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Propagación in vitro de Echinocereus knippelianus Liebner (Cactaceae), especie amenazada Neith Alejandra ISIDOROCERVANTES 1, *, Ana Laura LÓPEZESCAMILLA 2 y Laura Patricia OLGUÍN SANTOS 3 *[email protected] 1 Laboratorio de Desarrollo en Plantas, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autónoma de México, Ciudad Universitaria, 04510 México, D.F., México 2 Laboratorio de Morfofisiología Vegetal, Centro de Investigaciones Biológicas, Universidad Autónoma del Estado de Hidalgo, 42184 Pachuca, Hidalgo, México 3 Unidad de Ambientes Controlados, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional Autónoma de México, Ciudad Universitaria, 04510 México, D.F., México Echinocereus knippelianus (Cactaceae), especie endémica de México, se distribuye en los estados de Coahuila y Nuevo León y se encuentra catalogada como Amenazada en la NOM059SEMARNAT 2010. Las técnicas de cultivo de tejidos vegetales se han empleado exitosamente en varias especies de cactáceas, pero son escasos los trabajos para este género. El objetivo del presente trabajo fue establecer el protocolo para la propagación in vitro de Echinocereus knippelianus. Semillas de E. kinippelianus se escarificaron con ácido sulfúrico concentrado, se desinfectaron y sembraron en medio Murashige y Skoog (MS) al 50 % de todos sus componentes incluyendo la sacarosa + Carbón Activado 1 g L 1 . Plántulas de 1 a 2 cm de altura se utilizaron como fuente de explantes laterales y apicales y se sembraron en medio MS adicionado con N6 benciladenina (BA) 2 y 3 mg L 1 . Posteriormente los explantes con los brotes formados se subcultivaron en medio en MS basal para promover su elongación. La germinación fue del 47 % después de 37 días de incubación. La formación de brotes fue por organogénesis directa después de ocho semanas. Los explantes apicales se elongaron y no formaron brotes; en cambio, los explantes laterales fueron más regenerativos. El número total de brotes con BA 2 mg L 1 fue de 36 y con BA 3 mg L 1 fue de 39. Los explantes con brotes, al ser subcultivados en medio MS basal para su elongación, generaron nuevos brotes a partir del explante inical, incrementando su número de 36 a 50 con BA 2 mg L 1 y de 39 a 58 con BA 3 mg L 1 . A pesar de mostrar un porcentaje bajo de germinación, se determinó que los explantes laterales fueron más regenerativos y que esta técnica ofrece la posibilidad de obtener regenerantes como una estrategia de conservación ex situ para esta especie. ID_1099 Modalidad: cartel Sesión CA6: PROPAGACIÓN DE PLANTAS

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Propagación  in  vitro  de  Echinocereus  knippelianus  Liebner  (Cactaceae),  especie  amenazada  

Neith   Alejandra   ISIDORO-­‐CERVANTES1,*,   Ana   Laura   LÓPEZ-­‐ESCAMILLA2   y   Laura   Patricia   OLGUÍN-­‐SANTOS3    *[email protected]  

1Laboratorio   de   Desarrollo   en   Plantas,   Facultad   de   Ciencias,   Universidad   Nacional   Autónoma   de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  2Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad  Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184  Pachuca,  Hidalgo,  México  3Unidad  de  Ambientes  Controlados,  Facultad  de  Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  

Echinocereus  knippelianus  (Cactaceae),  especie  endémica  de  México,  se  distribuye  en  los  estados  de  Coahuila   y   Nuevo   León   y   se   encuentra   catalogada   como   Amenazada   en   la   NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010.  Las  técnicas  de  cultivo  de  tejidos  vegetales  se  han  empleado  exitosamente  en  varias  especies  de   cactáceas,   pero   son   escasos   los   trabajos   para   este   género.   El   objetivo   del   presente   trabajo   fue  establecer   el   protocolo   para   la   propagación   in   vitro   de   Echinocereus   knippelianus.   Semillas   de   E.  kinippelianus   se   escarificaron   con   ácido   sulfúrico   concentrado,   se   desinfectaron   y   sembraron   en  medio  Murashige  y  Skoog  (MS)  al  50  %  de  todos  sus  componentes   incluyendo   la  sacarosa  +  Carbón  Activado  1  g   L-­‐1.  Plántulas  de  1  a  2   cm  de  altura   se  utilizaron  como   fuente  de  explantes   laterales  y  apicales   y   se   sembraron   en   medio   MS   adicionado   con   N-­‐6   benciladenina   (BA)   2   y   3   mg   L-­‐1.  Posteriormente   los  explantes  con   los  brotes   formados  se   subcultivaron  en  medio  en  MS  basal  para  promover  su  elongación.  La  germinación  fue  del  47  %  después  de  37  días  de  incubación.  La  formación  de   brotes   fue   por   organogénesis   directa   después   de   ocho   semanas.   Los   explantes   apicales   se  elongaron   y   no   formaron   brotes;   en   cambio,   los   explantes   laterales   fueron   más   regenerativos.   El  número   total   de  brotes   con  BA  2  mg   L-­‐1   fue  de  36   y   con  BA  3  mg   L-­‐1   fue  de  39.   Los   explantes   con  brotes,  al  ser  subcultivados  en  medio  MS  basal  para  su  elongación,  generaron  nuevos  brotes  a  partir  del  explante  inical,  incrementando  su  número  de  36  a  50  con  BA  2  mg  L-­‐1  y  de  39  a  58  con  BA  3  mg  L-­‐1.  A   pesar   de   mostrar   un   porcentaje   bajo   de   germinación,   se   determinó   que   los   explantes   laterales  fueron  más  regenerativos  y  que  esta  técnica  ofrece  la  posibilidad  de  obtener  regenerantes  como  una  estrategia  de  conservación  ex  situ  para  esta  especie.  

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Propagación  in  vitro  de  Mammillaria  hernandezii,  cactácea  endémica  de  México  

Fernando   PÉREZ   HUERTA*,   Octavio   GONZÁLEZ   CABALLERO   y   Víctor   Manuel   CHÁVEZ   ÁVILA  *[email protected]  

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  Circuito  Exterior,  México,  D.F.  04510,  México  

El   género  Mammillaria   es   el   más   diverso   dentro   de   la   familia   Cactaceae;   México   cuenta   con   173  especies   (148  endémicas).  Mammillaria  hernandezii   tiene  un  alto  grado  de  endemismo,  es  de   lento  crecimiento,   sufre   extracción   y   venta   ilegal,   se   considera   amenazada   y   no   se   cultiva.   El   cultivo   de  tejidos  vegetales  es  una  alternativa  para   su  propagación  como  se  ha   logrado  con  muchas  especies.  Este   estudio   planteó   lograr   la   regeneración   de   plantas   a   partir   de   distintos   explantes   de   plántulas  germinadas   in   vitro   como  una  medida  para   su   conservación.   Se  utilizaron  211   semillas  divididas  en  tres  lotes:  1  (20s),  2  (127s)  y  3  (64s),  que  se  desinfectaron  con  detergente  durante  10  min,  alcohol  70  %  durante  1  min  y  solución  de  hipoclorito  de  sodio  30  %  v/v  durante  20  min;  se  enjuagaron  en  agua  destilada  esterilizada,  se  remojaron  y  estratificaron  (5  °C)  por  tres  días  y  se  sembraron  asépticamente  en  medio  MS  a  25  ±  2   °C,   fotoperíodo  16  h,  así   como  en  oscuridad.  Del   Lote  1  plántulas  de  6  a  12  meses   fueron   disectadas   en   ápices   y   bases,   cultivados   en  medio  MS   con   ANA/BA   (mg/l):   0/0;   0/1;  0.5/1;   0/2;   1/2;   0.5/2;   0/3;   0.1/3   y   0.5/3.   Se   registró   el   inicio   de   la   germinación   a   los   siete  días   en  fotoperíodo.  A  las  nueve  semanas  se  logró  55  %,  16  %  y  65  %  de  germinación  en  los  distintos  lotes.  La  germinación  del  Lote  2  mejoró  a  53  %  después  de  pasarlo  a  medio  con  GA3  (47  d).  La  mejor  respuesta  morfogenética  del  Lote  1  se  obtuvo  en  0.5/3  con  78  brotes  regenerados  vía   indirecta  (1  año)  de  un  solo  ápice.  De  la  disección  de  estos  brotes,  a  los  cuatro  meses  de  cultivo  se  obtuvieron  vía  directa,  en  promedio   3   brotes/base   en   la   concentración   0/3;   en   tanto   que   fueron   1.2   brotes/ápice   en   la  concentración  0.5/3.  El  enraizamiento  ha  ocurrido  de  manera  eventual.   Se  demostró   la  utilidad  del  cultivo  de  tejidos  en  la  conservación  de  especies  mexicanas  en  peligro  de  extinción.  

