Atlas Hematologia

HEMATOLOGAVETERINARIA

Atlas deEspeciesDomsticasComunesWilliam J. ReaganTeresa G. Sanders Dennis B. DeNicofa (Eds.)

HARCOURTBRACE

CONTENIDO

Prefacio vii

1. Hematopoyesis 3

2. Morfologa normal del eritrocito 13

3. Variaciones de la morfologa del eritrocito 17

4. Inclusiones y parsitos eritrocitarios 25

5. Morfologa normal del leucocito 29

6. Variaciones de la morfologa del leucocito 37

7. Inclusiones y parsitos leucocitarios 43

8. Plaquetas 47

9. Trastornos linfoproliferativos y mieloproliferativos 49

10. Descubrimientos varios 59

Apndices 631. Esquema de gradacin semicuantitativa para la evaluacin de la morfologa eritrocitaria 632. Esquema de gradacin semicuantitativa para la evaluacin de la toxicidad de los neutrfilos 64

Glosario 65

Referencias seleccionadas 71

Indice 73

CAPITULO UNOHEMATOPOYESIS

CARACTERSTICAS GENERALESTodas las clulas sanguneas tienen una vida media fini- ta, pero en los animales sanos el nmero de clulas en circulacin se mantiene en un nivel constante. Para con- seguirlo, las clulas que se hallan en circulacin necesitan ser repuestas constantemente, y ello se consigue mediante la produccin y emisin de clulas desde la medula sea. Los centros de produccin en la medula sea se conocen normalmente como lugares medulares. En momentos de una mayor demanda, la produccin puede realizarse fuera de la medula sea en lugares como el bazo, el hgado y los ganglios linfticos. Se trata de los llamados lugares extramedulares.

La Hematopoyesis, la produccin de clulas de la sangre, es un proceso complejo y sumamente regulado. Todas las clulas sanguneas de la medula sea surgen de una clula madre comn. Esta clula madre multipotencial origina diferentes fases de clulas progenitoras, que, posteriormente, se diferencian en clulas de la serie eritroctica, granuloctica, megacarioctica y agranuloctica (monocitos y linfocitos). El resultado final de este proceso es la emisin de eritrocitos, de leucocitos y de plaquetas al torrente sanguneo. Con un microscopio ptico, resulta difcil identificar con precisin las primeras clulas madres de la medula sea, pero podemos identificar los niveles mas diferenciados de desarrollo, los cuales se indican y describen grafica- mente en la figura 1.1.

4HEMATOPOYESIS.

La figura 1.2 muestra una seccin histolgica de una biopsia del ncleo de la medula sea de un perro. Ob- serve que hay una mezcla de un 50% aproximadamente de clulas hematopoyticas y un50% de grasa rodeado de trabculas seas. Puede resultar difcil reconocer, en secciones histolgicas, los tipos especficos de clulas de

la medula sea en esta ampliacin de bajo aumento, pero las clulas grandes presentes son megacariocitos. Las clulas son ms fcilmente identificables en un frotis de aspirado de medula sea (figura 1.3). Las clulas presentes incluyen precursores de eritrocitos y granulocitos y un megacariocito. Para clasificar estos tres tipos dis-

Figura 1.2. Seccin histolgica de medula sea canina. Aparecen trabculas seas rosceas en la esquina inferior izquierda, en la esquina inferior derecha y en la parte superior de la microfotografa y rodean las clulas hematopoyticas y la grasa. La grasa aparece en forma de reas redondas u ovales, de aspecto claro. Las clulas precursoras de eritrocitos y granulocitos son las estructuras pequeas, numerosas, redondeadas y de color prpura. Las estructuras mas grandes densamente teidas de color prpura distribuidas por el espacio de la medula son megacariocitos. Biopsia del ncleo de medula sea canina; tincin de hematoxilina y eosina. Objetivo lOx.

Figura 1.4. Precursores del eritrocito. La mayora de las clulas intactas presentes son precursores tempranos del eritrocito con ncleos redondos situados en el centro y citoplasma azul oscuro. Las clulas con ncleos redondos situados excntricamente y citoplasma azul-rojizo son precursores del eritrocito de ltima fase. La clula mas grande, en el centro derecho del campo, que tiene peque-nos grnulos rosados en el citoplasma, es un promielocito. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

* $,

Figura 1.3. Megacariocito, precursores del eritrocito y precursores granulocticos. El Megacariocito es la clula mas grande situada en Id parte central derecha del campo. Los precursores eritrocitarios mas iniciales tienen ncleos centrales redondos y un citoplasma azul oscuro. Los precursores de granulocitos tienen ncleos ovales o dentados y citoplasma azul. Hay un predominio de granulocitos en este campo. Frotis de medula sea canina. Objetivo 50x.

Figura 1.5. Precursores de granulocitos. La mayora de las clulas intactas presentes son precursores de granulocitos con ncleos ovales o dentados y citoplasma azul. Las formas inmaduras mas grandes tienen grnulos citoplsmicos pequeos y rosados. FJ citoplasma se vuelve menos azul al madurar las clulas. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

HEMATOPOYESIS5

tintos de clulas, pueden utilizarse algunas caractersticas generales. Los megacariocitos se pueden distinguir con mayor facilidad por su tamao muy grande; la mayora de ellos tienen un dimetro de 100 a200 um en comparacin con los 20 a 30 )um aproximadamente de los precursores mas grandes de granulocitos o eritrocitos.Las celulas de la lnea eritrocitaria pueden distinguirse inicialmente de las de la lnea de los granulocitos basndose en la forma nuclear y el color del citoplasma (imgenes 1.4 y 1.5). Las celulas de la lnea eritrocitaria tienen ncleos muy redondeados a lo largo de la mayora de las fases de su desarrollo. Por el contrario, los ncleos de las celulas de la lnea de los granulocitos se van dentando y segmentando al madurar. Por otra parte, el citoplasma de los precursores inciales de eritrocitos es mucho mas azul que el de los precursores de los granulocitos.Hay varias caractersticas morfolgicas comunes adicionales que aparecen durante el desarrollo tanto de los precursores del eritrocito y granulocito. Tanto la celula como el ncleo disminuyen de tamao al madurar. Como las clulas pierden su capacidad para dividirse, se produce una perdida de nucleolos y una condensacin de la cromatina nuclear. Tambin se producen cambios en el citoplasma. A medida que aumenta el contenido de hemoglobina de los precursores del eritrocito, el citoplasma se vuelve menos azul y mas rojo. Mientras se produce la maduracin en las clulas granuloctica, elcitoplasma tambin se vuelve menos azul.

ERITROPOYESIS ;-;-Hay varias fases del desarrollo de los eritrocitos que son perceptibles en la medula sea. La figura 1.6 representa el desarrollo del eritrocito y la lamina 1 muestra la morfologa de todos los precursores del eritrocito. El desarrollo de los eritrocitos se detalla brevemente a continuacin.

El rubriblasto es el primer precursor del eritrocito reconocible morfolgicamente. El rubriblasto es una clula grande y redonda con un ncleo grande y redondo con una cromatina granular gruesa y un nucleolo prominente. Estas clulas tienen pequeas cantidades de citoplasma azul oscuro. El rubriblasto se divide para producir dos prorubricitos.El prorubricito es redondo y del mismo tamao o, a veces, mayor que el rubriblasto. El ncleo es redondo con un tipo de cromatina granular gruesa. Normalmen- te no existe nucleolo. Hay una pequea cantidad de citoplasma azul oscuro, a menudo con una zona clara perinuclear prominente. Cada prorubricito se divide para formar dos rubricitos.El rubricito es ms pequeo que el prorubricito. El ncleo continua siendo redondo, y la cromatina granular gruesa es mas densa en comparacion con las prime-ras fases. Hay una pequea cantidad de citoplasma azul oscuro, aunque algunos de los rubricitos ms maduros tienen un citoplasma azul- rojizo. En la fase de rubricito hay dos divisiones: los rubricitos se transforman al madurar en metarubricitos.El metarubricito es ms pequeo que el rubricito. El ncleo es redondo o ligeramente oval, esta situado en el centro excntricamente y tiene una cromatina muy condensada. Hay una cantidad moderada de citoplasma azul o azul-rojizo. A partir de la fase de metarubricito, no hay ninguna divisin posterior de las clulas, nicamente maduracin.El ncleo picnotico altamente condensado del metarubricito es expulsado de la clula, y esta clula se convierte en un policromatcifilo. Los policromatofilos son clulas redondas sin ncleo y tienen un citoplasma azulado. Al madurar el policromatofilo, se vuelve menos azul y mas rojo hasta convertirse en un eritrocito maduro. Los eritrocitos maduros tienen caractersticas morfolgicas dependiente de las especie, y que se describen en el Capitulo 2.

GRANULOPOYESIS

6HEMATOPOYESIS

En los mielocitos neutrofilos, los grnulos secundarios son de color rosa claro y son muy dificiles de reco-

La granulopoyesis se muestra en la figura 1.7 y lamina2. En la medula sea, hay tres tipos de granulocitos, que incluyen clulas de las lneas de neutrofilos, eosinofilos y basofilos. Las clulas de la lnea de los neutrfilos son el tipo predominante de granurocitos presentes y su desarrollo se describe en primer lugar.El primer precursor de granulocito reconocible en la medula sea es el mieloblasto. Es una clula grande con un ncleo redondo u oval con una cromatina finamente granular y uno o mas nucleolos prominentes. La cantidad de citoplasma es pequea o moderada y azul. Cada mieloblasto se divide para formar dos promielocitos. Los promielocitos se parecen a los mieloblastos excepto en que pueden no tener nucleolos y pueden tener una zona perinuclear clara dentro del citoplasma. El rasgo distintivo de los promielocitos es la presencia de mltiples grnulos muy pequeos de color rosado o purpureo en el citoplasma; se les conoce como grnulos primarios. Los promielocitos se dividen para producir mielocitos.El mielocito es mas pequeo que los primeros precursores y tiene un ncleo redondo u oval o ligeramente dentado y con una cromatina granular de fina a moderada. Estas clulas tienen cantidades moderadas de citoplasma azul. En esta fase, dejan de producirse los grnulos primarios y se forman en ese momento grnulos secundarios. Estos grnulos secundarios son mas gran-des que los grnulos primarios.

