乙型鏈球菌(GBS)鑑定乙型鏈球菌(GBS) 鑑定與藥物敏感性試驗流程介紹與藥物敏感性試驗流程介紹

台灣醫事檢驗學會台灣醫事檢驗學會台灣醫事檢驗學會台灣醫事檢驗學會

2015.07.05 2015.07.05 

2015.08.232015.08.23

1

乙型鏈球菌乙型鏈球菌((StreptococcusStreptococcus agalactiaeagalactiae,,乙型鏈球菌乙型鏈球菌((Streptococcus Streptococcus agalactiaeagalactiae, , Group B streptococcus, GBS)Group B streptococcus, GBS)

• 鏈球菌屬• 革蘭氏陽性鏈球菌(GPC in chain)• 革蘭氏陽性鏈球菌(GPC in chain)• 菌體直徑< 2 μm

GPC in cluster GPC in chain Gm (+) diplococcus

2

乙型鏈球菌乙型鏈球菌(GBS)(GBS)菌落特徵與生化特性菌落特徵與生化特性乙型鏈球菌乙型鏈球菌(GBS)(GBS)菌落特徵與生化特性菌落特徵與生化特性

綿羊血血液培養基上呈灰色半透明菌落(窄型之• 綿羊血血液培養基上呈灰色半透明菌落(窄型之Beta溶血或無溶血)

• 兼性厭氧• 兼性厭氧• 需5 % CO2可生長良好，24 hr培養菌落直徑大

小約大於0.5 mm小約大於0.5 mm• 革蘭氏陽性鏈球菌• 觸酶(Catalase)陰性觸酶(Catalase)陰性• CAMP test 陽性• Hippurate test 陽性 (具有hippuritase)Hippurate test 陽性 (具有hippuritase)• Lancefield grouping “B”

3

乙型鏈球菌乙型鏈球菌((Streptococcus Streptococcus agalactiaeagalactiae, , 鏈球菌鏈球菌(( pp gg ,,Group B streptococcus, GBS)Group B streptococcus, GBS)

α-Streptococcus β-Streptococcus γ- Streptococcus

S pneumoniae Gr A streptococcus EnterococcusS. pneumoniaeviridans streptococcusGr D streptococcus

Gr A streptococcusGr B streptococcusGr C streptococcus

EnterococcusGr.B streptococcusGr D streptococcusGr.D streptococcus

EnterococcusLactococcus

Gr.C streptococcusGr.G streptococcusGr D streptococcus

Gr.D streptococcus

LactococcusAerococcusG ll

Gr.D streptococcusGr.F streptococcusE tGemella

LeuconstocP di

Enterococcus

4

Pediococcus

溶血特徵比較溶血特徵比較‐‐ ‐‐ ‐‐溶血特徵比較溶血特徵比較

5

不同菌株間之不同菌株間之betabeta‐‐溶血特徵比較溶血特徵比較不同菌株間之不同菌株間之 溶血特徵比較溶血特徵比較

GAS GBS

菌落0.5mm窄溶血圏

S. aureus -strepto. non ABD

6

乙型鏈球菌檢驗鑑定流程圖乙型鏈球菌檢驗鑑定流程圖型鏈球菌檢驗鑑定流程圖型鏈球菌檢驗鑑定流程圖

7

常見鏈球菌之生化特性常見鏈球菌之生化特性常見鏈球菌之生化特性常見鏈球菌之生化特性

菌名(群) 溶血Lancefield group

CAMPHippuratehydrolysis

PYRBile‐

esculine/6 5% NaCl

Bacitracin6.5% NaCl

S. S. pyogenespyogenes AA ‐‐ ‐‐ ++ ‐‐//‐‐ SSS. S. agalactiaeagalactiae BB ++ ++ ‐‐ ‐‐/v/v RRS. S. 

CC ‐‐ ‐‐ ‐‐ ‐‐//‐‐ RRdysgalactiaedysgalactiae CC ‐‐ ‐‐ ‐‐ ‐‐//‐‐ RR

EnterococusEnterococus DD ‐‐ ‐‐ ++ +/++/+ RR

8

Enriched broth (LIM / Carrot broth) Enriched broth (LIM / Carrot broth) Subculture on BAPSubculture on BAP

