95120210 Pembuatan Pelet Ida Trichoderma Harzianum Dengan Bahan Pembawa Campuran Tepung Ketan Putih...
-
Upload
deni-darmawan -
Category
Documents
-
view
28 -
download
6
Transcript of 95120210 Pembuatan Pelet Ida Trichoderma Harzianum Dengan Bahan Pembawa Campuran Tepung Ketan Putih...
PENGENDALIAH HAYATI MENGGUNAKAN PELET BIOFUNGISIDA Trichoderma harzianum
Oleh :
Nungki Ayuningtyas B1J007017Diah Tri Utami B1J007027Izza Dwi Khaerani B1J007065Nova Prastianti B1J008007Maman B1J008021Devi Restiana B1J008008Adhi Nugroho B1J007085
LAPORAN PRAKTIKUM FITOPATOLOGI
KEMENTERIAN PENDIDIKAN NASIONALUNIVERSITAS JENDERAL SOEDIRMAN
FAKULTAS BIOLOGIPURWOKERTO
2010
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Pembangunan pertanian dewasa ini ditekankan pada pertanian berbasis
agribisnis yang berdaya saing, berkelanjutan dan dilaksanakan secara
terdesentralisasi. Sejalan dengan hal tersebut, dan semakin meningkatnya
kesejahteraan masyarakat serta kesadaran konsumen akan pentingnya kesehatan,
maka permintaan akan produk pertanian yang bebas dari bahan kimia juga terus
meningkat. Pertanian yang ditawarkan dalam hal ini adalah pertanian dengan
input eksternal rendah, yang dikenal dengan konsep pertanian berkelanjutan,
dengan prinsip yang digunakan adalah pemanfaatan interaksi unsur-unsur
agroekosistem, yang merupakan dasar dalam menjamin kondisi tanah yang
mendukung pertumbuhan tanaman, mengoptimalkan ketersediaan unsur hara,
menyeimbangkan arus unsur hara, meminimalkan kerugian akibat radiasi
matahari, udara dan air, meminimalkan serangan hama dan penyakit, serta
memanfaatkan keterpaduan dan sinergi dalam penggunaan sumberdaya genetik
(Reijntjes et al., 1999).
Salah satu unsur agroekosistem dari pertanian berkelanjutan adalah
mikrooganisme yang sudah ada di alam dan dapat dimanfaatkan sebagai agens
hayati, baik berperan dalam pengendalian patogen tumbuhan maupun sebagai
dekomposer. Pengendalian hayati patogen tumbuhan adalah suatu cara untuk
mengurangi jumlah inokulum patogen atau menekan aktifitas patogen baik aktif
atau dorman dalam menimbulkan penyakit dengan satu atau beberapa organisme
secara alami atau melalui manipulasi lingkungan, inang atau antagonis (Cook dan
Baker 1983). Dekomposer adalah mikroorganisme yang mempunyai kemampuan
dalam mendekomposisikan bahan organik, terutama bahan-bahan alami yang
mengandung selulosa dan lignin yang tinggi. Salah satu mikroorganisme yang
mempunyai kedua peran tersebut serta pemanfaatannya telah banyak dilaporkan
adalah cendawan antagonis Trichoderma spp.
Trichoderma harzianum adalah jamur saprofit tanah yang secara alami
merupakan parasit yang menyerang banyak jenis jamur penyebab penyakit
tanaman (spektrum pengendalian luas), jamur tersebut dapat menjadi hiperparasit
pada beberapa jenis jamur penyebab penyakit tanaman, pertumbuhannya sangat
cepat dan tidak menjadi penyakit untuk tanaman tingkat tinggi. Mekanisme
antagonis yang dilakukan adalah berupa persaingan hidup, parasitisme, antibiosis
dan lisis (Trianto dan Gunawan Sumantri, 2003).