ID_1202  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Establecimiento   in   vitro   y   micropropagación   de   Agave   lurida   Aiton   (Agavaceae),   una  especie  mexicana  en  peligro  de  extinción  

Héctor  MÁRQUEZ  PÉREZ*,  Octavio  GONZÁLEZ  CABALLERO  y  Víctor  M.  CHÁVEZ  AVILA    

*[email protected]    

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  Circuito  Exterior,  México,  D.F.  04510,  México    

Los   agaves   son   especies   clave     de   las   regiones   áridas,   por   su   abundancia   y   diversidad   y   por   los  servicios  ecológicos  para  otros  organismos.  Con  aproximadamente  200  especies,  75%  se  distribuyen  en   México,   donde   Oaxaca   presenta   la   mayor   diversidad   de   especies   (58).   Agave   lurida,   especie  endémica  del  distrito  de  Huajuapan,  Oaxaca,  se  encuentra  en  peligro  de  extinción,  por  alteración  del  hábitat  y   limitada  reproducción  por  semillas,  ya  que  sus   inflorescencias  son  cortadas  para  alimentar  ganado   caprino.   La   especies   no   se   cultiva,   cada   vez   quedan   menos   individuos   y   su   situación   se  agudiza.  El  cultivo  de  tejidos  vegetales  ha  hecho  posible  una  propagación  masiva  a  partir  de  pequeños  fragmentos   de   numerosas   especies,   entre   ellos   algunos   agaves.   Para  A.   lurida   éste   fue   el   objetivo.  Plántulas  germinadas   in   vitro   fueron  disectadas  en  cotiledón,  hojas,   tallos  y   raíces,   y   sembrados  en  medio  MS50%,  con  diferentes  concentraciones  de  reguladores  de  crecimiento.  Hojas  y  raíces,  en  las  combinaciones  (mg/L)  de  ANA  (0,  0.1,  0.5)  con  BAP  (0,  0.5,  1,  2);  tallo,  BAP  (0.5  y  1);  y  cotiledón,  2-­‐4  D  (0.5   y   1).  Al   término  de   tres  meses  de   cultivo,   se   regeneraron   individuos   completos   a  partir   de   los  tallos.   Las   raíces   habían   formado   callo   en   0.5/0   y   0.5/1.   Las   hojas   formaron   callo   en   cuatro  tratamientos   y   a   los   cinco   meses   en   0.1/2   y   0.5/0.5   se   observaron   embriones   somáticos,   que  germinaron  en  plántulas.  Al   término  de  un  año   se   tienen  122  plántulas,  ca.   250  brotes   in   vitro   y   8  individuos  en  invernadero.  Esta  investigación  puede  potenciar  la  conservación  y  la  economía  a  través  de  un  aprovechamiento  sustentable  de  ésta  y  otras  especies  amenazadas.  

ID_1203  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Regeneración   in   vitro   de   Leuchtenbergia   principis,   cactácea   amenazada   endémica   de  México  

Oscar  JIMÉNEZ  DÍAZ*,  Octavio  GONZÁLEZ  CABALLERO  y  Víctor  M.  CHÁVEZ  ÁVILA  *[email protected]  

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510,  México,  D.F.,  México  

Las   cactáceas   son  originarias   del   continente   americano,   con   amplia   distribución   con   110   géneros   y  1500  especies,  y  en  México  con  ca.  52  géneros  y  850  especies  y  un  alto  grado  de  endemismo   (715  especies).   Dentro   de   esta   diversidad   se   encuentra   Leuchtenbergia   principis,   especie   endémica   y  amenazada  de  México  que  es  considerada  ornamental.  El  cultivo  de  tejidos  vegetales   in  vitro  es  una  estrategia   para   la   propagación   y   conservación   de   especies   en   peligro   de   extinción.   En   la   presente  investigación   se   exploró   la   germinación   y   propagación   in   vitro   de   Leuchtenbergia   principis.   Se  sometieron   semillas   a   escarificación  química   (60)   y  mecánica   (10);   y   a   un   tratamiento   control   (50);  sembradas   in   vitro   en   medio   MS   e   incubadas   en   oscuridad   y   en   fotoperiodo   16h.   Plántulas  germinadas   in   vitro   fueron   disectadas   (46)   en   la   parte   apical,   el   hipocótilo   y   la   raíz,   sembradas   en  medio   MS50%   semi-­‐sólido   y   medio   MS50%   líquido   con   puentes   de   papel,   adicionando   diferentes  concentraciones  de  reguladores  de  crecimiento  ANA/BAP  (mg/l).  Tubérculos  (1-­‐4  cm)  provenientes  de  plantas  de  invernadero  fueron  desinfectados,  disectados  en  secciones  (0.5-­‐2  cm)  apicales  y  basales  y  sembrados  en  las  mismas  condiciones.  El  mayor  porcentaje  de  germinación  (80  %)  se  obtuvo  con  la  escarificación  química  en  fotoperíodo.  La  germinación  con  escarificación  mecánica  fue  del  50  %  y  en  el  control  del  6  %.  Secciones  basales  de  tubérculos  formaron  callo  en:  0.1/3,  0.1/1  y  0.5/3.  De   igual  forma   lo  hicieron   las   secciones  de  plántulas   hipocotilo   (0.5/   1)   y   raíz   (0.5/3).   Secciones   apicales   de  plántulas   (1   de   28)   formaron   nueve   brotes,   vía   directa   en   0.1/3   medio   semi-­‐sólido.   El   presente  estudio   contribuye   a   la   conservación   y   conocimiento   de   especies   en   peligro   de   extinción   y   al  desarrollo  de  nuevas  técnicas  para  su  propagación.  

