano de focagem pela objetiva.

Instrumentos usados em citologia: Materiais utilizados:

Microscopia ptica: Lminas e lamnulasCampo luminoso / Campo claro CorantesCampo escuro Pipetas, bisturis, pinasUltravioleta Materiais biolgicosFluorescenteContraste de faseMicroscopia eletrnicaTransmissoVarredura

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UTILIZAO DO MICROSCPIO PTICO

1- Introduo

O microscpio ptico (ou microscpio de luz) um aparelho utilizado para observao de objetos muito pequenos, impossveis de serem examinados em detalhes a olho nu. O tipo de microscpio mais utilizado nos estudos citolgicos o composto, que constitudo basicamente por duas lentes convergentes. A luz atravessa o objeto observado e o conjunto de lentes, antes de atingir o olho, formando uma imagem bidimensional. Assim, o objeto deve ser delgado o suficiente para que a luz possa atravess-lo. O microscpio de luz utiliza como fonte de iluminao a luz branca comum para permitir a observao de materiais. Esse instrumento fornece uma imagem consideravelmente aumentada, geralmente invertida verticalmente (de cima para baixo) e invertida horizontalmente (da esquerda para a direita). O aparelho constitudo basicamente por uma parte mecnica que serve de suporte, e uma parte ptica, constituda por trs sistemas de lentes: o condensador, as objetivas e as oculares.

Descrio do microscpio ptico:

1- Parte mecnica

a) P ou base: o suporte do microscpio. Pea que sustenta todas as outras.

b) Brao ou coluna: pea que liga o p parte superior do microscpio.

c) Platina: pea de formato retangular que serve de apoio para a lmina de vidro. No centro possui um orifcio para passagem da luz.

d) Charriot: pea ligada platina para movimentar a lmina no plano horizontal. Possui uma presilha que prende a lmina platina. Dois parafusoslaterais promovem a movimentao do charriot, da esquerda para direita e vice-versa e de trs para frente e vice-versa.

e) Parafuso macromtrico: localizam-se em ambos os lados da coluna e serve para ajustar o foco. Permite grandes avanos ou recuos da platina em relao objetiva.

f) Parafuso Micromtrico: localizam-se tambm em ambos os lados da coluna, encaixado sobre o parafuso macromtrico. Ajusta o foco finamente, atravs de pequenos avanos ou recuos da platina.

g) Canho: parte superior do microscpio constituda por pea semi-esfrica ligada um tubo oco. Internamente abriga um prisma e sustenta as lentes objetivas e oculares.

h) Revlver: pea em que se encaixam as lentes objetivas. Nela existe um disco por onde se faz o giro do revlver para a mudana das objetivas.

2 - Parte ptica:a) Sistema de Iluminao: todos os elementos esto situados abaixo da platina.

a1. Fonte de Luz: acoplada ao p do microscpio.

a2. Condensador : Conjunto de lentes situado abaixo da platina. Concentra a luz e fornece iluminao uniforme preparao biolgica. Fornece tambm a possibilidade de contraste imagem, principalmente no caso de preparao fresco.

a3. Diafragma: regula a intensidade da luz que atinge a preparao, atravs de uma alavanca que comanda a abertura e fechamento da pea, localizada no condensador.

b) Objetivas: cada objetiva um conjunto de 4 ou mais lentes superpostas. O microscpio geralmente possui 4 objetivas, proporcionando aumentos diferentes. O valor de aumento est gravado na prpria objetiva.

c) Ocular: a lente superior do microscpio que seencaixa no tubo, o qual pode sustentar 1 ou 2 oculares (microscpios mono ou binoculares, respectivamente). So duas lentes convergentes que ampliam e corrigem defeitos da imagem dada pela objetiva. Essa lente tambm traz gravado o aumento que proporciona a imagem do objeto observado.

2- Objetivos:- Aprender a manusear corretamente para focalizao no microscpio ptico.- Identificar e compreender a funo de cada componente do microscpio ptico.

3- Procedimento:

- Para o manuseio correto para focalizao siga os seguintes passos: Gire o revlver encaixando a objetiva de menor aumento no eixo ptico. Quando se encaixa corretamente se produz um pequeno rudo caracterstico. Abra a presilha do charriot e coloque a lmina sobre a platina, sempre com o material a ser observado voltado para cima. Centralize o material no orifcio da platina, utilizando os parafusos do charriot Coloque o condensador em sua posio mais elevada Levante a platina at o fim, movimentando o parafuso macromtrico com as duas mos, quando chegar ao final, no force o parafuso, pois poder danific-lo. Acenda a luz do microscpio Certifique-se de que o diafragma est aberto, olhando se h passagem da luz atravs da lmina. Olhando agora, atravs das oculares, abaixe lentamente a platina, movimentando o parafuso macromtrico com as duas mos, at que o material possa ser visto. Refine o ajuste do foco utilizando o parafuso micromtrico Explore a lmina, movimentando-a atravs do charriot A preparao pode agora ser observada com as demaisobjetivas, respeitando sempre a ordem crescente de seus aumentos. Antes de passar para a objetiva de aumento superior, coloque sempre a parte do material a ser observada no centro do campo de observao. A partir da objetiva de aumento mdio (10x) e com as demais objetivas, faa o ajuste do foco utilizando apenas o parafuso micromtrico. A cada objetiva que estiver usando, ajuste a iluminao movimentando o condensador e adequando a abertura do diafragma. Quando necessrio o uso da objetiva de 100x, chamada objetiva de imerso, imprescindvel o uso do leo de imerso entre a lmina e a objetiva. Para faz-lo siga os passos seguintes: Aps ter focado com a objetiva de 40x, gire com cuidado o revlver em direo objetiva de 100x, sem encaix-la no eixo ptico Pingue uma gota de leo de imerso sobre a regio iluminada da lmina Complete o giro do revlver, encaixando a objetiva de 100x. Ao encaixar a objetiva de 100x, esta lente deve mergulhar na gota de leo e arrast-la pela lmina medida que a preparao explorada.

