Cálamo-Aromático - Acorus calamus L. - Ficha Completa Ilustrada
1.- Espectroscopía UV-Vis 1.1.- Interacción de la luz con...
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Caracterización de Materiales y defectosEspectroscopía UV-VIS
1.- Espectroscopía UV-Vis
1.1.- Interacción de la luz con la materia
�Reflexión.- Reflectancia = R= I R/I0�Absorción.- Transmitancia = T= I T/I0
Absorbancia = - Log T = Log I 0/IT�Luminiscencia�Dispersión o esparcimiento Tipo de cubetas : Cuarzo y PMMA
Fco. Javier González Benito
Figura tomada de:-ALBELLA, J.M.; CINTAS, A.M.; MIRANDA, T. y SERRATOSA, J.M.: "Introducción a la ciencia de materiales". C.S.I.C., 1993.
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1.2.- Medición de la Transmitancia y/o Absorbancia
Tipo de cubetas : Cuarzo y PMMA
Obtención de Línea base:
- Ajuste al 0% de T (o de corriente oscura)
- Ajuste al 100% de T
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I0 I
dx
S
l
1.3.- Ley de Beer
En el elemento dx: I = I0 - dI
Fracción de intensidad que se pierde = -dI/I = A·dx = α·c·dx (A es constante)
Para una muestra de longitud l (paso óptico):
∫∫ =−lI
Idxc
I
dI0
·0
α lcII
lcII··
0
0
10·
)···exp(ε
α−=
−=
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1.2.- Ley de Beer
lcII
lcII··
0
0
10·
)···exp(ε
α−=
−=
ε(λ) = coeficiente de absorción o extinción molar
Intensidad absorbida = I0 - I
lcTaAbsorbanci
I
IT lc
··log
10100100%ncia%Transmita ··
0
ε
ε
=−=
×=×== −
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1.2.1.- Aplicación de la ley de Beer a mezclas
Atotal = A1 + A2 + A3 + … = εεεε1·b·c1 + εεεε2·b·c2 + εεεε3·b·c3 + …
1.2.2.- Limitaciones a la aplicabilidad de la ley de Beer
a) Limitaciones propias de la ley de Beer•Disoluciones diluidas. Se precisa ausencia de inter acciones•Dependencia de εεεε del índice de refracción
b) Desviaciones químicas
c) Desviaciones instrumentales con radiaciones poli cromáticas
∑
∑=
2
1
)(
2
1
)(0
log λ
λ
λ
λ
λ
λ
i
i
M
I
I
A
como log I 0/I = εεεε·b·c ⇒⇒⇒⇒ I = I 0 10-εεεε·b·c
−
= −∑∑ bciiiM IIA )(
2
1
)(0
2
1
)(0 10loglog λε
λ
λ
λλ
λ
λ
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1.2.2.- Limitaciones a la aplicabilidad de la ley de Beer
c) Desviaciones instrumentales con radiaciones poli cromáticas
d) Desviaciones instrumentales en presencia de radi ación parásita
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1.3.- Efecto del ruido instrumental en la precisión de los análisis espectrofotométricos
1.4.- Efecto de la radiación dispersada a longitudes de onda extremas de un espectrofotómetro
1.5.- Efecto de la anchura de rendija en las mediciones de absorción
Detalles espectrales importantes para análisis cualitativo
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Cristal de didim
io
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1.5.- Efecto de la anchura de rendija en las medicio nes de absorción
Disminución de rendija: ventaja ⇒ detallesInconveniente ⇒ Aumento de relación señal/ruido
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Dis
oluc
ión
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loru
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e pr
aseo
dim
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1.6.- Instrumentos para mediciones de absorción UV/VIS(Fuentes, selectores de longitud de onda, recipientes para la muestra, detectores de radiación, procesadores de señal y dispositivos de lectura)
1.6.1.- Fuentes de luz
a)Lámparas (deuterio e hidrógeno; wolframio, xenon)- Concentración de luz a través de lentes
b) Láseres- Luz colimada
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1.6.2.- Detectores de radiación
a) Detectores térmicos (la radiación eleva la T)
- Bolómetros (cambio de resistividad al cambiar T)
- Termopares y termopilas (efecto termoeléctrico)
- Piroeléctricos (polarización eléctrica)
b) Detectores cuánticos
- Fotoconductores (cambio de conductividad por bombeo fotónico)
- Fotovoltaicos (La luz genera cambios en la intensidad de corriente)
- Fotomultiplicadores (Dispositivo fotoeléctrico con un elemento interno de amplificación) http://www.shsu.edu/%7Echm_tgc/sounds/flashfiles/PMT.swf
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1.6.3.- Espectrómetro de absorción UV/VIS de un solo haz
Determinación de transmitancia tres etapas:
a)Ajuste del 0% de T
b)Ajuste del 100% de T
c)Medición del % de T
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1.6.4.- Espectrofotómetro UV/VIS de doble haz
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Imagen tomada del enlace:http://www.uned.es/cristamine/mineral/metodos/imagenes/espectrofotom.gif
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1.6.5.- Espectrofotómetro con array de diodos
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Imagen tomada del enlace:http://www.jenck.com/images/uv-ir/uv-dad.jpg
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1.7.- Aplicación de la espectroscopía molecular de abs orción UV/VIS
1.7.1.- Análisis cualitativo
La absorción UV-Vis ⇒ excitación de e- enlazantes ⇒ las λ de los picos de absorción pueden correlacionarse con los tipos de enlace de las especiesbajo estudio ⇒ identificación de grupos funcionales.
