5674 3 + ˘ ˇ+ 1 2 3˘ Arthrobotrys ... -...

هاي گياهي فصلنامه تحقيقات بيماري 1392ستان تابم،دو، شماره اول سال23-34صص

جهت ليسيليكسااسيدو القاء كننده Arthrobotrys oligosporaاستفاده از قارچ نماتد خوار هاي دفاعي گياهو مطالعه برخي پاسخ Meloidogyne javanicaگره ريشه كنترل نماتد مولد

3زرقاني، شاهين نوري نژاد2*، نوازاله صاحباني1حديث مصطفي نژاد

23/5/92:تاريخ پذيرش22/1/92: تاريخ دريافت

دهيچكا ك در كنتـرل نماتـد گـرهيليسـيسالاسيد كنندهءو القا Arthrobotrys oligospora شكارگر قارچييتوانا پژوهشنيدر

و گلخانهيط آزمايدر شرافرنگي روي گوجه Meloidogyne javanicaشهير رات ييـتغنيچنـ هـم. قرار گرفـتيمورد بررسشگاهندازيپراكسو دازيفنل اكسيپليهاميآنز ميو تيبات فنليزان تجمع تركيز پـنج غلظـت.گرديـد العهمطمختلفيمارهايدر اثربه اسپور قارچ در ميلي106غلظتو موالر اسيد ساليسيليك به صورت اسپري هواييي ميل به صورت،خيساندن خاك روشليتر

و توأم قطـر زنـي، پنجـاه روز پـس از مايـه.فرنگي در گلخانه مورد بررسي قرار گرفـت گوجه در مرحله شش برگي گياه جداگانهگا ها، گال و اندامتعداد و توده تخم در هر گياه، تعداد تخم موجود در هر توده تخم، وزن تر ريشه هـاي هـوايي مـورد ارزيـابيل

ــارچاســـتفاده از نتـــايج نشـــان داد كـــه. انجـــام شـــديتصـــادفالًكـــامدر قالـــب طـــرح شـــاتيآزما.قـــرار گرفـــت قـA. oligospora يككيليسيسالاسيدو ايقيتلفاستفاده هر چند كه ند، مؤثر M. javanicaدر كنترل نماتدييبه تنهاهر نياز

فنـليپلـيهـاميآنـزتيـ فعال راتييـتغيبررسـ چنينهم.باشدمي به صورت جداگانهكيهر تر از كاربرد مؤثربه مراتب عواملندازيپراكسو دازياكس ميو تيبات فنليزان تجمع تركيز نيهاميت آنزيش فعاليافزا بيانگريمورد بررسيمارهايدر و ز يـ مـذكور

ريبات فنليتجمع ترك گيدر سينشان دهنده تحرخود كه بوداهيشه ميگيستم دفاعيك .باشدياه

، دازيفنـل اكسـيپلـ ساليسـيليك، كنتـرل، اسـيد، Arthrobotrys oligospora،Meloidogyne javanica:يديـكليهـا واژهيبات فنليتركداز،يپراكس

دانشجوي كارشناسي ارشد گروه گياهپزشكي، پرديس ابوريحان، دانشگاه تهران-1 پرديس ابوريحان، دانشگاه تهران دانشيار گروه گياهپزشكي،-2 استاديار گروه گياهپزشكي، پرديس ابوريحان، دانشگاه تهران-3 [email protected]: نويسنده مسئول مقاله-∗

ازا 24 در كنترل نماتد مولد گره ريشهساليسيليك اسيدو Arthrobotrysستفاده

مقدمهتـرين عوامـل ايجـاد خسـارت اقتصـادي بـه طيـف وسـيعي از از جملـه مهـم).Meloidogyne spp(ه نماتدهاي گره ريش

و نيمـه محصوالت كشاورزي در مناطق مختلف جهان، خصوصاً Sikora and( رونـد مـي گرمسـيري بـه شـمار نواحي گرمسيري

Fernandez, 2005 .( و كاهش خسارت ناشكنجهت هـاي مختلفـي همچـون تنـاوب زراعـي بـا گياهـان دها، روشنماتازيترلآ ده،ش، استفاده از ارقام مقاوميغيرميزبان، ,.Pakeerathan et al(اسـت قابـل اسـتفادهييايميشـيهـاو روش خاكيآفتاب

رواهيـگ مقاومتيهاالقاء كنندهوزيستي كنترل استفاده از عواملبه عالوه.)2009 مـورد توجـه اسـت كـهييهـاشاز جملـهباشديم .Arthrobotrys oligosporaآسكوميست دها، قارچنماتزيستي عوامل كنترلاز جمله. قرار گرفته استياريبس محققان

ميو چسبنده مانع حركت نماتدها شدهسه بعدي هاي كه با تشكيل شبكه ايـن.)Veenhuis et al., 1985( انـدازد آنها را به دام). Olthof and Estey, 1963(شـود كند كـه از طريـق مـيخ آلـوده كننـده بـه بـدن نماتـد وارد مـي قارچ توكسيني را توليد مي

و همكارانيدوپونو كه)Duponnois et al., 1995(س ر نماتد مولد جمعيت A. oligospora قارچنشان دادند اه يـ شـه درگيگـرهمييفرنگگوجه .كندرا كنترل

بيهاز از جمله روشينييت القامقاوم سكه بشمار رفتهمارگرهايكنترل نتيگيستم دفاعيموجب فعال شدن و در جـهياهبيمحدود شدن فعال ميت گ القاءده جهت بات مورد استفاين تركيترشدهاز جمله شناخته. گردديمارگر مـاده اهـانيمقاومـت در

و همكاران.)He and Wolyn, 2005( باشديمكيليسيسالاسيدييايميش دادنـد كـه نشان)Kempster et al., 2001( كمپسترو همكـارانينانـد.شـود مـي Heterodera trifolii القاء مقاومت عليه نماتدموجب ساليسيليك در گياه شبدر اسيد استفاده از

