A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

14
Molecular Microbiology 2001) 402), 347±360 A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter Yan Wang, Benjamin D. Jones and Yves V. Brun* Department of Biology, Indiana University, Jordan Hall 142, 1001 East 3rd St., Bloomington, IN 47405-3700, USA. Summary FtsZ is required throughout the cell division process in eubacteria and in archaea. We report the isolation of novel mutants of the FtsZ gene in Caulobacter crescentus. Clusters of charged amino acids were changed to alanine to minimize mutations that affect protein folding. Molecular modelling indicated that all the clustered-charged-to-alanine mutations had altered amino acids at the surface of the protein. Of 13 such mutants, four were recessive-lethal, three were dominant-lethal, and six had no discernible phenotype. An FtsZ depletion strain of Caulobacter was constructed to analyse the phenotype of the recessive-lethal mutations and used to show that they blocked cell division at distinct stages. One mutation blocked the initiation of cell division, two mutations blocked cell division randomly, and one mutation blocked both early and late stages of cell division. The effect of the recessive mutations on the subcellular localization of FtsZ was determined. Models to explain the various mutant phenotypes are discussed. This is the first set of recessive alleles of ftsZ blocked at different stages of cell division. Introduction Bacterial cell division is a complex process that requires at least nine genes in Escherichia coli, ftsZ, A, I, K, L, N, Q, W and ZipA Rothfield et al., 1999). Of these genes, ftsZ acts at the earliest known stage of cell division. FtsZ null mutants are unable to initiate cell division and form long smooth filaments. FtsZ localizes to the site of cell division before any visible cellular constriction and forms a ring structure called the Z ring Bi and Lutkenhaus, 1991). The Z ring stays at the leading edge of the septum during invagination and disassembles once septation is com- pleted Bi and Lutkenhaus, 1991; Addinall et al., 1996). FtsZ binds and hydrolyses GTP in vitro de Boer et al., 1992; RayChaudhuri and Park, 1992; Mukherjee et al., 1993) and can polymerize in vitro into protofilaments and sheets in a GTP-dependent manner Bramhill and Thompson, 1994; Erickson et al., 1996; Yu and Margolin, 1997; Lu et al., 1998; Mukherjee and Lutkenhaus, 1998). It has been proposed that GTP-bound FtsZ polymerizes into a ring structure during cell division, and that GTP hydrolysis leads to the instability and depolymerization of the Z ring Lutkenhaus and Addinall, 1997). FtsZ is required for the recruitment of other cell division proteins to the division site. FtsA, I, K, L, Q, N, W and ZipA have all been shown to localize to the septum in an FtsZ- dependent manner Ma et al., 1996; Addinall et al., 1997a; Buddelmeijer et al., 1998; Wang et al., 1998; Yu et al., 1998; Chen et al., 1999; Ghigo et al., 1999; Hale and De Boer, 1999; Liu et al., 1999; Weiss et al., 1999). FtsZ can be divided into three regions based on sequence similarity between FtsZ from different bacteria: a long N-terminal conserved region NTR) of approxi- mately 300 amino acids that is absolutely conserved; a spacer region spacer) that varies in both length and sequence; and a short C-terminal conserved region CTR) that is present in many but not all FtsZ proteins Fig. 1). The NTR region is required for FtsZ±FtsZ interaction and polymerization, whereas the CTR region is required for FtsZ±FtsA interaction Ma et al., 1996; 1997; Wang et al., 1997; Din et al., 1998). The NTR region can be subdivided into two domains based on the crystal structure of Methanococcus jannaschii FtsZ: an N-terminal GTPase domain and a C-terminal domain of unknown function referred to as the NC domain), which are bridged by a central helix, H7 Lo Èwe and Amos, 1998). The GTP- binding domain is similar to that of a/b tubulin Lo Èwe and Amos, 1998; Nogales et al., 1998a). FtsZ is required throughout cell division Addinall et al., 1997b). To study the function of FtsZ at different stages of the cell division process, we wanted to identify FtsZ mutants that are blocked at various stages. In this paper, we describe new mutants of FtsZ obtained by clustered- charged-to-alanine scanning mutagenesis of Caulobacter FtsZ Wertman et al., 1992; Reijo et al., 1994). Clustered- charged-to-alanine mutagenesis has been used success- fully to identify important surface residues in yeast tubulin and actin Wertman et al., 1992; Reijo et al., 1994). This method is based on the observation that charged residues tend to be at the surface of a protein, and that changes in surface residues are not usually disruptive to protein structure. Because residues involved in protein±protein Q 2001 Blackwell Science Ltd Accepted 7 February, 2001. *For correspondence. E-mail ybrun@bio. indiana.edu; Tel. 11) 812 855 8860; Fax 11) 812 855 6705.

Transcript of A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

Page 1: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��������� ��������� ����� �� ��� �������

� ��� �� ���� ����� ������ �� ��������� ������ �� ������������ �� ��������

��� ����� ������� �� ����� ��� ���� �� ����

���������� �� ��� ������� ����������� ����� �� ����

���� ���� ��� ���� � ������� � �!��"#�!��� ��$�

��!