GBS(‐)

GBS(‐)

Carrot broth (-) Enriched broth LIM broth / Carrot brothLIM broth / Carrot broth

9

Enriched broth (LIM / Carrot broth) Enriched broth (LIM / Carrot broth) Subculture on BAPSubculture on BAP

GBS(+)

GBS(+)( )

beta‐hemolytic GBS ~ 96%

Carrot broth (+)    Enriched broth 

GBS   96%

LIM broth / Carrot broth10

觸媒試驗觸媒試驗((CatalaseCatalase Test,3%Test,3% HH22OO22))觸媒試驗觸媒試驗((CatalaseCatalase Test,3%Test,3% HH22OO22))

1. 以木棒或牙籤將菌株挑取菌株，塗抹於測試卡片或玻片上

2. 滴入一滴配製好的 3% H2O23. 觀察是否產生氣泡

使用單一菌落避免挑到含血培養基

4. 陽性反應會產生大量氣泡，陰性則不會產生氣泡

陽性對照：S. aureus ATCC 25923陰性對照：S pyogenes ATCC 19615陰性對照：S. pyogenes ATCC 19615

陽性反應:產生大量氣泡

陰性反應:無氣泡產生 11

HippurateHippurate TestTest

1. 取出三管已分裝好的Hippurate試劑(每管0.4 mL)。

目的目的: : 測試菌株是否具有測試菌株是否具有HippuricaseHippuricase

取出三管已分裝好的 pp 試劑(每管 )2. 分別加入培養18‐24小時的測試菌株、陽性對照菌株(S. agalactiae ATCC 

12386)與陰性對照菌株(S. pyogenes ATCC 19615)，濃度約需達McF 3 (注意勿將培養基挑起，以免內含之蛋白質影響試驗結果)。勿將培養基挑起，以免內含之蛋白質影響試驗結果)。

3. 於35‐37℃培養2小時。4. 加入4滴的ninhydrin試劑。5. 於35‐37℃培養30分鐘。6. 每隔10分鐘觀察一次顏色，陽性反應會於30分鐘內出現深藍紫色變化，陰

性則呈現淡淡的紫色或不變色。

Hippuricase Ninhydrin Glycine Glycine ninhydrinninhydrin

Hi t b i l i

35℃, 4 hoursyy yy((深藍紫色產物深藍紫色產物))35 ℃, 30min

Hippurate = benzene ring + glycine

12

CAMP test CAMP test 

1. 以直線劃法將標準菌株 S. aureus ATCC 25923 劃於BAP中間的位置。

(Christie, Atkins, Munch(Christie, Atkins, Munch‐‐Peterson test)Peterson test)

2. 同樣以直線劃法，將測試菌株垂直步驟1之菌線劃於BAP上，切勿碰觸步驟1之菌線

將 於 ℃ 氧化碳( )培養箱中培養 小時3. 將BAP於35‐37℃，二氧化碳(5%)培養箱中培養18‐24小時。

4. 觀察在S. aureus與測試菌株之交界處是否產生箭頭狀(arrowhead)的加強溶血現象，有的話則為陽性反應，確認為乙型鏈球菌。溶血現象 有的話則為陽性反應 確認為乙型鏈球菌

5. 陰性則不會產生箭頭狀(arrowhead)的加強溶血現象。

GBS陽性反應:GAS陰性反應:

BAP QCS. aureus ATCC 25923

GBS陽性反應:箭頭狀加強溶血現象

陰性反應無加強溶血現象

S. aureus ATCC 2592313(‐hemolysin) 

LancefieldLancefield血清分型血清分型清分清分((Lancefield Lancefield  grouping)grouping)

Group A ‐ Streptococcus pyogenes (GAS)Group B Group B ‐‐ Streptococcus agalactiaeStreptococcus agalactiae (GBS)(GBS)Group C – S equisimilis S zooepidemicus S equiGroup C  S. equisimilis, S. zooepidemicus,  S. equi, 