nocer con el microscopio ptico. El mielocito sufre dos divisiones y la progenie resultante madura y se trans- forma en metamielocitos. A partir de la fase del metamielocito, las clulas ya no se dividen.El metamielocito es mas pequeo que el mielocito y tiene un ncleo con forma de rin. La cromatina es moderadamente granular y mas espesa y densa que la del mielocito. El citoplasma es azul y contiene grnulos primarios y secundarios. Ambos tipos de grnulos en el metamielocito y en las fases subsiguientes de desarrollo no son fcilmente visibles al microscopio. Los metamielocitos se transforman en neutrofilos en banda. Los neutrofilos en banda son redondos y ms pequeos que los metamielocitos, tienen ncleos con la forma de herradura y cantidades moderadas de citoplasma azul o azul claro. El neutrfilos en banda madurara y se convertir en un neutrofilo segmentado, que es una clula pequea con un citoplasma que va del azul muy claro al rosa y un ncleo segmentado. La cromatina nuclear es gruesa, granular y densa.Los eosinofilos y los basofilos maduros y sus precursores aparecen en poca cantidad en la medula sea normal. La produccin de dichas clulas es similar a la de los neutrfilos y, por tanto, solo se describen las diferencias principales (figura 1.1). El desarrollo es idntico hasta la fase de mielocito, que es cuando los mielocitos eosi-

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nofilos y basofilos pueden distinguirse de los mielocitos neutrofilos por el color de los grnulos secundarios. Los mielocitos eosinofilos y basofilos contienen, respectivamente, grnulos secundarios de color rojizo a rojizo-anaranjado y purpureo. Los metamielocitos eosinofilos y basofilos y los metamielocitos en banda pueden reconocerse tambin mediante la presencia nica de los grnulos secundarios.La ltima fase de desarrollo es el eosinofilo y el basofilo maduros. El eosinofilo es, a menudo, ligeramente mas grande que el neutrofilo maduro, y el ncleo no esta segmentado de manera tan estrecha. El citoplasma contiene grnulos rojizos a rojizo-anaranjados. El basofilo maduro es una clula redonda que es ligeramente ms grande que el neutrfilos, con un ncleo segmentado con cromatina condensada. El citoplasma es de color purpura claro y puede contener grnulos. En el Capitulo 5 figuran, dependientes de la especie animal, algunos rasgos nicos de los eosinofilos y basofilos maduros.

MONOCITOPOYESISLos precursores de los monocitos surgen de clulas madres, que son precursores comunes para ambas clulas de las lneas de los granulocitos y monocitos. En la figura 1.1 se puede apreciar el desarrollo del monocito. En la medula sea normal, aparecen poqusimas clulas de la familia de los monocitos. Los monoblastos son los primeros precursores reconocibles microscpicamente en la medula sea, aunque sea imposible diferenciarlos de los mieloblastos. Los monoblastos dan lugar a los promonocitos. Un promonocito es una clula grande con un ncleo oval, a veces dentado con un tipo de cromatina reticular (parecida a una red) o en forma de encaje. Es- tas clulas tienen cantidades pequeas y moderadas de citoplasma azul y puede resultar difcil distinguirlas de los mielocitos o metamielocitos neutrofilos. Los promonocitos dan origen a los monocitos, que son mas grandes que los neutrofilos segmentados. El ncleo de los monocitos tiene mltiples muescas. La cromatina nuclear tiene reas de condensacin pero tiene una forma de encaje o reticular en comparacin con el tipo de cromatina condensada del neutrofilo maduro. El citoplasma es moderado en lo que se refiere a la cantidad y es tpicamente azul-gris, a menudo con mltiples vacuolas discretas.

MEGACARIOCITOPOYESIS YPRODUCCION DE PLAQUETASLa megacariocitopoyesis es nica comparada con el desarrollo de las clulas sanguneas restantes y su descrip- cion aparece en la figura 1.1. Los megacarioblastos son los primeros precursores, morfolgica ment e reconocibles, de la lnea de los megacariocitos en la medula sea, pero puede resultar imposible diferenciarlos

de otras clulas basticas. El megacarioblasto es una clula grande con un solo ncleo redondo y un nucleolo prominent e. Esta clu la s e difer encia en promegacariocito, que es ms grande que el megacarioblasto y que tiene un ncleo multilobulado con un citoplasma agranular azul oscuro.Del promegacariocito surge el megacariocito (figura1.8), que se puede distinguir con facilidad en la medula sea a causa de su gran tamao (normalmente de 100 a200 |im). Esta clula grande tiene un gran ncleo multilobulado y abundante citoplasma granular.Las plaquetas se for man en el citoplasma de megacariodtos mediante la formacion de una estructura que se conoce como proplaqueta. La proplaqueta se fragmenta en mltiples plaquetas. Las plaquetas resul- tantes son clulas pequeas con forma discoidal que no tienen nucleos y que tienen un citoplasma rosa plido que, algunas veces, contiene grnulos inconfundibles de color purpura.

LlNFOPOYESISLos linfocitos surgen del mismo precursor de clula madre comn como lo hacen el resto de las otras clulas de la medula sea (figura 1.1). Las mltiples fases de dife- renciacion de linfocitos en la medula sea no pueden reconocerse microscpicamente, pero existen dos tipos principales de linfocitos presentes en la sangre periferica: linfocitos B y T. Estas dos clulas parecen idnticas y no pueden diferenciarse basndose nicamente en la morfologa, siendo sus funciones completamente diferentes. En la medula sea aparecen cantidades redud- das de linfocitos pequeos y escasos linfocitos medianos y grandes (figura 1.9) El numero exacto de linfocitos en la medula sea depende de la especie.

Figura 1.8. Megacariocito. El megacariocito es la clula grande del centra con un ncleo irregular multilobulado y abundante citoplasma granular. Frotis de medula sea canina. Objetivo 50x.

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mente granular con algunas reas de condensacin. El ncleo del linfocito grande tiene nor malmente un nucleolo y se le conoce como linfoblasto. Ambos tipos de clulas tienen pequeas o moderadas cantidades de citoplasma de color azul claro.Adems de los linfocitos, pueden verse pequeas cantidades de clulas plasmticas en la medula sea (figura1.10). Estas clulas son la fase final de diferenciacin de

Figura 1.9. Linfocitos. Las dos clulas redondas mas pequeas (centro izquierda) que son ligeramente mas grandes que los eritrocitos, con ncleos redondos u ovalados y pequeas cantidades de citoplasma azul claro, son linfocitos pequeos. La clula mas grande del centra es un precursor del granulocito neutrofilo. La clula redonda (encima del precursor del granulocito) con un ncleo redondo, cromatina muy condensada y un borde de citoplasma azul oscuro, es un rubricito. Frotis de medula sea felina. Objetivo lOOx.

los linfocitos B y son redondas con ncleos redondas situados excntricamente. La cromatina nuclear esta muy condensada y espesa con reas claras en medio. Los plasmocitos tienen cantidades moderadas de citoplasma azul oscuro con una zona clara perinuclear prominente.

OTRAS CLULAS DE LAMEDULA SEA

MacrfagoLos macrfagos de la medula sea aparecen en pequeas cantidades (figura 1.11). Estas clulas son grandes y tienen un ncleo oval o dentado. La cromatina nuclear es reticular o con forma de red. Las cantidades de citoplasma azul, que pueden ser moderadas o abundantes, son a menudo muy espumosas y pueden contener vacuolas mltiples de tamaos variados. A menudo, dentro de estas clulas pueden encontrarse restos fagocitados o pigmento de hierro, conocido como hemosiderina. En general, la hemosiderina no se identifica en la medula sea normal de gato.

OsteoclastoPocas veces se encuentran osteoblastos en frotis de medula sea. Los osteoblastos son similares en tamao a los megacariocitos y estos dos tipos de clulas se confunden a menudo (figura 1.12). Los osteoblastos tienen ncleos mltiples individuales, redondos u ovales. En cambio, el ncleo del megacariocito maduro es multilobulado. El citoplasma del osteoclasto es granular y su color es azul claro o rojo.

Figura 1.10. Plasmocitos. Las tres clulas (centro) con ncleos redondos, situados excntricamente, con cromatina gruesa densa y una cantidad moderada de citoplasma azul oscuro con zonas perinucleares claras, son plasmocitos. Las clulas restantes son principalmente precursores de granulocitos. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

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OsteoblastoPueden encontrarse pequeas cantidades de osteoblastos en la medula sea normal. El tamao de dichas clulas es muy similar al del macrfago y la morfologa es algo similar a la del plasmocito, incluido un ncleo redondo situado excntricamente y una zona clara perinuclear destacada (figura 1.13). El ncleo tiene una cromatina granular, normalmente con un nico nuclolo prominente. El citoplasma es azul claro. Por el contrario, el plasmocito es mas pequeo de tamao y la cromatina nuclear es mucho mas condensada sin ningn nuclolo prominente.

Figura 1.11. Macrfago. La clula grande (centro derecha) con citoplasma abundante lleno de vacuolas y un ncleo redondo es un macrfago. Los grnulos rojizo-pardos del citoplasma son compa- tibles con hemosiderina. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

MastocitoLos mastocitos pueden aparecer en cantidades muy pequeas en la medula sea. Estas clulas son redondas con un ncleo redondo situado en el centro (figura 1.14). Estas clulas se reconocen fcilmente por los grnulos pequeos de color purpura que llenan el citoplasma. A menudo en dichas clulas la granularidad es tan grande que llega a esconder el ncleo. Los mastocitos aparecen a menudo en partculas intactas de medula sea.

Figura 1.13. Osteoblastos. Las clulas nucleadas con abundante citoplasma azul (centro) que forman un circulo son osteoblastos. Estas clulas se parecen a los plasmocitos: sin embargo, son mas grandes que los plasmocitos y la cromatina nuclear es menos gruesa. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

Figura 1.12. Osteoclasto. La clula muy grande (centro) con mltiples ncleos individuales, redondos u ovalados y citoplasma granular es un osteoclasto. La gran rea clara en el cuadrante inferior derecho es una gota de grasa, que esta dentando parcialmente el osteoclasto. Frotis de medula sea canina. Objetivo 50x.

Figura 1.14. Mastocito. La clula (centro) con abundantes grnulos citoplasmticos de color purpura es un mastocito. Los grnulos casi oscurecen el ncleo redondo. Una gota de grasa (estructura redonda clara) esta dentando parcialmente el lado derecho de la clula. Frotis de medula sea canina. Objetivo lOOx.

LAMINA 1. Desarrollo de los Eritrocitos

RubriblastoEl rubriblasto es una clula grande y redonda con un ncleo grande y redondo., una cromatina gruesa granular y un nucleolo. Esta clula tiene pequeas cantidades de citoplasma azul oscuro.

Prorubricito

El prorubricito es una clula grande y redonda con un ncleo redondo con un tipo de cromatina gruesa granular. Esta clula carece normalmente de nucleolo. Hay una pequea cantidad de citoplasma azul oscuro y, a menudo, una zona clara perinuclear destacada.