"��# �� ��$���� �%���%�� �%� ���� �������� &������

�� � ������� ��� �� ���%���� �� ��&��� �%� ���������

�� ����� ����� �� �%� "��# ���� �� ��������

� ��������� '������ �� �%����� ���� ����� (���

�%����� �� ������� �� ����)� ������� �%�� ������

&������ �������� *������� �������� ��������� �%��

��� �%� ��������+�%�����+��+������� ������� %��

������� ���� ����� �� �%� ������ �� �%� &������� ,�

-. ��% ������ ��� (��� ���������+���%��� �%���

(��� �������+���%��� ��� ��/ %�� �� �������� ��

&%����!&�� �� "��# ��&������ ������ �� ��������

(�� ���������� �� ����!�� �%� &%����!&� �� �%�

���������+���%�� ������� ��� ��� �� �%�( �%��

�%�! ������ ���� �������� �� �������� ������� ,��

������ ������ �%� ���������� �� ���� ��������� �(�

������� ������ ���� �������� ������!� ��� ���

������ ������ ��% ����! ��� ���� ������ �� ����

��������� 0%� ������ �� �%� ��������� ������� �� �%�

� ������� ������)����� �� "��# (�� ����������

*����� �� �/&���� �%� ������ ���� &%����!&��

��� ��������� 0%�� �� �%� ����� ��� �� ��������� �������

�� ���� ������ �� ��������� ������ �� ���� ���������

1����������

�������� ���� ����� � � ������ ������� �!�� ��"����

�� ����� ��� ����� � ��%&���%&�� % �� ��'� $� �� (� )� �

*� + ��� '��$ #��!$��� �� � %� �&&&�% '$ �!��� ������

��' ���� �� �!� ������� (��)� ����� �$ ���� �����% *��+

���� ������� ��� ����� �� ����� ���� ����� ��� $���

���� �����! $�������% *��+ �����,�� �� �!� ��� �$ ����

����� �$��� ��� ���� �������� ���������� ��� $���� �

��� ��������� ������ �!� + ��� � ��� -��(��!���� �&&��%

.!� + ��� ����� �� �!� ������ ���� �$ �!� ������ �����

��������� ��� ���������� ���� �������� � ���/

������ � ��� -��(��!���� �&&�0 1������ �� � %� �&&��%

*��+ ��� ��� !��������� 2.3 �� ���� �� ���� �� � %�

�&&�0 #��4!���!�� ��� 3��(� �&&�0 ��(!��5�� �� � %�

�&&�� ��� ��� �������,� �� ���� ��� �����$������� ���

�!���� � � 2.3/��������� ������ ����!�� ���

.!������� �&&�0 6��(��� �� � %� �&&�0 7� ��� ��������

�&&�0 -� �� � %� �&&80 ��(!��5�� ��� -��(��!���� �&&8�%

9� !�� ��� �������� �!�� 2.3/���� *��+ �������,��

��� � ��� ��������� ����� ���� ������ ��� �!�� 2.3

!�������� ����� �� �!� ������� ��� ���������,���� �$

�!� + ��� -��(��!��� ��� 1������� �&&��% *��+ �

��"���� $�� �!� ���������� �$ ��!�� ���� ����� �������

�� �!� ����� ���% *��1� 9� :� -� ;� <� = ��� +�1 !��� ���

��� �!�)� �� �����,� �� �!� ������ � �� *��+/

��������� ������ �� �� � %� �&&�0 1������ �� � %�

�&&��0 ��������5�� �� � %� �&&80 =��� �� � %� �&&80 7�

�� � %� �&&80 4!�� �� � %� �&&&0 2!�� �� � %� �&&&0 >���

��� ?� ����� �&&&0 -� �� � %� �&&&0 =��� �� � %� �&&&�%

*��+ ��� � ����� ��� �!��� ������ ���� ��

��"����� ������� ��)��� *��+ $��� �$$����� ������@

� ���� </������� ��������� ����� <.#� �$ ����� /

������ ��� ���� ���� �!�� � ��������� ���������0 �

������ ����� ������� �!�� ����� � ��! �����! ���

��"�����0 ��� � �!��� 4/������� ��������� ����� 4.#�

�!�� � ������� � ���� �� ��� ��� *��+ ������� *�% ��%

.!� <.# ����� � ��"���� $�� *��+�*��+ ��������� ���

�������,����� )!����� �!� 4.# ����� � ��"���� $��

*��+�*��1 ��������� �� �� � %� �&&�0 �&&�0 =��� �� � %�

�&&�0 ?� �� � %� �&&8�% .!� <.# ����� ��� � �������

��� �)� ������ ���� �� �!� ������� ��������� �$

,��&��%%%-� .�����%&�� *��+@ �� </������� 2.3���

����� ��� � 4/������� ����� �$ ��(��)� $������

��$����� �� �� �!� <4 ������� )!�! ��� ����� � �

������� !�� � >� -�A)� ��� 1���� �&&8�% .!� 2.3/

���� ����� � ����� �� �!�� �$ �B� ����� -�A)� ���

1���� �&&80 <������ �� � %� �&&8��%

*��+ � ��"���� �!����!��� ���� ����� 1������ �� � %�

�&&��% .� ����� �!� $������ �$ *��+ �� �$$����� ������ �$

�!� ���� ����� �������� )� )����� �� ����$� *��+

������� �!�� ��� ���(�� �� ������ ������% 9� �!� ������

)� ������ ��) ������� �$ *��+ ������ � ���������/

�!�����/��/������ ������� ���������� �$ /�- 0�%���

*��+ =������ �� � %� �&&�0 #�5� �� � %� �&&��% 4��������/

�!�����/��/������ ���������� !�� ��� ���� �������/

$���� �� ����$� �������� ���$��� ������� � ����� �����

��� ���� =������ �� � %� �&&�0 #�5� �� � %� �&&��% .!�

���!�� � ���� �� �!� ��������� �!�� �!����� �������

���� �� � �� �!� ���$��� �$ � ������� ��� �!�� �!����� �

���$��� ������� ��� ��� ������� �������� �� ������

���������% ������� ������� ������� � �������������

� ���� ����()��� C����� -��

1������� � *������� ����% D*�� ��������������% 6/��� ����E�%�����%���0 .��% ��� 8�� 8FF 88��0 *� ��� 8�� 8FF ���F%

Page 2: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��������� ��� ��,����� ������ ��� ������� �� �!�

���$��� �$ �������� �!� ���!�� ����!�� $�� ��������

�!�� ������ ������ ������ �� ��� ���������% /�- 0�%���

%���%���-� � � ��)��$�� � ��������� ������ $�� �������

���� ����� ������ �$ �!� ���� )�! )!�! ����!���,��

���������� ��� � ������ ���� �� � %� �&&�0 ���� ���

G���(������ �����% 6��! ���� ����� ���� ��� �� �)�

����!��������� �$$����� ������� �����@ � ����� �)�����

���� ��� � ������ ����(�� ����% *��+� )!�! � ����� $���

�)����� ����� �� �!� ������ �$ �!� ���� ����� ;�����/

(�� �� � %� �&&��� ���� �� ���������� ����� �)�����/

��/����(�� ���� �$$��������� ��� $���� � + ��� �� �!�

$����� ��� �$ ���� ����� :���� �� � %� �&&8�% 1� �!� ��� �$

�!� ���� ������ *��+ ������ ������� ��� � ������

�������� :���� �� � %� �&&8�% .!� �!����� ������� �$

/�- 0�%��� *��+ ������� �� �������� ���� $�� ��������

)��/���� *��+ )�! ������ $���� �$ �!� ������%

>���� )� ������ �!� ����������� ��� ��������� �$ �

*��+ �������� ����� �$ /�- 0�%��� ���� �� $������� �!�

������� �$ ��' �������% '�� �$ �� ������� ������� $���

������� )��� �������/���!�� ��� $��� ������� )���

�������� �� )��/���� *��+% .!��� ������� )��� ���(��

�� �$$����� ������ �$ ���� �����% .!� ������� �

������� !�� � )��/���� �!�������% 1 ��������� ����� �$

/�- 0�%��� *��+ )�� ���� � ���5������ )�! �!� ������

�!�������� ��� ����������,���� ���� �� ������� �

��� $�� �!� ��$���� � �!� ������ �������%

2�����

/����-%��� ��� %&���%����1���� �� 2��' ��� ����

������

.� $������� �!� ����� �$ ��' � /�- 0�%���� )�

����������� ����� 7��F8F *�% �1�� � )!�! �!� �!��/

������� )��/���� ��' � ���������� � �!� �����/

������ 3� 4 �������� ��� �3��������� ��%��-����%

.!� 7��F8F ����� ���� !�� � ������ ��������� �$ �!�

$��� ��� ������ �$ ��' ��������� � �!� ����� ��'

�������� *�% �1�% 1 ����� ��������� �$ *��+ ���� ��

�!������� )!�� � ������� $��� � !�!/���� �������

������������ �!�� �!� ��������� *��+ ���� ��� ����$���

)�! ���� ����� ?� �� � %� �&&8�% *���!������� �!�

�������� ��������� *��+ $������� ������ � �������� �� �

=������ ��� ��� �!�)��� ������� �!�� �!� ���������

���� � ������ � ���� ������% 7��F8F ��"���� ����� $��

"��� -� 1������� �$ *��+ ������� ��� ���� �$ ��������% 3����� ��"����� �$ *��+ $��� $��� �$$����� ������ � ��������� �����@/� %���%���-�� ,� .�����%&��� ��%� -� �-0�� �� ��� �� % �� ��� ������% ������� ���� ��� ���������� ��� ��� ������� )��� �!����� ��������� � ���� $�� ������ ��&� )!�! !�� � 2 �� C �!���� DD�% C��������� �������� ��� ������� ��� ������� ��"�������� �� >��>�� ���C��C�� $�� !����� ��� �������� ������������ �� ������� ��������� <������ �� � %� �&&8�% -���� )�! ������� ������� � ����� �������)�! �!� ��������� ��� ���(�� .��.� <������ �� � %� �&&8�%

��8 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 3: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

���)�! �� ������ *�% ��� ��� $�� ���� ����� � 376

�"�� ����� *�% �1 ��� ��% .!� ��"������� $�� �����

����� � ������������ � �!� ��)/���� ������

�����&�$��+� )!�! ������� �!� ��' ����� �� ��� �

�!� ������ �#:����&� ����� *�� �� ��� �4�% ����/

����� � ������� �$ � ������� �� �$$����� ���� �$���

�����$�� �$ � ���������� ���)�� 7��F8F ����� $��� 376/

����� ����� �� 376/������� ����� ������� �!��

����� ���� �� $������ � ! �$��� �!� �����$�� *�% �?� ���

�������� �� �������� )�!��� ������ ���� �����

*�% �6 ��� *�% .!� ���� ����� ��$��� �$ 7��F8F �

376/������� )�� $���� ������������ � � ���� �$ ��'

�� ������ �����&�$��+ *�% �4�% 9����������� �$ ����

� ������ $��� 376/ ����� �������� �!�)�� �!�� �!� *��+

������������ �$ � ���������� ���)�� 7��F8F )��

����� �� �!�� �$ � )��/���� ����� *�% �1�% .!�

������������ �$ *��+ ��������� ������ �$��� �!� �������

�$ �����% 1$��� �� ��� �!� *��+ ������������ !��

��������� �� � ��H �$ �!� ������ ������������� ��

��������� � ������������ ��� ���� �H ������� �$���

� ! *�% �1�% .!��� ������� ������ �!�� �!� �����/

��������� ���� ���)�! ��� ���� ����� �$ 7��F8F �������

$��� �!� ������� �$ ��' � ������� ��� �!�� *��+ �

��"���� $�� �!� ������ �$ ���� ����� � /�- 0�%���%

*���!������� )��/���� *��+ ��� � ������ �������� $���

7��F8F � �!� ������� �$ �����% .!� ���� ��������/

���� �$ *��+ ���� �!$� �$ 7��F8F �� 376/�������

����� )�� � ������� �� ���� �$ �!� *��+ � )��/����

����� � ������ �������� �� �!� ��� �$ ���! ���� �����

;�����(�� �� � %� �&&�0 ����0 :���� �� � %� �&&8�%

=� � ����� �!� ���� ����� ���������� �$ 7��F8F �

������� �)����� ����� $��� � 376/ ����� ������� ���

����������� �!�� ��� 376/ ����� ��� 376/�������

�����% 4���� � �!� 376/ ����� ����� �$$���������

��� ���������� �� � )��/���� ���� �!����! �!� ����

����� �����% �� &� �� ��� �!� ���� ������ �����/���)�

7��F8F ����� !�� ������ ���� ����� ���� ��� �!�)���

��� �!�� !�� ���� ����������� � ��F �� ���� ���

�!�)��% C���!���,�� 7��F8F ����� ���)� � 376/

������� ����� ������ ���� ����� ��� ���) �� ����

$������� ������� ��� �!�)��% =� �������� �!� ������/

������ �$ *��+ � �)����� ��� ����(�� ����� �$ 7��F8F

��� )��/���� ����� <1����% 9� <1����� ���� ����(��

����� �������� *��+ *�% ���� �� �������� ���������

;�����(�� �� � %� �&&��% C)����� ����� �$ 7��F8F

�������� � ��) ������������ �$ *��+ �������� )�!