S. dysgalactiaeGroup D ‐ Enterococci, S. bovisGroup E – S. milleri and mutansGroup E  S. milleri and mutansGroup F – S. anginosusGroup G – S. canis and S. dysgalactiaeGroup H – S. sanguis

Rebecca Craighill Lancefield (Jan 5, 1895 – Mar 3, 1981) 美國微生物學家

p gGroup L – S. dysgalactiaeGroup N ‐ Lactococcus lactisGroup R&S ‐ Streptococcus suis美國微生物學家

主要貢獻:GAS和風濕熱的關聯性研究beta‐溶血性鏈球菌的血清分型

non‐Lancefield Streptococci ‐ other Strep. spp 

溶血性鏈球菌的血清分型(依細胞壁上之碳水化合物組成不同而分型)

14

鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗鏈球菌 清分 乳膠凝集試驗鏈球菌 清分 乳膠凝集試驗(Latex serologic test for streptococcal grouping)(Latex serologic test for streptococcal grouping)

15

依照廠商說明書操作菌株: Streptococcus

鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗鏈球菌 清分 乳膠凝集試驗鏈球菌 清分 乳膠凝集試驗(Latex serologic test for streptococcal grouping)(Latex serologic test for streptococcal grouping)

Lancefield grouping Beta 溶血性鏈球菌Beta‐溶血性鏈球菌的血清分型

無凝集(陰性) 凝集反應(陽性)無凝集(陰性) 凝集反應(陽性)

16

商業化鑑定儀器商業化鑑定儀器//套組套組商業化鑑定儀器商業化鑑定儀器//套組套組

VITEK 2

Phoenix

MALDI-TOF

API Strep 2017

常見窄型溶血細菌之生化特性常見窄型溶血細菌之生化特性常見窄型溶血細菌之生化特性常見窄型溶血細菌之生化特性

菌名(群) G t iLancefield 

t l CAMPHippurate

PYR 6 5% N Cl菌名(群) Gram staingroup

catalase CAMPpp

hydrolysisPYR 6.5% NaCl

S. S. agalactiaeagalactiae

GPC in GPC in short Chainshort Chain

BB ‐‐ ++ ++ ‐‐ vvagalactiaeagalactiae short Chainshort Chain

E.E. faecalisfaecalisGPC inGPC in

shortshort Chain, Chain, in pairin pair

DD ‐‐ ‐‐ ‐‐ ++ ++in pairin pair

ListeriaListeria Short GPBShort GPB ‐‐ ++ ++ ‐‐ ‐‐ ‐‐

SmearSmearcatalase

18

103年孕婦乙型鏈球菌檢驗機構調查彙總 (回覆家數：140家)

鑑定 回覆 家數 百分比 附註是否操作觸媒 (3% t l )試驗？

是 128 91.4否 12 8 6catalase)試驗？ 否 12 8.6

是否操作CAMP test？是 92 65.7否 47 33.6

未回覆 1 0 7未回覆 1 0.7

是否操作Hippuratehydrolysis test

是 3 2.1否 133 95.0

未回覆 4 2 9未回覆 4 2.9

是否操作乙型鏈球菌血清

是 102 72.9Prolex TM latex Agglutination system(34)、Remel streptex(17)、PRO‐LAB DIAGNOSTICS(12)、OXOID(8)、BIO‐RAD(6)

' l ( )是否操作乙型鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗

BioM'erieux SLIDEX Strepto Plus(4)、PASTOREXTM Strep(2)、Phadebact Strep B test(2)、BD DirectigenTMMeningitis Combo test(1)、SLIDEX ® l (1) Th (1)

否 36 25.7

未回覆 2 1.4SLIDEX ® streptoplus(1)、Thermo(1)

是否使用自動化鑑定儀器或商業化套組

是 61 43.6Vitek 2(29)、Phoenix(23)、BBL crystal(4)、BrukerMALDI‐TOF(3)、API(2)、Microscan(2)、MASS(1)否 76 55.0

未回覆 2 1 4未回覆 2 1.4

19

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

• CLSI 建議的方法:

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

CLSI 建議的方法:– 紙錠擴散法

肉湯稀釋法 /培養基稀釋法CLSI M100‐S25

– 肉湯稀釋法 /培養基稀釋法• E test

20• Automatic MIC methods

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

• CLSI 建議的方法:

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

CLSI 建議的方法:– 紙錠擴散法

培養基：MH BAP• 培養基：MH-BAP• 菌落：BAP overnight (18-20小時)菌落調菌方式 直接調菌 (b h / li )• 調菌方式：直接調菌 (broth / saline)

• 濃度：McFarland No. 0.5培養環境 溫箱 ℃• 培養環境：5% CO2 溫箱，35 ± 2℃

• 培養時間：20~24 hrs

21

紙錠法紙錠法Mueller‐Hinton BAP Agar

紙錠法紙錠法

susceptibility tests判讀標準是使用此培養皿累積而得

approximately 4 mm

pH (7.2-7.4)< pH7.2 -- lose potency: macrolides, aminoglycosides, quinolone

excessive activity: tetracyclinesexcessive activity: tetracyclines> pH7.4 -- opposite effects can be expected

thymidine or thymine影響thymidine or thymine影響Thymidine and thymine in the M-H agar can reverse the inhibitory effect of sulfonamides and trimethoprim

M 2 C 2 影響 f P iMg2+, Ca2+影響- for P. aeruginosa22

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

於TSB或無菌生理食鹽水調成0 5 McF濃

藥物感受性試驗藥物感受性試驗

使用無菌棉棒挑取經培養18‐20小時的菌落

鹽水調成0.5 McF濃度之懸浮液

將無菌粗棉棒浸潤於已調好

藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗

準備菌液• 準備菌液-Direct Colony Suspension Method- McFarland No.0.5- 1-2*108 CFU/mL- 15分鐘內接種

24

藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗Retro 80 Inoculator

-塗菌方式- 三向法三向法- 不可與挑菌共用同 支棉棒同一支棉棒

- 15分鐘內打紙錠(24mm) Rotate 60˚Rotate 60˚

15分鐘內放CO 溫箱- 15分鐘內放CO2溫箱25

藥物感受性藥物感受性試驗試驗((結果判讀結果判讀))

反射光R fl d li h

藥物感受性藥物感受性試驗試驗((結果判讀結果判讀))

• 反射光Reflected light– 在暗色的背景E b i h– Enterobacteriaceae, other gram‐nagative bacilli, staphylococci, enterococci p y ,streptococci (拿掉蓋子)

• 透射光Transmitted light透射光 g– Oxacillin for staphylococci– Vancomycin for yenterococci

26

藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗藥物感受性試驗((結果判讀結果判讀))

• 量取生長抑制圈(非溶血圈)

•不要由背面量•不要由背面量Disk MIC

S I R S I RPenicillin 24 - - 0.12 - -

Ampicillin 24 - - 0.25 - -Ampicillin 24 0.25

Clindamycin 19 16-18 15 0.25 0.5 1

Erythromycin 21 16-20 15 0.25 0.5 1

27

Vancomycin 17 - - 1 - -CLSI M100-S25,2015

Staphylococcus, ‐hemolyticp y , yStreptococci* 

h i / li d iErythromycin / Clindamycin

Mechanism Determinant Ery Clin

Efflux msrA mef R SEfflux msrA, mef R S

Ribosome modification erm C R S**

Ribosome modification erm B R Rconstitutive

* Groups A, B, C, G* Groups A, B, C, G**requires induction to show resistance**requires induction to show resistance

28

MH‐BAP or BAP

29CLSI M100‐S25

操作操作D testD test((偵測誘發型克林達黴素抗藥性偵測誘發型克林達黴素抗藥性))

12 12 mmmmE CC

• 發生在E(R/I), CC(S)時• 菌株具有 erm 基因 E CC• 菌株具有 erm 基因• 以D test試驗偵測

D t t ( )操作藥物感受性試驗時，將 E與CC紙錠貼距12 mm的距離

D test (‐): 不具有誘發型克林達黴素抗藥性

• 當CC周圍出現盾狀(D型)抑制圈時為陽性結果

E CC• 陽性結果 D test(+)出現時，表示菌株具有誘發型克林達黴素抗藥性，須將 CC結果修正為 “R”