ATENO - Terminando a observao: Desligue a luz do microscpio Gire o revlver para encaixar a objetiva de menor aumento Abaixe totalmente a platina Retire a lmina Limpe as objetivas com papel higinico e lcool 70% e cubra-o com a capa.

( Complete no desenho abaixo as partes do microscpio que esto indicadas:

( Qual a importncia da utilizao do leo de imerso quando se utiliza a objetiva de 100X ?

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TCNICAS PARA OBSERVAR CLULAS AO MICROSCPIOPTICO

1- Introduo

O estudo dos seres vivos ao nvel citolgico limitado pelos seguintes fatores: as pequenas dimenses da maioria das clulas, a falta de contraste entre as estruturas celulares, a espessura e o tamanho dos rgos que se pretende estudar. Em conseqncia, a anlise da estrutura e a organizao celular no dependem somente do uso do microscpio, mas tambm de tcnicas bsicas de preparo do material biolgico.Para poder ser observado ao microscpio, o material biolgico tem de ser previamente preparado, passando por processos ou tcnicas citolgicas. Na utilizao do microscpio ptico, a lmina de vidro serve como um suporte para o material.Veremos a seguir algumas tcnicas de preparao de clulas para a observao microscpica.1. Observao vital tambm conhecida como exame a fresco coloca-se o material biolgico sobre uma lmina retangular de vidro, eventualmente cobrindo-a com uma fina lamnula de vidro, e observam-se suas clulas enquanto ainda esto vivas. Como exemplos destas preparaes podemos citar: esfregao de lquidos corporais, cortes feitos a mo livre em tecidos vegetais, entre outros.2. Fixao Consiste em matar rapidamente as clulas, mantendo inalterada sua estrutura interna, como se fosse uma espcie de mumificao. Para a fixao, geralmente as clulas so mergulhadas em lquidos que contm substncias fixadoras, entre as quais as mais usadas so o formol, cido actico, lcool etc.3. Colorao as estruturas presentes no interior das clulas vivas apresentam pouco contraste, o que torna difcil observ-las. Parasuperar essas dificuldades usa-se a colorao, que consiste em tratar o material biolgico com corantes que realam estruturas internas da clula. A hematoxilina, por exemplo, um corante azul com grande afinidade pelo ncleo celular, mas com pouca afinidade pelo citoplasma. J a eosina um corante cor-de-rosa com grande afinidade pelo citoplasma celular, mas que no colore o ncleo. A mesma preparao pode ser submetida ao tratamento com dois ou mais corantes, o que aumenta a diferenciao entre as estruturas celulares.4. Esfregao Se o material biolgico constitudo por clulas isoladas ou fracamente unidas entre si, podemos simplesmente espalh-lo sobre a lmina de vidro, processo conhecido por esfregao. Por exemplo, para preparar lminas de um material lquido como o sangue, pinga-se uma gota sobre a lmina e espalha-se bem, formando uma camada fina. Isso evitar que as clulas se empilhem e assim ser possvel observ-las individualmente. Essa tcnica tambm utilizada para preparar as clulas de revestimento interno da boca. Basta passar levemente um palito na parte interna da bochecha para fazer dezenas de clulas se soltarem. Em seguida, passa-se o palito sobre uma lmina, de modo a obter o esfregao.5. Esmagamento no caso de clulas frouxamente associadas, como as de partes moles de animais ou de vegetais, pode-se preparar o material por meio da tcnica de esmagamento. O material, geralmente j fixado e corado, colocado entre uma lmina e uma lamnula de vidro e esmagado por uma leve presso do dedo polegar. Em alguns casos, o material pode ser aquecido para fazer com que suasclulas se separem mais facilmente.6. Corte manual quando possui clulas firmemente unidas entre si, o material biolgico precisa ser cortado em fatias finas para poder ser observado. Essas fatias so chamadas de cortes biolgicos. Certos materiais vegetais relativamente rgidos (caules, razes, folhas etc) podem ser cortados manualmente, com uma lmina de bisturi bem afiada, e observados a fresco, com uma pequena gota de gua entre a lmina e a lamnula. As estruturas vegetais, geralmente mais rgidas que as dos animais, permitem fazer cortes suficientemente finos para uma observao vital satisfatria.7. Incluso e corte com micrtomo a maioria dos materiais biolgicos no tem rigidez para serem cortados em fatias realmente finas, necessrias a uma boa observao. Por isso, preciso submet-los a tratamentos especiais que endurecem as clulas, o que permite cort-las mais facilmente. O mtodo mais comum de endurecer os materiais biolgicos a incluso, que consiste em impregnar o material com uma substncia que o torna mais rgido, facilitando os cortes. Para preparaes destinadas ao microscpio ptico, geralmente a incluso consiste em embeber o material j fixado em parafina derretida pelo calor, deixando-a esfriar e solidificar. O material fica, assim, includo dentro de um bloco de parafina solidificada, e pode ser cortado em fatias bem finas, em torno de 5 m de espessura. Para obter cortes to finos, emprega-se um aparelho denominado micrtomo.

2- Objetivos Compreender como o desenvolvimento das tcnicas citolgicas contribuiu para o avano do conhecimento sobre asclulas. Aprender a manipular o microscpio ptico. Observar clulas da mucosa bucal e clulas mortas da cortia

3- Materiais: microscpio, lminas, lamnulas, esptula de madeira, corante azul de metileno, cortia, lmina de barbear ou bisturi.

4- Procedimento:

A) Exame a fresco utilizando a tcnica do esfregao:- Retire, raspando suavemente com uma esptula estril, um pouco de clulas da mucosa bucal.- Para coletar o material, force a bochecha para dentro, com auxlio do polegar, para que sua parte interna fique exposta, facilitando a raspagem.- Apie a esptula contendo o material, sobre uma lmina limpa, formando um ngulo de 45.- Faa-a deslizar sobre a lmina limpa, na qual est apoiada, de maneira que o material seja deixado na poro central da mesma. Prepara-se assim um esfregao.- Pingue uma gota do corante azul de metileno sobre o material.- Cubra o material com uma lamnula limpa, procurando evitar a formao de bolhas de ar.- Retire o excesso de corante das bordas com papel de filtro.- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe no local indicado abaixo.

