1Estructuras y morfología
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BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA
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EN EL LABORATORIO
• USAR TÚNICA• EN LA MESADA SOLO
MATERIALES DE TRABAJO• SENTARNOS SOLO EN LAS
SILLAS• NO COMER, BEBER NI
FUMAR• CABELLO RECOGIDO
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MANTENER EL ORDEN Y LIMPIEZA
• LIMPIAR LA MESADAS ANTES DE TRABAJAR
• DESCARTAR LOS MATERIALES CONTAMINADOS EN BOCALES
• DESCARTAR MATERIALES NO CONTAMINADOS EN LA BASURA
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FRENTE A CUALQUIER ACCIDENTE
• AVISAR INMEDIATAMENTE AL DOCENTE RESPONSABLE
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LAVARSE LAS MANOS
• DESPUES DE TRABAJAR CON MUESTRAS O CULTIVOS
• ANTES DE SALIR DEL LABORATORIO
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PROTECCION PERSONAL
USO DE TÚNICA SIEMPRE
PARA SITUACIONESESPECIALES:-ROPA ESPECIAL-GUANTES-LENTES-TAPABOCAS OTROS
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TAMAÑO: célula eucariota versus célula procariota
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Organelos eucarióticos : Cloroplastos
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Organelos eucarióticos: Mitocondria
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cocos bacilos espirilos
FORMA DE LAS BACTERIAS
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V. cholerae L. Monocytogenes
Helycobacter pylori Campylobacter sp.
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FLORA NORMAL VAGINAL
lactobacilos
célula epitelial
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Streptococcus
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Cocos gram positivos
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Bacilos Gram negativos
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Coloración de Ziehl- Neelsen
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Esquema de E. coli
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Micrografía electrónica de barrido mostrando Klebsiella sp
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Estructura celular procariota - DNA• No tiene núcleo. El DNA está en el
citoplasma. Se habla de “nucleoide” para referirse a la zona que ocupa el DNA.
• Es haploide. El genoma es una única molécula de DNA de doble cadena, circular.
• El genoma contiene 1 - 6 x 106 pares de bases (bp) en procariotas de vida libre; 1000-5000 genes.
• Puede contener otros elementos genéticos no indispensables para la vida: plásmidos y genomas fágicos.
• Está rodeada por la membrana celular y cubiertas exteriores de naturaleza variable.
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La membrana celularFunciones:
– Transporte selectivo de sustratos.
– Participa en la generación de energía y en la división celular.
Estructura:– Bicapa fosfolipídica con proteínas
embebidas; puede contener también hopanoides de estructura similar al colesterol.
– *en Archaea, membranas adaptadas a condiciones extremas - éteres de alcohol isoprenoide, algunas monocapas.
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Membrana fotosintética en láminas (bacterias púrpuras)
Membrana como vesículas individuales (bacterias púrpuras)
Clorosomas unidos a membrana plasmática (bacterias verdes)
Bacterioclorofila asociada directamente a la membrana plasmática (Heliobacterium)
Otro sistemas de membrana
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Esquema de la estructura de la pared bacteriana
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ESQUEMA DE LA PARED GRAM POSITIVA
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Gram
+Gram
Eubacterias
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Muropéptido de Gram –
Péptidoglicano de Gram -
Péptidoglicano de Gram +
Peptidoglicano o mureína
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Peptidoglicano o mureína
• Funciones: formando un saco rígido y cerrado, confiere forma a la bacteria y previene la lisis osmótica.
• Estructura: Polímero de muropéptidos. – Muropéptido: Es el monómero, compuesto por N-acetil
glucosamina (NAG) y ácido N-acetil murámico (NAM) en unión (1,4), más un tetrapéptido unido a NAG.
– Cadenas de glicanos: los monómeros se unen formando cadenas lineales NAG-NAM-NAG-NAM-NAG-NAM-------
– Entrecruzamientos: los tetrapéptidos quedan perpendiculares a las cadenas lineales y se unen a los tetrapéptidos de las cadenas vecinas por enlaces peptídicos, creando la malla de péptidoglicano.