RubricitoEl rubricito es una clula redonda con un ncleo redondo situado en el centro; es ms pequea que el prorubricito. La cromatina gruesa granular es mas condensada en comparacin con las primeras fases de desarrollo y aparecen reas claras irregulares entre los grumos de cromatina. El citoplasma vara del azul oscuro al azul-rojizo. Los primeros rubricitos, normalmente tienen un citoplasma mas azulado, y los ltimos rubricitos se tien de forma mas rojiza al aumentar la cantidad de hemoglobina.

Metarubricito

El metarubricito es ms pequeo que el rubricito. El ncleo es redondo a oval, normalmente situado ligeramente excntrico, y tiene una cromatina muy condensada. Hay cantidadespequeas a moderadas de citoplasma azul o azul-rojizo. Los metarubricito, con citoplasma ms rojizo contienen ms hemoglobina.

Policromatofilo

El policromatofilo no tiene ncleo y el citoplasma es azul o azul-rojizo. A medida que el policromatofilo madura se vuelve menos azul y mas rojizo a causa de las cantidades mayores de hemoglobina.

Eritrocito

El eritrocito no tiene ncleo y el citoplasma es rojizo o rojizo-anaranjado. La palidez central que aparece aqu es debida a la forma discoidal bicncava de las clulas.

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LAMINA 2 Desarrollo de los Leucocitos

MieloblastoEl mieloblasto es una clula grande, redonda u oval con un ncleo redondo u oval con un tipo de cromatina finamente punteada y normalmente con un nucleolo destacado o nucleolos mltiples. Hay una cantidad pequea o moderada de citoplasma azul y ningn granulo citoplasmtico destacado.

PromielocitoEl promielocito es una clula grande, redonda u oval, con un ncleo redondo u oval. El tipo de cromatina nuclear es finamente granular. Puede aparecer o no un nucleolo o nucleolos mltiples. A menudo aparece una zona perinuclear clara pero en este caso no. La cantidad moderada de citoplasma es azul y contiene mltiplesgrnulos finos de color rosa o purpura que son grnulos primarios.

Mielocito neutrofiloEl mielocito neutrofilo es una clula redonda ms pequea que el mieloblasto y el progranulocito. El ncleo es redondo u oval y puede contener una nica muesca. El tipo de cromatina es finamente o moderadamente granular. No aparecen nucleolos. Las cantidades moderadas de citoplasma azul contienen mltiples grnulos secundarios, llamados tambin grnulos especficos. Estos grnulos secundarios son de color rosa para la lnea de los neutrofilos y resultan difciles de ver. Los grnulos secundarios para la lnea de los eosinofilos y basofilos son generalmente rojizos y purpreos, respectivamente.

Metamielocito neutrfilos

El metamielocito neutrfilos es una clula redonda con un ncleo en forma de rin. La cromatina es moderadamente granular y mas condensada que la del mielocito. Las cantidades moderadas de citoplasma azul contienen grnulos secundarios que son difciles de ver. Los grnulos secundarios de los metamielocitos eosinofilos y basofilos son normalmente rojizos y purpura, respectivamente.

Neutrofilo en banda

El neutrfilos en banda es una clula redonda con un ncleo en forma de herradura. Las membranas del ncleo pueden tener lados paralelos aunque pueden aceptarse ligeras muescas. El citoplasma es azul o azul claro y contiene grnulos secundarios. Estos grnulos son difciles de ver en el neutrfilos en banda. Los grnulos secundarios del eosinofilo en banda y del basofilo en banda son generalmente rojizos y purpreos, respectivamente.

Neutrofilo segmentado

El neutrfilos segmentado es una clula pequea, redonda, con un ncleo nico que tiene mltiples segmentaciones. La cromatina nuclear esta muy condensada. Exis- te una cantidad moderada de citoplasma azul claro o rosa.

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CAPITULO DOSMORFOLOGIA NORMAL DEL ERITROCITO

Los rasgos morfolgicos de los eritrocitos maduros de perros, gatos, caballos y rumiantes son generalmente muy parecidos por lo que se refiere a la ausencia de nucleos, la coloracin rojiza o rojizo-anaranjada y el hecho que sean generalmente clulas con forma discoidal bicncava. Las mayores diferencias se encuentran en el tamao de los eritrocitos y el grado de palidez central. Clasificados de mayor a menor tamao estn los eritrocitos de perro, gato, caballo, vaca, oveja y cabra. La palidez central es el rea de coloracin mas clara en el centro de la clula, debida a una estrecha asociacion de las membranas en esa parte (figura 2.1). Los eritrocito de perro tienen la palidez central ms destacada. En gatos, caballos y rumiantes la palidez central no destaca. A diferencia de lo que ocurre en otras especies do-mesticas, los eritrocitos de las llamas sanas son bastante diferentes morfolgicamente. Aunque carezcan de ncleos y se tifian de rojo o rojo-anaranjado, son pequeos discos elpticos que carecen de forma bicncava y de palidez central. La tabla 2.1 resume los rasgos morfolgicos y las figuras 2.2-2.8 muestran microfotografas de eritrocitos normales de las especies domesticas comunes.Otros dos rasgos morfolgicos que pueden presen- tarse en animales sanos son las pilas de moneda y la anisocitosis. Las pilas de moneda son filas de eritrocitos apilados uno encima de otro (figura 3.8). Este cambio puede observarse mejor en reas ms gruesas de frotis de sangre, conocidas como el cuerpo central de la pre- paracion. Las pilas de moneda sobresalen especialmen-te en caballos sanos, pero aparecen tambin en gatos, y en mucha menos escala en perros. La formacin de pilas de moneda tiene que ver con las diferencias de cargas en la superficie del eritrocito, de forma que cambios en estas cargas pueden originar un aumento de la formacin de pilas de moneda. En una enfer medad inflamatoria, existen, a menudo, niveles altos de globulinas en la sangre que se traducen en cambios de las cargas de protena, y de este modo aumenta la formacin de pilas de moneda en la mayora de los animales. En las llamas y la especie bovina, hay generalmente una ausencia de pilas de moneda en estados sanos y de enfermedad. La anisocitosis se define como una varia-don del tamao de los eritrocitos. La anisocitosis apare-ce principalmente en gatos y vacas sanas (figuras 2.3 y2.5).

Figura 2.1. Representacin grafica de un eritrocito de un perro sano. Observe que la zona de palidez central se debe a una estrecha apo- sicion de las membranas y a una cantidad disminuida de hemoglobina en esta zona.

Tabla 2.1Rasgos morfolgicos de eritrocitos normales

Fuente: Adaptado de Jain, Nemi C. 1986. Schalm's Veterinary Hematology, 4r edition. Philadelphia: Lea & Febiger. * Puesto que estas clulas no son redondas, se.especifica la anchuura y la longitud aproximadas de las clulas.

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Figura 2.2. Eritrocitos caninos. La mayora de las clulas son de tamao similar y tienen una palidez central destacada. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 2.5. Eritrocitos de vaca. Existe una ligera variacin en el tamao de estas clulas (anisocitosis) y tienen normalmente una palidez central limitada. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 2.3. Eritrocitos felinos. Estas clulas son ms pequeas que los eritrocitos de perro, existe una ligera variacin de tamao (anisocitosis) y tienen una palidez central limitada. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 2.6. Eritrocitos de oveja. Observe el tamao muy pequeo de estas clulas, al compararlo con los eritrocitos del perro, y su palidez central limitada. Existe tambin una ligera variacin de tamao (anisocitosis) y forma (poiquilocitosis) en estas clulas. Frotis de sangre ovina; objetivo lOOx.

Figura 2.4. Eritrocitos de caballo. Estas clulas son ms pequeas que los eritrocitos de perro y tienen una palidez central mnima. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 2.7. Eritrocitos de cabra. Obsrvese el tamao extremadamente pequeo de las clulas y la palidez central mnima. Es tambin normal que se produzcan ligeras Variaciones de tamao (anisocitosis) y forma (poiquilocitosis). Frotis de sangre de cabra; objetivo lOOx.

Figura 2.8. Eritrocitos de llama. Estas clulas son elpticas y carecen de palidez central. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO TRES

VARIACIONES DE LA MORFOLOGA DEL ERITROCITO

Las Variaciones de la morfologa de los eritrocitos pueden producirse en animales con varias enfermedades y estados fisiopatologicos. Para comprender mejor el desarrollo de estos cambios, se agruparan en cinco catego- rias: rasgos morfolgicos asociados a (1) una respuesta regenerativa, (2) danos inmunomediados, (3) oxidativa, (4) trastornos de membrana / metablicos, y (5) fragmentacin mecnica. Estas categoras no se excluyen mutuamente y los rasgos morfolgicos descritos en una categora pueden encontrarse en mltiples estados fisiolgicos o de enfermedad. Se mencionan los estados fisiolgicos o de enfermedad mas comunes en los que se observan estos tipos de clulas, pero estas listas no pretenden ser exhaustivas. Estos cambios se demostraran a menudo mediante microfotografas de frotis de sangre canina, pero la mayora de estas anormalidades ocurren tambin en otras especies.Un termino utilizado para describir variaciones en la morfologa de los eritrocitos es la poiquilocitosis, que se define como la presencia de eritrocitos de forma anormal en la circulacin. Si se puede subclasificar el cambio morfolgico presente mediante la utilizacin de un termino mas especifico, dicho termino debera utilizarse.