)Nandi et al., 2003(ازين Abelmoschus(هيـ در بام M. incognitaك به منظور كنترل نماتديليسيسالاسيد اسپري هواييز

esculentus(يا چشم بلبليو لوب)Vigna unguiculata(نش.نداستفاده كرد ك موجـب كـاهشيليسـيسالاسيد ان دادند كه آنهاميگايندرت نماتديدار تعداد گال حاصل از فعاليمعن . گرددياهان

سيهاميت آنزيش فعاليافزا نيگيستم دفاعيمرتبط با و اثرؤمـيهـاتيز تجمع متابولياهان زميـ در نيتـر نـه از مهـمينگييايميشيهاكنندهءالقايهاسميمكان گيمتعـدديهـاميآنـز.اهان اسـتيدر عليدر دفـاع هـا نقـش دارنـده پـاتوژن يـ اهـان

)Odjakova and Hadjiivanova, 2001(.ا از جمله مي ين آنزيمي و پراكسيداز اشاره كـرد توان به پلي ها Simons( فنل اكسيداز

and Ross, 1970; Daly et al., 1971; Loon and Geelen, 1971; Chen et al., 2000.( فنل اكسيداز در اكسيداسيون آنزيم پليو تشكيل ليگنين در سلولفنل ). Concellón et al., 2004(ش مهمـي دارد نقـهاميكروب مورد حملههاي گياهي ها به كوئينون

نقـش ).Kosuge, 1969(باشـد مـي هـاي دفـاعي پراكسيداز در مقاومت گياه، توانايي آن در اكسيده كردن متابوليتآنزيم نقش Pennisetum(گيـاه ارزن دري سفيدك دروغي عامل، Sclerospora graminicolaبه فنل اكسيداز در ايجاد مقاومت پليآنزيم

glaucum(اثبـات شـده اسـت )Raj et al., 2006(.و يـ سـتيگـزارش كردنـد كـه آنتاگون ) Yao and Tian, 2005(انيـتائو

Cryptococcus laurentii مت ميپراكسهمچونهاميآنزيت برخيت باعث القاء فعاليجاسمونليو ميداز در لوايسـ. شونديوه هلوپليپراكسيهاميت آنزيفعالنيز ) Silva et al., 2004(و همكاران و كيسـتميسييرا در ارتباط با مقاومت القـا دازيفنل اكسيداز

ر. اندعنوان كرده گيآنها نشان دادند كه در خيشه تياه يهـاميت آنـز يـ فعال Pseudomonas corrugataيمار شـده بـا بـاكتريارپليپراكس و ت دازيفنل اكسيداز ميافزايمار با باكتريبعد از و تيـ. ابدييش گـزارش كردنـد كـه ) Yao and Tian, 2005(انيـائو

ها همچـون پراكسـيداز در ميـوه هلـوو متيل جاسمونيت باعث القاء فعاليت برخي آنزيم Cryptococcus laurentii آنتاگونيستو همكاران. شوندمي Pseudomonasنشان دادند كه در ريشه گياه خيار تيمار شـده بـا بـاكتري نيز ) Silva et al., 2004( سيلوا

corrugata و پليهاي فعاليت آنزيم مي فنل اكسيداز پراكسيداز .يابدبعد از تيمار با باكتري افزايشگيباتيز از جمله تركينيبات فنليترك بهيهستند كه در پاسخ بيهاتنش اهان ياهيـگيزايمـاريمختلف از جمله عوامل

و همكارانيو.)Zheng et al., 2007( دخالت دارند درختـان مـاريتگزارش كردند كـه)Vivekananthan et al., 2006( وكنانتانك P. fluorescensيبا باكتر انبه ميموجب افزا روز15ازپس،نيتيو نيش و فيزان فنل پليپراكسيهاميت آنزيعالز و فنـليدازمياكس .گردديداز

25 1392 ستانتاب/مدوشماره/ اول سال/ هاي گياهي تحقيقات بيماري

ا ن A. oligospora نماتدخوار قارچ اثريق بررسين تحقيهدف از انجام بـه عنـوان يـك القـاءكيليسـيسال اسيد تاثيرزيوم و گلخانهيط آزمايدر شرا M. javanicaنماتدبر قاومت در گياهكننده يهـاميرات آنـز ييـتغچنين بررسـي هم.بوده استشگاه

ندازيپراكسو دازيفنل اكسيپل ميو . فرنگي نيز يكي ديگر از اهداف تحقيق استدر ريشه گوجهيبات فنليتركزان تجمعيز

و روش هامواد نماتداينوكلوم اوليههيته

رآلودهيهاشهير از جمـع آوري اسـتان تهـراندرنيشهرستان ورامـيفرنگاز مزارع گوجهشهيبه نماتد مولد گره و پـسوايفرنگي رقم ارلگوجهاهيگشهير روي،توده تخمتك جداسازي بـا اسـتفاده سپس. تكثير گرديد)Early Urbana Y(ياوربانا

و ريخت سنجي،از خصوصيات از ).Eisenback, 1985(ديه نماتد مشخص گردگون ريخت شناسي سن در تمامي آزمايشات الروشدبهمدو و ميـتچم با اسـتفاده از روش ضد عفوني سطحي الروها ).Hussey and Barker, 1973( عنوان زاد مايه نماتد استفاده

,.Mitchum et al( همكاران شد) 2004 .انجام oligospora Arthrobotrysتهيه قارچ

گين قارچ از كلكسيا تهيس ابوريپردياهپزشكيون گروه و به روشيحان دانشگاه تهران روتكه آبيمحياسپور ط كشتته.ني از منطقه ورامين تهران جمع آوري شده استاين قارچ توسط صاحبا.شديسازخالص)Water Agar( آگار ه يـ به منظـور

رويسوسپانس زميسطيمحيون اسپور، قارچ و به مدت)Potato Dextrose Agar( دكستروز آگارينيب روز28كشت داده شدا. قرار گرفتC1±25°يدر انكوباتور در دما م قارچ اسپور106ن مدت غلظتيپس از همتر با استفيليليدر الم تومتريسواده از