����(�� ����� *�% ���� ������� �!�� *��+ � ������

�������� $��� �)����� ����� �� ����� ���� �����% .!� �

��������� )�! �!� $��� �!�� ���������� � �!� ��5��

���������� �$ �!� ���� ����� ������� � *��+ ������������

:���� �� � %� �&&8�% .!��� ������� ������ �!�� 7��F8F

�!���� ���������� �� )�� ���� )�! ������� �� ���� �����

��� *��+ ��������� )!�� ���)� � ����� �����% .!�

���� ���������� �$ *��+ � �)����� ����� ������� �!��

)��/���� *��+ ��� � �������� � � ������ $��� �$ *��+

)�!� ��� ���� ����� $ 7��F8F � ���)� � ������� � �!�

�������� �$ �� � ������� ������ ������%

������ ��� ��� ���� �&� �-������

9� �� �$$��� �� ���� *��+ ������� �!�� ��� ���(�� ��

�$$����� ������ �$ ���� ������ )� ���� ���������/

�!�����/��/������ ���/������� ���������� �� ����/

���,� ���$��� �������% =� �������� �������� �$ $��

��5����� ������� �������� �)� �� ���� �!�����

������� ��� �!����� �!�� �� ������� �� ������ �����

�������� �$ ������ ���������% .!��� ��� F� ���! ��������

� *��+0 �� ��� � �!� <.# ����� �$ �!� ������ ��� ���

���� �(��� �� � ������� � ��������� $������� �$ *��+%

=� ������� �� �������� � �!� <.# ��� ��� ������� � �!�

������ *�% ��% 9� ������� )� ������� ������ ��& ��

����� ������ �!� ���� ���� ��� ��������� ����

��� �� � �����������/������� ������ �$ �� % � ��'� ��'7��

)�! ������� 2.3 ���� ��� !��������% 1$��� �!� �������

��������� �$,� .�����%&�� )�� ����!�� -�A)� ��� 1����

�&&8�� )� ����������� � �!���/��������� ����� �$

�!� /�- 0�%��� *��+ <.# ����� ���� �� �� !�������

�� ,� .�����%&�� *��+ ���� ��������� ��������% .!�

"��� 3� .!� *��+ �������� ����� 7��F8F%1% 7��F8F )�� ������� � ��������� ������ ��G� �� �!� ��'����� � !��������� ����������% .!� 4/������� ��������� ��' ��'����4� � � ���� ������� ��� �!� )��/���� ��' ������ � ������!� ������� �$ �!� 3� 4 ��������% 9� �!� ������ �$ ������ )��/������' � ��� � �������%�% <1����� 7��F8F� 7��F8FB�#:-���&� ������� ������� ���7��F8FB�����&�$��+ )��� �����(�� ���� 376 ������ )�! �� )�!��� ����� �� �������% .!� <1���� ������� )��� $��� �$$����� ��������������� � �!� ���� )��%

4��������� $��+ �-����� ��&

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 4: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

������� �$ �!� �������� � �!�)� �� �!� ����� �$

/�- 0�%��� *��+ *�% F�% 1�� �� ������� �������� � �!�

<.# ����� ��� $���� �� �������� � ����� �� �!� ������

���$���� � ���� 2��&C� )!�! � �������� �� �� � �!�

2?3/���� ���(��%

.� ����� �!� �$$��� �$ �!� ��������� ������� ��'

������� )��� ������ ��� �!� ��)/����/����� ������

�#:����&� ��)������� $��� �!� ����� ��' ���������

��� �!� �������� ������� )��� ���5������ ��� 7��F8F%

.� �������� �!� � ���� �� )!�! �!� ������ *��+ ���

������� ���� ������ ��������5������ �������� �!�

������� ������� )��� ���)� � 376/ ����� �����

��� �!�� �����$����� �� 376/������� ����� �� �!��

��)� �!� � ������� �$ )��/���� *��+ $��� �!� �!����/

����% .!� ����� )��� � ����� �$��� � ! �$ ���)�! �

376/������� �����% 9� �!� �������� �$ ������ ��! �!�

�!��������� )��/���� ��' ��� �!� ������/���� ��'

��� � ������� *�% �4�% .!� ����)� ���)�! �$ �!� ������

$ �!�� ������ � ��������/���!�� ������� � �!� ������/

���� ���� �$ ��'� �� ��� $ �!� ������� ��� �������%

9� �!� ������ �$ ������ �!� �!��������� 83� 9��'

������ )�� ��� � ������� *�% �4� ���� ��� ��� ���� �!�

������/���� ��'� ���������� � �!� ����� ��' ���������

)�� �������� *�% �4� ���� F�% .!� ������������ �$

*��+ � 7��F8FB�����&�$��+ ���)� � 376/������� �� �

376/ ����� )�� ����� �� �!�� � )��/���� ����� <1����

*�% �4� ����� �� � ��� F�% 1�� �!� ������� )��� ������ $��

������ �����������/������� �!�������� � ���)��

�!�� �� �$$����� ������������% 6 ���� $�� ������ ���

��� ���)�� ��� �!� ������� !�� ����� �!�������� ��

���4� ���4 ��� ���4%

.!� ������� )��� ������� ��� �!��� ������� ���� ��

�!�� �!�������� � 7��F8F .��� ��% '�� ����� �$

�������� ������� F&� ��F� ��8� �&�� ��� ��� ���� !�� �

�!������� ��������!��� $��� 7��F8FB�����&�$��+ �

376/������� ������ ������� �!�� �!� ������� ���/

���� ��� ��� ������ $�� ���� ����� ���� ��� �!�)��%

1���!�� ����� �$ ������� �������� ������� �!�� )���

����� �� ������� ���� ����� � 376/������� ������

������� 8�� ���� �&8 ��� �F� *�% �?� *� > ��� G�%

������� ����� !�� ���� ������� ����� �������� )!��

�!��� ������� )��� � ������� �����!�� )�! )��/����

*��+ � 376/ ����� *�% �4� 6� 2 ��� 9�� �!��� ��������

!��� � ���!� ������� �$$��� ��� ��� �!�� ��� �����

��������% <����!������ )� )�� ��$�� �� �!�� �� ��������

������� � �!� �� � �� �������! �!�� $��� �!� �������/

���!�� �������% 9����������� ���$���� �!�� �!� ����� �$

*��+ �������� � �!� �������� ������� )�� ����� ��

�!�� �$ )��/���� ����� <1����� ��������� �!�� �!�

������ �$ *��+ )�� ��� �!����� � �!� ��������

*�% �4� ����� �� &� �� ��� ���% ������ 8� �������

���� ������ �!�� )��/���� *��+ ��� ��!�� ������ *��+ ��

�� C?C�3126 ��� *�% �4� ����� � ��� ��% C�"������

�$ �!� ������ ���� ���$���� �!�� �!��� )��� �� ��!��

"��� .� 3!������� �$ 7��F8F ���)� � 376/ ����� �� 376/������� �����%1% 7��F8F ����� ���)� ������!� � 376/ ����� �����%�% 7��F8F ����� ���)� ������!� � 376/������� �����%4% 7��F8FB�����&���' ���)� ������!� � 376/������� �����%?�*% 6 ���������� ���)�� 7��F8F ����� )��� ��(�� $��� 376/ ����� ������ )��!�� )�! 376/������� ������ �!�� ��������� ��� 376/������� ����� �� �@��� ������% 3������ )��� ��(�� �� � ! ?�� � ! 6� ��� � ! *� �$��� �!� �����$��%

�F� 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 5: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��"����� �!����� ����� �!� ���/������� �������,��

���������� ��� �!�)��% 4����������� �!� �������� �$

7��F8FB�����&�/8� ������� ������!�� �!�� �!� ������

*��+ � �!� ���� ������� $��� �$ *��+ �$��� ���)�! �

376/������� $�� � ! *�% �4� ���� ��% 7��F8FB�����&�/

8� ���)� � ����� �������� �)�/ �� �!���$��� ����

������ *��+ �!�� )��/���� *��+ ��� �������� ���! ����

)��/���� *��+ �!�� 7��F8F � ����$% 1� �!� ������������

�$ *��+ � ������ ���������� � ����������� �!� �������

������� �$ )��/���� ��� ������ *��+ � 7��F8FB

�����&�/8� ������ ��$���� �!� ������� ���� ����� �$

�!� �)� �������% =� )��� ����� �� ���� ��������5������

� 7��F8F $�� �!� ���� ����� �$ ������� ������� ��&�

���� ��� ��� ��8�� ��������� �!�� �!��� ������� ���

�������/���!��%

/&���%����1���� �&� ��%������ �-�����

.!� $��� �������� ������� � !��� ������ ���� �����

�!�������� )!�� ���)� � 376/������� *�% ��% 376/

������� �������� �$ ������ �&8 �������� �$ �)� (��� �$

�����% 1���� ������ �FH �$ �!� ����� )��� $����������

)!����� �!� ���� �$ �!� ��������� )�� �������� �$

�!����� ������ ���� �$ )!�! )��� ����� � ����!����� ��

)��/���� �����% .!� ���� �$ ���� ����� �� ���� ���

������ $��� � ����� ������ �$ )��/���� *��+ �������� �

�!� ��)/����� ����������� �$ �!� 3 �� �������� �!�� ������

���� � �!� ������ �$ ����� �����,�!� �� � %� �&&��%

.!� ����� ������ �$ *��+ ��� � ��� �� ������ �!�

��������� ��"���� �� ����� �������,���� � ����

�����% *��������� ����� �$ ������ �&8 )��� ���(�� �� �!�

������� ����� �$ �!� $��� �������� ������� ��� !�� ��

���� �$ ���������� *�% �?�% .!� $������� ��������

����� ����� �$ ������)�! �� �!�� ���� *�% �?�%

'����������� � ����( ����� � ���� �� �!� ��� �$ �!�

������)�! ���� ��� �!�)��% =� ���� �� �$$���/���$��

���/*��+ ������ �� ����������,� *��+ � ������ �&8

���)� � 376/�������% C!����� ���������� ����� !�� �����

+ ���� �� �!� ���������� ��� *�% �1�% >�)����� �� +

���� )��� ���� � �!� $��������� �����0 ���� � �$$���

*��+ ������ )�� ���� �!����!��� �!� $������� *�% �1�%

.!� ������� �!�� �!� ����� ���� ����� ���( �$ ������

�&8 � �(��� �� � ������ � �!� ����� �$ �!� ������

*��+ �� �����,� �� �!� ��� �$ ���� ����� �� � �� �����

�� �������,� �� $��� � + ���%

9� ������ 8�� ���� &�H �$ �!� ����� � !��� ����

����� ��$���� ��� )��� $��������� *�% �*�% 4������/

���� ����� � ���� � � ��H �$ �!� $�������% .!� ����!