RESPUESTA REGENERATIVALas anemias pueden clasificarse en dos categoras principales: no regenerativas y regenerativas. Una anemia no regenerativa se debe a la produccin inadecuada de eritrocitos por la medula sea; los eritrocitos presentes en la circulacin a menudo aparecen normales. Por el contrario, una anemia regenerativa es aquella en la que la medula sea ha respondido a una demanda de eritrocitos produciendo y enviando a la circulacin cantidades adecuadas de eritrocitos inmaduros conocidos como policromatofilos (figura 3.1). Estas clulas tienen un tito-plasma azulado o azul-rojizo y son normalmente un poco ms grandes que los eritrocitos maduros. Asimismo, debido a la mayor flexibilidad de dichas clulas, no siempre adoptan la clsica forma discoidal sino que pueden tener mltiples repliegues interiores y exteriores de las membranas y por ello aparecen como clulas diana o de barra, que se describen a continuacin. Aunque los cromatofilos pueden identificarse en preparaciones realizadas con la tincion de Wright debido a su coloracin azulada, pueden identificarse con facilidad tiiendo una muestra de sangre con nuevo azul de metileno.En las preparaciones teidas con nuevo azul de

Metileno, los policromatofilos se llaman reticulocitos (figura 3.2), y se teirn de verde-azulado, a medida que maduren los eritrocitos. Adems, los policromatofilos tendrn estructuras irregulares en forma de red, conocidas como retculo, dentro de las clulas. El retculo consiste en grumos irregulares de RNA ribosomal y organelas, tales como las mitocondrias. En la mayora de las especies existe un nico tipo de meticulosito. Sin embargo, en los gatos hay dos tipos de reticulocitos: punctata y agregata (figura 3.3). Los reticulocitos con agregaciones tienen abundante retculo, mientras que los reticulocitos con puntos tienen nicamente unos-cuan-tos puntos de retculo aislados que no se unen.Adems de encontrar policromatofilos, otros rasgos que pueden observarse en las anemias regenerativas son los eritrocitos nucleados, el punteado basofilo, la anisocitosis y los cuerpos de Howell-Jolly. No esta abso- lutamente clara la razn de que los eritrocitos nucleados (figura 3.4) se encuentren en la circulacin durante una respuesta regenerativa. Es posible que dichas clulas se liberen debido a un leve dao estructural de la medula sea o debido a una demanda mayor de eritrocitos.Cuando la demanda de eritrocitos es grande, la produccin se produce en puntos extramedulares tales como el hgado y el bazo, con la emisin potencial subsiguiente a la circulacin de eritrocitos nucleados. Cuando los eritrocitos nucleados aparecen sin la presencia de la policromasia adecuada, es posible que exista un dao subyacente en la medula sea. Un ejemplo clsico de este caso lo ofrece la intoxicacin de animales por plomo.El punteado basofilo aparece (figura 3.5) en las preparaciones efectuadas con colorante de Wright, bajo la forma de pequeos puntos azules de tamao variado en el citoplasma de los eritrocitos. En la mayora de los casos los puntos son RNA retenido y aparecen normalmente durante la respuesta regenerativa en los rumiantes, pero pueden hacerlo durante la regeneracin en otras especies. El punteado basofilo aparece en la intoxicacin por plomo puesto que el plomo inhibe una enzima que es importante en la degradacin del RNA.Se ha definido previamente la anisocitosis que aparece en la respuesta regenerativa, debido normalmente a la presenta de grandes policromatofilos.Los cuerpos de Howell-Jolly (figura 3.4) son fragmentos restantes de material nuclear presente en los eritrocitos. Su presencia durante una respuesta regenerativa se debe probablemente a la incapacidad de los macrfagos17

18VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO

Figura 3.1. Policromatofilos. Los eritrocitos de tinte azulado, normalmente mas grandes, son policromatofilos. En la mayora de los animales, excepto los caballos, los policromatofilos aparecen en gran cantidad en la circulacin durante una anemia regenerativa. Ade- mas, hay una ligera poiquilocitosis y se observan clulas diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.3. Reticulocitos agregata y punctata. Las dos clulas (centro izquierda) con material granular agrupado de color azul oscuro en el citoplasma son reticulocitos agregata. Las clulas con un uni- co o mlti pl es punt os pequeos de materi al azul ado son reticulocitos punctata. Las clulas sin retculo son eritrocitos maduros.. Frotis de sangre felina; tincin de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

Figura 3.2. Reticulocitos. Las cuatro clulas con material granular agrupado (retculo) de color azul oscuro en el citoplasma son reticulocitos. Las clulas sin retculo son eritrocitos maduros. Frotis de sangre canina; tincin de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

Figura 3.4. Eritrocitos nucleados y cuerpos de Howell-Jolly. La celula ligeramente azul con un ncleo redondo y cromatina condensada es un eritrocito nucleado (metarubricito). Dos eritrocitos ad- yacentes tienen Inclusiones citoplasmticas linicas, pequeas, redondas y de color purpura; son cuerpos de Howell-Jolly, que son fragmentos de los ncleos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx. .

para eliminar completamente los ncleos de los eritrocitos maduros durante la produccion acelerada. Si los cuerpos de Howell-Jolly aparecen con una falta de policromasia adecuada, entonces debera considerarse

un descenso de los macrfagos, especialmente la fun- cion macrofagica esplnica. Un animal sano que haya sido esplenectomizado tendra, a menudo., cuerpos de Howell-Jolly en la circulacin.

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL ERITROCITO19

Figura 3.5. Punteado basofilo. El eritrocito (centro) con pequeos puntos mltiples azules es un eritrocito con punteado basofilo. Los tres eritrocitos grandes de tinte azulado son policromatofilos. Hay tambin Una anisocitosis moderada. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

DAO INMUNOMEDIADOLas anormalidades morfolgicas de los eritrocitos aso- dados con procesos inmunomediados dirigidos a los eritrocitos dan como resultado la posibilidad de encontrar esferocitos, aglutinacin y clulas fantasmas. Los esferocitos (figura 3.6) se forman cuando los macrfagos eliminan, pardalmente, anticuerpos unidos a las membranas. A causa de la perdida de la membrana, estas clulas no pueden retener por mas tiempo su forma discoidal normal y por ello se produce una forma esferica con una falta de palidez central. Estas clulas se reconocen fcilmente en perros. Los esferocitos son difciles de reconocer en otras especies debido a la falta de palidez

central significativa en sus eritrocitos normales. Los esferocitos pueden aparecer en cantidades reducidas tambin cuando existe un dao no inmunomediado en los eritrocitos.La aglutinacin (figura 3.7) es una agregacin tridimensional desorganizada de eritrocitos, formada normalment e a causa de una int erconex in de anticuerpos asociados a la superficie de los eritrocitos. Se ha observado la aglutinacin en caballos que estaban siendo tratados con heparina. La aglutinacin puede observarse tanto macroscpicamente como microscpicamente y no debe confundirse con la formacin de pilas de monedas (figura 3.8) que esta relacionada con las cargas de los eritrocitos.

Figura 3.7. Aglutinacin. Existen varios racimos irregulares de eritrocitos; se trata de una aglutinacin. Aparecen por todo el campo, pero hay tres grumos grandes presentes (centro). La aglutinacin puede verse en animales con anemia inmunomediada. Frotis de Sangre equina; objetivo 50x.

Figura 3.6. Esferocitos. Las clulas ms pequeas que carecen de palidez central son esferocitos. Estas clulas pueden aparecer en canti dades rel ati vamente elevadas en ani males con anemi a hemoltica inmunomediada. Aparece tambin un policromatofilo (centro) y un eritrocito (abajo a la derecha) con un cuerpo de Howell- Jolly. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.8. Pilas de monedas. Las cadenas lineales y a veces ramificadas de eritrocitos constituyen las pilas de monedas. En con- diciones normales, se detecta de manera mas destacada en caballos; sin embargo, pueden verse pilas de monedas asociadas con enfermedades inflamatorias en la mayor parte de las especies. Frotis de sangre equina; objetivo 50x.


Figura 3.9. Clulas fantasmas. Los cuatro eritrocitos muy plidos y pequeos son clulas fantasmas. Indican una hemolisis intravascular. Tambin son visibles esferocitos, policromatofilos con un gran cor- pusculo de Howell-Jolly. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.11. Cuerpos de Heinz. El eritrocito (doble flecha) tiene una pequea protuberancia redondeada en la superficie en la posi- cion de las 5 de la tarde que es un cuerpo de Heinz. Muchos de los eritrocitos tienen, asimismo, pequeas estructuras redondas claras en su superficie (flecha) que son tambin cuerpos de Heinz. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Las clulas fantasma (figura 3.9), son membranas residuales de eritrocitos que han experimentado una lisis intravascular. Esta lisis puede inducirse aadiendo anticuerpos y complementos a la membrana del eritrocito as como otros mecanismos no inmunitarios.

LESIN OXIDATIVALa oxidacin de eritrocitos puede producirse en algunos estados de enfermedad, as como con la exposicin a algunos frmacos. Esta oxidacin y desnaturalizacin de la hemoglobina en eritrocitos origina la formacin de protuberandas en la membrana de los eritrocitos que son a menudo refractiles; se las conoce como cuerpos de Heinz (figuras 3.10 y 3.11) Si los cuerpos Heinz son gran-des, pueden observarse con facilidad en los frotis tei-

Figura 3.10. Cuerpos de Heinz. Las protuberancias pequeas redondeadas de la superficie de los eritrocitos (centro) son cuerpos de Heinz. Representan la oxidacin y desnaturalizacin de la hemoglobina. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.12. Cuerpos de Heinz. El eritrocito (centra) tiene un cuerpo de Heinz que es la pequea protuberancia redondeada y de color azul verde claro que hay en la superficie en la position de medio- dia. Muchos de los eritrocitos del campo tienen tambin cuerpos de Heinz, sencillos o a veces mltiples. Aparece tambin un reticulocito agregata (centro derecha). Frotis de sangre felina; tincin de nuevo azul de metileno; objetivo lOOx.

dos con la tincin de Wright. Estas estructuras pueden tambin identificarse utilizando frotis teidos con nuevo azul de metileno, en las que se colorean de un azul- verde claro (figura 3.12). Los cuerpos Heinz se observan con ms regularidad en gatos.Otro tipo de clula que aparece a veces en la exposicin a los oxidantes es el excentrocito (figura3.13). Estas clulas tienen reas claras de forma de media luna situadas excntricamente. Esta rea clara indica donde las membranas de la clula estn estrechamente yuxtapuestas y posiblemente enlazadas debido al dafto de la membrana inducido por el oxidante.