.ديه گرديتهسترون در آب مقطركيليسيسالاسيدهيته

ش و غلظتيته)Merck(از شركت مرككيليسيسالاسيدييايميماده مه شد شـاتيانجـام آزمايآن بـرا موالريليپنج ).Katoch et al., 2005(مورد استفاده قرار گرفت

و A. oligosporaبررسي اثر قارچ دو بر مرگ .M نماتدممير الرو سن javanica در شرايط آزمايشگاهي ، به كمك چوب پنبـه سـوراخررشد يافته بر روي محيط سيب زميني دكستروز آگا A. oligosporaقارچ حاشيه پرگنه از

و هر قطعه بر روي محيط5/0كن قطعاتي به قطر ت روزپـس از هشـ. آب آگار دو درصد قرار گرفـت كشت سانتي متر جدا شدازدو ميلي،به هر ظرف كشت دريا.دياضافه گرد سترونخ شدهيتازه تفر الرو 100±5حاوي نماتدونيسوسپانسليتر ن ظـروف

و پس از گذشتينگهدارC1±25°يدما تيدرصـد نماتـدها،ساعت96و72شد و شـاهد شـمارشيمـرده در ظـروف مـارم.گرديد و آن IP = (C-T / C) × 100 فرمولازهار الرويدرصد مرگ م IPكه در و زنـدهيهاوتعداد الرC، الروريدرصد مرگ

ت ويدر سايتعداد الروهاTمار شاهد تيزنده در الروهـايي مـرده در نظـر گرفتـه شـدند كـه فاقـد.ديمحاسبه گرد،مارها بوديرو تحرك مي سترونهنگامي كه با سوزن حتي بوده ,.Cayrol et al(د شد تحركي نداشتنبه آنها ضربه زده ظروف كشت.)1989

.با چهار تكرار انجام گرفتيتصادفالًكامش دو بار در قالب طرحين آزمايا. فاقد قارچ به عنوان شاهد در نظر گرفته شدندمكيليسـيسالاسيدمياثر مستقيبررس ـ بـر م ي و ـ زان مـرگ .M نماتـدمر الرو سـن دو ي javanica در شـرايط

آزمايشگاهيآ )متـر با قطر دهانـه نـه سـانتي( ستروندر ظروف كشت موالر پنج ميليكيليسيسالاسيد ليتر ميلي20زمايش از در اين

و فعاليالرو تازه تفر 100±5يحاو .ديبه عنوان شاهد استفاده گردسترون آب مقطرياز ظروف حاو.شداستفادهد نماتخ شدهمقرار گرفتC1±25°ين ظروف در انكوباتور با دمايا و و درصد مرگ ازيند طبق فرمـول ساعت96و72 گذشتر الروها پس

و همكارانالروهاي فاقد تحرك، طبق روش.شد محاسبه ذكر شده در باال بـه عنـوان الروهـاي مـرده در نظـر) 1989( كايرولدرش دو بارين آزمايا. گرفته شدند .شد با چهار تكرار انجام،يتصادفالًكامقالب طرحو


در گلخانه M. javanicaنماتد رويساليسيليك اسيدو A. oligosporaي اثربررسدق3انيرقم كالجيفرنگبذور گوجه هيبه مدت پنج سديپوكلريقه توسط پـنج بـارو سـپسيك درصد ضـدعفونيميتكييهادر گلدان اين بذور. آبكشي شدند سترونتوسط آب مقطر خاكازيمساو شامل حجم(خاك سترونيحاويلوگرميك

مـم بـزرعه، و كود گ)رگـاسه شيردــكشت و در ن16طيشرا(د گلخانهــط مساعيراـد وـساعت تـس8ور ي، دمـايكيارـاعت°C5±27(شد .پرورش داده

تـريليلـيم20 سـپس.شـدندييهـواياسـپر مـوالر پـنج ميلـيكيليسـيسالاسيدبايبرگششيها در مرحلهاهچهيگقايسوسپانس م106رچ با غلظت ون توسـط تيمارهـاي مـورد نظـر، پس از سه روز. به سطح خاك اضافه گرديدتريليلياسپور در

دو 2000حدود مامالرو فعال سن كهندشد زنيهينماتد و،اًموقت، به اين صورت مقداري از خاك سـطح گلـدان برداشـت شـدمايگ: مارها شامليت.الروهاي مذكور در تمام سطح خاك پخش گرديد سوسپانسيون ليشـده بـا آب مقطـر اسـتر زنـيه يـ اهان

مايگ،)آلوده شاهد( شده با نماتد زنيهيما اهانيگ،)شاهد غير آلوده( با زنيهياهان زنـيهيـمااهـانيگ،كيليسيسالاسيد شدهمايگ،نماتد+كيليسيسالاسيد شده با مااهايگ،نماتد+ ون اسپور قارچيشده با سوسپانس زنيهياهان اسـيد شـده بـا زنـيهيـن

ما. بودند نماتد+ ون اسپور قارچيسوسپانس+كيليسيسال گبا نماتد زنيهيپنجاه روز پس از قطـر ها بـه منظـور سـنجش اهچهي،گ ها، گال و توده تخم به ازاء هر ن درون هر توده تخميهاتعداد تخم،اهيتعداد گال ر هايشاخصزيو و انـداميوزن تر يهـا شـهو توده تخم به ازاء هر گياه. اندازه گيري شد1ها به كمك قطر سنجقطر گال.شگاه منتقل شدنديبه آزماييهوا به تعداد گال نيز

هاي مربوط به هـر تـوده تخـم بـه، ابتدا تخمهاي درون هر توده تخمتعداد تخمبه منظور محاسبه. كمك بينوكولر مشاهده شدو باركر سپس با استفاده از پتري شمارش تعداد هر تخم در يك توده تخـم استخراج شده) 1973(طور جداگانه با روش هوسي

بايآزما.مشخص گرديد ويتششش شديتصادفالًكامتكرار، در قالب طرح پنجمار .انجامبيهاسميمكانيبرخيبررس اهيگييايميوشيدفاع

شديبيبه همان ترت3انيرقم كالجيفرنگشده گوجهيبذور ضد عفون .ديـ كشـت گرد سـترونيهادر گلدان،كه اشارهليتـر اسـپور در ميلـي106با غلظت A. oligosporaو قارچ موالرپنج ميليساليسيليك اسيدبايبرگششها در مرحله اهچهيگ

