Aglutinación pasivas
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INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS INMUNOLOGIA
INTEGRANTES:
GARCÍA GARCÍA CÉSAR ANDRÉS.
MORALES VARGAS MA. ANALY
PÉREZ MARTÍNEZ JESSICA ALEJANDRA
Reacciones de aglutinación
Químico Farmacéutico Industrial
5FV1 equipo. 6
REACCIONES DE AGLUTINACIÓNAGLUTINACIÓN PASIVA
Hemaglutinación pasiva
AGLUTINACIÓN
Proceso realizado in vitro.Evidencia reacción Ag-Ac.Ag insoluble o particulado.
Fenómeno de unión completo:
Presencia de grumos visibles.
Etapas1. Unión del Ag con Ac.
Fuerza iónica, temperatura y pH del medio.
2. Formación de malla (Ac hacen puente de unión entre los Ag).
Disminuir potencial Z
Elevar temperatura, centrifugar o sedimentar c/sustancias químicas.
AGLUTINACIÓN PASIVA
Utilizado para:
Evidenciar reacciones Ag-Ac.
Ag soluble.
Precipitación.
Modificación:
Fijar Ag (a veces Ac) a partículas insolubles.
Poliestireno, látex o bentonita.
HEMAGLUTINACIÓN PASIVA
Variación de aglutinación pasiva.
Glóbulos rojos son el soporte.
Se debe a la presencia de antígenos en los eritrocitos, antígenos capaces de reaccionar con anticuerpos o bien con proteínas específicas de algunos microorganismos
VENTAJAS
Eritrocitos:
Recubiertos con Ag;
Ag acoplados de manera espontánea (polisacáridos).
Acoplamiento químico (ácido tánico, bencidina bisdiazotizada, cloruro crómico)
Disponibilidad inmediata Alta sensibilidad como indicadores
(medir antígenos a concentraciones de 0.2- 9 µg/ml).
Almacenamiento prolongado.
La hemaglutinación indirecta o pasiva con células sensibilizadas a las proteínas puede identificar anticuerpos a concentraciones tan bajas como 0.03 µg/ml.
Inhibición de la hemaglutinación
La inhibición de la hemoaglutinación (IHA) es la unión de anticuerpos a la sustancia que se absorbe para la hemaglutinación.
GONADOTROPINA CORIÓNICA HUMANA
Secretada por la placenta.
Detectada en orina o suero humanas.
3° día de pérdida del periodo menstrual.
Aumenta hasta las 10 semanas de gestación.
ANTECEDENTES
Wide y Gemzell descubren métodos inmunológicos para detectar HGC (1960).
Inhibición de la aglutinación de hematíes de carnero sensibilizados.
Suero antigonadotropo de conejo.
Actualmente se utilizan partículas inertes como el látex.
PROCEDIMIENTO
Enfriar la orina. Filtrar o
centrifugar a 3 000 rpm por
5min.
0.25 ml de suero anti-HCG
en tubo de ensaye.
0.25 ml de solución control en un tubo de
ensaye.
0.25 ml de orina a c/u de
los tubos
Una gota de eritrocitos
sensibilizados en cada tubo
Colocar los tubos en una gradilla.
Incubar a temperatura
ambiente por 2 hrs.
Observar resultados.
RESULTADOS
AGLUTINACIÓN PASIVA
Los antígenos se acoplan de manera artificial a partículas que solo funcionan como soporte.
PRUEBA CUALITATIVA O SEMICUANTIATIVA
DETERMINACIÓN DE FACTOR REUMATOIDE
PRUEBA DE AGLUTINACIÓN EN LÁTEX.
Es un método de laboratorio para examinar ciertos anticuerpos o antígenos en una variedad de fluidos corporales, como la saliva, la orina, el líquido cefalorraquídeo o la sangre.
La muestra se mezcla con gotas de látex cubiertas con un anticuerpo (Ig G)o un antígeno específico. Si la sustancia sospechosa está presente, las gotas de látex se agruparán (aglutinarse).
Los resultados de la aglutinación en látex demoran aproximadamente de 15 minutos a una hora.
RAZONES POR LAS QUE SE HACE EL EXAMEN.
Esta prueba es una manera rápida de determinar la ausencia o presencia de un antígeno o anticuerpo.
FACTOR REUMATOIDEOEn el suero aparecen anticuerpos anti-anticuerpos
dirigidos a Ig G´s principalmente y los más abundantes pertenecen a la clase Ig M, el médico puede hacer otro examen de sangre (anticuerpo anti-PCC) para ayudar a diagnosticar la artritis reumatoidea.
PCC. PÉPTIDO CÍCLICO CITRULINADO
FACTOR REUMATOIDEO.
Este examen se usa con mayor frecuencia para el diagnóstico de la artritis reumatoidea o el síndrome de Sjogren.
VALORES NORMALES
Los resultados generalmente se reportan en una de dos formas:Menos de 40-60 u/mLTítulo menor de 1:80Un número bajo (resultado normal) por lo regular significa que
usted no tiene artritis reumatoidea o el síndrome de Sjogren. Sin embargo, algunas personas que en realidad padecen estas afecciones aún tienen un factor reumatoideo (FR) bajo o "normal".
!No toda persona con niveles más altos de factor reumatoide tiene artritis reumatoide o síndrome de Sjogren.!
PROCEDIMIENTO
Preparación dilución 1:20 del suero problema con amortiguador de glicina.
Añadir una gota de dilución seguido de reactivo látex-γ globulina.
Mezclar con agitador de madera
Oscilar placa suavemente.
RESULTADOS
PROTEÍNA C REACTIVA
PERTENECE A LA FAMILIA DE LAS PENTRAXINAS, UN GRUPO DE PROTEÍNAS PENTAMERICAS HOMOLOGAS EN SU ESTRUCTURA.
SE UNE AL COMPONENTE FOSFORILCOLINA DE LOS LIPOPOLISACARIDOS DE LA PARED CELULAR BACTERIANA.
• SE UNE A LOS MICROBIOS Y ACTIVA EL COMPLEMENTO
• Cuando hay un proceso de infeccion umenta hasta 1000 veces su concentracion.
• Es una proteina de fase aguda
INICIO
Colocar 1 gota del suero problema + 1 gota del reactivo de latex-anti-PCR, en una placa de vidrio.
RESULTADOS
Imagen 1: Reaccion de aglutinación (Proteina C reactiva)
DISCUSIÓNLA PRUEBA DE PROTEÍNA C REACTIVA MUESTRA AGLUTINACIÓN POR TANTO LA PRUEBA ES POSITIVA POR LO QUE PODEMOS SUGERIR QUE EL INDIVIDUO AL CUAL SE LE REALIZO TAL PRUEBA PASABA POR UN PROCESO DE INFECCIÓN, POR LO QUE EL NIVEL DE PROTEÍNA C REACTIVA AUMENTO.