�$ ����������� ������ ��� �!��� )��� ���� ���� �$ ����

����������% 9����������,���� �$ *��+ � ������ 8�

�!�)�� �!�� + ���� )��� ������� �� � ��H �$ �!�

����������� �$ $��������� �����% ���� �$ �!� ����������

���� � ������ 8� !�� �� *��+ ������� ��������� �!��

�!� + ��� ��� !��� ���������� �����������% + ����

)��� ���� ������� �� ���� ���� )!��� �� �����������

)��� ���� *�% ���% .!� + ���� ���� �� ���� )�!���

���������� ����� � $�������� ���� �!�� !��� ��� ���

���� �� ��������% .!� �������� �$ �!��� ������������

���� �������� �!�� ������ 8� $���� + ���� �!�� ��������

���)�� �� �$��� $���� ���/$�������� + ����% 9� �������

$������� �$ ������ 8� !�� � ������ ������ )�!��� +

����� ��������� �!�� � ��� ���� !��� ������� )�! +

��� �������%

������ �F� !�� ���� �$ �!� �!����������� �$ ������

8�0 ���� &�H �$ �!� ����� � !��� ���� ����� ��$�����

��� ���� �!�� &�H �$ �!� $��������� ����� !��

����������� *�% �>�% =!�� ���)� � 376/��������

������ �F� ���� !�� ���� ����� )�! � ������ �������/

��� ���� �!� ���� ��� ���� ��� �!�)��% + ���� )��� �$���

�����,�� �� �!� ���� �$ ���� ���������� *�% �4�% *��+

������ )�� �$��� ���� �� �� � ������ ���� ��� �!���

���� )��� ��� ��)��� ��������� )�! �����������0 � �

��� (��)� )!��!�� �!��� ������ �������� ��� �������

�$ ��5����� + ����%

������ ��� )�� �!� ���� ������ �!�� � !��� �

�����������/������� �!�������% 1� ���4� ���� �$ �!�

����� )��� $��������� )�! �� ����������� *�% �G�� ���

"��� �� 9�������� �$ 7��F8F ��� 7��F8F �������� ������������ *��+ ���� �� ���/*��+ ������%1% 7��F8F ����� $��� � �������� �!��� )��� �����$����� $���376/ ����� �� 376/������� �����% C������ )��� ��(�� �� �!����� ������� �$��� �!� �����$�� ��� ��������� $�� �����������%�% C)����� ����� ��� ����(�� ����� )��� ��(�� $��� � ���������������� �$ )��/���� ����� <1���� �� 7��F8F ��� ��������� $�������������%4% 9�������� �$ 7��F8F ����� �������� �������� �������%6"��� ������� �$ ����� )��� ������ ��� ���! ����% =��/����<1���� ���)� � 376 ����� ���� ��� 7��F8F ����� � ��� ���7��F8FB�����&�$��+ ����� � ��� F�� 7��F8FB�����&�/8� ����� ���� ��� 7��F8FB�����&�/��� ����� 8 ��� &�� 7��F8FB�����&�/�&8 ����� �� ������ ��� 7��F8FB�����&�/�F� ����� �� ��� ��� )������)� � 376/ ����� ����� ��� �����$����� �� ��!�� 376/ ���������� �� �� 376/������� ����� �� �� ������� ���� �!������% 4��� ������� )��� ��(�� �� � ! �$��� �!� �����$��%

4��������� $��+ �-����� �F�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 6: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��H �$ �!� ����� !�� � ������ ����� �$ ����������

���������� ���� ��� �!�)��% 1� ���4� ���� �$ �!� �����

!�� � ������ ����� �$ ���������� ���������� *�% �:�%

���! �� ���4 ��� ���4� �!� ����������� �$ ������ ���

)��� ������ �!�� ���� �$ �!� ����������� �$ ������� 8�

��� �F�% '�� ���(�� $������ �$ ������ ��� �� ���4

)�� �!� ����������� �������� �$ � ������ ����� �$

���������� ��� �$ � ������ ����� )�! �� ����������%

C���������� *��+ ������ ����� ����� � �������� � �!�

������ ���������� ����� �$ ������ ���� ��� ���������

������ *��+ ������ )�!��� ���� �� ���� ����� �

�������� � �!� ������������ ����� *�% �?�% .� ������

�!�� ��� ����� �� ������ *��+ � �!� ������ ����������

������ �$ ������ ��� )�� ��� ������ � �!� ����! �$

"��� 4� ����� �$ �!� /�- 0�%��� *��+ �!���/��������� ���������% .!� </������� ��� ���� ���� )��� �������� ���� �� �!� ���������������� �$ ,� .�����%&�� *��+% 1�� �!� ��������� ��������� ��(���� !�� ��� �!����� )��� �!� ���� �� ,� .�����&%�� *��+ � ���� �!���!��� � �� >� � /�- 0�%��� *��+%1% #�� ������ �$ �!� /�- 0�%��� *��+ �������� ��������� �!�)�� �)� ��)� �$ �!� ��������� ������� �8�� ���������% .!� �������������� ��� �!�)� � ��� ��� ���( $���� ��� 2?3 � �!�)� � �����/$���� $���% >�� >� ��� ���� .� ��� �������%�% C��$��� ������ �$ /�- 0�%��� *��+ �������� ���������% .!� ������� ������� ��� �!�)� �� ���(%

�F� 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 7: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

�!� ������������ )� ���� � ����� � )��/���� �����

� ������� )��/���� *��+� )!�! ������ ���� �����������

� � ������ ����� �� ������� ��������� ?� �� � %� �&&8�%

*��+ ������ )�� ������� ���� � �!� ������ ����������

����� ���� ��� �!�)��% .!��� ������� ������� �!�� ������

��� )�� ��� �� ������� ���� ����� ���� � ���� ���� �����

��� �!�� �!� + ��� $����� � ������ ��� ����������

�$��� �!� ��������� �$ ���� �����%

/&���%����1����� �&� �������# ��&� �-�����

.� ����� �!� �!������� �$ �!� �������/���!�� ��������

)� ������ �!�� � ������ �IG���� �������� �!� �����

��' �������� )�! �!� 3� 4 ��������% .!� ��������

������� )��� ���5������ ��� )��/���� ����� <1����

� �!� ������ �$ ����� �� ������� �!� � ������� �$ �!�

������ �������% .� ������� �!� ��$���� �$ �!� �������/

���!�� �������� )� �������� �!� �$$��� �$ �!�� � �������

$��� ������ �IG��� )�! �!�� �$ )��/���� *��+ $��� �!�

���� ������% J����� ������� �$ )��/���� *��+ � ����/

��� ������� ���� ���������� ��� ������� �����������

�������� �� ��/���� )�!� � ! �� ������� ���������

?� �� � %� �&&8�% 4��� ��������� ���������� ��������

��� )�� ���� �������� �$��� F ! �$ ������� *�% 8��%

6 ������� �$ �!� $��� �������/���!�� ������� �!���

���� ����� �� �$$����� ������ *�% 84�*�% =������

��� ������� �!�)�� �!�� �!� � ������� ����� �$ �!�

"��� 5� 3!������� �$ �!� �������� ������� �7��F8F% 7��F8FB�����&�$��+ 1 ��� ���7��F8FB�����&�/�&8 4 ��� ?�� 7��F8FB�����&�/8� 6 ��� *�� 7��F8FB�����&�/�F� 2 ��� >�� 7��F8FB�����&�/��� 9 ��� G�)��� ���)� � 376/ ����� ��� �����$����� ����!�� 376/ ����� 1� 4� 6� 2 ��� 9� �� 376/������� �� ?� *� > ��� G� �� ���4% 3������)��� ��(�� 8%F ! �$��� �!� �����$��%: ��� -% 7��F8FB�����&�/��� )�� �����$�����$��� 376/ ����� �� 376/������� ��� ���)��� ���4 $�� 8%F ��� �8 ! �����������%

0� �� -� 3!������� �$ ��' �������%

������ -������ 3!������� � 7��F8F '������������ �!�������

=��/���� �������=. *��+ =�� ���� ������� ��/���� �����������?##F&111 C� =�� ���� ������� ��/���� �����������#6#��F111 >� =�� ���� ������� ��/���� �����������6#��811 >�/>� =��/���� ������� ��/���� �����������?36�&�131 >��/C& =�� ���� *���������?3C-6���13C-1 C&/C�� =�� ���� ������� ��/���� �����������66##���1111 C����� =�� ���� ������� ��/���� �����������

#�������/���!�� �������668�11 >� *��������� )�! ����������� <?62#���121 >F ?��� ��� � ������ ���������� )�!

� ������ $����������?��� ��� � ������ ����������

#C9.?�&81C9.1 >� *��������� )�! ��� (��� *��������� ��� �!��� ����� �$ ���� ����������?6�F�11 >&/C8 *��������� )�! ����������� <?