T. harzianum merupakan jamur antagonis yang sangat penting untuk
pengendalian hayati. Mekanisme pengendalian T. harzianum yang bersifat
spesifik target, mengkoloni rhizosfer dengan cepat dan melindungi akar dari
serangan jamur patogen, mempercepat pertumbuhan tanaman dan meningkatkan
hasil produksi tanaman, menjadi keunggulan lain sebagai agen pengendali hayati.
Aplikasi dapat dilakukan melalui tanah secara langsung, sebagai jasad antagonis
mudah dibiakkan secara massal, mudah disimpan dalam waktu lama dan dapat
diaplikasikan sebagai seed furrow dalam bentuk tepung atau granular /butiran
(Arwiyanto, 2003).
B. Tujuan
Praktikum kali ini bertujuan untuk menguji aktivitas cendawan antagonis
terhadap cendawan pathogen.
II. MATERI DAN METODE
A. Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah tabung reaksi, blender, cawan petri,
tabung Erlenmeyer, pipet ukur, pinset, jarum ose, gelas ukur, bor gabus,
hemocytometer, cover glass, beaker glass, pipet tetes, mortar dan pestle, ayakan,
spatula, kertas tissue, kapas, aluminium foil, magnetic stirrer, Laminar Air Flow
(LAF), autoklaf, lampu spiritus, desikator bersilika gel, timbangan analitik dan
oven.
Bahan-bahan yang digunakan adalah tepung ketan putih, tepung bawang
putih, isolat T. harzianum, media PDA, wrapper, akuades, alkohol 70 %, dan
spiritus.
B. Cara Kerja
1. Peremajaan Isolat T. harzianum
Isolat T. harzianum dipindah pada media cawan yang baru kemudian
diinkubasi pada suhu ruangan.
2. Pembuatan inokulum
a. T. harziznum dibiakan pada media miring, diinkubasi pada suhu ruang
sampai pertumbuhannya memenuhi media ± 1 minggu.
b. 10 ml akuades steril dimasukan ke dalam (langkah a), kemudian tabung
tersebut goyang-goyang hingga konidia terlepas dan tercampur ke dalam
akuades (terbentuk suspense konidia T. harzianum).
c. 1 ml suspensi konidia tersebut diambil kemudian dimasukan ke dalam
tabung reaksi berisi 9 ml akuades steril (pengenceran).
d. Pengenceran dilakukan hingga diperoleh konsentrasi konidia 108
konidia/ml.
e. Jumlah konidia pada pengenceran dihitung mengunakan haemocytometer
dengan bantuan mikroskop cahaya. Penghitungan jumlah konidia dengan
mengunakan rumus menurut Hadioetomo (1994) sebagai berikut:
∑ konidia = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(108)
Keterangan:
∑ konidia = jumlah konidia dalam 5 kotak sedang
∑ kotak = jumlah 5 kotak sedang
Fp = faktor pengenceran
2,5 x 105 = konstanta
f. Semua tahapan dalam pembuatan inokulum T. harzianum dilakukan
secara aseptis.
3. Pembuatan dan Penyiapan Pelet
a. Tepung beras ketan putih 100 gram dicampur tepung bawang putih 5
gram sebagai antibiotis kemudian dibungkus aluminum foil, selanjutnya
di oven pada suhu 80oC selama 24 jam.
b. Setelah suhu tepung menurun, sebanyak 100 gr dimasukan ke dalam
cawan petri besar berdiameter 14 cm, kemudian ditambahkan 60 ml
akuades steril sampai terbentuk adonan tepung yang tidak lengket di
tangan.
c. Suspensi konidia T. harzianum dengan konsentrasi 108 konidia/ml
sebanyak 20 ml dicampurkan dengan tepung kemudian dihomogenkan
agar konidia tersebar merata dalam media.
d. Setelah homogen, tepung dipadatkan sampai ketebalan 1 cm
e. Media tepung yang telah padat kemudian dibor (dibentuk dengan bor
gabus) hingga membentuk pelet berdiameter 1 cm. Butiran pelet
kemudian dikeringkan di dalam oven dengan suhu 40 0C selama 24 jam.
f. Semua tahapan dalam pembuatan dan penyimpanan pelet biofungisida T.
harzianum dilakukan secara aseptis.