B) Corte manual:- Cortar um fragmento extremamente delgado de um pedao de cortia.- Colocar a fatia sobre uma lmina, adicionar uma gota de gua e cobrir com lamnula.- Focalizar nas margens do fragmento e observar as paredes suberificadas- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe no local indicado abaixo.

Clulas da mucosa bucal Cortia

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VISO GERAL DE CLULAS: REINOS PLANTAE E ANIMALIA

1- Introduo

Embora as clulas procariticas se diferenciem das eucariticas por vrias caractersticas estruturais e funcionais, apenas a principal diferena entre elas pode ser detectada pela microscopia ptica: o tamanho. J entre as clulas eucariontes encontram-se muitas caractersticas morfolgicas diferenciais detectveis, principalmente entre as clulas animais e vegetais. No entanto, para que sejam identificadas ao microscpio ptico, as estruturas de qualquer tipo celular devem ter cor prpria ou devem ser coradas com substncias corantes que lhes conferem diferentes graus de absoro de luz, acentuando os contrastes.

2- Objetivo: detectar, ao microscpio ptico, caractersticas diferenciais entre os dois tipos celulares: animais e vegetais.

3- Materiais e Procedimentos

A) Observao de clula vegetal

- Adicionar a uma lmina limpa, uma gota de gua.- Com o auxlio de uma pina, retirar a pelcula interna da cebola.- Coloque a pelcula esticada sobre a gota de gua.- Pingue uma gota do corante azul de metileno sobre o material.- Cubra o material com a lamnula, sem que se formem bolhas de ar.- Retire o excesso de gua das bordas com papel absorvente.- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe.

B) Observao de clula animal

- Retire, raspando suavemente com uma esptula estril, um pouco de clulas da mucosa bucal.- Para coletar o material, force a bochecha para dentro, com auxlio do polegar, para que sua parte interna fique exposta, facilitando a raspagem.-Apie a esptula contendo o material, sobre uma lmina limpa, formando um ngulo de 45.- Faa-a deslizar sobre a lmina limpa, na qual est apoiada, de maneira que o material seja deixado na poro central da mesma. Prepara-se assim um esfregao.- Pingue uma gota do corante azul de metileno sobre o material.- Cubra o material com uma lamnula limpa, procurando evitar a formao de bolhas de ar.- Retire o excesso de corante das bordas com papel de filtro.- Observe nos aumentos de 40x (objetiva de 4x) e 100x (objetiva de 10x) e desenhe.

Clulas Vegetais Clulas Animais

( Relate as diferenas que puderam ser observadas entre os dois tipos celulares.

( Quais diferenas voc sabe que existem, porm no foi possvel observar?

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VISO GERAL DE CLULAS (CONTINUAO): REINOS MONERA, PROTISTA E FUNGI

A) Observao de clulas bacterianas

- Coloque 2 gotas de Yakult contendo Lactobacillus vivos em uma lmina- Cubra com lamnula, procurando evitar a formao de bolhas de ar- Observe nos aumentos de 40x, 100x e 400x e desenhe no aumento de 400x

B) Observao de clulas de protozorios

- Coloque sobre uma lmina uma gota de cultura de protozorios- Cubra com lamnula, procurando evitar a formao de bolhas de ar- Observe nos aumentos de 40x e 100x e desenhe no aumento de 100x

C) Observao de clulas fngicas (leveduras)

- Coloque uma gota da soluo de fermento biolgico sobre uma lmina- Adicione uma gota de lugol e cubra com lamnula- Observe nos aumentos de 40x, 100x e 400x edesenhe no aumento de 400x

Clulas de protozorios Clulas de leveduras Clulas de bactrias

( Relate as principais diferenas observadas entre os trs tipos celulares.

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MOVIMENTOS CELULARES

1- Introduo

Os movimentos celulares podem ocasionar a locomoo da clula, a circulao do meio extracelular, a movimentao de partculas sobre sua superfcie, a movimentao das organelas intracelulares, as atividades de endocitose ou de exocitose, manuteno do formato celular e ainda a contrao muscular.De um modo geral, os diversos tipos de movimentos resultam de alteraes ao nvel do conjunto de microtbulos e/ou de microfilamentos presentes na matriz citoplasmtica, que constituem um citoesqueleto ativo e reticulado.As correntes citoplasmticas, tanto em clulas animais como em vegetais, possibilitam um aumento da taxa de difuso dos solutos, entre os diferentes pontos do citoplasma de uma clula. Como o citoplasma das clulas vegetais constitui normalmente apenas uma estreita lmina entre o grande vacolo central e a membrana plasmtica, o seu movimento, acompanhado das organelas, bastante ordenado, recebendo a denominao de ciclose.O espermatozide uma clula com mobilidade ativa, capaz de nadar livremente, consistindo em uma cabea e uma cauda ou flagelo. A cabea, que constitui o maior volume do espermatozide, consiste no ncleo, onde o material gentico se encontra concentrado. A cauda responsvel pela mobilidade do espermatozide e na rea intermediria da cauda encontramosas mitocndrias.

2- Objetivo: Observar movimentos celulares em clulas vegetais e animais.

3- Materiais: microscpio, lminas, lamnulas, folhas de Elodea e smen.

4- Procedimento:

A) Observao de Elodea

- Adicione uma gota de gua sobre uma lmina de microscopia.- Destaque com auxilio de uma pina, uma folha de Elodea e deposite-a sobre a gota dgua.- Cubra o material com uma lamnula.- Observe ao microscpio ptico nos aumentos de 40x e 100x.- Desenhe no aumento de 100x, indicando o ncleo, o citoplasma, o vacolo, os cloroplastos ou leucoplastos.

B) Observao de espermatozides

- Coloque luvas.- Adicione uma gota de smen sobre a lmina, e coloque a lamnula.- Observe ao microscpio nos aumentos de 40x, 100x e 400x.- Desenhe no aumento de 400 X.

Clulas de Elodea Espermatozides

( Qual a importncia da ciclose para as clulas vegetais?