و مايه زني دو الرو فعال 2000سه روز بعد حدود شده اماريت.دياضافه گرد مورد نظريهانماتد به گلدانمسن ين بررسيها درت بهيآزما.بودياشات گلخانهيدر نظر گرفته شده در آزمايمارهايمشابه پا6×7ليفاكتور آرايش شات يتصـادفالًكامطرحهيبر

شدو با چهار تكرار نيپراكسـو دازيفنل اكسيپليهاميرات آنزييتغچنينهم.انجام و ميـ داز دريبـات فنلـيتركزان تجمـعيـزماپستا هفتم اوليروزها براي اين منظور ابتدا از ريشه گياهان عصاره تهيه گرديد،.قرار گرفتيبا نماتد مورد بررس زنيهياز

ركيبه اين صورت كه چيگرم از بافت ماينيشه در هاون شديع كوبيبا استفاده از ازت و پودر ميـ سپس. ده تـر بـافريليلـيكبايليم10مينمونه فسفات سد و مخلوط گرد=6pHموالر م.ديبه آن اضافه ميهـاوبيكروتيمخلوط حاصل به يتـريليلـيدو

و دريدق20به مدت g12000در منتقل شديسانترC°4يدما قه رويمـاو سـپس فوژ شـات مـورديجهـت انجـام آزما يـيع.)Sahebani and Hadavi, 2008( استفاده قرار گرفت

ايپلميت آنزيزان فعاليميابيارز دازيكسفنلپليت آنزيزان فعاليميابيارزجهت با كمي تغييـرات اسـتفاده ) Liu et al., 2002(و همكارانويلروشازدازيفنل اكسيم

ا،گرديد 515رات جـذب نـور در طـول مـوج ييـتغتيدر نها.شداستفادهاهيگريشه تر عصارهيكروليم 500ازكه ترتيبنيبهدقيبه مدتهيثان10يبا فواصل زمان نانومتر تغيت آنزيفعال.شديريگاندازهقهيك دريم بر اساس دريدقكيرات جذب نور قـه

گير بافتك گرمي شديشه .اه محاسبه

1- Caliper


دازيپراكسميت آنزيزان فعاليميابيارزبايم پراكسيت آنزيزان فعاليميابيارز كم) Reuveni, 1995(يرئوونروش از استفاده داز مقـدار.گرفتانجام،راتييتغيبا

در 475در طول موج ميكروليتر عصاره ريشه گياه بر حسب تغييرات جذب نور 200در فعاليت آنزيم دقيقه در يك يك نانومترشدگرم بافت ريشه .اندازه گيري

يبات فنليتركزان تجمعيميبررسگيت فنلبايزان تجمع تركيميبررس شد)Singleton et al., 1999( همكارانو نگلتونيساه بر اساس روشيدر بـه. انجام

اسيگرم معادل كافئيليمبه صورتيبات فنليمقدار تجمع تركاين ترتيب كه دريك با استفاده از منحنيشهير بافتك گرميد.ديمحاسبه گرد،)Fluka(رد تهيه شده بر اساس كافئيك اسيد استاندايز آماريآنال

و تحليل داده شد SAS 9.0با استفاده از نرم افزارهاتجزيه بانيانگيم چنينهم،انجام ياآزمون چند دامنـه استفاده از هاشكليبرا.ندسه قرار گرفتيمورد مقا در سطح احتمال پنج درصددانكن ارسم شد Excel 2003ز نرم افزار ها .استفاده

و بحثجيتانم اسيد ساليسيليكاثريبررس و دويبر مرگ در شرايط آزمايشگاهي M. javanicaنماتدمر الرو سن

اينتا كهين آزمايج حاصل از از اسـيد ساليسـيليك موالرغلظت پنج ميليش نشان داد بيـ بـه ترت سـاعت96و72پـسم43/24%و20/21% موجب و دويالروهادرريمرگ كـهز نشان دادين)2008( عمران زاده. گرديد M. javanicaنماتدمسنم پـس از سـه روز موجـب مـوالر ميلـي10 اسيد ساليسـيليك غلظت و دويالروهـا درصـدي06/42ريـ مـرگ نماتـدمسـن

M. javanica ميا.شده است مين اختالف در و دويزان مرگ مـمر الرو سن اسـيد از اخـتالف در غلظـتيوانـد ناشـتينماتـد.ك مورد استفاده باشديليسيسالم A. oligosporaاثر قارچيبررس و سنيبر مرگ .M نماتدمدور الرو javanica در شرايط آزمايشگاهي

م41/99%و83/76% موجـببيـ بـه ترت سـاعت96و72پـس از.oligospora Aج نشان داد كه قـارچينتا و ر يـ مـرگدويالروها و همكاران.شد نماتدمسن ,.Singh et al( سينگ 2012a ( جدايهكه نيز نشان دادند VNS-1 پـس از قـارچ همـين

م و دويالروهادرصدي8/57ريهشت روز موجب مرگ .M نماتدمسن graminicola در تحقيق سـاير محققـان نيـز اثـر.شد ,.Jamshid nezhad et al., 2013; Singh et al(بـه اثبـات رسـيده اسـت هاي مولد گـره كنترل اين گونه قارچ بر روي نماتدبيو

2012c.( در گلخانه M. javanicaنماتد رويو اسيد ساليسيليك A. oligosporaبررسي اثر

اينتا دارياخـتالف معنـيدارا،مارهـايتيتمـامدريابيـ مـورد ارزيهـا شـاخص كـه دادش نشـانين آزمـايـج حاصل از)p≤ مايگ( با شاهد) 0.05 با زنيهياهان .M شده javanica(باشنديم )ميكمتر).1جدول و زان قطر گال،ين تعـداد تعداد گـال

گ نيتوده تخم در هر و درنيكمترزياه تهرتعداد تخم دنماتـ+ A. oligospora قـارچ+ اسـيد ساليسـيليك مـاريتوده تخم درM. javanica تيمشاهده شد كه با سـا ن اسـيد ساليسـيليك اثـريدر بررسـ.دار بـودياخـتالف معنـيمارهـا داراير قـارچزيـو