4. Uji Viabilitas Pelet Biofungisida T. harzianum.
a. Satu gram pelet biofungisida T. harzianum dengan lama waktu
penyimpanan yang diuji dihaluskan dengan menggunakan mortar dan
pestle secara perlahan.
b. Satu gram pelet yang telah dihaluskan kemudian diencerkan dengan
akuades steril 9 ml sampai 2 atau 3 kali dengan menggunakan prinsip
pengenceran.
c. Pada pengenceran terakhir dihitung jumlah konidia per ml suspensi
dengan menggunakan haemocytometer dan bantuan mikroskop cahaya.
d. Penghitungan jumlah konidia awal dengan mengunakan rumus menurut
Hadioetomo (1994) sebagai berikut:
∑ konidia awal = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(103)
Keterangan:
∑ konidia = jumlah konidia dalam 5 kotak sedang
∑ kotak = jumlah 5 kotak sedang
Fp = faktor pengenceran
2,5 x 105 = konstanta.
e. Setelah diketahui jumlah konidia per ml suspensi (jumlah konidia awal)
kemudian diinokulasikan 1 ml suspensi konidia kedalam media PDA.
Inkubasi dilakukan di ruang terbuka pada suhu ± 280C selama 5 hari atau
dihentikan apabila salah satu koloni cendawan telah memenuhi cawan
petri.
f. Penghitungan jumlah konidia akhir dengan mengunakan rumus menurut
Hadioetomo (1994) sebagai berikut:
∑ konidia akhir = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(103)
Keterangan:
∑ konidia = jumlah konidia dalam 5 kotak sedang
∑ kotak = jumlah 5 kotak sedang
Fp = faktor pengenceran
2,5 x 105 = konstanta.
g. Semua tahapan dalm uji viabilitas pelet biofungisida T. harzianum
dilakukan secara aseptis.
III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Hasil
Jumlah konidia pada pengenceran
∑ konidia = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(108)
= 6/4 x 1/108 x 4 x106
= 0,06
Jumlah konidia awal
∑ konidia awal = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(103)
= 41/4 x 1/103 x 4 x106
= 41 x 103
Jumlah konidia akhir
∑ konidia awal = ∑ konidia × 1 × 4 × 106
∑ kotak Fp(103)
= 16/4 x 1/103 x 4 x106
= 1,6 x 104
Tabel 1. Inokulasi Pelet Trichoderma harzianum
Kel
Dosis
(gram
)
Perlakuan
Hari ke-
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
1
0
9 hari
Sebelum
tanam
- - v
5 - - v
2
10 - - v
15 - - - v
3
20 - - - v
25 - - - - v
4 0
2 hr stlh
tanam
- - - v
5 - - - - - - -
5 10 - v
15 - v
6 20 - - - - - - -
25 - - - - - - -
V = mulai menunjukan penyakit
B. Pembahasan
Trichoderma harzianum merupakan salah satu jenis cendawan yang
mampu berperan sebagai pengendali hayati karena mempunyai aktivitas
antagonistik yang tinggi terhadap cendawan patogen tular tanah. Cendawan ini
termasuk jenis cendawan tanah, sehingga sangat mudah didapatkan di berbagai
macam tanah, di permukaan akar berbagai macam tumbuhan, juga dapat diisolasi
dari kayu busuk atau serasah (Suwahyono dan Wahyudi, 2001).
Beberapa ciri morfologi jamur T. harzianum sebagai bahan baku
biofungisida tersebut yang menonjol, antara lain koloninya berwarna hijau muda
sampai hijau tua yang memproduksi konidia aseksual berbentuk globus dengan
konidia tersusun seperti buah anggur dan pertumbuhannya cepat (fast grower).