( Quais as pores que foram possveis distinguir nos espermatozides?

( Qual a estrutura de um flagelo? Como ele consegue se movimentar?

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PERMEABILIDADE SELETIVA DE MEMBRANAS

1- Introduo

A clula consegue manter uma composio qumica extremamente diferente do meio que a rodeia graas a uma fina membrana (a membrana plasmtica) que controla a entrada e a sada de molculas e ons, apresentando uma permeabilidade diferencial ou seletiva.Esta seletividade , na verdade, o reflexo de sua estrutura e composio qumica lipoproteica. Determinadas substncias, como gases, gua e alguns ons, tm passagem livre atravs damembrana (difuso pasiva) e o sentido de sua movimentao determinado, basicamente, por diferentas de concentrao, gradientes eltricos e/ou pH. Nesse caso, essas substncias se difundem em direo ao meio menos concentrado, tendendo a equilibrar as concentraes. Todavia, a concentrao intracelular de certos ons ou molculas pode ser mantida diferente da concentrao extracelular, graas ao transporte ativo executado por molculas transportadoras presentes na membrana. Portanto, a manuteno de determinadas substncias dentro ou fora da clula, contra um gradiente de concentrao, s pode ocorrer se as membranas plasmticas permanecerem ntegras.A membrana plasmtica constituda por uma bicamada lipdica a qual se associam protenas globulares. Essa bicamada mantida pela insolubilidade dos radicais apolares dos lipdios no meio aquoso circundante. Tratamentos com solventes orgnicos (acetona por ex.), que dissolvem lipdios, alteram a permeabilidade da membrana por desestruturarem a bicamada lipdica. Temperaturas elevadas tambm atuam alterando a integridade e a seletividade da membrana, uma vez que o calor desnatura a maioria das protenas celulares, geralmente envolvidas no transporte de substncias atravs da membrana.

2- Objetivos: Descrever o efeito e o mecanismo de ao da acetona e da temperatura elevada sobre a permeabilidade das membranas celulares.

3- Materiais- 5 tubos de ensaio- etiquetas e caneta- pissete com gua- acetona- beterraba em cubos de aproximadamente 1cm3- 5 pipetas Pasteur- suspenso de levdo- corante vermelho congo (0,2%)- banho-maria a100C- lmina e lamnulas

4- Procedimento

a) Efeito do solvente orgnico sobre a permeabilidade seletiva da membrana- Identifique dois tubos de ensaio com os nmeros 1 e 2.- Adicione 4 mL de gua no tubo n 1 e 2 mL no tubo n 2.- Acrescente 2 mL de acetona ao tubo n 2.- Adicione a cada um dos tubos, um cubinho de beterraba.- Aguarde cerca de uma hora e verifique o que ocorreu em cada um dos tubos.

b) Efeito do aquecimento sobre a permeabilidade seletiva da membrana- Enumere trs tubos de ensaio.- Faa as adies descritas na tabela abaixo, na seqncia indicada, agitando aps cada adio.

|TUBO |SUSPENSO DE LEVDO |VERMELHO CONGO (0,2%) |GUA ||1 |2 mL |- |3 mL ||2 |2 mL |3 mL |- ||3 |2 mL |3 mL |- |

- Coloque o tubo n 3 em banho-maria a 100C por 10 minutos.- Coloque, com auxlio de uma pipeta Pasteur, uma gota da suspenso de levdo do tubo n 1 sobre uma lmina e cubra o material com uma lamnula.- Observe ao microscpio. As clulas do levdo so esfricas ou ovaladas e podem apresentar brotamentos (uma clula pequena unida a uma maior), caractersticos de seu processo de reproduo. Atente para a colorao destas clulas.- Monte outra lmina com a suspenso de levdo do tubo n 2 em uma dasextremidades da lmina e com a suspenso de levdo do tubo n 3 na outra extremidade. Utilize pipetas diferentes para cada suspenso. Cubra cada gota com lamnulas diferentes.- Observe ao microscpio com a lente objetiva de 40x.

( Responda:

a) O que se pode concluir quando se compara os resultados dos tubos 1 e 2 que contm a beterraba? Explique.

b) Em qual das suspenses de levedo houve penetrao do corante? Explique.

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OSMOSE

QUESTO PRVIA: possvel introduzir ou retirar matria de um ovo sem quebr-lo ou perfur-lo?

1- IntroduoPara observar os efeitos da osmose nos ovos preciso primeiro remover a casca calcria, o que pode ser feito atravs da dissoluo do carbonato de clcio da casca pelo cido actico presente no vinagre.2 H3 C COOH + CaCO3 [Ca ++] [ H3 COO - ]2 + H2O + CO2cido actico Carbonato cido actico gua Gsde Clcio de clcio carbnico

2- Objetivo: Observar o processo de osmose atravs de membranas biolgicas.

3- Materiais

- 2 ovos de codorna- 2 copos descartveis- gua destilada (aproximadamente 150 mL)- vinagre- soluo saturada de sacarose (aproximadamente 150 mL)- etiquetas de papel

4- Procedimento

1. Coloque o vinagre em um bcker e mergulhe os ovos, de modo a cobri-los completamente. Durante 5 a 10 minutos, observe o que acontece. Ocorre alguma reao qumica?2. Deixe-os assim por cerca de 24 horas ou at a totalremoo da casca calcria. Com cuidado, para no romper a membrana dos ovos, retire o vinagre do bcker segurando os ovos. Observe se os ovos ainda tm casca, em seguida, lave-os bem sob gua corrente.3. Coloque gua (150mL) em um dos copos. No outro copo coloque a mesma quantidade de uma soluo supersaturada de sacarose. Etiquete os copos, identificando as solues que eles contm.4. Coloque 1 ovo com a casca calcria removida em cada soluo. Observe a forma e a consistncia deles a cada 2 horas. Anote os resultados.