Figura 3.13. Excentrocitos. Los cuatro eritrocitos (centro) con reas claras perifericas y hemoglobina desplazada son excentrocitos. Otros estn situados en la periferia del campo. Representan la oxi- dacion de las membranas de los eritrocitos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

TRASTORNOS METABLICOS / DEMEMBRANALa exposicin de eritrocitos a distintos entornos, tanto in vitro como in vivo, puede originar Variaciones morfolgicas de la forma discoidal normal. Una de las Variaciones ms comunes observadas es el equinocito. Los equinocitos son clulas con mltiples puas pequeas, delicadas, de forma regular distribuidas de modo uniforme alrededor de la membrana del eritrocito. La causa mas comn de la presenta de equinocitos es un artefacto in vitro, la crenacion (figura 3.14) que necesita diferenciarse de los verdaderos equinocitos. Los verda-

Figura 3.14. Equinocitos. La mayora de los eritrocitos tienen pe- quefias puas uniformes que sobresalen de la superficie. Se trata de equinocitos. La causa mas comn de la formacin de equinocitos es un artefacto in vitro conocido como crenacion. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

deros equinocitos se producen asociados a diversos tras-tornos metablicos tales como las enfermedades renales. Para distinguir los verdaderos equinocitos de la crenacion, hay que extraer y fijar inmediatamente la sangre antes de exponerla al cristal o a un anticoagulante.Las clulas erizo (figura 3.15) tienen protuberandas mltiples similares a los equinocitos pero son ovales o alargadas. Las clulas erizo pueden observarse en animales con enfermedades renales.Al contrario de los equinocitos, los acantocitos (figura 3.16), son clulas con protuberancias mltiples, romas, de forma irregular (de 2 a 10), con aspecto de dedo. Estas clulas se deben a las alteraciones en la relacion de colesterol y fosfolipidos en las membranas del eritrocito. Los acantocitos se observan normalmente en anima-

Figura 3.15. Clulas erizo. Los eritrocitos alargados con mltiples protuberandas cortas y romas en la superficie son clulas erizo. Estas clulas pueden observarse en animales con enfermedad re- nal. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 3.16. Acantocitos. Observe los eritrocitos con mltiples protuberandas de forma irregular en la superficie. Esta anormali- dad va asociada a alteraciones de la relacin de colesterol y fosfolipidos en la membrana. Estas clulas pueden observarse en animales con enfermedad heptica. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.


les con enfermedad.es hepticas y a menudo se detectan en perros con hemangiosarcoma; pueden ser debidos a un trastorno neoplasico del hgado o a una fragmentacion inusual debida a la tortuosidad del sistema vascular neoplasico. Los Acantocitos pueden observarse tambin asociados con anormalidades lipidicas inducidas por disfunciones renales.Los queratocitos (figura 3.17) son clulas con dos protuberancias bastante uniformes parecidas a cuernos. Se cree que surgen de un rea localizada y definida de la membrana del eritrocito en la cual se forma una vacuola o una "ampolla" que se rompe mas tarde. Las clulas con estructuras de membrana semejantes a una ampolla que permanecen intactas se conocen normalmente con el nombre de clulas de ampolla (figura 3.18).Existen varios cambios morfolgicos potencialmen- te significativos asociados con los cambios en la zona de palidez central. Dos tipos de clulas que originan una acentuacin de la palidez central son las clulas hipocromicas y los torocitos. En las clulas hipocromicas (figuras 3.19 y 3.20), hay un incremento de la palidez central, y las clulas se tifien de un rojo mas claro debido a una cantidad reducida de hemoglobina. Como sucede con los eritrocitos normales existe una transicin gradual en las clulas entre las zonas exteriores que tienen un tinte ms denso y la zona central de palidez. Las clulas hipocromicas aparecen en animales con carencias de hierro, ya que el hierro es necesario para la sntesis normal de la hemoglobina. Por el contrario, en los torocitos (figura 3.21), aunque exista una palidez central acentuada, el dimetro de la zona de palidez central normalmente no es tan grande como el de las clulas hipocromicas, la densidad en conjunto de la coloracin roja de la clula es normal y existe una transicin brusca

Figura 3.18. Clula de ampolla. La clula con un trozo fino de membrana sobresaliendo de la superficie (centra) es una clula de ampolla. Esta "ampolla" a veces se rompe para formar un queratocito. Aparecen tambin clulas hipocromicas. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Entre las zonas exterior y central de la clula. Los torocitos se conocen tambin con el nombre ms popular de clulas perforadas y son normalmente artefactos de la preparacin.Los estomatocitos (figura 3.22) son clulas cuya palidez central es mas oval o alargada y toma el aspecto de una boca. Si estas clulas se evalan en preparaciones de base hmeda, parece que se doblen sobre si mismas en una direccin. Los estomacitos han sido observados en animales con defectos metablicos de membrana de los eritrocitos, pero pueden aparecer tambin como artefactos de preparacin en reas mas gruesas de la mis-ma.

Figura 3.17. Queratocito. La clula con dos protuberancias con aspecto de cuernos (centra) es un queratocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 3.19. Clulas hipocromicas. Aparecen varias clulas hipocromicas en todo el campo que tienen una palidez central acentuada as como membranas celulares dbilmente coloreadas. Este cambio se asocia a menudo con la carencia de hierro. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.


Figura 3.20. Clulas hipocromicas. La mayora de las clulas que tienen palidez central son clulas hipocromicas. Observamos una serie de eritrocitos normales de llama que carecen normalmente de palidez central. Este cambio va asociado a menudo a la carencia de hierro. La forma fusiforme de algunas clulas es un rasgo comn adicional en las llamas con carencia de hierro. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 3.21. Torocito. La mayora de las clulas en el campo son torocitos, conocidos normalmente como clulas perforadas. Estas clulas tienen una palidez central destacada con una transicin brusca desde el centra plido hasta la zona exterior de la clula. Pueden parecer mas pequeas que los eritrocitos normales. La morfologia del Torocito es normalmente un artefacto que aparece como consecuencia de una dispersin anormal de las clulas en la preparacin. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx

Los ovalocitos (figura 3.23), conocidos tambin como eliptocitos, son clulas ovales con una zona oval de palidez central. Aparecen en animales con defectos en la membrana del eritrocito.Los leptocitos son clulas que son mas grandes que los eritrocitos normales maduros y tienen la membrana demasiado delgada que tiende a doblarse fcilmente. Dos tipos de leptocitos incluyen las clulas diana y las clulas de barra.

Figura 3.22. Estomatocitos. La clula un tanto oval con una palidez central lineal (centro) es un estomatocitos. Aparecen tambin mu-chas clulas diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.23. Ovalocitos. Los eritrocitos ovales presentes son ovalocitos. Aparecen en animales con defectos en la membrana del eritrocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Las clulas diana (figura 3.24), conocidas tambin como codocitos, tienen un pliegue redondo exterior de la membrana en mitad de la clula que da a esta el aspecto de diana. Debido a que los policromatofilos son a menudo muy flexibles, suelen tomar el aspecto de una clula diana. La morfologa de la clula diana puede considerarse como un cambio no especifico, pero se produce en cantidades elevadas en eritrocitos maduros y debera considerarse la investigacin de una posible enfermedad heptica.Las clulas de barra (figura 3.25), conocidas tambin como "knizotitos", tienen un pliegue central exterior de la membrana en forma de barra. Las clulas de barra aparecen a menudo en situaciones similares a las de las clulas diana.


Estos filamentos pueden escindir los eritrocitos en dos o mas trozos de forma irregular mientras las clulas atraviesan el sistema vascular. Un estado fisiopatologico frecuente en el cual estos cambios pueden observarse es la coagulacion intravascular diseminada.Los dacriocitos (figura 3.27) son eritrocitos con forma de lagrima. No esta nada claro el proceso de formacion de dichas clulas, pero este cambio puede repre- sentar un tipo de fragmentacion. Pueden observarse en animales con mielofibrosis.

Figura 3.24. Clulas diana. Muchos de los eritrocitos con aspecto de diana son clulas diana, conocidas tambin como codocitos. El rea central de las clulas que se tie representa un pliegue exterior de la membrana del eritrocito en esta zona. Estas clulas aparecen en animales con enfermedades hepticas o con reticulocitosis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.26. Esquistocitos. El eritrocito de forma irregular (centro) es un esquist ocit os, o un fr agment o de er itr ocit o. Hay dos esquistocitos muy pequeos en el cuadrante inferior derecho. Apa- recen dos fragmentos mucho mas grandes (parte superior izquierda). Este cambio se relaciona con el dao mecnico del eritrocito. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 3.25. Clula de barra. La clula (centro) con una porcin de membrana con forma de barra biseccionado el rea de palidez central es una clula de barra, conocida tambin como "knizodto". El cambio representa un repliegue exterior de la membrana del eritrocito similar al cambio que se produce en muchas clulas diana en este campo. Frotis de sangre de canina; objetivo lOOx.

FRAGMENTACIN MECNICALos esquistocitos (figura 3.26), conocidos tambin como "esquizodtos", son fragmentos de eritrocitos. Estos fragmentos surgen del deterioro mecnico de los eritrocitos en la circulacin, a menudo debido a anormalidades microvasculares. Una de las anormalidades mas comunes que lleva a la formacin de esquistocitos es la presencia de redes de fibrina en el sistema microvascular.

Figura 3.27. Dacriocito. El eritrocito con forma de lagrima (centro) es un dacriocito. Estas clulas pueden observarse en animales con mielofibrosis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

CAPITULO CUATROINCLUSIONES Y PARSITOSERITROCITARIOS

Al evaluar los eritrocitos con relacin a Inclusiones o parsitos, existen varias estructuras normales y artefactos que confunden, a menudo, los hematlogos con poca experiencia. Algunas de estas estructuras, que fueron definidas en el capitulo tercero, se revisan aqu brevemente. Uno de los artefactos mas comunes que se confunde con parsitos e inclusiones de los eritrocitos es el precipitado de colorante (figura 4.1), que se presenta como un pequeo material granular, de tamao variable y de color rosa o purpura. Puede aparecer a menudo en eritrocitos as como en el fondo de una preparacin; esta generalmente en un piano diferente de enfoque al de los eritrocitos. Esta distribucin y la variedad de tamaos ayuda a diferenciar el precipitado de colorante de los verdaderos parsitos del eritrocito. En cambio, el punteado basofilo (agregaciones de KNA retenidas) (figura

4.2) se presenta como grnulos mltiples muy pequeos y redondos de color azul en el citoplasma del eritrocito. Como se indica en el capitulo tercero, este material lo forman en general agregaciones de RNA retenidas en la clula. Resulta difcil distinguir el punteado basofilo de los cuerpos de Pappenheimer, que son pequeos grnulos azules en los eritrocit os. Los cu erpos de Pappenheimer son agregados de hierro en los eritrocitos (figura 4.3). Los eritrocitos nucleados o anucleados que tienen cuerpos de Pappenheimer se conocen como siderocitos o sideroblastos, respectivamente. La nica manera de confirmar la presencia de cuerpos de Pappenheimer es mediante la utilizacin de un coloran-

Figura 4.1. Precipitado de colorante. El material granular purpura de varios tamaos que aparece sobre y entre los eritrocitos es un precipitado de colorante. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.2. Punteado basofilo. Varios eritrocitos tienen pequeos grnulos de color azul plido y de varios tamaos que son conocidos como punteado basofilo. Queda mejor demostrado en los dos er it r ocit os del cuadr ant e i nfer i or i zqui er do. Apar e ce un metarubricito en el cuadrante superior derecho. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.3. Cuerpos de Pappenheimer. Los grnulos pequeos de color azul plido dbilmente visibles, en algunos de los eritrocitos son cuerpos de Pappenheimer. Queda mejor demostrado en los tres eritrocitos que estn en fila en el cuadrante inferior derecho. Estas inclusiones se deben a la acumulacin de hierro. En cambio, el eritrocito del centro del campo contiene una pequea estructura redonda de color purpura oscuro que es un cuerpo de Howell- Jolly. Frotis de sangre canina, revisin de diapositivas de la ASVCP de 1988, por cortesa de J. A. Matthews; objetivo lOOx.