Jamur tersebut merupakan salah satu jenis jamur mikroparasitik, artinya bersifat
parasit terhadap jenis jamur lain dan sifat itulah yang dimanfaatkan sebagai agen
biokontrol terhadap jenis-jenis jamur fitopatogen. Beberapa keuntungan dan
keunggulannya adalah mudah dimonitor dan dapat berkembang biak, sehingga
keberadaannya di lingkungan dapat bertahan lama serta aman bagi lingkungan,
hewan dan manusia lantaran tidak menimbulkan residu kimia berbahaya yang
persisten di dalam tanah. Jamur penyakit mempercepat pertumbuhan tanaman dan
meningkatkan hasil produksi tanaman. Secara ekonomi penggunaan biofungisida
trichodermin dan gliocladin lebih murah dibandingkan dengan fungisida kimiawi.
Mekanisme pengendalian biofungisida itu bersifat spesifik target, sehingga tidak
menimbulkan hilangnya organisme nontarget. Kelebihan lain mampu mengoloni
rhizosfer (daerah perakaran tanaman) dengan cepat dan melindungi akar dari
serangan. Penggunaan jamur antagonis sebagai agen hayati harus dalam bentuk
formulasi yang tepat dengan bahan yang mudah tersedia (Lewis dan Papavizas,
1991).
Menurut Weller dan Cook, (1983) bahwa untuk menstabilkan efektifitas
agensia hayati harus diformulasikan. Beberapa laporan menyebutkan bahwa P.
fluorescens, Gliocladium dan 5 Trichoderma telah diformulasikan dalam bentuk
cair, tepung dan kompos. Perkembangbiakan T. harzianum akan terjadi bila hifa
jamur mengadakan kontak dengan bahan organik seperti kompos, bekatul atau
beras jagung. Menurut Bertha Hapsari, (2003) menunjukkan bahwa jamur
menguntungkan tersebut dapat bertahan selama 3 bulan jika disimpan dalam
kulkas atau sebulan di suhu kamar pada medium beras dan jagung yang telah
difermentasi (Trianto dan Sumantri, 2003).
Menurut Kamus Ilmiah (2010) Mekanisme pengendalian jamur patogen
oleh biofungisida Naturalindo secara alamiah dapat dikelompokkan menjadi 3
fenomena dasar, yaitu :
a. Terjadinya kompetisi bahan makanan antara jamur patogen dengan bahan
aktif biofungisida Naturalindo di dalam tanah. Adanya pertumbuhan yang
berjalan begitu cepat dari jamur agensia aktif dari biofungisida
Naturalindo ini akan mendesak pertumbuhan jamur patogen.
b. Mikoparasitisme. Jamur agensia aktif biofungisida Naturalindo merupakan
jamur yang mempunyai sifat mikoparasitik, artinya jamur Trichoderma
tergolong dalam kelompok jamur yang menghambat pertumbuhan jamur
lain melalui mekanisme parasitisme. Mekanisme yang terjadi adalah
bahwa selama pertumbuhan jamur ini di tanah yang berjalan begitu cepat,
jamur ini akan melilit hifa jamur patogen. Bersama dengan pelilitan hifa
tersebut, dia mengeluarkan enzim yang mampu merombak dinding sel hifa
jamur patogen, sehingga jamur patogen mati. Beberapa jenis enzim pelisis
yang telah diketahui dihasilkan adalah enzim kitinase dan b -1,3
glucanase.
c. Antibiosis. Ternyata agensia aktif biofungisida Naturalindo selain
menghasilkan enzim pelisis dinding sel jamur juga menghasilkan senyawa
antibiotik yang termasuk kelompok furanon dapat menghambat
pertumbuhan spora dan hifa jamur patogen, diidentifikasikan dengan
rumus kimia 3-(2-hydroxypropyl-4-2-hexadienyl ) -2-(5H)-furanon
Ketiga mekanisme ini berjalan secara simultan dan sekaligus.
Ferreira dan Boley (1992) menambahkan bahwa Sclerotium rolfsii mampu
menginfeksi tanaman jika jumlah miselia yang tumbuh cukup banyak. Untuk
mendukung pertumbuhan miselia secara optimal diperlukan nutrisi yang berasal
dari bahan organic sebab di alam sklerosia atau hifa berdinding tebal biasanya
berasosiasi dengan sisa tanaman atau bertahan hidup sebagai saprofit pada bahan
organik.