ID_1204    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Micropropagación   de   Barkeria   whartoniana   y   B.   scandens   (Orchidaceae),   especies  mexicanas  en  peligro  de  extinción  

Alejandra   VILLAFUERTE   SALAZAR*,   Uriel   MARTÍNEZ   HERNÁNDEZ,   Octavio   GONZÁLEZ   CABALLERO   y  Víctor  Manuel  CHÁVEZ  ÁVILA  *[email protected]  

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  Circuito  Exterior,  México,  D.F.,  04510  

Barkeria   whartoniana   y   B.   scandens   son   especies   endémicas   de  México   afectadas   por   actividades  humanas,  destrucción  de  su  hábitat  y  alta  tasa  de  colecta   ilegal,   lo  que  conlleva  a  una  pérdida  muy  importante  de  su  variabilidad  genética  y,  con  ella,   la  disminución  de  su  capacidad  de  supervivencia.  Actualmente  están  catalogadas  como  especies  “Sujetas  a  protección  especial”  (NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010)   y   en   el   Apéndice   II   de   CITES.   Esto   demuestra   que   es   urgente   e   indispensable   implementar  estrategias  de  manejo  y  conservación  en  virtud  de  que  no  se  cultivan.  Una  alternativa  potencial  no  sólo  para  mantener  sino  incrementar  el  número  de  individuos  de  ésta  y  otras  familias  de  plantas  es  el  CTV,  que  ha  demostrado  ser  capaz  de  obtener  altas   tasas  de  multiplicación  a  partir  de  un  explante  inicial,  debido  a  la  totipotencialidad  celular;  sin  embargo,  no  hay  registros  de  estudios  in  vitro  para  el  género  Barkeria.  Por  ello,  el  objetivo  de  la  investigación  fue  realizar  la  micropropagación  y  el  análisis  estructural  de  ambas  especies  para  contribuir  a  su  conocimiento  y  conservación.  Para  B.  whartoniana  se   cultivaron   explantes   de   protocormos.   Para   B.   scandens   se   utilizaron   explantes   (hoja,   tallo)   de  plántulas  (1-­‐3  cm  altura).  Ambas  especies  se  cultivaron  en  medio  MS  con  antioxidantes  y  reguladores  de  crecimiento:  ANA/BA.  Resultados  a  180  d  de  inducción.  B.  whartoniana,  el  mejor  tratamiento  para  obtener  la  mayor  formación  de  PLBs  se  logró  en  el  medio  adicionado  con  1  mg/L  de  ANA  más  1  mg/L  BA,   con   un   total   de   969   PLBs   y   un   promedio   por   explante   de   48.45   ±   0.99.  B.   scandens,   el  mayor  número   de   regenerantes   se   logró   en   secciones   de   tallo   en   medio   con   0.5/1   ANA/BA   mg/L,  formándose  un  total  de  220  PLBs  y  un  promedio  de  22  ±  0.81  por  explante.  En  el  análisis  estructural  se  probó  que  los  regenerantes  obtenidos  fueron  embriones  somáticos.  

ID_214    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Micropropagación   de   estrella   de   belén,   Ornithogalum   umbellatum   (Hyacinthaceae),   a  partir  de  yemas  axilares  

Luis  HERMOSO  GALLARDO¹*,  Teresa  VARGAS  CEDEÑO2,  Andrea  MENÉNDEZ-­‐YUFFÁ¹  y  Eva  DE  GARCÍA²  *[email protected]  

¹Laboratorio   de   Clonación   y   Genética   Vegetal,   2Laboratorio   de   Biotecnología   Vegetal,   Centro   de  Botánica   Tropical;   Instituto   de   Biología   Experimental,   Facultad   de   Ciencias,   Universidad   Central   de  Venezuela,  Apartado  47114.  Caracas  1041A,  Venezuela  

Las  plantas  de  estrella  de  belén  tienen  un  alto  valor  comercial  por  su  belleza  y  el  tiempo  de  duración  de   sus   flores   una   vez   cortadas.   Por   sus   propiedades   curativas   es   también   utilizada   en   la  medicina  homeopática.  El  objetivo  de  esta  investigación  fue  la  propagación  y  multiplicación  in  vitro  de  plantas  de   estrella   de   belén.   Una   vez   desinfectadas,   las   yemas   axilares   fueron   cultivadas   en   el   medio   de  Murashige  y  Skoog  1962,  suplementado  con  Tiamina  0,4  mg/l,  Mioinositol  100  mg/l,  Sacarosa  30  g/l,  sin  hormonas  y  con  Benciladenina  1  mg/l.  A  los  30  días  de  cultivo,  se  apreció  un  100  %  de  explantes  con  brotes  en  los  2  medios  probados.  A  los  60  días,  se  observó  un  promedio  de  19.5  brotes/yema  en  el  medio  con  1  mg/l  de  Benciladenina,  y  de  7.5  brotes/yema  en  el  medio  sin  hormonas.  En  las  hojas  de   los  brotes  obtenidos  en   los  dos  tratamientos  empleados  se  observó  una  organogénesis  directa  y  en   la   base   de   dichos   brotes   se   observó   una   organogénesis   indirecta,   lo   cual   aumentó  considerablemente   la   multiplicación   de   esta   especie.   En   ambos   medios   hubo   gran   formación   de  raíces.  Para  la  etapa  de  aclimatación  se  utilizó  un  sustrato  compuesto  con  turba  y  tierra  negra  en  una  proporción  1/1,  obteniéndose  95  %  de  plantas  aclimatadas  en  vivero.  

ID_267    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Organogénesis  in  vitro  de  Picea  chihuahuana  Martínez  (Pinaceae)  

Laura   Patricia   OLGUÍN-­‐SANTOS1*,   Ana   Laura   LÓPEZ-­‐ESCAMILLA2,   Víctor   Manuel   CHÁVEZ   ÁVILA3,  Judith  MÁRQUEZ  GUZMÁN4  y  Robert  BYE  BOETTLER3  *[email protected]  

1Unidad   de   Ambientes   Controlados,   Facultad   de   Ciencias,   4Laboratorio   de   Desarrollo   en   Plantas;  Facultad  de  Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  2Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad  Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184,  Pachuca,  Hidalgo,  México  3Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad   Nacional   Autónoma   de   México,   Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  

Picea   chihuahuana   es   un   relicto   endémico   de   los   bosques   de   coníferas   en  México.   Su   distribución  geográfica  restringida,  su  baja  producción  de  semillas  viables  y  el  escaso  número  de  individuos  en  sus  poblaciones   la   colocan   como   especie   En   Peligro   de   Extinción   en   la   NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010.  Embriones   cigóticos  maduros   fueron   cultivados   in   vitro   para  determinar  el  mejor  medio  de   cultivo,  concentración   hormonal,   tiempo   de   inducción   para   la  mayor   proliferación   de   brotes   y   los   eventos  histológicos   que   ocurren   durante   su   diferenciación.   Se   utilizaron   tres   medios:   B5   modificado,  Murashige  y  Skoog  y  Schenk  y  Hildebrandt  modificado  (SH)  adicionados  con  Bencilaminopurina/Ácido  Naftalenacético   (5/0   y   5/0.5  mg   L-­‐1)   y   Kinetina/2,4-­‐D   (5/0   y   5/.01  mg   L-­‐1),   mejores   combinaciones  determinadas  en  ensayos  previos  con  30  días  de  inducción.  Después  de  75  días  de  cultivo,  el  mayor  número   de   brotes/tratamiento   (133)   se   obtuvo   en   SH   +   Kinetina/2,4-­‐D,   5/0.1   mg   L-­‐1.   Los   brotes  adventicios  fueron  regenerados  por  organogénesis  directa  sobre  los  cotiledones  y  escasamente  sobre  el   hipocótilo,   únicamente   en   los   tratamientos   con   hormonas.   Los   tratamientos   con   Kinetina/2,4-­‐D  (5/0  y  5/.01  mg  L-­‐1  )  fueron  repetidos  utilizando  embriones  obtenidos  de  semillas  con  dos  y  seis  años  de  almacenamiento,  aplicando  dos  tiempos  de  inducción:  30  y  60  días.  Estadísticamente  se  corroboró  que  el  mejor  tratamiento  para  la  proliferación  de  brotes  adventicios  fue  el  SH  +  Kinetina  5  mg  L-­‐1  con  semillas   almacenadas  menos   tiempo   (2   años)   y   tiempo   de   inducción   de   60   días,   obteniéndose   en  promedio   18.1   brotes/embrión   a   los   140   días   de   cultivo.   La   oxidación   fue   controlada   agregando  antioxidantes  a  los  medios  y  aplicándolos  como  enjuagues  a  los  explantes  antes  de  cada  subcultivo.  El  análisis   histológico   reveló   que   en   las   capas   subepidérmicas   de   los   cotiledones   se   presentaron   las  divisiones  que  condujeron  a  la  formación  de  grupos  de  tres  a  cuatro  células  (promeristemoides),   las  cuales   precedieron   la   formación   de  meristemoides   que   posteriormente   dieron   origen   a   los   brotes  adventicios.  