A. oligospora كه قارچ گرديد، مشاهده نماتدبرييبه تنهاA. oligospora ويهادر خصوص كاهش شاخص تعـداد تعداد گالگ م ساليسيليكاسيد تر از اه موفقيتوده تخم در هر نـد نشان داد)Simon and Anamika, 2011( آناميكاو سيمون.كنديعملگ A. oligosporaكه استفاده از قارچ شيموجـب افـزا M. graminicola Golden and Birchfield نماتـد اه برنج آلـوده بـهيدر

تر3/24%وييوزن تر اندام هوا%1/61 ندر گياهان آلوده به نماتدشهيروزن نتـايج.گـردد مـي تعـداد گـال9/86%ز كاهشيوو پنديهايبررس ميين)Sharma and Pandey, 2009(يشارما ب دهدز نشان توسـط M. incognitaك نماتـد يـ ولوژيكه كنترلهمموجب كاهش تعداد گال A. oligosporaقارچ و گيچنـين افـزا هاي نماتد )Withania somnifera(دان يـ اه بوزيـش رشـد در

. گردديم


شرايط گلخانه در M. javanicaو اسيد ساليسيليك در كنترل نماتد.oligospora Aثير مايه زني با قارچأت-1جدول

در تعداد گال در هر گياه)متر ميلي( قطرگال تيمار تعداد توده تخم هر گياه

تعداد تخم در هر توده تخم

وزن تر اندام هوايي)گرم( وزن تر ريشه)گرم(

SA+Ar+N 06/1 ± 13/0 c40/44 ± 94/1 d20/21 ± 49/0 d20/100 ± 59/4 c73/9 ± 11/0 cd31/38 ± 07/1 b

SA+N70/1 ± 2/0 b80/158 ± 56/6 b20/117 ± 65/6 b80/152 ± 73/4 b79/10 ± 23/0 b32/30 ± 73/0 c

Ar+N66/1 ± 11/0 b60/69 ± 64/2 c40/54 ± 42/5 c80/144 ± 15/5 b19/10 ± 05/0 c70/32 ± 91/0 c

SA____44/9 ± 16/0 de31/43 ± 27/1 a

H____96/8 ± 20/0 e24/40 ± 63/1 ab

Control52/2 ± 10/0 a40/286 ± 50/10 a20/229 ± 45/7 a00/344 ± 08/12 a62/11 ± 22/0 a09/26 ± 36/1 d

≥p(دار هايي كه در هر ستون بر اساس آزمون دانكن داراي اختالف معنيميانگين .N:M. اندباشند با حروف مختلف نشان داده شدهمي) 0.05javanica ،SA : ،اسيد ساليسيليكAr :A. oligospora ،H:شاهد بدون آلودگي ،Control :شاهد آلوده به نماتد.

نياج به دست آمدهينتايدر بررس كهملأتز قابلين نكته موجـب كـاهشيداريمعنـز به طورين اسيد ساليسيليكاستگقطر گال و تعداد توده تخم در هر نيها، تعداد گال و سرافراز.ده استيسه با شاهد گرديز تعداد تخم در هر توده تخم در مقاياه

مويليم10 اسيد ساليسيليكييهواينشان داد كه اسپر) 2009( در داريمعن جب كاهشموالر و تعداد تـوده تخـم تعداد گالكهزين)Nandi et al., 2002(و همكارانيناند.گردديم M. javanicaآلوده به نماتديفرنگاه گوجهيگ اسـتفاده از نشان دادند

گيليم10در غلظت اسيد ساليسيليكييهواياسپر موجـب M. incognitaآلـوده بـه نماتـديا چشـم بلبلـ يـ اه لوبيموالر درگيكاهش معن و تخم در هر ميدر مقااهيدار تعداد گال هم. رددگيسه با شاهد اسـيدييهـواياسـپرن نشان دادند كـهيچنآنها

ميدر مقاييدار وزن اندام هوايمعنشيموجب افزا ساليسيليك بينپژوهش ايندر. گردديسه با شاهد ميترشيز زان وزن تـرينگيياندام هوا تيدر باياهان كهيمشاهده گرد اسيد ساليسيليكمار شده گيالبته فاقد اختالف معند تيدار با مـار شـده بـاياهـان

.بود سترونآب مقطر نيو پراكس دازيفنل اكسيپليهاميت آنزيزان فعاليميابيارز و ميداز يبات فنليتركزان تجمعيز

آنـزيم ايـن ميـزان فعاليـت نشان داد كه بيشترين)1شكل(فنل اكسيداز ميزان فعاليت آنزيم پلينتايج حاصل از بررسياسـيدو نيـز تيمـار A. oligospora +M. javanica+ اسـيد ساليسـيليك،بـه تنهـايي اسـيد ساليسـيليك تيمارهاي مربوط به

م M. javanica+ ساليسيليك در14/6و33/6،33/6به ترتيـب معـادل( با نماتد بوده زنيايه در روز اول بعد از تغييـر جـذبدر روز چهـارم بعـد از مايـه) شده با نماتـد زنيگياهان مايه(دار با تيمار شاهد اختالف معنيكه) دقيقه در يك گرم بافت ريشه

نيـز)2شكل(دازيپراكسميت آنزيزان فعاليميبررس.نداشت)در دقيقه در يك گرم بافت ريشهتغيير جذب07/6( با نماتد زنيب ميشترينشان داد كه تمين آنزياتيزان فعالين .M+ اسيد ساليسيليكيمارهايمربوط به javanica ،بـه اسيد ساليسـيليك

ما A. oligospora +M. javanica+ اسيد ساليسيليكو تيمار تنهايي ترتيـب معـادلبه( با نماتد بوده زنيهيدر روز اول بعد ازتياختالف معنكه)تغيير جذب در دقيقه در يك گرم بافت ريشه86/72و96/73،77/73 بعـد در روز چهـارمد مار شاهيدار با