Praktikum kali ini pathogen yang diujikan yaitu Sclerotium rolfsii.
Sclerotium rolfsi merupakan salah satu patogen yang menyebabkan penyakit bibit
di beberapa daerah pengembangan kapas di Indonesia. Jamur ini memang banyak
terdapat di daerah tropik maupun sub tropik dan menyerang lebih dari 189 species
tanaman (WATKINS, 1961).
Menurut hasil dapat dilihat gejala yang ditimbulkan oleh pathogen
Sclerotium rolfsii dengan pemberian dosis pellet yang berbeda, perlakuan berbeda
dan layu pada hari yang berbeda-beda pula. Hal ini sesuai dengan pernyataan
Menurut Wiyono (1994) Trichoderma spp. Merupakan salah satu agen pengendali
hayati yang efektif mengendalikan patogen tular tanah pada berbagai jenis
tanaman seperti Rhizoctonia solani, Pythium aphanidermatum, Fusarium
oxysporum, dan Sclerotium rolfsii. Gejala yang ditimbulkan adalah benih mati
sebelum berkecambah atau muncul ke permukaan tanah atau kecambah
rebah/layu.
IV. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil dan pembahasan dapat diambil kesimpulan bahwa :
1. Trichoderma harzianum merupakan jamur antagonis yang dapat
digunakan sebagai fungisida hayati.
2. Pada praktikum kali ini Trichoderma harzianum tidak berpengaruh besar
terhadap aktivitas pathogen Sclerotium roflsii
DAFTAR PUSTAKA
Arwiyanto, 2000. Pengembangan Agens Hayati untuk Tanaman Hortikultura. Departemen Pertanian Jakarta.
Bertha Hapsari, 2003. Stop Fusarium dengan Trichoderma. Trubus 404- XXX. Hal. (42- 43).
COOK, R.J. and SNYDER, W.C. 1965. Influence of host exudates on growth and survival of germlings of Fusarium solani f. phaseoli in soil. Phytopathology, 55:1021-1025.
Ferreira, S.A. and R.A Boley. 1992. Sclerotium rolfsii. Department of Plant Path,CTAHR. Univ of Hawaii http://www.extento.hawaii.edu/kbase/crop/ Type/s_rolfs.htm.
Kamus ilmiah. 2010. Penggunaan biofungisida pada usaha perkebunan. http ://www. kamusilmiah. com/ teknolog/ penggunaan biofungisida -pada- usaha-perkebunan/
Lewis, J.A. and G.C. Papavizas. 1983. Production of Clamidospores and Conidia by Trichoderma sp. In Liquid and Solid Growth Media. Soil Biology and Biochemistry, 15 (4): 351-357.
Purwantisari, S., Ferniah, R.S., B Raharjo. 2008. Pengendalian Hayati Penyakit Lodoh (Busuk Umbi Kentang) Dengan Agens Hayati Jamur-jamur Antagonis Isolat Lokal. BIOMA, Vol. 10, No. 2, Hal. 13-19
Suwahyono U, dan Wahyudi P, 2001. Trichoderma harzianum dan Aplikasinya: Penelitian dan Pengembangan Agen Pengendali Hayati. Direktorat Teknologi Bioindustri BPPT, Jakarta.
Trianto dan Gunawan Sumantri. 2003. Pengembangan Trichoderma harzianum. Untuk Pengendalian OPT Pangan dan Hortikultura. Makalah. Lab. PHPT Wilayah Semarang.
WATKINS, G.M. 1961. Physiology of Sclerotium rolfsii with emphasis on parasitism. Phytopathology, 51: 110-113.
Wiyono S, 1994. Keefektifan Gliocladium fimbriantum Gilman dan Abbot terhadap Patogen Busuk Batang pada Kedelai dan Toleransinya terhadap Pestisida. Jurnal Bul. HPT. 7 (1): 5–10.