3

須將 CC結果修正為 “R” D test (+): 具有誘發型克林達黴素抗藥性

D testD test 陽性結果陽性結果陽性結果陽性結果((誘發型克林達黴素抗藥性誘發型克林達黴素抗藥性))

Photo courtesy of Dr. Lesley McGee, CDC

當CC周圍出現盾狀(D型)抑制圈時為陽性結

31

果，表示菌株具有誘發型克林達黴素抗藥性，須將 CC結果修正為 “R”

藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果

VA

P

AM

CCCC

E

P(S), AM(S), CC(S), E(R), VA(S), D test(-)32

藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果藥物感受性試驗結果

E

P

CC

AM

VA

CC

P(S) AM(S) CC(S) E(R) VA(S) D test(+)P(S), AM(S), CC(S), E(R), VA(S), D test(+)修正為修正為 P(S), AM(S), P(S), AM(S), CC(R),CC(R), E(R), VA(S)E(R), VA(S) 33

Streptococcus GrBStreptococcus Gr.B Organism or group Category I

Not reported or only rarely reported to dateNot reported or only rarely reported to dateConfirm ID and susceptibility

-streptococcus Ampicillin or penicillin – NS

22mm >24mm

Vancomycin - NS CLSI M100‐S25

• Penicillin R• Ampicillin S

X22mm‐>24mm

S

p

• Vancomycin S  • Erythromycin R• Erythromycin R• Clindamycin SX D zone test (+) R

34

103年孕婦乙型鏈球菌檢驗機構調查彙總 (回覆家數：140家)

藥敏 回覆 家數 百分比附註藥敏 回覆 家數 百分比附註

是否操作D‐one test？

是 133 95.0否 5 3.6

zone test？未回覆 2 1.4Mueller‐

123 87.9操作抗生素敏感性試驗使用

Hinton BAP123 87.9

BAP 7 5.0Phoenix Vitek 2 AST之培養基

其他 13 9.3Phoenix、Vitek 2 AST ST‐01 Card、MicroScanMicroScan

35

2015年1~5月各檢驗機構Penicillin/Ampicillin/Vancomycin抗藥

100 機構家數

80

90

100 機構家數

60

70 P

AM

40

50 VA

105 610

20

30

1 1 25 2 1 2

61 0 0

0

10

0 1 2 3 >3抗藥件數

36

件

2015年1~5月Erythromycin/Clindamycin抗藥2015年1 5月Erythromycin/Clindamycin抗藥

60 機構家數

50

30

40

20

CC

E

3

5

3 40

10

抗藥比率

37

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則中華民國102年7月修訂

設有檢驗單位之醫院或聯合診所 或獨立設置之設有檢驗單位之醫院或聯合診所，或獨立設置之檢驗所(以下稱檢驗醫事機構)符合下列資格之ㄧ者 國健署得核予孕婦乙型鏈球菌檢驗醫事機構者，國健署得核予孕婦乙型鏈球菌檢驗醫事機構資格：

(一)經財團法人全國認證基金會(TAF)細菌培養檢驗與藥物感受性試驗檢驗項目認證。

(二)經本署認可之機構或團體之認證。

(三)經本署委託機構或團體辦理孕婦乙型鏈球菌檢驗與藥物感受性試驗能力測試合格。檢驗與藥物感受性試驗能力測試合格

38

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則符合前點資格者，得檢附下列文件一式三份 向國健署提出申請資格審查：

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

份，向國健署提出申請資格審查：

(一)申請表

(二)衛生局核發之開業執照影本。

(三)醫事檢驗人員相關證明文件。

(四)乙型鏈球菌培養檢驗之儀器資料。

序(五)乙型鏈球菌培養及檢驗標準操作程序書。

(六)符合前點規定之資格證明文件。 39

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

資格審查(由國健署或其得聘請專家/委託相關學會辦理)(由國健署或其得聘請專家 委 相關學會辦 )