a)Especies absorbentes
- Cromóforos (grupos con e- de valencia con E de excitación baja, n, σy π)
- Espectros electrónicos (complejidad por transiciones vibracionales)
- Tipos de transiciones (σ - σ*; n - σ*; ππππ - ππππ*; n - ππππ*)
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1.7.1.- Análisis cualitativo
b) Efecto de disolventes
-Transicones n - π* ⇒ desplazamiento al azul si disolventes polares
-Transiciones π - π* ⇒ desplazamiento al rojo si disolventes polares
c) Efecto de la conjugación de cromóforos
- Desplazamientos al rojo
d) Absorción por sistemas aromáticos
Auxocromo = grupo en sistema aromático que desplaza al rojo la absorción y aumenta la intensidad de absorción (-OH, -NH2). Hipsocromo = lo contrario (-NO2, -SO2)
e) Absorción por aniones inorgánicos (NO 3-; CO3
2-; NO2-)
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1.7.1.- Análisis cualitativo
f) Absorción que implica electrones d y f
absorción por iones lantánidos y actínidos
•Picos de absorción estrechos poco afectados por el entorno
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1.7.1.- Análisis cualitativo
f) Absorción que implica electrones d y f
absorción por elementos de la primera y segunda series de transición
•Bandas de absorción anchas e influidas por factores químicos del entorno
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Teoría del campo cristalino
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Teoría del campo cristalino
Factores que determinan la frecuencia de absorción:
•Naturaleza del metal•Estado de oxidación•Geometría del sitio•Fortaleza del campo cristalino
Olivino, SiO4(Mg, Fe)2con Fe2+ en dos sitios octaédricos distintos
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Transiciones por transferencia de carga
•Ligando – metal
•Metal – metal
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Centros de color
Transiciones de electrones atrapados en sólidos para compensar carga por deficiencia estequiométrica
Transiciones de banda
1.7.2.- Análisis cuantitativo
Aplicación de la ley de Beer
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Caracterización de Materiales y defectosEspectroscopía de Fluorescencia
2.- Luminiscencia
- Fluorescencia- Fosforescencia - Quimiluminiscencia
a) Ventajas:
- Sensibilidad- Gran intervalo lineal de concentraciones- Selectividad
b) Desventajas:
Método menos aplicable (hoy en día mejorado con la aparición delempleo de sondas y marcadores fluorescentes)
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2.1.- Teoría de la fluorescencia y de la fosforescen cia
- Radiación de resonancia
- Desplazamiento de Stokes
- Estado singlete
- Estado triplete
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hννννEstado m
Estado l
hνννν’
250 300 350 400 450 500 550 600 650
Desplazamiento de Stokes Espectro de emisión Espectro de excitación
Inte
nsid
ad (
u.a.
)
λ (nm)
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2.1.1.- Diagrama de Jablonski. Procesos de desactivación
a)Relajación vibracionalb)Fluorescenciac)Conversión internad)Conversión externae)Cruce entre sistemasf)Fosforescencia
hνA hνA hνF hνP
Cruce entre estados
Conversión interna
S2
S1
012
S0
Absorción Fluorescencia
Fosforescencia
T1
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2.1.2.- Parámetros fotofísicos
2.1.3.- Factores que afectan a la fluorescencia y a la fosforescencia
Estructura molecularEfecto de la rigidez estructuralTemperatura y efecto del disolventeEfecto del pHEfecto del oxígeno disueltoEfecto de la concentración en la intensidad de fluo rescencia
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2.2.- Fluorescencia de estado estacionario
excitación de una muestra con una fuente de ilumina ción continua
2.2.1.- Fluorímetro
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Imagen tomada del enlace:http://images.google.com/imgres?imgurl=http://www.microbeam.es/PTI/Tiempos_Vida/TM3_low.jpg&imgrefurl=http://www.microbeam.es/PTI/Tiempos_Vida/pti_tiemposvida.htm&h=158&w=144&sz=6&hl=en&start=16&um=1&tbnid=ghLPa9lr8R5kDM:&tbnh=97&tbnw=88&prev=/images%3Fq%3DFluorimetro%26um%3D1%26hl%3Den%26sa%3DG
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2.3.- Espectros de emisión y espectros de excitación
λ (nm) →
S0
S1
S0→S1 S1→S0
↑I
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3.- Aplicaciones de la fluorescencia)
-Detector
-Aditivos
-Estudios cinéticos en procesos de polimerización
-Propiedades térmicas
-Degradación y envejecimiento
-Copolímeros ( εεεε = X1·εεεε1 + X2·εεεε2)
-Etc.
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