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26 INCLUSIONES Y PARASITOS ERITROCITARIOS

te especial como el azul de Prusia. Cuando aparecen pequeos grnulos azules en los eritrocitos, es mas probable que sean punteado basofilo que cuerpos de Pappenheimer.Otro artefacto que puede confundirse con parsitos eritrocitarios son los cuerpos refractiles de los eritrocitos. Su formacin no esta nada clara. Este material puede tomar varias formas o tamaos pero puede confundirse con parsitos eritrocitarios cuando es de tamao similar a organismos como Haemobartonella. El rasgo principal utilizado para distinguir este artefacto de un ver- dadero parasito es que estas estructuras tienen tamaos variados y son refractiles cuando el microscopio se en- foca arriba y abajo (figura 4.4).Finalmente, pueden aparecer plaquetas ocasional- mente superpuestas a los eritrocitos y uno puede creer que se trata de Inclusiones (figura 4.5). Comparando las plaquetas de la parte superior del eritrocito con las plaquetas que aparecen en el resto de la preparacin, estas deberan distinguirse de las verdaderas Inclusiones o parsitos del eritrocito.Los cuerpos de Howell-Jolly (figura 4.6) son micronucleos residuales que aparecen en la mayora de las especies domesticas durante una anemia regenerativa. Estas estructuras se tien de purpura oscuro y tienen aproximadamente 1 um de dimetro, aunque pueden ser mas grandes. Normalmente, aparece un nico remanente nuclear en un eritrocito. En los rumiantes, los organismos como Anaplasma (figura 4.7) pueden parecer muy similares en tamao, forma e intensidad de color a los cuerpos de Howell-Jolly. Afortunadamente, el tipo mas comn de anaplasmosis se debe a Anaplasma marginale que, como su nombre indica, se encuentra a menudo en la periferia del eritrocito. Aunque los cuerpos de Howell-Jolly pueden aparecer en el margen de la

Figura 4.4. Artefacto refractil. Las estructuras brillantes sin color que aparecen en la superficie de los eritrocitos, redondos u ovales, o de forma irregular y tamaos varios, son artefactos refractiles. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

celula, la mayora de estas estructuras, se distribuyen de manera mas fortuita en los eritrocitos. Adems, en la anaplasmosis aparece, a menudo, mas de un organismo por celula mientras que con los cuerpos de Howell-Jolly, los micronucleos son normalmente nicos. Puesto que la anaplasmosis causa con frecuencia una anemia regenerativa, tanto Anaplasma como los cuerpos de Howell- Jolly pueden aparecer al mismo tiempo.Pueden aparecer Inclusiones vricas en los eritrocitos (figura 4.8) y en los leucocitos en perros con una infeccin vrica como el moquillo. Estas Inclusiones son muy variables en tamao, pero normalmente son mucho mas grandes que los cuerpos de Howell-Jolly. Las inclusiones vricas pueden tener un dimetro de varias micras y

Figura 4.5. Pseudoinclusion en eritrocitos. Una plaqueta superpues- ta al eritrocito aparece en el centro del campo. Observe los rasgos similares con las otras plaquetas. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 4.6. Cuerpos de Howell-Jolly. Cuatro eritrocitos tienen inclusiones simples citoplasmticas pequeas, redondas, de color purpura oscuro; se trata de cuerpos de Howell-Jolly, que son fragmentos nucleares. Tambin aparecen celulas diana. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

INCLUSIONES Y PARASITOS ERITROCITARIOS 27

tienen formas muy variadas, redondas u oblongas. Nor- malmente se tien de color rosa o rojo, aunque tambin pueden ser Inclusiones mas azuladas. No existe ninguna estructura interna real, y la inclusin tiene a menudo una apariencia vtrea suave, pero puede ser granular. Se afirma a menudo que la tincin Diff-Quik es la preferi- da para identificar inclusiones vricas.Los parsitos comunes en los eritrocitos caninos son Haemobartonella canis y Babesia canis. H. canis (figura 4.9) es un parasito epicelular muy pequeo, con un diame- tro inferior a 1 um, y puede resultar difcil distinguirlo del artefacto de colorante. Tiene forma cocoidal o bacilar y aparece individualmente o en grupos en los eritrocitos. El organismo forma a menudo cadenas sobre la su-

perficie de los eritrocitos. La babesiosis es causada normalmente por Babesia canis (figura 4.10) y se la encuentra principalmente en el sudeste de los Estados Unidos, en Amrica del Sur y Amrica Central, en el sur de Eu- ropa, frica, Asia y Australia. Este parasito grande, intracelular, de forma piriforme es fcil de reconocer aunque a menudo muy pocas celulas del frotis de sangre contienen organismos. Estos organismos tienen normalmente una anchura de 2.5 a 3 um y una longitud de4 a 5 um. En la celula pueden aparecer mltiples organismos. B. gibsoni (Estados Unidos, sur de Europa, Asia) causa tambin enfermedades en perros y es normalmente un organismo mucho mas pequeo y redondo, oval o alargado.

Figura 4.7. Anaplasrm marginale. Las inclusiones citoplasmticas simples o mltiples, redondas y de color purpura que aparecen en varios eritrocitos son Anaplasmn marginale. Observe que muchos de estos organismos aparecen en la periferia del eritrocito. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 4.9. Haemobartonella canis. Las pequesimas estructuras azules de forma cocoidal o bacilar que forman cadenas en varios eritrocitos son Haemobartonella canis. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.8. Inclusiones vricas de moquillo. Las estructuras redondas de tamaos diferentes y de color rosa-rojizo que aparecen en cinco de los eritrocitos son inclusiones vricas de moquillo canino. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 4.10. Babesia canis. Hay dos organismos (Babesia canis) dentro del eritrocito en el centro del campo. Se trata de estructuras piriformes de color azul claro con cuerpos internos de color purpura pobremente definidos. Frotis de sangre canina; colorante Diff- Quik; objetivo lOOx.

28 INCLUSIONES Y PARASLTOS ERITROCITARIOS

El parasito mas comn del eritrocito de los gatos es Haemobartonella felis (figura 4.11). Este pequeo organismo epicelular de forma cocoidal o bacilar es similar mor- fologicamente a H. canis. Adems, aparecen tambin formas de anillo. Como sucede con H. canis, puede resultar difcil distinguir H. felis de los precipitados de colorante. Requiere un frotis de sangre de buena calidad, bien tei- do, para una identificacin precisa. La unin con organismos del exterior de la celula no es muy fuerte, y as los organismos pueden separarse fcilmente. Si se produce una demora en hacer un frotis de sangre recogida con EDTA y secado al aire, los organismos pueden observarse en el fondo de la preparacin y no en los eritrocitos.Cytauxzoon felis (figura 4.12) es otro parasito del eritrocito felino Es a menudo de color azul y oval (de 1 a 5 um de dimetro) con una regin central clara. A menudo se encuentra en un extremo del ovalo un ncleo pur-pura, dando al organismo el aspecto de un anillo de se- llo. Algunos organismos tienen cuerpos de cromatina en ambos extremos, dndole un aspecto de imperdible. Nor- malmente, estos organismos aparecen en la sangre en cantidades reducidas. La mayora de los casos se con- signaron en Missouri, en el Sur de los Estados Unidos, en Amrica del Sur y Amrica Central,En los rumiantes, Anaplasma (Estados Unidos y reas tropicales) y Babesia (Norte y Oeste de Europa) son los parsitos mas comunes del eritrocito. En el ganado, la anaplasmosis es a menudo causada por Anaplasma marginale (figura 4.7). Estos organismos miden aproximadamente 1 um de dimetro, tienen forma cocoide, se tien de purpura oscuro y se encuentran localizados a menudo en la periferia de los eritrocitos; en cada eritrocito pueden aparecer uno o varios organismos. Como se especifica mas arriba, se debe distinguir estos organismos de los cuerpos de Howell-Jolly. En un animal infec- tado, muchos eritrocitos pueden contener normalmente el parasito.

Figura 4.11. Haemobartonella felis. Muchos de los eritrocitos tienen pequeos organismos azules simples o mltiples, de forma cocoidal, bacil ar o de ani ll o en su super fi ci e. Est os or ganismos son Haemobartonella felis. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Otro parasito de los rumiantes, as como de las llamas, es Eperythrozoon (figura 4.13). . wenyoni (Estados Unidos y frica) es un organismo que normalmente in- fecta al ganado vacuno; E. ovis afecta a las ovejas en todo el mundo. En cuanto a las llamas el numero exacto de especies del organismo no se ha determinado. Tanto en el ganado vacuno como en las llamas, los organismos se asemejan a Haemobartonella felis. Estos organismos pueden aparecer como organismos de forma cocoidal, bacilar o de anillo en la superficie del eritrocito. Miden aproximadamente 0,5 um de dimetro. Aparecen a menudo mltiples organismos en los eritrocitos, y tambin pueden aparecer en el fondo de la preparacin.

Figura 4.12. Cytauxzoon felis. Tres eritrocitos del centra del campo tienen anillos azules, con un nico ncleo purpura situado excen- tricamente. Estos organismos son Cytauxzoon felis. Tambin aparecen unos cuantos eritrocitos adicionales con organismos menos perceptibles. Frotis de sangre felina, cortesa de G.D. Boon; objetivo lOOx.

Figura 4.13. Eperythrozoon. Los pequeos organismos azules, simples o mltiples, con forma cocoidal, bacilar o de anillo de la superficie de estos eritrocitos son Eperythrozoom. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO CINCO

MORFOLOGA NORMAL DEL LEUCOCITO

NEUTROFILO SEGMENTADOLos neutrfilos segmentados son los leucocitos mas comunes en la sangre periferica de todas las especies domesticas comunes, excepto los rumiantes. Los neutrfilos segmentados tienen normalmente un dimetro de 10 a12 um y tienen un solo ncleo con varias muescas que son el resultado de la divisin del ncleo en mltiples lbulos. Normalmente, hay de 3 a 5 lbulos o segmentos por clula. El tipo de cromatina del ncleo consiste en reas muy oscuras y condensadas entremezcladas con pequeas reas claras. El citoplasma se tie ligeramente de azul o rosa segn el tipo y la calidad de la tincin utilizada. A veces, en el citoplasma pueden aparecer grnulos rosados confusos. Los neutrfilos de las distintas especies son similares. La principal excepcin es que el citoplasma de los neutrfilos bovinos se tie a menudo de un rosa mas intenso en comparacion con el de otras especies. Asimismo, en los caballos los segmentos del raideo no suelen ser muy perceptibles.