ميتـرشيبـزين) 2008( عمران زاده. نداشت)در دقيقه در يك گرم بافت ريشهتغيير جذب37/71( با نماتد زنيهياز ما زانيـنو پراكسـياكسنلفيپلميت دو آنزيفعال رايداز ر داز گيدر خيشـه مايـ اهـان اسـيد مـوالريلـيم10ت شـده بـا غلظـ زنـيه يـ ار

ما ساليسيليك كهزين) 2011( نسبيناصر. كردمشاهده زنيهيپنج روز پس از ميترشيبنشان داد ميت دو آنـز يـ زان فعاليـنو پراكسياكس فنليپل ر دازيداز گيدر با زنيهيماي اوربانا وايرقم ارليفرنگاهان گوجهيشه -ميلـي پـنج اسيد ساليسيليكشده

ويبه ترتموالر ماب چهار و همكـارانيويال.قابل مشاهده است زنيهيپنج روز پس از ميت آنـز يـ فعال)Oliveira et al., 2012( راگ دازيپراكس ما10مدت به M. incognitaآلوده به نماتديلا چشم بلبياه لوبيرا در ويبا نماتـد بررسـ زنيهيروز پس از كـرده

ميو آنزيم چهارتيفعال اوجدو نشان دادند .شودهشت روز پس از مايه كوبي با نماتد مشاهدهگ) 2008( عمران زاده خينشان داد كه در ميترشيب M. javanicaار آلوده به نماتدياهان فين فنليپلميت دو آنزيعالزان

و پراكسياكس مايداز فنـليپلـميت آنـز يـ حداكثر فعالزين) 2006(يارتيزيملك. قابل مشاهده است زنيهيداز چهار روز پس از.است كردهبا نماتد مشاهده زنيروز پس از مايهششرا،)King stone( نگ استونيكرقميفرنگداز در گوجهياكس


و غلظـت اسـيد هـاي محققيـق مختلـف مـي اوج فعاليت آنزيم در بررسي اين اختالفات در روز توانـد ناشـي از تفـاوت در گيـاهرژن)Williamson, 1999(ويليامسون.ساليسيليك مورد استفاده باشد فرنگي آلـوده بـه نماتـد مولـد در ريشه گياه گوجهاهايي

كه).Meloidogyne spp(ه ريشه گر مي هايي مانند پليالقاء آنزيم موجبشناسايي كرد و پراكسيداز .شوندفنل اكسيداز

.Aفرنگي مايه زني شده با اسيد ساليسيليك، قارچ گوجهگياه فنل اكسيداز در ريشه تغييرات فعاليت آنزيم پلي-1شكل oligospora و نماتدM.javanica .هر ستون بيانگر خطاي استاندارد بار روي)(±SE است .N:M. javanica ،SA:،اسيد ساليسيليكAr:A. oligospora ،،H:شاهد

.شاهد آلوده به نماتد: Control، بدون آلودگي

.A فرنگي مايه زني شده با اسيد ساليسيليك، قارچگوجهگياه تغييرات فعاليت آنزيم پراكسيداز در ريشه-2شكل oligospora و نماتدM.javanica .بار روي هر ستون بيانگر خطاي استاندارد)(±SE است .N:M. javanica ،SA:،اسيد ساليسيليكAr:A. oligospora ، ،H:شاهد

.شاهد آلوده به نماتد: Control، بدون آلودگي

تايـن پـژوهش در ن M. javanica+ اسـيد ساليسـيليك،ييبـه تنهـا اسـيد ساليسـيليكيمارهـايدر تيـو اسـيد مـاريزيبـات فنلـيدر تجمـع تركيشيافزايروندتا روز چهارميبرداراز روز اول نمونه A. oligospora +M. javanica+ ساليسيليك

ميكه از روز چهارم به بعد به تدر)3شكل(قابل مشاهده بود ازانيج از ت. كاسـته شـد باتين تركيتجمع نيدر و ز يـ مـار شـاهدميترشيب A. oligospora +M. javanicaماريت مايبـات فنلـيزان تجمع تركين اهـان بـا نماتـديگ زنـيه يـ هفـت روز پـس از


M. javanica بين) 2008( عمران زاده.مشاهده شد ميشتريز ريبات فنليزان تجمع تركين گيدر خيشه ماياهان شـده زنيهيارمارا در روز هفتم بعد M. javanicaبا نماتد .مشاهده كرد زنيهيازو همكارانيس شيسبب افزا M. incognitaبه نماتديفرنگاه گوجهيگينشان دادند كه آلودگ)Singh et al., 2012b( نگ

ريبات فنليترك گيايهاشهيدر مين گنيز)Valette et al., 1998(و همكاران والت. گرددياه آلـوده اه مـوز يـ نشان دادند كه در. شـوديمـ اطـراف آونـدها مشـاهدهيميپارانشـيهادر سلوليتجمع مواد فنل Radopholus similis (Cobb) Thorneبه نماتد كهزين)Cavalcanti et al., 2006(و همكارانيكاوالكنت بـا كـه گيـاه زمـاني فرنگـيهگوجدرتركيبات فنلي ميزاننشان دادند

Xanthomonasبـاكتري عليـه مقاومـت القـايي ايجـاد موجب افزايش اينو كندمي پيدا افزايش، شود تيمار ساليسيليك اسيد

vasicatoria گرددمي.گيبات فنليزان تجمع تركيمدريداريتفاوت معن تيدر مختلف مشـاهدهيروزهايط سترونمار شده با آب مقطرياهان

ملهأمسنيا).3شكل(نشد ز قابـليـن)2شـكل(دازيو پراكسـ)1شـكل(دازياكسـ فنليپليهاميت آنزيزان فعاليدر خصوصميا. مشاهده بود بين امر ايتواند ايانگر گين نكته باشد كه در .صورت نگرفته استيين القااهاين

فرنگي مايه زني شده با اسيد ساليسيليك، قارچگوجهگياه تغييرات در تجمع تركيبات فنلي در ريشه-3شكلA. oligospora و نماتدM. javanica . بار روي هر ستون بيانگر خطاي استاندارد)(±SE است.N:M. javanica ،SA:اسيد