?������/���!�� �������2��&C C�/>� ?������/���!�� ?��� ��� � ������ ����������?K#���1K1 >8 ?������/���!�� 4���� ��� $���������% C��!��� �!���� � �!� �����6?#���111 C�/>& ?������/���!�� *��������� )�! ��!� �)���6K?6��81K11 >�� ?������/���!�� *��������� ��� �!��� ����� �$ ���� ����������

4��������� $��+ �-����� �F�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 8: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

�������/���!�� ������� )�� ��������� )�! �!�� �$ )��/

���� *��+ $��� �!� ���� ������ ���� ��� �!�)��% .!�

�������� �!�� �!� ������� �!������� �$ �!��� �������

)�� ��� �!� ������ �$ ������� ������ ������%

������ ��� �������� $��������� ����� )�!��� ���

����������� *�% 86�% >�)����� �!� $������� ��������

� ������ ��� )��� ��� �� �����! �� �!��� �������� �

�!� *��+ �������� ����� 7��F8F0 �!�� !�� ���� (�(�

���� �!�� ���$���% ������ ��� �������� !�!�� �����

�����! $������� *�% 8?�% .!��� ������� ������ �!��

������� ��� ��� ��� �!� �!� ������ �$ ���� �����

)!�� �!�� ��� ����� �������% 9�����$�����������

��������� �������� ������ $�� �$ *��+ ������ �!����!/

��� �!� ����� ��� �!�)��%

.!� � ������� �$ ������� ��8 ��� ��& ��������

� ������ ����� �$ ���� ���������� �� �!� ��/�����

� ��� �� �!�( �������� )�! � ������ ���� )��! �$

������� �� *�% 84� *� > ��� G�% 6 ������� �$ �����

� ������� ������ ��8 ����� �$��� ������� �������� �!��

��� �!� ����� ����� ��� ���������� ��� )��� ���(�� �� �

���� ���� ����� �$ ���������� ��� �!�)��% *�� ������

��&� � &FH �$ �!� ����� !�� � ������ ����� �$ ����

����������� ��� �!� �����! �$ �!� ���������� ����� )��

����������� ������ �!�� $�� ������ ��8 ������� *�% 84

��� *�% 9�����$����������� �$ ����� ����� �������

������ ��& �������� �!�� �!��� ����� !�� ������ ���

�!�� *��+ ������ ���$��� �� �!� ���������� �����

)�! ���� ����� *��+ �� �!� ������������ ���� ����

*�% �6�% =� �!��� � ���� $��� � )!�! � ��������

)��/���� ���� �������� � + ��� )�� ������� $��

��������� *�% �6�%

������ ��& !�� �!� ���� ������� �� �!� �����������/

������� ��'7� ������ �$ �� % �% .!� ������� �������

������� �!� 2.3 ���� ��� 2.3��� ������ �$ �� % �

*��+ �� ��� ������������% ������� ��& ��� ��� ��! !���

�������� � ������� �!�� ��� �������� � �!� *��+ �������

"��� 6� 9����������,���� �$ *��+ � 7��F8F �������� ������� �&8� 8�� �F� ��� ���� ������������ � �����&� 1�?� �� � <1����� ������� ������ ��& $��� ������ �IG��� 6�%1�4% 4���� )��� ���)� � 376/ ����� ��� �����$����� �� 376/������� ����� �� ���) $�� � ! 1 ��� 4� �� ������!� ��%?% 4���� )��� ���)� � 376/ ����� �� ���4 ��� �����$����� �� 376/������� ����� �� ���) ������!� �� ���� �����������%6% <1����B�IG���/��& )�� ���)� � 376/������� ��� �!�� ������ �� � ����� ������ ��& � ����� ����� $�� F !% *��+ )�� �����,�� ������$����������� ��������� ���� �� �$$���/���$�� ������ ������ *��+ ��� *9.4/���5������ ��������� ������% *�� ���! ���� $�����$� �� ��!� ��� �!���/�������� ������ �����$����������� ����� ��� �� ������� �$ �!���/��������B�����$����������� ����� �$ �!����� $���% 1�� ����� ��� �� �!� ���� ����$�����%

�F� 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 9: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��������� �� � � ����� ������� )�! 2?3 *�% F� -�A)� ���

1���� �&&8�% .!���$���� )� ������ )!��!�� �!� ����/

� ������� �$ ������ ��� ���$����� � ����� �!�������

�� �!�� �$ ������ ��& ��� $���� �!�� � ��0 � ��������

����� )�! � ������ ����� �$ ���� ����������� *�% 89�%

���������

'�� �$ �� ������� ����������� � �!� ������ $���

)��� ��������/���!��� $��� )��� �������/���!��� ���

�!� ������� � !�� � )��/���� �!�������% 9������������

�!� ���/)��/���� ������� )��� ���(�� �� �$$�����

������ �$ ���� �����% 1$��� ����������� �$ ��� ��������

�!� �!���/��������� ��������� �$ ,� .�����%&�� *��+ )��

����!��� ����)�� �� �� �������� �!� ������ �$ ���

�������� �� �!� *��+ ���������% ��������� �������� �$

/�- 0�%��� *��+ ������� �!�� ��� ��� ���������/�!�����/

��/������ ������� !�� �������,�� ������� � ����� ��

�!� ���$��� �$ �!� ������ *�% ��% .!� !�! ���� �$

���$��� �������� ���� ���������/�!�����/��/������

���������� � ����� �� �!�� ������ $�� ����� ����

=������ �� � %� �&&��% .!� ����� ���� ������� �!�

����������� ��� �!�������,���� �$ � �������� ����� �$

*��+ � )!�! ��' � ������� � ���������� � � �����/

������ ��������% =� !��� �!�)� ��������� �!��

� ������� �$ ���� �������/���!�� ������� �$ *��+

��������� �!� ������ �$ ���� ������ ��������� �!��

/�- 0�%��� *��+ � ��"���� $�� �!� ������ �$ ����

����� �� �!�)� � ��!�� ������ ?� �� � %� �&&8�% .!�

�!������� �$ *��+ �������� ��������� !��� ���$���

�!� !����!���% 9� �!� �������� �$ ������ �!� �����

� ������� *��+ ������������ �� � ������������ ����� ��

�!�� �$ � )��/���� �����% ������� �!� ������� �$ *��+ �����

� ����� � ����� � *��+ ���������� :���� �� � %� �&&8��

�)����� ����� )��� ������ �������� �$ *��+% .!� ����)�

�!� ���� ����������� �$ )��/���� *��+ )�! ������ $����%

:�%������ � � ��

.!� $��� �������� ������� ����������� � �!� ����� !��

�!��� ������ �!��������% ������ �&8 )�� ����� ��

����� ���� ����� ��� !�� ����� ���$��� ����������%

������� 8� ��� �F� ����� ����� ���� ������ ��

��� �������� �� ��� !�� ����������� �$ ������

����!% ������ ��� !�� � ������ ������ �$ ��! ����

���������� ��� ������ )�!��� ����������% <��� �$ �!�

"��� 7� 3!�������� �$ )��/���� <1����/�- 0�%��� ����� ������� �������/���!��*��+ �������%1% <1����B�IG���$��+ ���)� � 376/������������%�% <1����B�IG���$��+ ���)� � 376/������������ ��� �����$����� �� 376/ ���������� $�� F !%4% <1����B�IG���/��& ���)� � 376/������� ����� ��� �����$����� �� 376/ ����� ����� $�� F !%?% <1����B�IG���/���%6% <1����B�IG���/��� ���)� � 376/������� ����� ��� �����$����� �� 376/ ����� ����� $�� F !%*% <1����B�IG���/��8 )��� ���)� � 376/������� ����� ��� �����$����� �� 376/ ����� ����� $�� F !%1�� ������� ��� �� �!� ���� ����$�����%2�G% .6� ������� �$ )��/���� <1���� 2��<1����B�IG���/��& >�� <1����B�IG���/��� 9� ��� <1����B�IG���/��8 G� ���)� �376/ ����� ����� $�� F !% .!� ������������ � �� � 2� ��� 9� ��� F�� �� � G� ��� >�%

4��������� $��+ �-����� �FF

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 10: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

�������� �������� !�� � �!������� ������� �� �!�

�������� �$ *��+� ������� �!�� �!�� ��� ��� ���� �������%

*���!������� ��� �!� ������� )��� � ������� �� �!� ����

����� �� )��/���� *��+� ������� �!�� �!�� )��� �����

��� �(��� �� � ��������� $�����%

.!� ����� ���( �$ ������ �&8 ��� � � ������ � ��

����� �� $��� + ����� )!�! ����� � ������ � � �����

���( �$ $������� � �� ����� �� �����,� �� � �� �����

�� �������,�% =� �!�( �!�� ������ �&8 � ���� ������

$�������� ���� �� ������� ���� �$ �������% 4����

� ������� ���� ������ �&8 !�� ���� ����� ���$���

���������� ����� �!� $�������� ��������� �!�� ��

� ������� !�� �$$���� �� �!� ��������� �$ �!� ���� )���%

4���� � ������� ��! ������ �&8 ��� )��/���� *��+ )���

���!��� $���������� ������� �!�� ������ �&8 !�� �

���!� ������� �$$���% *������ )!�� ������ �&8 )��

� ������� �� � !�!�� ����� )�! )��/���� *��+� ����� )���

������ $��������� )�! �!��� ����� �$ ���� ����������

.��� ��% ������� �&8 � ������� ���� �!� ��� �$ �!�

������� !�� >�� ��(�� �!� 2.3��� ����� ��� �!� <4

����� �$ �!� <.# �����% .!� ������ � $�� $��� �!�

2.3/���� ���(��� ������� �!�� �!� ������� �������

��� ��� ������� ������� � 2.3 ����� )!�! � ��"����

$�� �������,����%

������� 8� ��� �F� )��� ���(�� �$��� �!� ������ �$

���� �����% .!� $��� �!�� �!� ����������� � �!���

������� )��� �$ �$$����� ����! ������� �!�� ���� �����

����� ������ �� ��� �����% 9� )��/���� ������ + ���� ��� �

�������� ���� �!� ���� ���� ������ �$ ���� �����

;�����(�� �� � %� �����% 1� *��+ )�� ��� �����,�� ��

���� �$ �!� ���������� ���� � ������� 8� ��� �F�� � �

�(��� �!�� �!� + ���� �������� � �!��� ������� ���

�������% .!� � ��������� )�! �!� ������ �����

������% .!� ������� �$ �!� + ��� ����� ������ $��� �

��$����� � ��������� )�! ������� ��"���� $�� ����,/

�� �!� + ���� �� *��+�*��+ ��������� ����� � ������%

-���/�$/$������ ������� �$ ������� ���� ����� ��������

���! �� *��1� 9� : ��� ; � �� % �� ���� ������� ��������

���������� $��������� ����� 1������ �� � %� �&&�0 7�

�� � %� �&&8�% .!��� ������� ��� � ��"���� $�� �!�

���������� �$ ��� ���������� �� ����,���� �$ �!� +

���% ������� 8� ��� �F� ��� � ��$���� � ���������

)�! ���� �$ �!��� �������% 9� ������� �!��� ��������

��������� ������ 8�� ��� $��� ���/$�������� + ����� ��

���� ���� )��� ������� �� ���/���������� ����%

������ ��� )�� �!� ���� ��� �$ ��� ������� �!��

� !��� � �����������/������� �!������� � �!� �����

������ ������4�% 1� ���4� ���� �$ �!� ����� )��� �����!