Preparo da soluo supersaturada de sacarose: adicione 250g de acar a cerca de 250mL de gua quente e continue aquecendo e mexendo at que a dissoluo seja completa. A soluo ficar amarelada e viscosa.DISCUSSO:

Na primeira parte deste experimento, aps o consumo da casca do ovo na reao com o cido, o ovo fica envolvido apenas por uma membrana. Essa membrana semipermevel, pois permite a passagem da gua de uma soluo mais diluda (meio hipotnico) para uma mais concentrada (meio hipertnico): esse processo de transferncia da gua atravs da membrana semipermevel conhecido como osmose.O processo de osmose est presente em muitos mecanismos de transporte celular. No caso dos vegetais ocorre o transporte de gua do solo mido (meio hipotnico) para o interior da raiz (meio hipertnico). Em fisiologia animal est relacionada, por exemplo, com os processos de troca de substncias entre as clulas e o ambiente intercelular (como a que ocorre na regio dos capilares sangneos) e com a filtrao renal. No caso de microrganismos unicelulares, geralmente comconcentraes de solutos bem maiores que o meio externo (gua doce), ocorre transporte contnuo de gua para o seu interior; para no estourar, o microrganismo precisa bombear para fora o excesso de gua. O contrrio ocorre em microrganismos unicelulares de gua salgada, havendo gasto de energia para repor a perda de gua para o meio exterior mais concentrado, impedindo que o microrganismo murche.

( Explique o significado de meio hipertnico, isotnico e hipotnico.

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OBSERVAO DE PLASMLISE E DESPLASMLISE EM CLULAS DE CEBOLA

1- Introduo

A membrana plasmtica normalmente mais permevel gua que aos solutos nelas dissolvidos. Quando essa membrana separa duas solues aquosas com diferentes concentraes de soluto, h uma tendncia da gua movimentar-se, preferencialmente no sentido da soluo mais concentrada. Essa difuso da gua corresponde a um tipo de transporte passivo denominado osmose.A osmose cria problemas gerais do balano de gua para as clulas. Uma clula em um meio mais diludo do que a sua prpria concentrao de soluto (meio hipotnico) tende a se intumescer devido absoro osmtica da gua, enquanto que, em meio mais concentrado que seu interior (meio hipertnico), tende a perder volume, devido ao movimento de sada da gua. Portanto, dizemos que a gua passa, por osmose, do meio hipotnico para o hipertnico (onde j maior concentrao de soluto).As clulas vegetais so adaptadas a viver em um ambiente hipotnico, do qual tm constantemente a tendncia de absorver gua por osmose, mas so impedidas de intumescer atse romperem devido resistncia da parede celular. Quando colocadas em meio hipertnico, as clulas perdem gua e sofrem uma retrao alterando sua forma original. Essa modificao chamada, no caso de clulas vegetais, de plasmlise, sendo o resultado de uma retrao do grande vacolo e do afastamento do protoplasma e da membrana plasmtica, em relao parede celular. O fato de o protoplasma retrair-se, e no a parede, mostra que as membranas celulares plasmtica e vacuolar so seletivamente permeveis e esto envolvidas no processo de osmose. A parede celular bastante permevel aos solutos e, portanto, no age como membrana osmtica.A plasmlise temporria no destrutiva para a clula. Esta pode recuperar rapidamente a sua condio de turgidez normal, se a colocarmos em um meio diludo ou em gua pura. A essa recuperao da forma normal, damos o nome de desplasmlise.

2- Objetivo: Relacionar as mudanas de forma das clulas com a concentrao do meio extracelular e o fenmeno da osmose.

3- Materiais: microscpio, lminas, lamnulas, soluo de sacarose hipertnica, cebola, gua destilada

4- Procedimento:

- Coloque sobre uma lmina uma gota de soluo de sacarose hipertnica. Retire a pelcula fina que recobre as camadas da cebola, coloque-a sobre a gota na lmina e cubra com uma lamnula. Leve ao microscpio e observe o que vai acontecer. Faa um desenho no aumento de 100x.- Substitua a soluo hipertnica por gua destilada, procedendo da seguinte maneira: Coloque uma gota de gua destilada em uma das extremidades da lamnula. Encoste um pedao de papel absorvente na outraextremidade, de forma a absorver a soluo existente entre a lmina e a lamnula. Faa um desenho no aumento de 100x.

plasmlise desplasmlise

( Responda:

1- O que plasmlise? E desplasmlise?

2- O que ocorreu com o ovo mergulhado na gua destilada? Explique o porqu deste processo.

3- O que ocorreu com o ovo mergulhado na soluo de sacarose? Explique o porqu deste processo.

4- Compare o experimento do ovo com o das clulas da cebola.

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NCLEO E NUCLOLO

1. Introduo

Na clula eucaritica possvel reconhecer uma regio delimitada por membrana que contm, basicamente, DNA, RNA e protenas. Essa regio d-se o nome de ncleo. No DNA esto as informaes necessrias para o controle do metabolismo e da diferenciao celular.

A. A Composio Molecular do Ncleo e a Estrutura Nuclear

O ncleo apresenta um envoltrio que separa o seu contedo (cromatina, nuclolo e nucleoplasma) do restante do citoplasma. A membrana externa apresenta ribossomos aderidos a sua face citoplasmtica e a membrana interna apresenta cromatina associada a sua face nuclear. Essa associao possibilita a visualizao do contorno nuclear ao nvel da microscopia de luz. O envoltrio nuclear no contnuo, apresenta poros que permitem a passagem de macromolculas como, por exemplo, as molculas de RNA, que so sintetizadas no interior do ncleo e agem ao nvel do citoplasma.Existem evidncias de que h relao entre o grau de condensao da cromatina e sua atividade gnica. Clulas com uma alta taxametablica, ou seja, intensa sntese protica, apresentam cromatina descondensada devido atividade de transcrio, que resulta na formao de diferentes tipos de RNA. Por outro lado, clulas com baixa atividade metablica apresentam pouca cromatina descondensada. Isto pode ser evidenciado na microscopia de luz, pela intensidade de colorao do ncleo.Os nuclolos so estruturas basfilas tendo, portanto, afinidade por corantes bsicos. Em alguns casos, os nuclolos no so vistos, por estarem mascarados pela presena de cromatina densa. O tamanho e a quantidade de nuclolos variam em diferentes tipos celulares e de acordo com o estado funcional da clula. Geralmente, os nuclolos so mais evidentes e/ou numerosos em clulas com alta atividade de sntese protica, por serem o local de sntese de RNAr e organizao inicial dos ribossomos. Possuem tambm, uma pequena quantidade de DNA, correspondente regio organizadora nucleolar, alm de protenas.O nucleoplasma corresponde a uma soluo contendo gua, protenas, ons e metablitos, na qual se encontram a cromatina e os nuclolos.