取得資格審查後，始得接受國健署及醫事服務機構取得資格審 後 始得接受國健署及醫事服務機構委託辦理預防保健服務孕婦產前檢查之孕婦乙型鏈球菌檢驗。檢

40

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過國健署資格審查後，應配合辦理下列事項：

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過國健署資格審查後 應配合辦理下列事項

(一)應於收到檢體後七日內，通知委託代檢醫療機構其檢查結果。如有陽性檢查結果，應優先通知送其檢查結果。如有陽性檢查結果，應優先通知送檢機構。

(二)孕婦乙型鏈球菌檢查結果，應於檢驗後十四日內，依國健署規定之格式，登錄於國健署指定管內 依國健署規定之格式 登錄於國健署指定管理系統。

(三)持續辦理內部品管，並定期依品管稽核表之項目自我稽核，且針對缺失提出改善措施，相關資料應完整保留，以備國健署抽查。

41

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過國健署資格審查後，應配合辦理下列事項(續)：

(四)定期接受國健署委託機構或團體辦理此類檢驗與(四)定期接受國健署委託機構或團體辦理此類檢驗與藥物感受性試驗之外部能力試驗。

(五)因執行孕婦乙型鏈球菌檢驗之檢驗醫事機構人員離職，致無具資格人員執行業務，或有其他因素致不能執行業務時，應立即停止辦理孕婦乙型鏈球菌檢驗業務，經主管機關限期改善，並改善完竣者，始得恢復辦理。

42

43

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查後 有以下情形之 者 必須接受

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查後，有以下情形之一者，必須接受實地檢查：

(一)經檢舉有缺失。

(二)經資料分析 檢驗品質差異過大(二)經資料分析，檢驗品質差異過大。

(三)其他基於業務需要，應進行實地檢查。(三)其他基於業務需要 應進行實地檢查

44

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查之檢驗醫事機構，有以下情形之一

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查之檢驗醫事機構，有以下情形之者，應取消其資格：

未依規定及期限申報個案檢查資料或申報之資料(一)未依規定及期限申報個案檢查資料或申報之資料不完整、不正確，經通知限期補正，逾期未補正正。

(二)經查有偽造個案檢查資料情事或其他情節重大之(二)經查有偽造個案檢查資料情事或其他情節重大之情形。

(三)經實地檢查，確有重大缺失。

45

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查之檢驗醫事機構，有以下情形之一者，

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

通過資格審查之檢驗醫事機構 有以下情形之 者應取消其資格(續)：

(四)使用未經衛生福利部查驗登記領有許可證之檢驗(四)使用未經衛生福利部查驗登記領有許可證之檢驗試劑及儀器設備。

(五)經查有第六點第五款之情形，經主管機關限期改善而未於期限內改善者。善而未於期限內改善者

(六)喪失第二點所定資格 (TAF/認證/能力試驗合格)。

46

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

經取消資格者 自取消之日起 屆滿三個月後 始得

檢驗醫事機構資格審查原則檢驗醫事機構資格審查原則

經取消資格者，自取消之日起，屆滿三個月後，始得檢附第二點文件及改善計畫之實施成果報告，重新提出申請出申請。

47

Q & A (15)Q & A (15)

• Q: 使用鏈球菌血清分型乳膠凝集試驗 (Latex serologic test for streptococcal grouping)鑑定g p g p g)鑑定GBS，是否應操作品管測試？

A: 正確，依試劑操作說明執行陽性品管與陰性品管測試。

48

Q & A (17)Q & A (17)

• Q: 使用紙錠擴散法操作GBS的抗生素藥物敏感性試驗，應該採用何種培養基？(102.12感性試驗 應該採用何種培養 (增修)

A: 應使用含5%綿羊血的M‐H agar，不可以使用一般的BAP來取代。使用一般的BAP來取代。

49

Q & A (18)Q & A (18)

有• Q: 乙型鏈球菌的抗生素敏感性試驗方法有哪些？哪

A:依據臨床與實驗室標準協會（Clinical and Laboratory Standards Institute ; CLSI）建議乙型鏈球菌的敏感性試驗包括紙錠建議 型鏈球菌的敏感性試驗包括紙錠擴散法、微量稀釋法或經查驗登記合格的商品化套組。的商品化套組