ID_490    Modalidad:  cartel  Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Regeneración   in   vitro   de   brotes   de   Echinocactus   grusonii   (Cactaceae)   utilizando   medio  líquido  

Clara  Dolores  SOTO-­‐CORTES1,*,  Laura  Patricia  OLGUÍN-­‐SANTOS2  y  Ana  Laura  LÓPEZ-­‐ESCAMILLA3  *[email protected]  

1Laboratorio   de   Desarrollo   en   Plantas,   Facultad   de   Ciencias,   Universidad   Nacional   Autónoma   de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  2Unidad  de  Ambientes  Controlados,  Facultad  de  Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  3Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad  Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184,  Pachuca,  Hidalgo,  México  

Echinocactus   grusonii   (Cactaceae),   especie   endémica   de   México,   se   distribuye   en   los   estados   de  Querétaro  e  Hidalgo.  Su  distribución  geográfica  restringida,  el  amplio  uso  ornamental  y  la  destrucción  de   su  hábitat   la   sitúan  en   la   categoría   En  Peligro  de   Extinción  de   la  NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010.   La  propagación  de  cactáceas  por  cultivo  de  tejidos  vegetales  ha  utilizado  generalmente  medio  de  cultivo  sólido;   sin   embargo,   se   ha   observado   que   la   inducción   y   el   desarrollo   de   brotes   en  medio   líquido  resulta   mejor,   dado   que   los   nutrimentos   están   más   disponibles   para   el   explante   en   ausencia   del  agente   gelificante.   Por   lo   anterior,   en   este   trabajo   se   utilizó   a  Echinocactus   grusonii   como  modelo  para  evaluar  la  regeneración  de  brotes  in  vitro  en  medio  líquido  (puentes  de  papel  filtro).  Semillas  de  E.   grusonii   fueron   sembradas   en  medio  Murashige   y   Skoog   al   50  %  de   sus   componentes,   líquido   y  sólido.  El  porcentaje  de  germinación  in  vitro  después  de  60  días  fue  mayor  en  medio  sólido  (78  %)  que  en  líquido  (57  %);  sin  embargo,  a  los  40  días  de  cultivo,  la  longitud  de  las  plántulas  en  medio  líquido  fue   mayor   (1.2   cm)   que   en   sólido   (8   mm).   Explantes   longitudinales   se   sembraron   en   medio   de  inducción  MS   líquido   y   sólido   adicionado   con   N6-­‐2   isopentenil   adenina   3   mg   L-­‐1.   La   formación   de  brotes  ocurrió  vía  directa  por  activación  de  aréolas.  El  promedio  de  brotes  por  explante  fue  mayor  en  medio   líquido   (3)   que   en   sólido   (1.8)   a   los   a   los   90   días   de   inducción.   El   97   %   de   los   brotes  individualizados   formaron   raíces   de   manera   espontánea   en   medio   MS   basal   sólido.   Los   brotes  enraizados  se  aclimatizaron,  obteniéndose  95  %  de  supervivencia  ex  vitro.  El  medio  líquido  hizo  más  eficiente  el  sistema  de  propagación,  promovió  la  elongación  de  las  plántulas  facilitando  la  obtención  de  explantes  e  incrementó  la  regeneración  in  vitro  de  brotes  en  Echinocactus  grusonii.  

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Modalidad:  cartel  Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Cultivo  in  vitro  de  cuatro  especies  de  cactáceas  endémicas  de  México  

María  Alejandra  FERNÁNDEZ  TÉLLEZ,  Pablo  GRACIDAS  DÍAZ,  Mariana  Beatriz  RIVERA  BENÍTEZ,  Octavio  GONZÁLEZ  CABALLERO  y  Víctor  Manuel  CHAVEZ  ÁVILA  [email protected]  

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.  

Numerosas  especies  de  cactáceas  mexicanas  están  en  peligro  de  extinción.  Para  CITES  toda  la  familia  se   encuentra   amenazada   por   actividades   humanas   como   la   sobreexplotación,   destrucción   de   su  hábitat  y  la  colecta  ilegal  de  ejemplares  para  su  venta.  El  cultivo  de  tejidos  vegetales  representa  una  alternativa   viable   para   el   estudio,   propagación,   conservación   y   base   de   su   aprovechamiento  sustentable  de  especies   amenazadas.   En  este  estudio   a  partir   de   fragmentos  de   tallos  de  plántulas  que  germinaron   in  vitro   se   logró   la  multiplicación  de  cuatro   taxa  mexicanos  en  alguna  categoría  de  riesgo:   Backebergia   militaris   (protección   especial),   Strombocactus   disciformis   ssp.   disciformis,  Strombocactus   disciformis   ssp.   esperanzae   (amenazadas)   y   Mammillaria   luethyi   (en   peligro   de  extinción).  Semillas  de  las  cuatro  especies  fueron  sembradas  asépticamente  bajo  fotoperiodo  16  h  en  medio  MS50  %.  Plántulas  germinadas   (0.8-­‐2   cm)   fueron  disectadas  en  ápices   y   fragmentos  de   tallo  cultivados  en  MS50  %  con  Reguladores  de  Crecimiento  Vegetal  (RCV):  KIN,  BAP  en  combinación  con  ANA.  Para  B.  militaris  germinaron  con  una  solución  GA4+GA7  (3  mg/L)  40  embriones  de  60  sembrados.  La  germinación  de  S.  disciformis  fue  de  40  semillas  (ssp.  esperanzae)  y  de  76  (ssp.  disciformis).  En  M.  luethyi   sólo   germinaron   3   semillas   de   22.   La   obtención   de   brotes   en   los   cuatro   taxones   estuvo  asociada  a  diferentes  concentraciones  de  RCV.  B.  militaris:  al  término  de  1.5  años  se  han  logrado  12  plantas  y  13  brotes.  Para  M.  luethyi  después  de  1  año  se  obtuvieron  745  brotes.  Para  ambas  especies  de  Strombocactus  se  obtuvieron  brotes  vía  indirecta  después  de  un  mes  en  el  medio  de  inducción.  A  120  días  de  cultivo  se  obtuvo  un  promedio  de  157  brotes/explante  en  S.  disciformis  ssp.  esperanzae.  Se   logró   la  aclimatización  de  una  plántula  de  B.  militaris  y  un   lote  de  ca.  100  plantas  de  M.   luethyi.  Estos  resultados  tienen  implicaciones  directas  en  la  conservación  de  éstas  y  otras  cactáceas  en  riesgo  de  extinción.  