B. Nmero, Tamanho, Forma e Posio dos Ncleos nas clulas

As clulas apresentam uma variedade muito grande, quanto ao nmero, tamanho, forma e posio de seus ncleos. Em geral o nmero e tamanho dos ncleos esto relacionados atividade metablica da clula. Clulas que apresentam alta taxa de sntese protica e clulas muito grandes, podem ter mais ncleos e/ou ncleos maiores.Certos tipos celulares apresentam a cromatina altamente condensada, como a maioria dos leuccitos de mamferos,outras clulas altamente especializadas, como as hemcias de mamferos (eritrcitos) so anucleadas quando caem na corrente sangunea. A formao das hemcias ocorre na medula ssea, a partir de clulas nucleadas eritroblastos. O ncleo do eritroblasto inicial apresenta cromatina descondensada e nuclolo evidente. O ncleo eliminado durante o processo de maturao da hemcia.Os ncleos dos diferentes tipos celulares, em geral, ocupam uma posio central. No entanto, em certos casos o ncleo deslocado do centro, em conseqncia do acmulo de materiais no citoplasma. Por exemplo, em clulas secretoras de glicoprotenas os ncleos so basais, em clulas musculares esquelticas estriadas, devido a grande quantidade de microfilamentos, os numerosos ncleos ovides so perifricos e em adipcitos, o acmulo de gordura desloca o ncleo para a periferia.Normalmente a forma do ncleo acompanha a forma da clula. Clulas com formato cbico apresentam ncleo esfrico e clulas cilndricas tm ncleo alongado. Entre os leuccitos observamos ncleos multiformes e irregulares. Por exemplo, os neutrfilos apresentam ncleos polimrficos, com 2 a 5 lbulos ligados entre si por finas pontes cromatnicas. Em moncitos, os ncleos variam de ovide a reniforme, de acordo com o estgio de maturao da clula.

2. Objetivo: Observar, ao microscpio de luz, a forma, o tamanho, a posio e o nmero de ncleos em diferentes tipos celulares.

3. Materiais:- Microscpio ptico- lminas permanentes: 1) Tecido adiposo unilocular2) Esfregao sanguneo3) Tireide

4. Procedimento:Para cada lmina indicada focalize inicialmente usando a lente objetiva de 4X, e escolha um campo onde as clulas estejam adequadamente visveis.

1. Tecido adiposo unilocular Aps escolha do campo adequado, focalize agora a preparao com a objetiva de 10X e observe os adipcitos, cujo conjunto apresenta o aspecto de uma rede. O uso do xilol, durante o processo de incluso do material em parafina, promove a extrao dos lipdios dos adipcitos da o seu citoplasma se apresentar vazio e descolorido. Os adipcitos possuem um s ncleo, localizado na periferia da clula, devido ao acmulo de gordura no citoplasma. Escolha uma clula representativa e desenhe no aumento de 400X indicando o ncleo e o depsito de gordura.

2. Esfregao sanguneo Escolha um campo onde as clulas estejam bem separadas. Com a lente objetiva de 10X possvel distinguir os dois tipos celulares bsicos hemcias e leuccitos. As hemcias so as clulas predominantes e se apresentam como um disco bicncavo anucleado. Os leuccitos so facilmente distinguveis das hemcias por serem maiores e apresentarem ncleos que se encontram fortemente corados. Estas clulas so esfricas e seus ncleos tm formas variadas para cada tipo de leuccito. Assim, nos moncitos e linfcitos a forma do ncleo varia de arredondada a reniforme, enquanto que os neutrfilos eosinfilos e basfilos apresentam ncleos segmentados (lobulados). Escolha cada um dos tipos celulares - hemcia e leuccito - e utilizando o leo de imerso (cedido pelo professor ou pelo tcnico) focalize apreparao usando a lente objetiva de 100X. Desenhe o observado indicando cada tipo celular.

3. Tireide - Aps escolha do campo adequado, focalize agora a preparao com a objetiva de 10X e observe o tecido glandular constitudo de folculos ou vesculas com dimenses variadas. Identifique as clulas que constituem os folculos, que possuem em geral forma cbica e ncleo central arredondado. O epitlio formado pelas clulas delimita as cavidades foliculares que contm o colide (tireoglobulina) se apresentando na cor rosa vivo, quando usada a HE. Desenhe as clulas observadas no aumento de 400X, identificando seus ncleos.

o do volume nuclear, sendo o nompanhada de redu descondensada e nuclmo a maioria dos leuc

Clulas adiposas Clulas sanguneas

Clulas epiteliais da tireide

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EXTRAO DE DNA

1- IntroduoAs substncias qumicas presentes no interior das clulas interferem em toda a organizao e funcionamento do organismo dos seres vivos. A substncia central nesse processo o cido desoxirribonuclico, ou simplesmente DNA.A extrao de cidos nuclicos (DNA e/ou RNA) geralmente a primeira de vrias etapas para o estudo da biologia molecular de qualquer organismo. A partir do isolamento (extrao) da substncia qumica DNA, possvel, por meio de diferentes mtodos qumicos, identificar e isolar genes, fazer o seqenciamento de nucleotdeos que compem esse DNA e localizar seqncias homlogas (iguais ousimilares) a seqncias encontradas em outros seres vivos.

2- Objetivo: Extrair e visualizar macroscopicamente o DNA obtido a partir de clulas vegetais e animais.