NEUTROFILO EN BANDALos neutrfilos en banda en la sangre perifrica pueden aparecer o no en cantidades reducidas. Los neutrfilos en banda se parecen a los neutrfilos segmentados excepto en que los ncleos tienen forma de banda. Clasi- camente, las membranas del ncleo son paralelas de manera que el ncleo tiene una anchura constante. De- bido a que los neutrfilos en banda son un estado de la diferenciacin gradual hacia la forma de neutrofilo segmentado, es posible que se observen ligeras muescas nucleares.

LlNFOCITOLos linfocitos son el segundo tipo de clula mas comn en la sangre perifrica de la mayora de las especies domesticas y son el tipo de clula predominante de los rumiantes. Normalmente, estas clulas son redondas, ligeramente mas pequeas que los neutrfilos y tienen raideos redondos u ovales y a veces ligeramente dentados. El tipo de cromatina consiste en reas vtreas, suaves, entremezcladas con reas mas densas o en forma de mancha. Aparece una pequea cantidad de citoplasma azul claro. Algunos linfocitos pueden tener en el citoplasma mltiples grnulos pequeos de color rosa-purpura. Adems de estos linfocitos pequeos, muchos ani-

males pueden tener linfocitos medianos o grandes. Esto sucede especialmente con los rumiantes. A menudo estas clulas tienen mas citoplasma que los linfocitos pequeos. Adems, la cromatina de los ncleos de los rumiantes es a menudo mucho mas acentuada con reas marcadas de condensacin algunas veces. Esto puede provocar la conclusin errnea de que los nuclolos aparecen en dichas clulas.

MONOCITOLos monocitos estn ausentes o presentes en cantidades reducidas en la sangre perifrica y son muy similares en todas las especies domesticas comunes. Estas clulas tienen normalmente un dimetro de 15 a 20 |im, y los ncleos pueden tener formas diversas: ovales, ovales con una nica muesca (forma de rion), o con muescas mltiples y lbulos. La cromatina nuclear tiene un aspecto finamente granular o en forma de encaje con solo unas pocas reas de condensacin. La cantidad moderada de citoplasma es normalmente azul-gris y puede tener vacuolas mltiples discretas de varios tamaos.

EOSINOFILOLos eosinofilos estn presentes en cantidades reducidas o ausentes en los animales sanos. Estas clulas son normalmente similares en tamao a los neutrfilos o ligeramente mas grandes. Los ncleos son muy similares a los de los neutrfilos puesto que estn segmentados, pero los segmentos a menudo no estn tan bien definidos. El citoplasma se tie de azul plido y tiene mltiples grnulos rojizos o rojizo-anaranjados. La cantidad y las formas de los grnulos son muy diversas en la mayora de las especies domesticas comunes. Los grnulos del eosinofilo de perro son redondos y muy variables en tamao y numero. Asimismo, aparecen a menudo en el citoplasma mltiples vacuolas de tamaos variados. Los grnulos del eosinofilo felino tienen forma de bacilo y normalmente llenan el citoplasma. Los eosinofilos de caballo tienen grandes grnulos redondos, ovales u oblongos que llenan el citoplasma y a veces enmascaran el ncleo. Los eosinofilos de los rumiantes tienen pequeos grnulos redondos, completamente uniformes que normalmente llenan el citoplasma. Los eosinofilos de llama tienen grnulos pequeos redondos, ovales u oblongos. El bajo numero de grnulos no vena igualmente el citoplasma.

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BASOFILO

30MORFOLOGIA NORMAL DEL LEUCOCITO

los citoplasmticos pequeos, redondos y de color purpura. La presencia o ausencia de grnulos puede

Los basofilos aparecen raramente en la sangre perifricade todas las especies domesticas comunes. Se ven con mas frecuencia en el caballo. Los basofilos son semejantes en tamao o ligeramente mas grandes que los neutrfilos y el citoplasma es purpura claro. El ncleo se halla segmentado pero a menudo no llega al grado de los neutrfilos segmentados. En los basofilos caninos a veces pueden aparecer pequeas cantidades de granu-

depender del tipo de colorante utilizado. Los basofilos felinos contienen grnulos pequeos imperceptibles, redondos y de un azul lavanda. Tanto los basofilos de vaca como los de caballo tienen varios grnulos pequeos bien te-nidos de color purpura en el citoplasma. Los basofilos de llama se asemejan mucho a los basofilos de vaca o caballo. Las figuras 5.1-5.30 muestran los leucocitos normales de las especies domesticas comunes.

Figura 5.1. Neutrofilo segmentado. La clula con el ncleo segmentado y citoplasma rosado es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.4. Eosinofilo. La clula con un ncleo poco segmentado y mltiples grnulos redondos y r ojizos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.2. Linfocito pequeo. La clula pequea con un ncleo redondo, en position central y con un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.5. Basofilo. La clula con el ncleo con poca segmentacin y citoplasma de color purpura claro con una pequea cantidad de pequeos y discretos grnulos purpura es un basofilo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.3. Monocito. La clula grande con un ncleo profundamente dentado, cit oplasma azul -gris y mltiples y discretas vacuolas es un monocito. Observe que el ncleo no esta tan clara- mente segmentado como en los neutrofilos maduros. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.6. Basofilo. La clula con el ncleo pobremente segmentado y citoplasma de color purpura claro es un basofilo. Sin grnulos perceptibles, puede resultar difcil distinguir estas clulas de los neutrfilos txicos o de los monocitos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.7. Neutrofilo segmentado. La clula con un ncleo segmentado y un citoplasma rosa plido es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.10. Eosinofilo. La clula con un ncleo segmentado y mltiples grnulos rojizos con forma de bacilos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.8. Linfocito pequeo. La clula pequea con un ncleo redondo u oval en position central y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 5.11. Basofilo. La clula con un ncleo segmentado y grnulos redondos de color purpura poco definidos en el citoplasma es un basofilo. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.9. Monocito. La clula grande con un ncleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y mltiples y discretas vacuolas citoplasmticas es un monocito. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.12. Neutrofilo segmentado y basofilo. La clula en la parte inferior izquierda es un neutrofilo segmentado, y la de la parte superior derecha es un basofilo. Observe el tamao algo mayor del basofilo as como los grnulos redondos del citoplasma de color purpura claro, poco definidos. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 5.13. Neutrofilo segmentado. La clula con un ncleo segmentado y un citoplasma azul claro o rosa es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.16. Eosinofilo. La clula con un ncleo bilobulado y grandes grnulos rojizos redondos u ovalados en el citoplasma es un eosinofilo. Observe que los grnulos estn enmascarando parte del ncleo. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.14. Linfocito pequeo. La clula pequea con un ncleo redondo y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeo. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.17. Basofilo. La clula con un ncleo bilobulado y nume- rosos grnulos citoplasmticos pequeos de color purpura es un basofilo. Observe que los grnulos estn enmascarando parte del ncleo. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.15. Monocito. La clula grande con un ncleo profundamente dentado, cit oplasma azul -gris y mltiples y discretas vacuolas citoplasmticas es un monocito. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.18. Linfocito grande. La gran clula redonda con un ncleo oval y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito grande. Frotis de sangre equina; objetivo lOOx.

Figura 5.19. Neutrofilo segmentado. La clula con un ncleo segmentado y un citoplasma rosa plido es un neutrofilo maduro. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.22. Eosinofilo. La clula con un ncleo alargado y abundantes grnulos pequeos, redondos y rojizos en el citoplasma es un eosinofilo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.20. Linfocito pequeo. La clula pequea con un ncleo redondo u oval y un borde de citoplasma azul claro es un linfocito pequeo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5. 23. Basofilo. La clula con un ncleo segmentado y nu- merosos grnulos pequeos de color de purpura en el citoplasma es un basofilo. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.21. Monocito. La clula grande con un ncleo profundamente dentado y citoplasma azul-gris es un monocito. Observe la falta de vacuolas; no todos los monocitos contienen vacuolas. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.24. Linfocito grande. La clula con un ncleo redondo o ligeramente dentado con pequeas cantidades de citoplasma azul claro es un linfocito grande. Observe la cromatina nuclear acentuada que se ve a menudo en linfocitos bovinos normales. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.

Figura 5.25. Neutrofilo segmentado. Las dos clulas con ncleos segmentados y un citoplasma granular azul clar o o r osa son neutrfilos segmentados. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.28. Eosinofilo. La clula con un ncleo en forma de banda y cantidades reducidas de grnulos pequeos, rojizos, redondos u oblongos poco definidos en el citoplasma es un eosinofilo. A menudo los eosinofilos de llama tienen cantidades reducidas de grnulos citoplasmticos. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.26. Linfocito pequeo. La clula pequea con un ncleo redondo y una pequea cantidad de citoplasma azul claro es un linfocito pequeo. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.29. Basofilo. La clula con un ncleo con poca segmentacin y mltiples grnulos citoplasmticos pequeos de color purpura es un basofilo. Los grnulos enmascaran parcialmente el ncleo. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.27. Monocito. La clula grande con un ncleo profundamente dentado, citoplasma azul-gris y mltiples y discretas vacuolas citoplasmticas es un monocito. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

Figura 5.30. Eosinofilo. La clula con un ncleo bilobulado y mltiples grnulos rojizos, redondos es un eosinofilo bien granulado. Frotis de sangre de llama; objetivo lOOx.