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Modalidad:  cartel  Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Desarrollo  ontogénico  in  vitro  de  Epidendrum  radicans  Pav.  ex  Lindl  (Orchidaceae)  

Ana  Belén  RODRIGUEZ-­‐FARFÁN,  Bárbara  Susana  LUNA-­‐ROSALES*,  y  Amadeo  BARBA-­‐ÁLVAREZ  *[email protected]  

Unidad   de   Investigación   en   Biología   Vegetal,   Carrera   de   Biología,   Facultad   de   Estudios   Superiores-­‐Zaragoza  (Campo  II),  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  09230  México,  D.F.,  México  

Epidendrum  radicans  es  una  orquídea  nativa  de  México  que  ha  sido  poco  estudiada  en  relación  a  su  biología   básica   y   en   particular   al   proceso   del   desarrollo   ontogénico   del   embrión   de   las   semillas  durante   la   geminación   hasta   su   formación   en   plántula.   En   el   presente   estudio   se   describió   el  desarrollo   ontogénico   de   esta   especie   utilizando   la   técnica   de   cultivo   in   vitro.   Se   compararon   12  tratamientos,   los   cuales   consistieron   en   la   variación   del   medio   nutritivo,   la   presencia   de   carbón  activado   (Ca)   y   peptona   (P).   Los   medios   nutritivos   utilizados   fueron   dos   con   sales   inorgánicas  analíticas,   Kao   &   Mychayluk   (KM)   y   Mitra   (M),   y   dos   con   fertilizantes   orgánicos   comerciales,  Superthrive  ®  (S)  y  XIBANI  ®  (H).  Durante  el  proceso  de  germinación  de  las  semillas  de  E.  radicans  se  establecieron  seis  estadios  ontogénicos  a  lo  largo  de  120  días  de  cultivo.  En  todos  los  tratamientos  se  observó  a  los  siete  días  de  cultivo  el  primer  estadio  o  embrión  hinchado,  de  color  verde  y  dentro  de  la  testa;   posteriormente,   a   los   14  días   de   cultivo   el   embrión   incrementó   su   volumen  hasta   romper   la  testa,  estableciéndose  el  segundo  estadio.  Además,  para  este  tiempo  de  cultivo,  se  observó  el  tercer  estadio  ontogénico  o  protocormo  en  los  tratamientos  M+Ca,  KM+Ca  y  KM+Ca+P  y  sólo  en  estos  dos  últimos  tratamientos  se  apreció,  a  partir  de  los  28  días,  el  estadio  de  protocormo  con  primordio  foliar  y  hasta  los  42  días  de  cultivo;  solamente  en  el  tratamiento  KM+Ca,  este  primordio  se  diferenció  en  las  primeras  hojas  de  la  plántula.  En  este  mismo  tratamiento,  se  observó  a  los  56  días  de  cultivo  el  sexto  y   último   estadio   ontogénico   como   una   plántula   completa   o   plántula   con   hojas   y   raíz.   El   carbón  activado  favorece  el  rápido  desarrollo  ontogénico  del  embrión  de  las  semillas  cuando  es  adicionado  al  medio  nutritivo  KM.  

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Modalidad:  cartel  

Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Propagación  a  partir  de  semilla  y  su  posterior  multiplicación  vegetativa  mediante  BAP  en  Tillandsia  caput-­‐medusae  Morren  

Jonás   MILLÁN   CASTAÑEDA,   María   Elena   HUIDOBRO   SALAS,   José   Luis   GAMA   FLORES   y   Alejandra  GARCÍA  MARES    

Módulo   de   Diversidad   Vegetal   I,   Facultad   de   Estudios   Superiores   Iztacala,   Universidad   Nacional  Autónoma  de  México,  Av.  De  Los  Barrios  No.  1,  C.P.  54090  Los  Reyes  Iztacala,  Tlalnepantla,  Estado  de  México,  México  

El  objetivo  principal  fue  la  propagación  de  Tillandsia  caput-­‐medusae  en  medios  de  cultivo  in  vitro  y  la  evaluación  del  efecto  de  diferentes   concentraciones  de  BAP.  Como  objetivos  particulares   se   realizó  un   análisis   de   germinación   en   cultivo   in   vitro,   así   como   un   análisis   del   efecto   producido   en   las  plántulas  sometidas  a  BAP.  La   fase  de  propagación   fue  en   tres  etapas   (hinchamiento,  emergencia  y  desarrollo   de   raíz).   Se   obtuvieron   respuestas   positivas   en   99   %,   73   %   y   68   %   de   las   semillas,  respectivamente,   lo  cual   señala  que   la  capacidad  de  adsorción  de   las   semillas  es  casi   total   tras   tres  días.  La  emergencia  se  presentó  del  día  14  al  17  y   la  raíz  tras  30  días;   las  plántulas  que  no   lograron  sobrevivir   fueron   por   efecto   de   oxidación.   La   fase   de   multiplicación   vegetativa   se   trabajó   con  plántulas  producto  de   la  propagación;   se  seleccionaron  por   talla  y  número  de  hojas.  El   tratamiento  que  presentó  efecto  en  menor  tiempo  fue  la  concentración  2  mg/l,  seguido  por  0.5  mg/l  y  por  último  el   de   1   mg/l;   el   grupo   control   no   presentó   brotes   laterales.   Analizando   estadísticamente   los  resultados  respecto  al  número  de  plántulas  formadoras  de  brotes,  se  encontró  un  menor  efecto  en  la  concentración  de  1  mg/l  con  respecto  al  efecto  en  los  tratamientos  de  0.5  y  2  mg/l  (60  %,  44  %  y  60  %  de  los  individuos  por  tratamiento),  mientras  que  respecto  al  número  total  de  brotes  producidos  por  tratamiento  el  mayor  efecto   se  presentó  en  el   tratamiento  de  2  mg/l.   En   cuanto  a   la  oxidación,   se  presentó  en  los  tratamientos  de  0.5  mg/l  y  2  mg/l  (12  %  y  32  %  de  los  individuos,  respectivamente),  lo  cual  señala  un  efecto  directamente  proporcional  a   la  concentración  empleada  de  BAP.  Las  plántulas  parecen   responder   al   regulador   de   crecimiento   BAP   no   sólo   con   la   estimulación   en   formación   de  brotes,  también  se  provoca  la  oxidación.  

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Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS    

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Evaluación   de   la   propagación   in   vitro   de   Laelia   speciosa   (Kunth)   Schltr.   (Orchidaceae)  empleando  un  sistema  de  inmersión  temporal  

Fernando  CUÉLLAR-­‐GONZÁLEZ*  y  Ana  Laura  LÓPEZ-­‐ESCAMILLA  *[email protected]    

Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad  Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184  Pachuca,  Hidalgo,  México  