.شاهد آلوده به نماتد: Control، شاهد بدون آلودگي:Ar:A. oligospora ،Hساليسيليك،

گينت يكليريجهز شـيبا توجه به اثرات و محـييايميان بار كاربرد سموم زيبـر انسـان ن زيسـتي سـت اسـتفاده از عوامـل كنتـرليط زيـو

ميگيستم دفاعيسيهاكنندهالقاء محيبرايرسد خطرياه كه به نظر و زيانسان ت كنترل آفـاتجهثرمؤيندارند راهستيطايطـور كـه نتـا همــان. باشـديمـيمحصـوالت كشـاورز مـيـن تحقيـج حاصــل از قــارچ چنـد هـر دهــديق نشـان اسـتفاده از

oligospora A.دل ريالروهايآن در به دام اندازيباالييل توانايبه نينماتد مولد گره و ازيشه بـه اسيد ساليسيليكز استفادهاليدل ن عوامـليـايقيواقع شده است اما كاربرد تلفثر مؤ M. javanicaز در كنترل نماتدينيياه به تنهايگيت دفاعيفعاليقال

هرثرمؤبه مراتب .كدام به تنهايي مي باشدتر از كاربرد


References 1. Cavalcanti F, Resende M, Carvalho C, Silveira J and Oliveira J. 2006. Induced defence

responses and protective effects on tomato against Xanthomonas vesicatoria by an aqueous extract from Solanum lycocarpum infected with Crinipellis perniciosa. Biological Control 39: 408–417.

2. Cayrol JC, Djian C and Pijarowski L. 1989. Study of the nematicidal properties of the culture filtrate of the nematophagous fungus Paecilomyces lilacinus. Revue de Nématologie 12: 331–336.

3. Chen C, Belanger RR, Benhamou N and Paulitz TC. 2000. Defense enzymes induced in cucumber roots by treatment with plant growth-promoting rhizobacteria (PGPR) and Pythium aphanidermatum . Physiological and Molecular Plant Pathology 56: 13–23.

4. Concellón A, Añón MC and Chaves AR. 2004. Characterization and changes in polyphenol oxidase from eggplant fruit (Solanum melongena L.) during storage at low temperature. Food Chemistry 88: 17–24.

5. Daly J, Ludden P and Seevers P. 1971. Biochemical comparisons of resistance to wheat stem rust disease controlled by the Sr6 or Sr11 alleles. Physiological Plant Pathology 1: 397–407.

6. Duponnois R, Mateille T and Gueye M. 1995. Biological characteristics and effects of two strains of Arthrobotrys oligospora from Senegal on Meloidogyne species parasitizing tomato plants. Biocontrol Science and Technology 5: 517–526.

7. Eisenback JD. 1985. Diagnostic characters useful in the identification of the four most common species of root-knot nematodes (Meloidogyne spp). pp. 95-112. In JN Sasser and CC Carter (eds). An advanced treaties on Meloidogyne. Vol 1: Biology and control. USA: North Carolina State University Graphics.

8. Jamshidnezhad V, Sahebania N and Etebariana H. 2013. Potential biocontrol activity of Arthrobotrys oligospora and Trichoderma harzianum BI against Meloidogyne javanica ontomato in the greenhouse and laboratory studies. Archives of Phytopathology and Plant Protection 46: 1632–1640.

9. He C and Wolyn D. 2005. Potential role for salicylic acid in induced resistance of asparagus roots to Fusarium oxysporum f. sp. asparagi .Plant Pathology 54: 227–232

10. Hussey R and Barker K. 1973. A comparison of methods of collecting inocula of Meloidogyne spp., including a new technique. Plant Disease Reporter 57: 1025–1028.

11. Katoch R, Mann APS and Sohal BS. 2005. Enhanced enzyme activities and induction of acquired resistance in pea with elicitors. Journal of Vegetable Science 11:67–83.

12. Kempster VN, Davies KA and Scott ES. 2001. Chemical and biological induction of resistance to the clover cyst nematode (Heterodera trifolii) in white clover (Trifolium repens). Nematology 3: 35–43.

13. Kosuge T. 1969. The role of phenolics in host response to infection. Annual Review of Phytopathology 7: 195–222.

14. Liu T, Li Y, Shi Y, Zhou B, Guo Y, Liu Z and Wen J. 2002. Induced resistance of tobacco to TMV with Non-fungicidal chemical compounds. Journal of Northeast Agricultural University 33: 129–133.

15. Loon LC and Geelen JLMC. 1971. The relation of polyphenoloxidase and peroxidase to symptom expression in tobacco var."Samsun NN" after infection with tobacco mosaic virus. Acta phytopathologica 6: 9–20.

16. Maleki Ziarati H. 2006. Biological control of root-knot nematode Meloidogyne javanica byTrichoderma harzianum and study on changes of some biochemical defence mechanisms in tomato [MSc]. [Tehran (IR)]: Abooreihan campus, Tehran University.

17. Mitchum MG, Sukno S, Wang X, Shani Z, Tsabary G, Shoseyov O and Davis E.L. 2004. The promoter of the Arabidopsis thaliana Cel1 endo‐1, 4‐β glucanase gene is differentially expressed in plant feeding cells induced by root‐knot and cyst nematodes. Molecular Plant Pathology 5: 175–181.


18. Nandi B, Banerjee N, Sukul N, Das P, Sengupta S and Sinha Babu S. 2002. Salicylic acid enhances resistance in cowpea against Meloidogyne incognita. Phytopathologia Mediterranea 41: 39–44

19. Nandi B, Kundu K, Banerjee N and Babu SPS. 2003. Salicylic acid-induced suppression of Meloidogyne incognita infestation of okra and cowpea. Nematology 5: 747–752.

20. Naseri Nasab F. 2011. Biological control of root-knot nematode Meloidogyne javanica and salicylic acid with combination of Trichoderma harzianum BI on tomato [MSc]. [Tehran (IR)]: Abooreihan campus, Tehran University.