CAPITULO SEIS

VARIACIONES DE LA MORFOLOGA DEL LEUCOCITO

GRANULOCITOSUn cambio comn que puede observarse en animales con una inflamacin es la presencia de un numero mayor de Granulocitos neutrfilos inmaduros en la circula- don. Se conoce como desviacin a la izquierda. Normal- mente, una desviacin a la izquierda incluye cantidades mayores de neutrfilos en banda (figura 6.1), pero tam- bien puede incluir metamielocitos, mielocitos y, muy raras veces, promielocitos y mieloblastos. Los neutrfilos en banda, tal como se ha descrito anteriormente, tienen ncleos hiposegmentados. Normalmente, la cromatina del neutrofilo en banda es menos condensada que la de los neutrfilos segmentados maduros. En cambio, en la anomala de Pelger-Huet, que se ha estudiado en perros y gatos, existe un defecto que causa la hiposegmentacion de los granulocitos (figura 6.2) y provoca la aparicin de una falsa desviacin a la izquierda. Esta condicin es extremadamente rara pero se puede distinguir de una desviacin a la izquierda verdadera mediante las caractersticas de la cromatina nuclear. En la anomala de Pelger-Huet, aunque las clulas estn hiposegmentadas, la cromatina esta muy condensada como sucede con un neutrofilo normalmente segmentado. La anomala pasajera pseudo-Pelger-Huet se ha descrito tambin en algunas enfermedades.En todas las especies domesticas, durante la infla-

Figura 6.1. Neutrfilos en banda. Las dos clulas nucleadas (derecha) son neutrfilos en banda y la clula de la parte inferior izquierda es un neutrofilo poco segmentado pero mas maduro. To- das estas clulas son toxicas, basadas en el color azul mas intenso y la vacuolizacion del citoplasma. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

macion, pueden aparecer granulocitos neutrfilos en la sangre con un grupo de cambios morfolgicos conocidos como toxicidad o cambios txicos. Estos rasgos aparecen a menudo cuando existe desviacin a la izquierda. Los tres rasgos principales de toxicidad que se pueden observar incluyen la basofilia incrementada, la vacuolizacion y la presenta de cuerpos de Dohle en el citoplasma. La basofilia del citoplasma se debe a una mayor cantidad de RNA ribosomal (figuras 6.3-6.5). Se cree que la vacuolizacion del citoplasma se debe a lisosomas prominentes (figuras 6.6-6.7). Los cuerpos de Dohle son pequeas partculas de forma irregular, azul- grises en el citoplasma (figura 6.8). Son agregaciones laminares de retculo endoplasmatico rugoso. Debera tenerse en cuenta que la mayora de los cuerpos de Dohle en gatos y caballos son comunes durante la inflamacin y por ello no se les considera un signo tan grave de toxicidad en comparacin con las otras especies. Segn el grado y origen de la inflamacin, pueden aparecer uno o mas rasgos de toxicidad. Una causa de toxicidad grave habitual es la endotoxemia.Adems de los tres rasgos mencionados anteriormente, otro cambio morfolgico que se puede observar en los neutrfilos txicos es la granulacin toxica, que consiste en la presencia de grnulos pequeos mltiples de color purpura en el citoplasma de la clula. Estos grnulos son probablemente grnulos primarios prominentes.

Figura 6.2. Anomala de Pelger-Huet. El neutrofilo hiposegmentado con un tipo de cromatina muy densa es tpico de la anomala de Pelger-Huet. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

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38VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO

Figura 6.3. Neutrofilo segmentado normal. Observe el citoplasma de color rosa plido en comparacin con el citoplasma azul de los neutrfilos txicos en las figuras 6.4 y 6.5. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.5. Basofilia citoplasmtica moderada o marcada. El neutrofilo poco segmentado del centro del campo tiene una toxicidad que va de moderada a marcada indicada por la presencia de citoplasma azul oscuro, la vacuolizacion del citoplasma y los cuerpos de Dohle. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.4. Basofilia citoplasmtica suave a moderada. El neutrofilo segmentado en el centro del campo tiene una toxicidad suave a moderada indicada por la presencia de citoplasma azul y cuerpos de Dohle. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.6. Vacuolizacion cit oplasmtica suave. Existe una vacuolizacion suave del citoplasma del neutrofilo pobremente segmentado del centro del campo. Aparece tambin ligero o moderado citoplasma azul y cuerpos de Dohle, lo que indica, adems, una toxicidad moderada. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

No se trata de un hallazgo comn en las especies domesticas pero puede, alguna vez, encontrarse en caballos. Se debe distinguir la granulacin toxica de las In- clusiones en los neutrfilos que aparecen en gatos bir- manos sanos y en animales con enfermedades de alma- cenamiento lisosomal.Otro cambio morfolgico poco usual que puede observarse en animales con inflamacin es la presencia de neutrfilos gigantes. La medula osea produce y emite estas celulas con mayor rapidez y, por consiguiente, la maduracin no se ha producido, de ah su mayor tama- fio. Los neutrfilos gigantes pueden ser tambin un sig-

no de mielodisplasia, descrita en el Capitulo 9.Otros cambios diversos que pueden observarse enlos granulocitos son la hipersegmentacion neutrofila, losgrnulos eosinofilos de varios tamaos, y ladegranulacion eosinofila. La hipersegmentacion puedeobservarse en todas las especies y se la define comoneutrfilos con mas de 5 segmentos o lbulos (figura6.9). Este cambio se debe normalmente a la retencin dela celula en la circulacin por mas tiempo de lo normal,pero puede observarse tambin cuando los frotis de san-gre no se hacen inmediatamente despus de que la san-gre haya sido extrada. La hipersegmentacion de los neu-

VARIACIONES DE LA MORFOLOGIA DEL LEUCOCITO39

Figura 6.7. Vacuolizacion citoplasmtica marcada. La celula de la derecha es un neutrofilo en banda. La celula del centre, es un metamielocito. La celula de la izquierda es un linfocito. Tanto el neutrofilo en banda como el metamielocito muestran signos de una toxicidad marcada debida a la vacuolizacion citoplasmtica y al citoplasma azul. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx

Figura 6.8. Cuerpo de Dohle. La agregacin irregular de material azul en la posicin de las 12 en el citoplasma del neutrofilo segmentado (centro) es un cuerpo de Dohle. Tambin aparece una basofilia moderada y vacuolizacion citoplasmtica. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

trofilos puede producirse en caniches con macrocitosis eritrocitica y en schnauzers gigantes con deficiencia de vitamina Bp.Una variacin marcada del tamao de los grnulos eosinofilos ocurre principalmente en perros (figura 6.10). Pueden aparecer algunas celulas con unos cuantos grnulos mas grandes y una cantidad variable de vacuolas.La degranulacion de los eosinofilos puede observarse en todas las especies pero es mas visible en los perros. Aunque pueda producirse en cualquier raza, los galgos tienen a menudo eosinofilos degranulados. Se considera normalmente a dichas celulas como neutrfilos. Los

Figura 6.9. Neutrofilo hipersegmentado. El ncleo del neutrofilo del centr o del campo ti ene siete lbul os. Se consider a hipersegmentada una celula con cinco o mas lbulos nucleares. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

rasgos distintivos de los eosinofilos degranulados son que dichas celulas son mas grandes que los neutrfilos y que tienen a menudo vacuolas mltiples de tamao variado en el citoplasma (figura 6.11). Los grnulos eosinofilos pueden aparecer en cantidades reducidas o estar completamente ausentes en dichas celulas.


AGRANULOCITOSLos mayores cambios morfolgicos diferentes que ocurren en los agranulocitos son las Variaciones en morfologia de los linfocitos. Los linfocitos reactivos, conocidos tambin como inmunocitos, son normalmente linfocitos con citoplasma azul oscuro y cantidades de citoplasma posiblemente incrementadas (figuras 6.12-6.14). Estas celulas pueden tener tambin una destacada zona clara perinuclear. Cantidades pequeas de linfocitos reactivos pueden aparecer en animales sanos pero normalmente se observan en cantidades aumentadas en animales que estn estimulados antignicamente.Las celulas plasmticas o linfocitos reactivos

Figura 6.10. Eosinofilos con grnulos grandes de diversos tamaos. La celula nucleada (centro) es un eosinofilo con grnulos grandes rojizos de tamaos diversos. Frotis de sangre canina; objetivo

lOOx.

Figura 6.11. Eosinofilo degranulado. La celula del centro del campo con un ncleo bilobulado unido por un filamento delgado y vacuolas mltiples de varios tamaos pobremente definidas es un eosinofilo degranulado de galgo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

plasmocitoides aparecen en pocas ocasiones en la sangre perifrica. Dichas celulas tienen mucho mas citoplasma que los linfocitos normales o reactivos. El citoplasma es azul oscuro o azul-verde. A menudo existe una destacada zona clara perinuclear. El ncleo es redondo con una condensacin marcada de la cromatina en algunas reas, y clara en otras. Raramente, dichas celulas pueden tener vacuolas mltiples discretas en el citoplasma conocidas como cuerpos de Russell.Linfocito atpico es un termino usado de manera diferente por gente diversa. Nosotros describiremos los linfocitos atipicos como aquellas celulas con una morfologia similar a la de los linfocitos reactivos, pero adems del citoplasma azul oscuro y cantidades de citoplasma posiblemente incrementadas, presentan anormalidades nucleares. En comparacin con los linfocitos normales en los que el ncleo es redondo o ligeramente dentado, el ncleo de los linfocitos atipicos tiene profundas fisuras y/o mltiples muescas o repliegues interiores (figura6.15). La presencia de un linfocitos atpico raro puede ir asociada nicamente a un estimulo antignico. Sin embargo, la presencia en grandes cantidades de estas celulas puede indicar que el animal padece un trastorno linfoproliferativo (consulte el Capitulo 9).Los linfoblastos son linfocitos con ncleos que contienen uno o mas nuclolos (figura 6.16). Estas celulas son normalmente mas grandes que los linfocitos peque- fios, aunque puedan aparecer linfoblastos pequeos. El ncleo de un Linfoblastos no solo contiene un nuclolo prominente sino que la cromatina es tambin mas abierta y finamente punteada en comparacin con la del linfocitos pequeo normal. Si los linfoblastos son fciles de observar en la sangre perifrica, es muy probable que el animal tenga un trastorno linfoproliferativo. Debido a la marcada acentuacin de la cromatina de los linfocitos grandes bovinos normales, estas celulas pueden confundirse con los linfoblastos. La morfologa monocitica normal ha sido anteriormente descrita. La principal varia-don en la morfologa monocitica consiste en que algunos monocitos carecen de vacuolas destacadas (figuras 6.17 y 6.18). Esto puede ocurrir en cualquier especie. Cuando estas celulas carecen de vacuolas pueden con-

VARIACIONES DE LA MORFOLOGLA DEL LEUCOCITO41

Figura 6.12. Linfocito pequeo normal. Observe el citoplasma azul claro en comparacin con el citoplasma azul oscuro de los linfocitos reactivos de las figuras 6.12 y 6.13. Frotis de sangre felina; objetivo lOOx.

Figura 6.15. Linfcitos atpicos. Estas dos celulas (centro) con nucleos profundamente fisurados y citoplasma azul oscuro son linfocitos atipicos. Este animal presentaba un trastorno linfoproliferativo, basado en la presencia de grandes cantidades de linfocitos de morfologia atpica. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.13. Linfocito reactivo. El citoplasma azul oscuro y la zona clara perinuclear pobremente definida son tpicos del linfocitoreactivo. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx. Figura 6.16. Linfoblastos. Las tres celulas mas grandes con ncleos redondos u ovales, nuclolos simples o mltiples y pequeas cantidades de citoplasma azul son linfoblastos. Frotis de sangre canina; objetivo lOOx.

Figura 6.14. Linfocito reactivo. Este linfocito tiene cantidades elevadas de citoplasma azul oscuro, lo que indica reactividad. Frotis de sangre bovina; objetivo lOOx.


Figura 6.17. Monocito. La celula grande (centra) con un ncleo pro- fundament e dent ado y cit opl asma azul -gr i s si n vacu ol as citoplasmticas es un monocito. Observe la cromatina plid

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