Los   sistemas   de   inmersión   temporal   han   demostrado   incrementar   la   eficiencia   en   las   técnicas   de  micropropagación.  El  presente  estudio  tuvo  como  objetivo  establecer  uno  de  estos  sistemas  de  bajo  costo  y  validarlo  con   la  propagación   in  vitro  de  Laelia   speciosa   (Orchidaceae),  especie  endémica  de  México  y  sujeta  a  protección  especial  por  la  Norma  Oficial  Mexicana.  Para  el  sistema  de  inmersión  se  emplearon  envases  de  vidrio,  mangueras,  electroválvulas,  programadores  digitales,  una  compresora,  filtros   de   aire   y   conectores.   Para   su   validación,   se   utilizaron   plántulas   de   2   a   3   cm   previamente  regeneradas  in  vitro,  subcultivadas  en  medio  Murashige  y  Skoog  sólido  y  para  el  sistema  de  inmersión  temporal   en   medio   líquido,   ambos   con   bencilaminopurina/ácido   naftalenacético   1/2   mg   L-­‐1.   Las  frecuencias  de  inmersión  fueron  cuatro,  seis  y  ocho  veces  al  día,  con  inmersiones  de  2  min  durante  30  días;   posteriormente   se   transfirieron  a  medio  Murashige   y   Skoog  basal   otros  30  días.   Se  evaluaron  parámetros  morfológicos,  el  coeficiente  de  multiplicación  y  la  cantidad  de  clorofila  en  unidades  SPAD.  El   porcentaje   de   supervivencia   ex   vitro   se   evaluó   a   40   días.   Plántulas   provenientes   del   sistema   de  inmersión   temporal  presentaron  mayor   talla  en   comparación   con   las  obtenidas  mediante  el   cultivo  sólido.  Se  observaron  diferencias  estadísticamente  significativas  (P  =  0.00)  en  las  variables  evaluadas,  la   mejor   frecuencia   de   inmersión   fue   de   seis   veces   al   día   y   2   min   de   inmersión,   registrando   en  promedio  entre  36.08  y  42.67  unidades  SPAD,  un  coeficiente  de  multiplicación  de  3.33,  y  el  80  %  de  supervivencia   ex   vitro.   Se   estableció   un   sistema   de   inmersión   eficiente   y   económico   con   insumos  nacionales,  logrando  validar  el  sistema  y  obteniendo  plantas  con  mejores  características  morfológicas  y  fisiológicas  en  60  días  con  altos  porcentajes  de  supervivencia  en  comparación  con  el  medio  sólido.  El  uso  de  esta   técnica  biotecnológica  hizo  más  eficiente   la  micropropagación  de  L.   speciosa,  siendo  una  alternativa  viable  para  contribuir  a  su  conservación.  

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Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS    

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Cultivo  in  vitro  de  Poliomintha  bustamanta  B.L.  Turner  

María   Luisa   CÁRDENAS   AVILA1,   Sergio   MORENO   LIMÓN2,   Rahim   FOROUGHBAKHCH   POURNAVAB2,  Lidia  Rosaura  SALAS  CRUZ2,  Jorge  Alberto  VILLARREAL  GARZA2  y  Deyanira  QUISTIÁN  MARTÍNEZ2    

1Departamento   de   Biología   Celular   y   Genética,   2Departamento   de   Botánica;   Facultad   de   Ciencias  Biológicas,   Universidad   Autónoma   de   Nuevo   León,   Ciudad   Universitaria,   66451   San   Nicolás   de   los  Garza,  Nuevo  León,  México  

El  orégano  describe  a  más  de  60  especies  con  un  aroma  y  sabor  en  común  y  está  representado  por  Origanum   vulgare   (L.)   en   Europa   y   por   diferentes   especies   de   Lippia   (L.)   y   Poliomintha   (Gray)   en  América.  Es  apreciado  como  condimento  y  por  sus  propiedades  medicinales;  su  aceite  se  emplea  en  la  elaboración   de   jabones,   perfumes   y   cosméticos.   El   propósito   de   esta   investigación   fue   lograr   la  inducción  de  callo  in  vitro  de  explantes  de  hoja  y  tallo  de  orégano  mexicano  (Poliomintha  bustamanta  B.L.   Turner),   en   el   medio   de   cultivo   Murashige   y   Skoog   (MS)   modificado   y   con   diferentes  concentraciones   y   combinaciones   de   reguladores   de   crecimiento   vegetal   (RCV):   ácido   2,4-­‐diclorofenoxiacético  (2,4-­‐D)  (0,  2.5,  5,  7.5  y  10  mg/L)  y  ácido  naftalenacético  (ANA)  (0,  0.5,  1  mg/L).  Asimismo  se  empleó  la  regeneración  directa,  elongación  y  desarrollo  de  brotes  apicales  en  medio  de  cultivo   MS,   modificado   con   1   mg/L   de   ácido   indolacético   (AIA)   y   2   mg/L   de   6-­‐bencilaminopurina  (BAP).   Los   explantes   (hoja   y   tallo)   de   orégano  mexicano   se   sembraron   bajo   condiciones   asépticas,  logrando  mayor  proliferación  en  el  tratamiento  (MS  +  5  mg  2,4-­‐D)  a  los  20  días  después  de  la  siembra.  En  la  regeneración  directa  de  brotes  apicales,  el  medio  de  cultivo  MS  +  1  mg/L  AIA  y  2  mg  BAP/L  es  el  adecuado  para  la  elongación,  crecimiento  del  explante  y  desarrollo  de  brotes  laterales.  El  Análisis  de  Varianza  demostró  que  en  relación  a  la  formación  de  callo  in  vitro,  la  diferencia  significativa  (P  <  0.01)  solamente  se  presenta  entre  los  tratamientos,  pero  no  entre  los  tipos  de  explante  ni  en  la  interacción  de  ambos  factores.  La  Comparación  Múltiple  de  Medias  muestra  la  mejor  respuesta  de  formación  de  callo  en  el  tratamiento  MS  +  5  mg  2,4-­‐D,  cuyo  resultado  es  estadísticamente  diferente  del  obtenido  en  el  resto  de  los  tratamientos.  

ID_648    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS    

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Germinación   asimbiótica   y   propagación   in   vitro   de   Epidendrum   radicans   Pav.   ex   Lindl.  (Orchidaceae)  

Nancy  Araceli  CANDIDO  DÍAZ1*,  Ana  Laura  LÓPEZ-­‐ESCAMILLA2  y  Laura  Patricia  OLGUÍN-­‐SANTOS3  *[email protected]  

1Laboratorio   de   Desarrollo   en   Plantas,   3Unidad   de   Ambientes   Controlados;   Facultad   de   Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  2Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad  Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184  Pachuca,  Hidalgo,  México  

México  tiene  un  inventario  de  1264  especies  de  orquídeas,  de  las  cuales  el  40  %  son  endémicas.  Las  orquídeas  son  reconocidas  y  valoradas  por   la  gran  diversidad  de  formas  florales,  por   lo  que  muchas  especies   son   vulnerables   a   la   extinción.   La   germinación   de   sus   semillas   requiere   de   una   asociación  micorrízica;   sin   embargo,   ésta   ha   podido   lograrse   de   forma   asimbiótica   utilizando   las   técnicas   de  cultivo   de   tejidos   vegetales,   incorporando   al  medio   los   azúcares   que   en   condiciones   naturales   son  proporcionados  por  el  hongo.  El  objetivo  del  presente  trabajo  fue  establecer   la  metodología  para   la  germinación  asimbiótica  y   la  propagación   in  vitro  de  Epidendrum  radicans   como  modelo  para  otras  orquídeas   de   hábitos   terrestres   que   se   encuentren   en   la   Norma   Oficial   Mexicana.   Semillas   de   E.  radicans   se   desinfectaron   y   sembraron   en  medio  Murashige   y   Skoog   (MS).   Para   la   propagación,   se  utilizaron  como  explantes  mitades  de  protocormos  que   se   sembraron  en  medio  MS  al  50  %  de   sus  componentes   adicionado   con   Ácido   Naftalenacético   0,   2   y   4   mgL-­‐1,   siendo   2   mgL-­‐1   la   mejor  concentración   al   generar   un   promedio   de   1159   cuerpos   parecidos   a   protocormos   a   partir   de   100  explantes   en   cuatro  meses.   Las   plántulas   desarrolladas   se   subcultivaron   a  medio  MS   y   después   de  cuatro  meses   se   transfirieron   al  mismo  medio   adicionado   con   pulpa   de   plátano   para   estimular   su  crecimiento.   Las  plántulas   se  aclimatizaron  en  charolas  de  plástico   transparente  con  una  mezcla  de  carbón:tezontle:corteza  de  pino  (1:1:1)  a  27  °C.  Después  de  tres  meses,  las  plántulas  procedentes  de  las  concentraciones  0,  2  y  4  mgL-­‐1,  sobrevivieron  en  un  5  %,  70  %,  60  %,  respectivamente.  El  presente  trabajo   demuestra   la   potencialidad   regenerativa   de   las   mitades   de   protocormos   como   fuente   de  explante  para  la  propagación  masiva  de  esta  especie  terrestre.  

