PRACTICA DE LABORATORIO BIOQUMICA FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS Universidad Nacional De Colombia - Sede: PalmiraFacultad De Ingeniera Y AdministracinIngeniera Ambiental

RESUMEN

En esta prctica se realizaron diferentes procedimientos para explorar el efecto de la temperatura, la variacin de pH y la presencia de cianuro sobre la actividad de la Peroxidasa, con el objetivo de evidenciar los factores que afectan la actividad de las enzimas. Ya que la enzima objeto de examen en esta practica se cataloga como xido-reductasa, se encuentra de forma abundante en hortalizas verdes, en este caso se utilizo la espinaca, por lo cual el primer procedimiento realizado fue la deteccin de la actividad de la Peroxidasa, posteriormente se prob el efecto de la temperatura, el efecto de la variacin del pH y el efecto del cianuro para comprobar experimentalmente como afectan estos factores sobre la actividad de dicha enzima.

Palabras Clave: Enzima, temperatura, pH, Cianuro, Peroxidasa

Introduccin.

Las enzimas son molculas de naturaleza proteica y estructural que catalizan reacciones qumicas, siempre que sean termodinmicamente posibles: una enzima hace que una reaccin qumica que es energticamente posible pero que transcurre a una velocidad muy baja, sea cinticamente favorable, es decir, transcurra a mayor velocidad que sin la presencia de la enzima. En estas reacciones, las enzimas actan sobre unas molculas denominadas sustratos, las cuales se convierten en molculas diferentes denominadas productos. Casi todos los procesos en las clulas necesitan enzimas para que ocurran a unas tasas significativas. A las reacciones mediadas por enzimas se las denomina reacciones enzimticas. La Peroxidasa es un tipo de enzima muy extendida en toda la escala filogentica. Pertenecen a la categora de las xido-reductasas, catalizan reacciones bisustrato de carcter redox, utilizando un perxido como oxidante (a lo que deben su nombre) y un segundo sustrato de caractersticas reductoras que es oxidado por el perxido.

Protocolo. 1.

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Resultados. Deteccin de la Peroxidasa La reaccin ocurre inmediatamente y cambia el color a caf rojizo inmediatamente

Efecto de la temperatura A temperatura ambiente la reaccin ocurre de manera muy rpida y se observa la formacin de espuma, al igual que un cambio de color a un tono caf rojizoA una temperatura de 37C, la reaccin ocurre de forma casi inmediata un poco ms lenta comparado con el tubo que estaba temperatura ambiente, pero tambin se observa aparicin de espuma y cambio en la coloracin. A una temperatura de 100C, no ocurre reaccin

Efecto de la variacin del pHLa velocidad de reaccin en cada tubo de ensayo en orden descendente, (del ms rpido al ms lento) es la siguiente pH 5 , pH 9, pH 7, pH 12

Efecto del cianuro No hubo reaccin

Anlisis de los resultados.Los resultados obtenidos a partir de las pruebas realizadas para determinar el efecto de la temperatura en la actividad de la enzima Peroxidasa, afirman que al igual que ocurre con la mayora de las reacciones qumicas, la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas se incrementa con la temperatura. Sin embargo, a diferencia de lo que ocurre en otras reacciones qumicas, en las reacciones catalizadas por enzimas se produce un descenso de la actividad cuando se alcanza una temperatura crtica. Este efecto no es ms que un reflejo de la desnaturalizacin trmica del enzima cuando se alcanza dicha temperatura.Por otra parte, los resultados obtenidos a partir de las pruebas realizadas para determinar el efecto de la variacin de pH en la actividad de la enzima Peroxidasa, afirman que la mayora de las enzimas presentan un pH ptimo para el cual su actividad es mxima; por encima o por debajo de ese pH la actividad disminuye. Este efecto se debe a que, al ser las enzimas de naturaleza proteica, al igual que otras protenas, se desnaturalizan y pierden su actividad si el pH vara ms all de unos lmites estrechos. De ah la conocida importancia biolgica de los sistemas tampn.Finalmente en los resultados obtenidos a partir de las pruebas realizadas para determinar el efecto del cianuro, se observo que no hubo reaccin, puesto que este es un inhibidor y anula la accin de la enzima. La Peroxidasa, es una enzima que cataliza la oxidacin de un amplio nmero de sustratos orgnicos e inorgnicos, utilizando el poder oxidante del perxido de hidrgeno, esta enzima utiliza como cofactor el grupo hemo; es por esto que el cianuro acta sobre dicho grupo dando lugar a una inhibicin; es decir impide la entrada del sustrato al sitio activo de la enzima y afecta la catlisis correspondiente a dicha enzima.

Conclusiones.

Diferentes factores ambientales como la variacin de pH, temperatura o presencia de inhibidores pueden afectar a la actividad enzimtica.

Las enzimas son los catalizadores biolgicos muy importantes ya que casi todos los procesos en las clulas los necesitan para que ocurran a unas tasas significativas.

Bibliografa.

Ospina Giraldo, B. L., 2010. Manual de prcticas de laboratorio de bioqumica. :Universidad Nacional de Colombia

Ospina Giraldo, B. L., Introduccion a la Bioquimica. Universidad Nacional de Colombia

Lehninger, A. , Principios de Bioqumica. 4ed. New York Publishers