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arabinogalactano
Cord factor
Ac. Micólico
Lipoarabinomanano LAM (lipopolisacarido)
Acyl -lipido
polisacarido
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Paredes celulares Gram positivas y Gram negativas
• Las bacterias se agrupan en base a su tinción por la técnica de Gram.– Gram positivos - Pared celular con grueso
peptidoglicano que retiene un colorante específico. No tienen membrana externa.
– Gram negativos - pared celular compleja, con membrana externa y un espacio entre membrana interna y externa -el periplasma- que contiene el saco de mureína y abundantes enzimas. El peptidoglicano es fino, por lo que no retienen el colorante.
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Pared celular Gram positiva
• Posee un polímero de peptidoglicano.– Organismos gram positivos altamente sensibles a
antibióticos -lactámicos
• Ácidos teicoicos confieren carga negativa a la pared celular.
• Ácidos lipoteicoicos anclan la pared a la membrana plasmática
• No funciona como barrera de permeabilidad
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Pared celular Gram negativa
• Membrana externa de bacterias gram negativas – Capa externa consituída por lipopolisacáridos (LPS)
– Capa interna de fosfolípidos; unida a peptidoglicano por lipoproteínas
• Proteínas porinas permiten el pasaje (de pequeñas moléculas) al periplasma
• Proteínas de enlace periplasmáticas unen nutrientes, interactúan con proteinas de transporte en membrana plasmática para facilitar el ingreso de nutrientes.
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Lipopolisacárido (LPS)
• Lípido A (NAG-P + grupos acilos) • Núcleo del polisacárido
– contiene KDO (cetodesoxioctonato) otros carbohidratos (ramnosa, ácido galacturónico)
– usualmente específico de especies
• O-antigen – número de repeticiones variables – también contiene carbohidratos – específico de cepa
• A menudo tóxico para animales - endotoxina
• Crea superficies densamente hidrofílicas
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Otros polisacáridos extracelulares
• Glicocalix – Cápsulas - altamente organizado– Capas mucilaginosas - menos
organizado– Usualmente constituído por
polisacáridos
• Funciones– Protección contra defensas del
huésped– Protección contra desecación– Protección contra virus, toxinas– Adhesión a superficies
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Streptococcus pneumoniae-cápsula
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Fimbria, Pili, Flagelo
• Fimbria - filamento proteico corto, involucrado en funciones de adhesión a superficies.
• Pelo sexual - unión a célula receptora durante la conjugación.
• Flagelo - filamento proteico involucrado en la motilidad.
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Flagelos
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•Localización y número frecuentemente usados para distinguir bacterias.
–Solo detectado por técnicas de tinción específicas
–monotrico - único flagelo polar
–anfitrico - uno en cada extremo
–lofotrico - agrupados en un extremo
–peritrico - todo alrededor
Flagelos
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Micrografía electrónica de Proteus vulgaris
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Mecanismo de acción flagelar
• Rotación de anillos en el cuerpo basal estaría dirigido por gradiente de H+ - no ATP.
• Rotación antihoraria produce movimiento hacia adelante:corridas.
• Rotación horaria causa cese del movimiento hacia adelante: vueltas
• Corridas/ Vueltas controladas por quimioatrayentes y repelentes
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Endosporas
• Resistencia al calor, radiación, desecación.
• Producidas principalmente por los géneros Bacillus y Clostridium
• Permite la supervivencia en ambientes desfavorables
• DNA protegido por ácido dipicolínico y proteínas
• Luego de la activación por stress, la disponibilidad de nutrientes dispara la germinación y el crecimiento
• La localización de la espora en la célula puede ser usada para la identificación
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Clostridium botulinum
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Inclusiones citoplasmáticas
• Algunas bacterias tienen estructuras internas– gránulos de almacenamiento - polifosfato,
sulfuro, polihidroxibutirato (PHBs)– vesículas de gas - flotación– membranas fotosintética y respiratoria
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DIFERENTES MORFOLOGÍAS COLONIALES
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Colonia Lactosa negativa
Colonia Lactosa positiva
MEDIO SELECTIVO Y DIFERENCIAL
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HEMOLISIS EN AGAR SANGRE
HEMÓLISIS COMPLETA HEMÓLISIS PARCIAL
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S. epidermidis en agar sangre
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Serratia marcescens
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Pseudomonas aeruginosa
Siembra en medio OF
Metabolismo oxidativo