3- Materiais

de cebola picada em cubinhos pequenos (aproximadamente 50 gramas) ou uma banana amassadaum bisturi2 Bckers de 250 mL e 2 provetas de 50 mL1 Bcker de 100 mLfunil e papel filtro ou gazebanho-maria (60o C)gelopissete com gua destilada10 mL de detergente transparenteNaCl (sal de cozinha)20 mL de lcool etlico ou etanol geladobasto de vidro ou palitocopos descartveis

4- Procedimento

1- Extrao de DNA de clulas vegetais: Coloque 10 mL de detergente e uma pitada de sal em 20 mL de gua destilada num Bcker e misture bem. Coloque a banana amassada no Bcker com a soluo de detergente e leve ao banho-maria por exatamente 15 minutos a 60 C. Resfrie a mistura, colocando o Bcker no gelo por cerca de 5 minutos, mexendo periodicamente. Filtre a mistura, recolhendo o filtrado em um Bcker limpo. Adicione lentamente pela borda do Bcker, cerca de 20 mL de lcool etlico gelado. Observar o aparecimento de duas fases. Espere alguns minutos. Bolhas iro se formar e o DNA vai precipitar. Mergulhe o basto de vidro ou palito no Bcker fazendo movimentos circulares lentos. As longas cadeias de cidos nuclicos enrolam-se no basto e so facilmente removidas. No mexer muito para no quebrar as molculas de DNA.

2- Extrao de DNA de clulas animais (mucosa bucal): Adicione uma colher (de ch) de sal a meio copo de gua e mexa bem at dissolver completamente. Coloque umaboa quantidade desta soluo na boca e faa movimentos de bochechos por aproximadamente 5 minutos. Aps esse tempo, despeje o contedo em um Bcker, remova a espuma e adicione vagarosamente pela borda, igual quantidade de lcool etlico gelado. Espere alguns minutos. Note a formao de 2 fases e o aparecimento na fase superior de fios esbranquiados, que so aglomerados de molculas de DNA. Colete esses fios com auxlio de um palito ou basto de vidro, fazendo movimentos circulares lentamente.

( Responda:

a- Qual a funo do detergente?

b- Qual a funo do sal?

c- Qual o papel do lcool?

d- Qual o objetivo de se extrair cidos nuclicos?

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MITOSE

1. Introduo

O crescimento de um organismo e a regenerao de seus tecidos depende da formao de novas clulas. Nos organismos unicelulares a diviso celular resulta numa verdadeira reproduo, originando novos indivduos. Ao contrrio, nos organismos pluricelulares, que provm de um zigoto, repetidas divises desta clula inicial levam ao desenvolvimento e crescimento do indivduo.Esta multiplicao celular resulta da diviso mittica do ncleo das clulas somticas, diviso essa que assegura a repartio de cromatina pelos dois ncleos filhos, cada um dos quais contm igual nmero de cromossomas que a clula me. A diviso mittica , portanto, uma diviso equacional.A diviso do ncleo geralmente acompanhada pela diviso do citoplasma, obtendo-se assim, de uma clula me, duas clulas filhas; em resumo, a mitose compreende dois processos:-diviso do ncleo ou cariocinese;- diviso do citoplasma ou citocinese.Apesar de o processo de cariocinese ser contnuo, isto , uma vez iniciado no sofre pausas, podem ser consideradas vrias fases que nos permitem didaticamente compreender melhor todas as alteraes e modificaes que se registram na clula em diviso:Intrfase corresponde maior parte do ciclo celular, o perodo entre o final de uma diviso e o incio da seguinte. nesta fase que ocorre a duplicao do contedo de DNA das clulas que vo se dividir.Prfase fase caracterizada pelo incio da compactao da cromatina, associada, no final, desagregao do invlucro nuclear;Metfase fase em que decorre a interao dos cromossomas com os microtbulos do fuso acromtico e sua orientao na placa metafsica;Anfase fase em que se verifica a separao das cromtides-irms e sua ascenso para os plos do fuso;Telfase fase em que se observa a descompactao da cromatina, reorganizao do invlucro nuclear e a citocinese.

2. Objetivo: observar clulas vegetais em diviso celular e interpretar as distintas fases da mitose.

3. MateriaisMicroscpio, lminas e lamnulasVrtices vegetativos de raiz de cebolaSoluo corante orcena actica (1% de orcena em cido actico a 70%)Tubos de ensaio, Placas de PetriBisturis, pinas, pregadores para tubos, pipetas PasteurBico de BunsenPapel toalhaEsmalte incolor

4. Procedimento

- Obteno das razes: Retire os catafilos secos de uma cebola e coloque em um frasco escuro com gua, mergulhando somente a sua parte inferior. Aps trs ou quatro dias,ser observado o crescimento de razes. - Corte as razes a 2 ou 3 mm das extremidades inferiores, colocando-as em um tubo de ensaio com uma soluo do corante orcena actica. - Aquece-se ao fogo a lateral do tubo, um pouco acima do nvel do corante, at que a soluo de orcena comece a ferver.- Aps 3 ou 4 fervuras da soluo despeja-se o contedo do tubo em uma placa. As pontas das razes so transferidas para uma gota de orcena fria sobre uma lmina de vidro para microscopia.- Coloca-se uma lamnula de vidro sobre a gota de orcena contendo a raiz.- Coloca-se a lmina, com a lamnula para cima, entre duas metades de um pedao de papel dobrado, pressionando-se com o polegar para esmagar os fragmentos de raiz e espalhar as clulas. Depois de vedar as bordas da lamnula com esmalte incolor, a preparao est pronta para ser observada ao microscpio ptico.- Focalize as lminas com os aumentos de 40X, 100X e 400X seguidamente, e descreva o que foi observado em cada fase da mitose.