ID_708  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS      

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Micropropagación   de   Mammillaria   coahuilensis   (Boed.)   (Cactaceae)   Moran   a   partir   de  semillas  de  plantas  regeneradas  in  vitro  

Laura  Lorena  RODRÍGUEZ-­‐NÚÑEZ1,*,  Ana  Laura  LÓPEZ-­‐ESCAMILLA2  y  Laura  Patricia  OLGUÍN-­‐SANTOS3  *[email protected]  

1Laboratorio   de   Desarrollo   en   Plantas,   Facultad   de   Ciencias,   Universidad   Nacional   Autónoma   de    México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México    2Laboratorio  de  Morfofisiología  Vegetal,  Centro  de  Investigaciones  Biológicas,  Universidad    Autónoma  del  Estado  de  Hidalgo,  42184  Pachuca,  Hidalgo,  México    3Unidad   de   Ambientes   Controlados,   Facultad   de   Ciencias,   Universidad   Nacional   Autónoma   de    México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México    

Mammillaria   coahuilensis,   especie   endémica   del   estado   de   Coahuila,   México,   y   de   distribución  restringida  está  amenazada  de  extinción  de  acuerdo  con  la  Norma  Oficial  Mexicana.  Las  técnicas  de  propagación   in   vitro   se   han   aplicado   exitosamente   en   especies   de   este   género   como   estrategia   de  conservación   ex   situ.   El   objetivo   del   presente   trabajo   fue   evaluar   la   capacidad   de   germinación   y  regeneración   in   vitro   de   semillas   provenientes   de   plantas   propagadas   previamente   por   cultivo   de  tejidos,   establecidas   en   invernadero   y   polinizadas   manualmente.   Semillas   de   M.   coahuilensis   se  desinfectaron   y   sembraron   en   medio   Murashige   y   Skoog   (MS).   Para   promover   su   elongación,   las  plántulas  se  transfirieron  a  MS  líquido  con  puentes  de  papel  filtro  durante  25  días  y  posteriormente  en  MS  +  Carbón  Activado  1.5  gL-­‐1  para  evitar  la  hiperhidratación.  Plántulas  de  0.5-­‐16  mm  de  longitud  se  utilizaron  como  fuente  de  explantes  apicales  y  laterales  y  se  sembraron  en  medio  de  inducción  MS  adicionado   con  Benciladenina   y  N62-­‐isopentiladenina   ambas   a   0.5,   1   y   2  mgL-­‐1.   La   germinación   fue  menor  (75  %)  que  la  obtenida  en  trabajos  previos  en  semillas  de  plantas  silvestres  (100  %).  Los  brotes  se  formaron  por  organogénesis  directa  a  partir  de  aréolas  florales  y  vegetativas  en  ambos  explantes.  En  explantes  laterales,  el  mayor  número  promedio  de  brotes  (13.3)  se  obtuvo  con  BA  2  mgL-­‐1  y  en  los  apicales   (10.6)   en   la   misma   concentración.   Con   N62-­‐isopentiladenina   los   laterales   formaron   en  promedio   7.25   brotes   por   explante   con   2  mgL-­‐1   y   fue   nula   en   los   apicales.   Estudios   previos   con   la  misma  especie  reportaron  21.25  brotes  por  explante  con  1  mgL-­‐1  Benciladenina  y  8.86  con  0.5  mgL  -­‐1.  Se  concluye  que  las  semillas  procedentes  de  una  primera  generación  obtenida   in  vitro  disminuyeron  en  su  porcentaje  de  germinación  y  en  el  número  de  brotes  regenerados,  sin  embargo,  conservan  su  viabilidad  y  alta  capacidad  regenerativa.  

ID_711  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS      

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Propagación   in   vitro   y   descripción   histológica   de   estructuras   embrionarias   de   Agave  victoriae-­‐reginae  

Betzy   Rosaura   RIVERA   FUENTES1,   Guitele   Dalia   GOLDHABER   PASILLAS2,   Mónica   Karina   PÉREZ  PACHECO3,  Judith  MÁRQUEZ  GUZMÁN3  y  Víctor  Manuel  CHÁVEZ  ÁVILA1  

1Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  04510  México,  D.F.,  México  2Natural   Products   Laboratory,   Leiden   Institute   of   Biology,   Leiden   University,   2300   Leiden,   South  Holland,  Países  Bajos  3  Laboratorio  del  Desarrollo  en  Plantas,  Departamento  de  Biología  Comparada,  Facultad  de  Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  

Agave  victoriae-­‐reginae  es  una  especie  endémica  de  México  con  una  gran   importancia  económica  y  cultural,  pues  constituye  un  grupo  de  plantas  clave  por  los  recursos  que  otorgan  al  ecosistema  y  al  ser  humano.   Los   factores   antropogénicos   han   alterado   sus   poblaciones   silvestres   debido   a   la   colecta  ilegal  de  plantas  y  semillas  para  su  comercialización  ornamental  y  la  destrucción  del  hábitat  natural,  del   cual   se   extraen   minerales   para   compañías   cementeras.   Por   esta   situación   crítica   ha   sido  catalogada  como  en  peligro  de  extinción  por  la  NOM-­‐059-­‐ECOL-­‐2001  y  bajo  el  estatus  de  amenazada  de  acuerdo  con  CITES,  Apéndice   II.  El  objetivo   fue  establecer   las  condiciones   in  vitro  para   inducir   la  regeneración  de  plantas  completas  a  partir  de  explantes  de  hoja,  tallo  y  raíz  en  medio  MS  50  %  con  PVP  y  carbón  activado,  adicionado  con  2,4-­‐D  (0,  0.1,  0.5,  1,  2,  3,  4  mg/L)  y  BA  (0,  0.5,  1,  2,  3  mg/L).  Se  logró   obtener   organogénesis   indirecta   a   partir   de   hoja   y   directa   a   partir   de   tallo,   así   como  embriogénesis   somática   a   partir   de   hojas   y   la   descripción   del   desarrollo   ontogénico,  morfológico   y  anatómico  in  vitro  de  callo  embriogénico,  primordios  foliares  y  hojas.  Los  cortes  obtenidos  muestran  células   de   callo   con   paredes   celulares   delgadas   y   núcleo   excéntrico,   células   meristemáticas   con  núcleos  conspicuos,   formación  de  proembriones,  mitosis,  embrión  y  suspensor,  haz  vascular  de  raíz  con  periciclo  y  endodermis,  cofia,  primordios  foliares  y  brotes.  Con  este  trabajo  se  demostró  que  el  cultivo  de  tejidos  vegetales  es  una  herramienta  eficaz  y  viable  para  la  propagación  in  vitro  de  especies  en  peligro  de  extinción  y  que  a  su  vez  permite  la  reintroducción  a  la  vida  silvestre,  promoviendo  así  la  conservación  y  su  aprovechamiento  sostenible.  