21. Odjakova M and Hadjiivanova C. 2001. The complexity of pathogen defense in plants. Bulgarian Journal of Plant Physiology 27: 101–109.

22. Oliveira JTA, Andrade NC, Martins-Miranda AS, Soares AA Gondim DMF, Araújo-Filho JH, Freire-Filho FR and Vasconcelos IM. 2012. Differential expression of antioxidant enzymes and PR-proteins in compatible and incompatible interactions of cowpea (Vigna unguiculata)and the root-knot nematode Meloidogyne incognita. Plant Physiology and Biochemistry 51: 145–152.

23. Olthof THHA and Estey RH. 1963. A nematotoxin produced by the nematophagous fungus Arthrobotrys oligospora Fresenius. Nature 197: 514-515.

24. Omranzadeh F. 2008. Induction of resistance to the root-knot nematode (Meloidogyne javanica) in cucumber (Cucumis sativus) by some chemical and microbial inducers [MSc]. [Tehran (IR)]: Abooreihan campus, Tehran University.

25. Pakeerathank K, Mikunthan G and Tharshani N. 2009. Effect of different animal manures on Meloidngyne incognita (Kofoid and White) on tomato. World Journal of Agricultural Sciences 5: 432–435.

26. Raj SN, Sarosh B and Shetty H. 2006. Induction and accumulation of polyphenol oxidase activities as implicated in development of resistance against pearl millet downy mildew disease. Functional Plant Biology 33: 563–571.

27. Reuveni R. 1995. Biochemical Markers as Tools for Screening Resistance Against Plant Pathogens. pp. 21-45, In R Reuveni (ed). Novel Approaches to Integrated Pest Management Boca Raton: CRC Press.

28. Sahebani N and Hadavi N. 2008. Biological control of the root-knot nematode Meloidogyne javanica by Trichoderma harzianum. Soil Biology and Biochemistry 40: 2016–2020.

29. Sarafraz Nico F. 2009. Induction of resistance to the root-knot nematode (Meloidogyne javanica) in tomato by some chemical and microbial inducers and study of some active oxygens and related enzyms [MSc]. [Tehran (IR)]: Abooreihan campus, Tehran University.

30. Sharma P and Pandey R. 2009. Biological control of root-knot nematode; Meloidogyne incognita in the medicinal plant; Withania somnifera and the effect of biocontrol agents on plant growth. African Journal of Agricultural Research 4: 564–567.

31. Sikora RA and Fernandez E. 2005. Nematode Parasites of Vegetables. pp. 319–392, In M Luc, R. A. Sikora and J. Bridge (eds). Plant parasitic nematodes in subtropical and tropical agriculture. UK: CAB International.

32. Silva HSA, Romeiro RDS, Macagnan D, Halfeld-Vieira BDA, Pereira MCB and Mounteer A. 2004. Rhizobacterial induction of systemic resistance in tomato plants: non-specific protection and increase in enzyme activities. Biological Control 29: 288–295.

33. Simon S. and Anamika A. 2011. Management of root knot disease in rice caused by Meloidogyne graminicola through nematophagous fungi. Journal of Agricultural Science 3: 122–127.

34. Simons TJ and Ross A. 1970. Enhanced peroxidase activity associated with induction of resistance to tobacco mosaic virus in hypersensitive tobacco. Phytopathology 60: 383–384.

35. Singh UB, Sahu A, Singh RK, Singh DP, Meena KK, Srivastava JS and Renu Manna MC. 2012a. Evaluation of biocontrol potential of Arthrobotrys oligospora against Meloidogyne graminicola and Rhizoctonia solani in Rice (Oryza sativa L.). Biological Control 60: 262–270.


36. Singh UB, Sahu A, Sahu N, Singh R, Prabha R, Singh DP, Sarma B and Manna M. 2012b. Co-inoculation of Dactylaria brochopaga and Monacrosporium eudermatum affects disease dynamics and biochemical responses in tomato ( Lycopersicon esculentum Mill.) to enhance bio-protection against Meloidogyne incognita. Crop Protection 35: 102–109.

37. Singh UB, Sahu A, Sahu N, Singh RK, Renu S, Singh DP, Manna MC, Sarma BK, Singh HB and Singh KP. 2012c. Arthrobotrys oligospora‐mediated biological control of diseases of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) caused by Meloidogyne incognita and Rhizoctonia solani. Journal of Applied Microbiology 114: 196–208.

38. Singleton VL, Orthofer R and Lamuela-Raventos RM. 1999. Analysis of total phenols and other oxidation substrates and antioxidants by means of folin-ciocalteu reagent. Methods in Enzymology 299: 152–178.

39. Valette C, Andary C, Geiger J, Sarah J and Nicole M. 1998. Histochemical and cytochemical investigations of phenols in roots of banana infected by the burrowing nematode Radopholus similis. Phytopathology 88: 1141–1148.

40. Veenhuis M, Nordbring-Hertz B and Harder W. 1985. An electron-microscopical analysis of capture and initial stages of penetration of nematodes by Arthrobotrys oligospora. Antonie Van Leeuwenhoek 51: 385–398.

41. Vivekananthan R, Ravi M, Ramanathan A, Kumar N and Samiyappan R. 2006. Pre-harvest application of a new biocontrol formulation induces resistance to post-harvest anthracnose and enhances fruit yield in mango. Phytopathologia Mediterranea 45: 126–138.

42. Williamson VM. 1999. Plant nematode resistance genes. Current Opinion in Plant Biology 2: 327–331.

43. Yao H and Tian S. 2005. Effects of a biocontrol agent and methyl jasmonate on postharvest diseases of peach fruit and the possible mechanisms involved. Journal of Applied Microbiology 98: 941–950.

44. Zheng Y, Wang SY, Wang CY and Zheng W. 2007. Changes in strawberry phenolics, anthocyanins, and antioxidant capacity in response to high oxygen treatments. LWT-Food Science and Technology 40: 49–57.

5674 3 + ˘ ˇ+ 1 2 3˘ Arthrobotrys ... -...

Documents

Transcript of 5674 3 + ˘ ˇ+ 1 2 3˘ Arthrobotrys ... -...