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CLASSIFICAO DOS CROMOSSOMOS HUMANOS E MONTAGEM DE CARITIPO

1- IntroduoCaritipo a descrio clara e precisa das caractersticas do conjunto cromossmico de uma espcie, sendo de fundamental importncia quando se deseja comparar citogeneticamente espcies diferentes; quando se pretende examinar a variao entre indivduos de uma mesma espcie; nos estudos de condies patolgicas associadas a alteraes numricas e estruturais dos cromossomos; no diagnstico pr-natal, dentre outros.Os cromossomos metafsicos constituem o melhor materialpara os estudos cariotpicos devido ao alto grau de condensao que eles adquirem nessa fase, o que facilita a observao tanto de cromtides como da posio dos centrmeros. Assim para se fazer um estudo cariotpico de uma determinada espcie necessrio que se obtenha um tecido com alto ndice mittico para se conseguir um bom nmero de metfases.Na caracterizao cromossmica, a princpio as caractersticas mais evidentes do caritipo so a posio do centrmero, o nmero e o tamanho dos cromossomos. O nmero cromossmico dentro de uma espcie geralmente constante. Entre espcies diferentes h freqentemente uma variao muito grande. Contudo possvel haver um mesmo nmero entre espcies diferentes. O tamanho mdio dos cromossomos na metfase, na maioria das espcies, de aproximadamente 5 a 6 m. De acordo com a posio do centrmero os cromossomos podem ser classificados em: metacntricos, submetacntricos, acrocntricos e telocntricos.

Classificao dos cromossomos humanos

Com o avano nos estudos dos cromossomos humanos e com o acmulo de novos dados, houve a necessidade de se padronizar a representao cariotpica humana. No I Congresso Internacional de Gentica Humana realizado em Denver (1960), os cromossomos autossmicos humanos foram classificados em ordem decrescente de tamanho, sendo numerados de 1 a 22. O 23 par corresponderia aos cromossomos sexuais (XX ou XY). Em 1961, Patau props que mantendo-se a ordem de tamanho e levando-se em considerao a forma dos cromossomos, estes fossem distribudos em 7 grupos, identificados pelas letras de A G.

2. Objetivos: obterconhecimentos bsicos da classificao dos cromossomos humanos e da montagem de um cariograma.

3. Materiais: Fotografia de cromossomos humanos em metfase, tesoura, cola e lpis.

4. Procedimento

- Conte os cromossomos da pgina avulsa e anote o resultado.- Os cromossomos so classificados de acordo com o tamanho e a morfologia, que est relacionada com a posio do centrmero, e esto divididos em 7 grupos representados de A G, e ordenados decrescentemente.- Identifique os cromossomos do grupo A:O par A1 o maior metacntricoO par A2 o maior submetacntricoO par A3 metacntrico, o maior que sobrou- Identifique os cromossomos do grupo B:O par B4 o maior submetacntricoO par B5 o maior submetacntrico, menor que o B4- Identifique os cromossomos do grupo D:Correspondem aos pares 13, 14 e 15. Os trs pares so compostos pelos maiores acrocntricos.- Identifique os cromossomos do grupo F:Correspondem aos pares 19 e 20. So os menores metacntricos.- Identifique os cromossomos do grupo G:Correspondem aos pares 21 e 22, que so os menores acrocntricos. Se o caritipo pertencer ao sexo masculino, voc devera encontrar mais um cromossomo, o cromossomo Y.- Identifique os cromossomos do grupo E:O par E16 o menor metacntrico que sobrou.Os pares 17 e 18 so os menores submetacntricos que restaram.- Identifique os cromossomos do grupo C:So todos que restaram, correspondem aos pares 6 a 12 e mais um cromossomo sexual X se for um indivduo do sexo masculino, e 2 cromossomos X, se for do sexo feminino.Responda

O caritipo montado corresponde a qual sexo?

O indivduo em questo apresenta alguma anomalia cromossmica? Qual?

Classificao dos cromossomos e montagem de um cariograma

Grupo A : Grupo B:

Grupo C:

Grupo D : Grupo E:

Grupo F : Grupo G:

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TIPAGEM SANGNEA: SISTEMAS ABO E Rh

1- IntroduoAntes de 1900, a administrao de sangue com o intuito de salvar vidas humanas era feita de uma maneira aleatria e, na maioria das vezes resultava em insucessos. Somente a partir de 1900, quando Landsteiner descobriu os grupos sangneos do sistema ABO que os acidentes ps-transfusionais puderam ser interpretados como conseqncia da interao entre as hemcias do doador e de anticorpos do receptor. Hoje sabe-se que, na superfcie das hemcias, existem centenas de substancias, chamadas de antgenos, capazes de induzir a resposta imune em indivduos da mesma ou de outras espcies.

2. Objetivos: aprender a identificar os indivduos com relao aos grupos sangneos ABO e Rh.

3. Materiais:- lancetas esterilizadas- laminas de microscopia- anticorpos (anti-soro) Anti-A, Anti-B e Anti-Rh (Anti-D)- lcool iodado- algodo

4. Procedimento

- Fazer a anti-sepsia da ponta do dedo com algodo embebido em lcool iodado.- Com o auxilio de uma lanceta nova e esterilizada, fazer uma inciso nesta regio.- Em uma lmina, colocar duas gotas de sangue para a tipagem do sistema ABO.- Em uma segunda lmina, colocar uma gota de sangue para tipagem dosistema Rh.- Na primeira lmina adicionar de um lado, o soro Anti-A e do outro o soro Anti-B, misturando em seguida com a ponta da lanceta ou de um palito, evitando misturar os materiais.- Na segunda lmina adicionar o soro Anti-D e misturar o material.- Interpretar os resultados observando a formao ou no de grumos em cada lmina.

5. Resultados

- Com os dados coletados dos indivduos tipificados, preencher a seguinte tabela:

| |Grupo sangneo |Total de indivduos || |O |A |B |AB |Rh + |Rh - | ||Nmero de indivduos | | | | | | | ||Porcentagem de cada grupo | | | | | | | |

( Responda:

a- Quais so os gentipos possveis para o sistema ABO e para o sistema Rh?

b- possvel afirmar que o alelo IA se comporta como co-dominante em relao ao alelo IB (e vice-versa) e que ambos se comportam como dominantes em relao ao alelo i? Neste exemplo, o que pode significar ser dominante, co-dominante ou recessivo?

c- Em transfuses sangneas, um tipo sangneo chamado de doador universal e outro de receptor universal devido suas compatibilidades ABO. Quais so seus gentipos?