50

Q & A (19)Q & A (19)

• Q: 乙型鏈球菌的抗生素敏感性測試是否需要包括inducible clindamycin resistance的試要 括 y 的試驗？

是的 因有部分的乙型鏈球菌具有誘A: 是的，因有部分的乙型鏈球菌具有誘導型clindamycin抗藥，因此若有懷疑應操作D‐zone test。且應注意將erythromycin與clindamycin的紙錠相隔12erythromycin與clindamycin的紙錠相隔12 mm。

51

Q & A (20)Q & A (20)

• Q: 操作乙型鏈球菌的D‐zone test與金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）的D‐zone 萄球菌（ p y ）的test是否有所不同？

A: 是的，金黃色葡萄球菌的D‐zone test中 th i 與 li d i 的紙錠距中，erythromycin與clindamycin的紙錠距離相隔15‐26 mm，相對的GBS的D‐zone test，erythromycin與clindamycin的紙錠距離為12 mm。距離為

52

Q & A (21)Q & A (21)

• Q: 臨床上普遍會以Cefamezin(cefazolin)來治療孕婦乙型鏈球菌的感染，實驗室是否應療孕婦乙型鏈球菌的感染 實驗室是否應操作此抗生素的敏感性測試？

A: 依據CLSI的建議，若乙型鏈球菌菌株對於penicillin有效時，同時也表示對ampicillin, amoxicillin, amoxicillin‐clavulanic acid ampicillin sulbactam cefazolin cefepimeclavulanic acid, ampicillin‐sulbactam, cefazolin, cefepime, cephradine, cephalothin, cefotaxime, ceftriaxone, ceftizoxime, imipenem, ertapenem, and meropenem等藥ceftizoxime, imipenem, ertapenem, and meropenem等藥物有效，因此不需再操作上述抗生素的敏感性測試，直接引用penicillin測試結果。

53

Q & A (22)Q & A (22)

• Q: 依據CLSI的建議，若GBS菌株對於penicillin有效時，同時表示對ampicillin, p 有效時 同時表示對 p ,cefazolin等藥物有效，所以可直接以penicillin結果發ampicillin報告嗎? (102 12增penicillin結果發ampicillin報告嗎? (102.12增修)

A: 可以，不需再操作上述藥物的敏感性試驗，直接引用penicillin測試結果。

54

Q & A (23)Q & A (23)

無• Q: 自動化鑑定儀器(Vitek 2, Phoenix,等)若無ampicillin藥物結果，是否可直接以penicillinp 藥物結果 是否可 接 p結果發ampicillin報告? (102.12增修)

A:可以，不需再操作上述藥物的敏感性試A:可以 不需再操作上述藥物的敏感性試驗，直接引用penicillin測試結果。

55

Q & A (24)

床 會 敏

Q & A (24)

• Q: 臨床上會將抗生素敏感性試驗的intermediate (I)當作resistant (R)嚴謹看待，但學會之GBS測驗結果卻將兩者分開統計，或是以受測家數較多答案者為主要答案，而造成受測單位結果異常答案者為 要答案 而造成受測單位結果異常，是否可將I、R統一計算。(103年增修)

A 學會的能力試驗是依達80 %的 致性作為評A: 學會的能力試驗是依達80 %的一致性作為評估標準，且國際上規範如CAP也是以此標準作評估 若檢驗單位的答案與 %受測家數的答評估。若檢驗單位的答案與80 %受測家數的答案不同，應自行檢討在抗生素敏感性試驗上的流程。

56

Q & A (25)Q & A (25)

• Q:如果紙錠法及商品化藥敏套組所作的D‐zone結果不同，應如何處理? 。(103年增修)

A: D‐zone檢測時，使用Disk diffusion methodA: D zone檢測時 使用Disk diffusion method是標準方法，商品化產品上市前，都與標準方法比較 必須有 定比率以上的 致性結方法比較，必須有一定比率以上的一致性結果。當發現有方法間的差異時，應告知原廠 廠廠，請原廠進行測試並找出差異的原因。

57

感謝聆聽感謝聆聽感謝聆聽感謝聆聽

58