��� $���������� ������� �!�� ������ ��� � ����� ��

����� ���� ����� �� ���4� �� � ����� ��������� �$ �����

!�� ���� �����������% 1� ���4� ���� �$ �!� ����� !��

���� � ������ ����������� ��� � ������ ������ )�!

�� ����������� )!����� � ����� ���������� �$ �����

)��� $��������� )�!��� ��� ����������% .!� ����

����������� � ������ ��� �� ���4 ������ �!�� ������

��� $���� + ���� �!�� ��� ������� ���� ����� �!����!

���� �$ �!� ������� �� ������ ������� �!� $��� ������ �$

����������% *��+ )�� ���������� ����� $��� �!�

���������� ������ ������� �!�� �!� + ���� $����� �

������ ��� ��� ������,�� �� �!� ��� �$ ���� �����% .!�

$��� �!�� *��+ )�� ������ �������� � �!� ����

������������ ����� �$ �!� ����� �������� �!��� � ����$�

������ ��� � ��� ��� �� ����� ���� ����� �� ���4% =�

!����!��,� �!�� ���� ����� )�� ������ ����� � �!�

�������� ������� � )��/���� *��+% 9$ �!� � �!� ����� �

����� �!��� ���� �����,���� ��� �������,���� ��� ��

� ������ �$ �!� �������� �$ )��/���� *��+� ������ ��� ���

������� �� �������,� �� �!�� �������� �� $��� � ������

����� �$ ���������� ��� � ���������� $�������� ���� �!�

���� ������ �$ ���� �����% .!� � ��������� � �!� $���

�!��� )!�� ������ ��� )�� ����� ������� � � )��/����

������ ��� �!� ����� !�� � ������ ����� �$ ���� �������/

��� ��� �� � ������ ������ )�!��� �����������%

.!���$���� � ������� �!�� ������� ��� �!�� �!� ����

�$ *��+ �� ��! ����� ��� �������� �����%

'�� �$ �!� ������� ������� � ������ ��� � � !�!��

��������� ��������� �� ������ ���� )!�! � ������� �

��� �!� F� ��' ��"������ )� �!��(��% .!� �������

��������� �$ *��+ ������� �!�� ������ 6��� � � �����

������� )�! �!� ��������� ���� -�A)� ��� 1����

�&&8�% .!���$���� � � �(��� �!�� ������ ��� !�� �������

2.3/���� ���B�� !�������� �������% .!� $��� �!��

����� $��� ������ ��� )��� ��� �� $��� ���� �������/

���� �������� �!�� ������ ��� � ��� �� �������,�%

1��� ��� #��� )�� ���� ������� �� ������ � ������

���% #��� !�� ��� ��� �������� � 2.3 ���� ��

!��������� ��� ��� ��������� ����� ������� �!�� �

��������� ��� �$ �!� ���$��� �$ �!� ������ �� �!� ���� �$

�!� 2.3 ���� ���% 4���������� �$ ���! ����� ������

)�� � ��"���� �� �������! ��)��� �!� �$$��� �$ �!�

�)� ������� ��������%

������� � � ��

'�� �������� ����������� � ���������� �!� �������

�!�������� � �!�� �!� )��/���� ������ �$ *��+ )��

� ������� $��� �!� �!�������� �� �!� ���� ��� ��

�!� ������� ������% 9� ���� ���� � ����� �!�� ���� �$ �!�

�!������� ������� $�� �!��� ������� ��� ������ $���

�!�� ����� �������% <����!������ � �������� �!��

�!�������� )�! �!�� �$ )��/���� *��+ ����� �������� �

� ������ �� ��� ���� ���!� ��� �!�� ��$����%

=��/���� ����� ����� ������� ������ ��& !�� �

�!������� ����� �� ����� ����� ������� ������ ���0

���� �$ �!� ���� ���� )�� ������ ����������% >�)�����

�!� ������������ ����� )��� �!��� ��� ���$��� �� �!�

���� ����% .!� � ������ ������� �� )�! ������ ���

� ������� � )��/���� ������ )��/���� *��+ )�� �������

�F� 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 11: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

�� ����� ���� �����% 9����������,���� �$ ����� ����/

� ������� ������ ��& �!�)�� �!�� *��+ )�� �����,��

� �������� � �!� ���������� ����� ������� �!�� ��! �!�

)��/���� ��� �!� ������ $���� �$ *��+ )��� ����������

� + ��� $�������% -(� 6���� 2��& ��� � �!� 2.3

���� ��� ��� �������� �!� ���������% .!��� � � �(���

�!�� ��! �������� !��� ������� �!� 2.3/���� ��

!�������� ������ �$ *��+%

������� ��� � ������� �� �!� ���$��� �!�� � �!���!� ��

������� )�! �!� 2.3/���� ���$��� �$ �!� �� � *��+

������� � �!� �����$������� ��� ��������� � 2.3

!��������% .!���$���� ������ ��� ��� !��� � ��$��� �

*��+�*��+ ��������� ��� � 2.3 !��������% =!��

������ ��� )�� ����� �������� �!� ����� � !��� �

�����! $��������� �!������� )�! ��!� ����� ��� *��+

�������� �� $��� ������ ���������� � �!��� �����

���� ��� �!�)��% .!� ������� ���� �!��� �������� �!��

� ������� �$ ������ ��� ������� �!� ��������� �$ �!� ����

)���� �� � � �$$����� ������ $��� ������ �&8%

'������������ �$ ������ ��8 � �!� �������� �$ )��/

���� *��+ ���$����� � �!������� ����� �� �!� �!�������

���$����� � ����� ������� �$ ������ �&8� ���������

�!�� �!�� ��� �$$��� ����� ������� �$ *��+ $������%

.!��� � � !�!�� ���� ����� ������� !�� >�� )!���

������� ��8 � �������% 4!����� ���$���� ���� ��

�������� ���� � ������������� ����������� ��� �!�

������ ��� � ���������� � *��+������� ���������%

9� ���������� )� !��� �������� � ��� �$ �������

�!�� )�� ����� �� �� ������� � ������� ������� �$

*��+ $������ �� �$$����� ������ �$ ���� �����% *��

���� �$ �!� �������� � �!���� � ������ �� ��(�

����� ���� ��� �������� )�! �!� ���� �!�������%

1� ������� �$ �!� ��!����� ��$���� �$ �!��� �������

������� )�! ���������� ������� �!���� ����� �����������

��)��$��%

8/&�������� &��������

��%����� �������� � ������� ����-� ��� ��;�&

%�������

/�- 0�%��� %���%���-� ������ )��� ��������� �$ �����<1����% �� % � ?>F� )�� ���� $�� ������ ��� ���������$�����% �� % � C��/� )�� ���� $�� �!� ���5���� �����$���$ ������� �� /�- 0�%���% /�- 0�%��� )�� ���)� �� ���4� ������������� � ����� 376� �����% *�� /�- 0�%�������� � ��� )�� ���� �� � ������������ �$ �� �� ���������������� �� � �� ����� (������� �� �� �� ����� �!���/���!����� �� �%F �� ����� ����� �� �%�H ��� ������� ���%�H% 3������ ���� � �!� ����� ��� ������� � .��� �%

/����-%��� � 3� ��#��������� $��+ ������ ��� %�

���%&���1����

.� ��������� � ����� � )!�! � ������� �$ ��' � ����������� ������ )� ������ �!� </������� ������ �$ ��' ��'�<��/� ����� �!� ������� �$ �!� �����/�������������� 33� 4 �����,�!� �� � %� �&&�� � � ������ �!�������� �������� � /�- 0�%���% .!� ������ ��G�� )���!�� ��������� ��� /�- 0�%���� $����)�� � �������� �$ �!�(������� ��������� ���(�� �� �!� ������ �� ������ $��!��������� ���������� �$ �!� ������ ��� �!� �!����/����% .!��� ��� �)� ���� �$ !������� ��)��� ��G� ����!� /�- 0�%��� �!��������� �!� ��' ����� ��� �!� 3� 4�����% 9$ ��G� �������� �� �!� ��' ������ �!� ����� �����/���� ����� )�� ������ � � ��������� � )!�! ��' � ����� �!�������� �$ �!� 3� 4 �������� ��� ��'�<��/ � ����� �!�������� �$ �!� ��' �������� *�% �1�% =� (��) $��� �������)��( �!�� ��'�<��/ � � ���� ������ ?� �� � %� �&&8�% .!��� $��G� �������� �� �!� ��' ������ ���� ���)�! �!���� � ����� ���������% 1$��� ���������� �$ ��G� ��� )��/����<1����� �FH �$ �!� ������� )��� $���� �� � ��������������% .)� �$ �!��� �����/��������� ������� )�����(��� ��� �!� (������� ��������� ���(�� �$ �!� ������)�� ���������� ��� )��/���� <1���� �� ��� � ����� ������

0� �� 3� 3������ ���� � �!� �����%

3����� ?�������� �� ����������� C����� �� ��$������

�IG��� ?������� �$ ���#��4C )�! �!� 3� 4 �������� I% G�����IG���$��+ ��' ��������� � �!� 3� 4 �������� ?� �� � % �&&8��IG���/ ������ L� ������ ��' ��������� � �!� 3� 4 �������� .!� ������>��%� 1 � ( ���>9�����999 $������� �$ ��' � �C:� ;�����(�� �� � % �&&�������&�$��+ =��/���� ��' � �#:����&� :���� �� � % �&&8������&�/ ������ L� 1 �%� ( ���>9� %� $������� ��������

�!� ��' �������� $��� �>��%� ��� � �%F ( %9�����999 $������� �������� ������ ��'$��� �IG��� ������ � �#:����&�

.!� �����

�#:����&� -�)/����/����� ������� 9��3� .��# 2��� ��� C!���� �&&���G���� 1 �%�8 ( 8�� 9� %9 $������� �������� �!� 3� 4 ��������

� �C:�% 1� %9 ��� )�� ��������� �� �!� 1.2 ����� ���G% ������(

�G����<+ 1 �%�8 ( %9����>9 $������� �������� �!� </���������� ���� ���� �$ ��' $��� �>��%� � �G����

.!� �����

��G� 1 �%8� ( ����999����>9 $������� )�! �!� 3� 4�������� ��� </������� ��� ���� ���� �$ ��'$��� �G����<+ ������ ��� ��2C.�8

.!� �����

��2C.�8 1 �������� �$ ��2C�8 �!�� ������� � #:� ��= $���������� �!� �)� ���9 ����� ���� ��� �������� � /�- 0�%���

�% #% :% 1����

4��������� $��+ �-����� �F�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 12: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

��(������% '�� �$ �!� ������������ ������ )�� ���� �����"���� � �������� ��� � ������ 7��F8F%*�� ���� ����� ������� �!� 33� 9��' ����� )�� ���)� ��

����/��� �!��� � 376 ����� �������� (������� ��� �����% C)����� ����� )��� ������� � -��� ������������� �����$������ 6����� ��� 1����� �&��� ����������� ��� 376 ����� �������� ��!�� ����� ��������� �� � ������� '? �$ �%�% C������ )��� ��(�� ���$$����� ��� ����� ��� ������� ����� �!� ���������% *������������� �$ �)����� ��� ����(�� ������ ��! �)�������� ����(�� ���� ���� )��� ��������� �$��� -��� ������������� �����$������% .!� ����� )��� )��!��� ��5����� ���!� ���� ���� ������ ��� ��������� $�� �����������%

4��������� 2��' ���-%�-�� ��� ���

.!� ��������� �$ �!� </������� ��� ���� ���� �$/�- 0�%��� *��+ ������� �!� <.# ����� ��� ���� �$ �!������� ������ )�� �������� ���� �� �!� ������� ��������� �$,� .�����%&�� *��+ ���� 9<C92>.99 ��$�)��� &F%� �����B�C9�%.!� ������ ��"������ �$ /�- 0�%��� ��' ���,� .�����%&����' )��� ������% 1�� �!� ��������� ���������� �$ ,�.�����%&�� *��+� � ���� $�� >�� )��� ��������� �� � ������������� ��������� ����� ��� �������� � �!� ��������������% .!� ���� ��)��� >� ��� >� ���� ���� �����8��� �!� ���� ��)��� >& ��� C8 ���� ���� �F���F&���!� </������� ���� ���� ����� ��� �!� 4/������� ���� ���� ��&����� )��� ��� ��������� ��)��� �!����)� ������� ��� )��� ���������� ���� ������ ���,���� >�A ��5� ��� *��(���� �&&��% 1�� �!� ���/�!�� ������� )�����5����� ���� ������ ���,���� �� � ����������� �$ �����!�� �%� ���� �� 6C** $����$���%

����#����%��� �-���������

C��/������� ���������� )�� ���$����� ���� �!� ;�(/4!���� ���/������� ���������� (� C����������% '���/���������� )��� ������� �� ������ &��� ���������� �$������ �� ��! ���� �$ �!� ������� ��� ��� �� ������ ���������� ���% ������ ������� )��� ����$�� � ����������������% .!� ����� ������ ��' ����� )��� ��"������ �����$� �!� ��������� �!����� ��� ���� ��� �!� ������� �$��������� ��������%

>����� � $ �����- ������ ��?-��%��� ���

���-�0 �����

2������ ?<1 ����������� )��� ���$����� �� ���������������� 1����� �� � %� �&8&0 ���� �� � %� �&&��% ?<1��"������ �$ ��' ������� )�� ������ ��� )�! �!�.!����C�"������ ��� ��������� ����� ��"������ ���� (� 1����!��� ���� !��$ �!� ����������� �������������% �IG$��+ ������ ?<1 ������� ��� )�� ���� ����������% *�� �$$����� ��' ������ )��� ���� �� ���������!� $��� ��' ��"����� � ��� ������� �����������% .!� ���������� )���@ $��+�&�� F �/1.42242124144.42142242/� �0$��+���#��� F �/4.22..42211.21421.4122/� �0 $��+88F�F �/21.22241122421.21.2224/� �0 $��+��"����� F �/42.2244..4242444212442/� �0 ��� $��+�8�&#��� F �/11444422421212.424112/� �% 3���� F��� ����� )��

���� $�� �!� �������% C�"������ ���� )��� ��� � �!�9������� $�� ��������� ��� 4������� ������ �� 9�����I�������% 9����������� )�� ���$����� ���������� ��������� ��������� ;�����(�� �� � %� �&&��% 1��/*��+����� ����� )�� ���� �� � ������ �$ �@����� ��� �!���������� ������ ���� ���/��� 9�2 >����!��������!���� ���� ���5����� 2�� �#-� )�� ���� �� �@�F ���%

���-� -���%��%� ��� ��%��%��

*�� �����$����������� ���������� ����� )��� ����� �������$��� �������� �� � $ ���� ������� �������� $��� ���������/���� �%FH ����$�������!���� �� �� <�3'�� �> �%F� ���������� �� ���� ����������� $�� �F �� $����)�� � �� ���� ��% 4���� )��� )��!�� �!��� ���� � �� 3�C% .!� $��������� )�� ��������� � ��� �� �$ 2.6 F� �� �������� �� ��.��� �> �%F� �� �� 6?.1�% -���,��� )�� ����� �� � $��������������� �$ � �� ����� ��� �!� ����� )��� ��������������� �� ���������/������ �����% 1$��� � ��� �!� � ���� �����)��� ��������� ��� �!� �����!�� ����� )��� ����)�� �� �������������% 4���� )��� ��!������� )�! 3�C� ���(�� � 3�C�������� �H �C1 ��� ������� � � !��� �!���� �� ��������������� $�� �F ��% 4���� )��� ������� ������!� )�!�$$���/���$�� ���/*��+ ������ ������ ������ �@���� �3�C �������� �H �C1� )��!�� �� ���� )�! 3�C ���������� )�! ���� ���/��� $��������� ���!�������� *9.4�/���5������ ��������� ������ �� � ������ �$ �@���$�� � !� ��� )��!�� �� ���� )�! 3�C% 4���� )��� �������)�! C��)*��� ��������� 3�����%-�!� �!������������ ��� ��$����������� �!������������

)��� ���$����� �� � <(�� 6����� 68�� ��!� ��������� )�!� ���� 3��� 1�� �� �5�����% 9����� )��� �������� )�! �3������� 9���������� ������ �!����/������� ����� ��������� �!� �6.1�'#3> ����� ��$�)��� ���(��� K%�% .������/��� �������� ��������� )�� ���$����� �� ������� ���/������ G���(����� ��� ����� �&&&� ���� � G��� G6�/������������ ��������� �� �� (K% 4���� )��� ������ )�! �%FH������ �������� ������� $�� F ��%

�����(���������

=� �!��( ������ �$ ��� ��������� $�� ������ ������ �$ �!����������� ��� ����� 3���� $�� !��� )�! �!� �����������������% =� )���� �(� �� �!��( ��������� ����)��� $�����!�$�� �������� ��� "������� ���� �!� ������ �!���/�����% .!� )��( )�� ��������� � � <������ C�����*�������� 4����� 1)��� �4�/&���&F8� ��� � <������9�������� �$ >����! ����� 2�F�&8� �� 7%K%�%

2���������

1������� C%2%� �� 6%� ��� -��(��!���� G% �&&�� *��+ ���$������� � $�� �������% � ��%���� -67@ �8����88�%

1������� C%� 4��� 4%� ��� -��(��!���� G% �&&��� *��<� � ���������� �� �!� ������ � ��%&���%&�� % �% , ,�%�0� 34@������&%

1������� C%2%� 4��� 4%� ��� -��(��!���� G% �&&��.���������� �!$� � �������� )�! �� ��'7� .�� ����������� ���� ������� �$ *��+ �����,���� ��� ������ �!��

�F8 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 13: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

�!� + ��� � ��"���� �!����!��� �������� ��� �������������� ����� ���� ���� ���������� !�� ������%� ��%���� -69@ �������8�%

1������ *%�%� ������ #%� :������� #%6%� ������ ?%� C�������G%2%� C��!� G%1%� ��� C���!�� :% �&8&� /-����� 8��% � ��, �%- �� �� ��� <�) 7��(@ G�!� =���B2�����%

�� 6%� ��� -��(��!���� G% �&&�� *��+ ��� ������������������ )�! ����� � ��%&���%&�� % �% ��-�� .4�@�������%

�� ����� 3%� 4�������� #%� ��� #��!$���� -% �&&�� .!��������� ������� ����/����� ������ *��+ � � 2.3���% ��-�� .49@ �F���F�%

����!��� ?%� ��� .!������� 4%�% �&&�� 2.3/����������������,���� �$ ��%&���%&�� % � *��+ ������ �� $���������% 8�% �� $%�� �%� ��$ 9-@ F8���F8��%

����� 7%K%� ��� G���(������ #% ����� .!� �����!� �$������ �$ /�- 0�%��� ��� ����(�� ������% 9� 8�@�����%���� ������ ����� 7%K%� ��� C!�(���� -%G% ����%=��!������ ?4@ 1������ C����� $�� ���������3����� ��% �&�����%

����� 7%� ����,���(� 2%� ��� C!����� -% �&&�� .!�� ������� �$ ��������� ����� ���� �$$���������% $��-:�� ��%&�� 5.@ ��&��F�%

��������5��� <%� 1������� �%6%2%� :��(� 1%>%G%� K�������%� ��� <������� <% �&&8� -����,���� �$ ���� ����������� *��; � �����$����������� ��������� � ���/�� ��� �������� ����� �$ ��%&���%&�� % �% � ��%���� -7�@ ���������%

4!��� G%4%� =���� ?%C%� 2!��� G%/�%� ��� ���()�!� G% �&&&� C����� �����,���� �$ *��;� �� �������� ���� ����������� � ��%&���%&�� % �% � ��%���� -7-@ F���F��%

?�� <%� ;�����(��� 6%�%� C��(���� �%� G%� ��� ����� 7%K% �&&8� ?������ 4/������� �������� �$ *��+ �!�� �$$��� ������ �� �����,� � /�- 0�%��� ��� �� ��������� )�!*��1% , ,�%�0� 36@ ��F������%

6��(���� >%3%� .������ ?%=%� .������ :%� ��� ����!��� ?% �&&�� �������� ���� ����� ������ *��+ �������� ��������$������ �!���� ��� ������� ���������� !������� �$����� ��������% 8�% �� $%�� �%� ��$ 9.@ F�&�F��%

6������ �%� ��� 1����� <% �&��� 6�������/���������������� $��� /�- 0�%��� %���%���-� ����(�� ����)����� �����% � ��%���� -.3@ �&�����%

2!��� G%/�%� =���� ?%C%� 4!��� G%4%� 7����)� G%4%� ������()�!� G% �&&&� -����,���� �$ *��- �� �!� ��%&���%&��% � ������ ���% , ,�%�0� .-@ ��F����%

2���� G%=%� ��� C!����� -% �&&�� 1 ������������������������ /�- 0�%��� $�������� �������� � �������� � � �

��!����� ��� 9>* ���� ��������% , �� /� .@ &���&��%

>���� 4%1%� ��� ?� ����� 3%1%G% �&&&� #��������� �$ +�1�� �!� ������ ��� �$ ��%&���%&�� % � � ��������� �� *��+��� ���������� �$ *��1% � ��%���� -7-@ �������%

>�A ��5�� >%/?%� ��� *��(���� 2% �&&��, �%- �� ,�� ���A ����%8���%�� �� ��� $�� �%������ <�) 7��(@ K4> 3���!���%

G���(������ #%C%� ��� ����� 7%K% �&&&� 4��� ����� ��������$ � !���$��� �����!���� ���� � /�- 0�%���% � ��%���� -7-@ ���8����F%

:����� 1%G%� C��(���� �%G%� ?�� <%� ;�����(��� 6%� ��� �����7%K% �&&8� 4��� �����/��������� ������������� ������������� ��������� �$ *��+ � /�- 0�%���% >���� ���-3@ 88��8&�%

-�� +%� ��(!��5��� 1%� ��� -��(��!���� G% �&&&� #�����/���� �$ +�1 �� �!� ����� ��� � ��������� )�! *��+%, ,�%�0� .-@ �8F���8��%

-�A)�� G%� ��� 1���� -%1% �&&8� 4������ ��������� �$ �!�������� ����/����� ������ *��+% ��-�� .9-@ �������%

-�� 4%� C���(��� G%� ��� 6��(���� >%3% �&&8� *��+ $�����%&���%&�� % �� $1�0�%��� ���� ������ ��� =&�������������� � "���������� 2.3 !��������� ��� �������%/� ,�� /���@� ��� ��@ ���8�%

-��(��!���� G%� ��� 1������� C%2% �&&�� �������� ��������� ��� �!� + ���% $��- :�� ��%&�� 55@ &�����%

��� J%� 6!�!����� ?%=%� ��� �������� =% �&&�� 4������,�/��� �$ ���� ����� ������� *��+ ��� *��1 �� �����(���������������� � ���� ��%&���%&�� % � ����� � ���� �����$���������� ������% 8�% �� $%�� �%� ��$ 9.@ ��&&8������%

��� J%� C��� ;%� =���� #%� C��!� 2%� G����,� 6%-%� ����������� =% �&&�� 9���������� ��)��� !�����������*��1 ��� *��+ ������� �� �!� *��+ ���% � ��%���� -69@��88���&�%

�����,�!�� 1%4%� C!����� -%� ��� G����� I% �&&�� 9���������� �!�������,���� �$ � �����/��������� �������� $���/�- 0�%��� %���%���-�% � ��%���� -69@ F&�����%

��(!��5��� 1%� ��� -��(��!���� G% �&&8� ?����� ��������$ *��+ ��������� � 2.3 !��������% �,�B � -6@ ������&%

��(!��5��� 1%� ?�� :%� ��� -��(��!���� G% �&&�� ��%&��#�%&�� % � ���� ����� ������ *��+ � � ������ ������������� ������% 8�% �� $%�� �%� ��$ 9�@ ��F����F�%

<������� 6%� ?�)���� :%>%� ��� -�A)�� G% �&&8�� .������� *��+ $��� � ������ $���� �$ 2.3����% ��-�� ���-%��� 4@ �F���F8%

<������� 6%� ?�)���� :%>%� 1���� -%1%� ��� -�)�� G% �&&8� .���� ��� *��+ $��� � ������ $���� �$2.3����% ��-�� ���-%� �� 4@ �F���F8%

;�����(��� 6%� ?�� <%� ��� ����� 7%K% �&&�� 4��� �������������� ��� ���� ����/����$� �����,���� �$ �!� *��+����� ������ ������ � 4���������% 8�% �� $%�� �%���$ 9.@ ��������&%

;�����(��� 6%�%� ?�� <%� ��� ����� 7%K% ����� 4��� �������� �������� ���������� �� *��+ �����,���� ��� �!������� �$ ���� ����� � /�- 0�%��� %���%���-�% , ,�%�0� .9@ &�&�&F&%

#��4!���!��� ?%� ��� 3��(� G%.% �&&�� ��%&���%&�� % � ����/����� ���� ��' ������� � ����� 2.3/���� ������% ��-�� .49@ �F���F�%

#�5�� #%1%� 4������ 6%�%� ������� 2%G%� ��� >�$$�(��� .%4% �&&�� C�������� ��������� ������� �$ �!� ����� �/����� ����% , �� /� 4@ �&���%

#��!$���� -%� G������ C%� ��� 2����/-���� G% �&&&� ������������ �����% $��- :�� >���� ..@ ������8%

=���� J%� >����� G%� ��(!��5��� 1%� 4��� 4%� ��� -��(��/!���� G% �&&�� 1������ �$ �!� ��������� �$ *��+ )�!����$� 2.3� ��� *��1% � ��%���� -69@ FFF��FFF&%

=���� -%� :!������ �%:%� ?����!�� =%?%� ��� -��(��!���� G% �&&8� *��9 ��� *��= ��� �����,�� �� �!� C����� �$��%&���%&�� % �% � ��%���� -7�@ �8����8��%

=���� ?%C%� 4!��� G%4%� 2!��� G%/�%� ����� ?%� ������()�!� G% �&&&� -����,���� �$ *��9 3�3�� �� �!������� ��� ��"���� �� ������� ���!��� �!� +/���� *��1�*��;� ��� *��-% � ��%���� -7-@ F�8�F��%

=������� :%*%� ?���� ?%2%� ��� �������� ?% �&&��

4��������� $��+ �-����� �F&

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������

Page 14: A set of ftsZ mutants blocked at different stages of cell division in Caulobacter

C�������� ��������� ������� �$ �!� ����� 14.� ����%>�����%� -.3@ �����F�%

7�� J%/4%� ��� �������� =% �&&�� 4���/������� 2.3/��������� ������ ������� �$ ������� ���� ����������� *��+ ��� ������ ��� ������� ���)��(� �� ����%�,�B � -5@ F�FF�F���%

7�� J%/4%� .���� 1%>%� C��� ;%� ��� �������� =% �&&8�-����,���� �$ ���� ����� ������ *��: �� �!� ��%&���%&��% � ������ ��� ����$����� �$ � �������� </��������������� �����% � ��%���� -7�@ ��&������%

��� 5� +���� �� �� ���� ��� 5� 6� ��-�

� ���� ����()��� C����� -��� , �%- �� ,�%�0� ��� ��� �������