ID_716  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS    

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Propagación   in   vitro   de   tres   especies   endémicas   mexicanas   del   género   Mammillaria  (Cactaceae):  M.  longiflora,  M.  napina  y  M.  sanchez-­‐mejoradae  

Marlene  HERNÁNDEZ  PACHECO*,  Octavio  GONZÁLEZ  CABALLERO  y  Víctor  M.  CHÁVEZ  AVILA  *[email protected]  

Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  Circuito  Exterior,  México,  D.F.  04510,  México  

Mammillaria,  género  casi  endémico  de  México  y  con  ca.  1,025  especies  y  subespecies,  incluye  plantas  que   son   fuente   de   recursos   ecológicos,   sufren   degradación   de   hábitats   y   saqueo   por   su   valor  ornamental,  económico  y  cultural.  Estos  procesos,  sumado  a  largos  ciclos  de  vida,  errática  producción  de  semillas  y  germinación,  hacen  que  estén  en  situación  crítica.  La  NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010  incluye  103  especies,  25  como  amenazadas  (A)  y  10  en  peligro  de  extinción  (P).  M.  longiflora,  M.  napina  (A),  endémicas   de   Durango   y   del   Valle   de   Tehuacán-­‐Cuicatlán,   Puebla,   respectivamente,   y  M.   sanchez-­‐mejoradae  (P),  endémica  de  Nuevo  León,  se  comercializan  pero  no  se  cultivan,  excepto  esta  última.  El  cultivo  de  tejidos  vegetales  permite  producir  numerosos  individuos  a  partir  de  fragmentos  pequeños  y  es  una  alternativa  para  la  conservación  de  especies,  objetivo  del  presente  estudio.  Ápices  y  distintos  fragmentos  fueron  cultivados  en  medio  MS50%  con  ANA/BAP  (0/0;  0/1;  0/3,  0.5/0;  0.5/1,  0.5/3  mg/l).  M.   longiflora:   de   14   plántulas   germinadas   in   vitro   (40   %),   se   cultivaron   ápice,   tallo   y   raíces,   11  semanas  con  ANA/BAP.  El  tallo  en  0.5/3  formó  mayor  número  de  brotes  vía  directa  e  indirecta.  A  1.5  años  se  obtuvieron  1349  brotes  in  vitro  y  75  plantas  en  invernadero.  M.  napina:  dos  plantas  silvestres  y   dos   injertadas   (cultivadas).   Fueron   disectadas   (ápice   y   2   segmentos   de   tallo   c/u),   sembradas   en  medio   con   ANA/BAP   7   semanas.   Los   brotes   generados   fueron   divididos   igualmente;   además,   seis  raíces  obtenidas  de  rizogénesis   in  vitro   fueron  sembradas  en  medio  con  ANA/BAP  con   los  explantes  originales.   Estos   últimos   permanecieron   en   inducción   14   semanas.   Después   de   22   meses   se  obtuvieron   16   brotes   vía   directa.  M.   sanchez-­‐mejoradae:   de   un   brote   in   vitro   (cinco   meses),   se  cultivaron  tubérculos  y  tubérculos  con  médula  (1-­‐3  mm  de  largo).  A  dos  años  se  tienen  112  brotes  vía  indirecta.   La  conservación  de   recursos  bióticos  y  el   incremento  de   la  productividad  se  deben   lograr  con  el  desarrollo  de  la  ciencia  y  la  tecnología.  

ID_743  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS    

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Embriogénesis  somática  en  Zamia  furfuracea  (Zamiaceae),  especie  endémica  mexicana  

Paulina   HEREDIA   GUZMÁN1,*,   Sandra   CABRERA   HILERIO2,   Octavio   GONZÁLEZ   CABALLERO1,   Víctor  Manuel  CHÁVEZ  ÁVILA1  y  Richard  E.  LITZ3  *[email protected]  

1Laboratorio   de   Cultivo   de   Tejidos   Vegetales,   Jardín   Botánico,   Instituto   de   Biología,   Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  México  04510  D.F.,  México    2Jardín  Botánico  y  Herbario  de  la  Benemérita  Universidad  de  Puebla,  Puebla,  Pue.,  México    3University  of  Florida,  Homestead,  Estados  Unidos  de  América  

Zamia  furfuracea,  especie  endémica  del  estado  de  Veracruz  y  con  escasas  poblaciones  e   individuos,  está   considerada   en  peligro  de   extinción   (NOM-­‐059-­‐SEMARNAT-­‐2010).  No  obstante   su   importancia  ecológica,   cultural   y   económica,   no   se   cuenta   con  un   sistema  eficiente  de  propagación;   su   ciclo  de  vida   largo  y   la  destrucción  del  hábitat   agravan   su   situación,  por   lo  que   la  exploración  del  potencial  morfogenético  in  vitro  podría  contribuir  a  su  conservación.  A  partir  de  hojas  inmaduras  de  individuos  adultos   se   establecieron   cultivos   asépticos   de   folíolos   y   pecíolos   que   formaron   callo   en  medio   Litz  adicionado  de   kinetina   (0,   0.1,   0.5,   1,   2  mg/l)   con   2,4-­‐D   (0,   1,   2  mg/l)   al   término   de   1-­‐2  meses   de  cultivo.  El   callo  obtenido  de  pecíolos   fue  de   rápido  crecimiento,  blanco,  compacto,  poco  hidratado,  amorfo,   mientras   el   de   folíolos   fue   de   más   lento   crecimiento,   blanco-­‐hialino,   friable,   húmedo,  nodular,   con   filamentos   cristalinos   semejantes   a   las   etapas   embriogénicas   tempranas   citadas   en   la  literatura.  Cultivos  en  medio  líquido  han  permitido  incrementar  la  biomasa  y  determinar  su  curva  de  crecimiento.  Después  de  ocho  meses  de  cultivo  se   formaron  embriones  somáticos  a  partir  del  callo  generado  por  foliolos.  Con  el  propósito  de  caracterizar  las  estructuras  formadas  in  vitro  se  realizó  un  análisis   histológico   de   los   callos   y   embriones   somáticos   formados   in   vitro   comprobándose   su  identidad.  Este  es  el  primer  reporte  a  nivel  mundial  de  embriogénesis  somática  a  partir  de  estructuras  somáticas   de   individuos   adultos   (hojas   inmaduras)   en   el   género   Zamia   que   abre   la   posibilidad   de  contar   con  un   sistema  de   regeneración   controlado  que  haga  posible   la   conservación  de  este  grupo  vegetal  en  peligro  de  extinción.  

ID_789    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Cultivo  de  callo  in  vitro  del  orégano  mexicano  Lippia  graveolens  Kunth  

Sergio   MORENO   LIMÓN1,   María   Luisa   CÁRDENAS   AVILA2,   Rahim   FOROUGHBAKHCH   POURNAVAB1,  Mario   Rodolfo  MORALES   VALLARTA1,   José   Guadalupe   ALMANZA   ENRÍQUEZ1   y  Ma.   Adriana   NÚÑEZ  GONZÁLEZ3  

1Departamento   de   Botánica,   2Departamento   de   Biología   Celular   y   Genética,   3Departamento   de  Química   Analítica;   Facultad   de   Ciencias   Biológicas,   Universidad   Autónoma   de   Nuevo   León,   Ciudad  Universitaria,  66451  San  Nicolás  de  los  Garza,  Nuevo  León,  México  

El  término  orégano  se  aplica  a  un  conjunto  de  plantas  pertenecientes  a  cuatro  familias  taxonómicas,  pero  la  más  representativa  de  nuestro  país  es  la  familia  Verbenaceae.  Lippia  graveolens  Kunth  es  un  arbusto   pequeño   de   hojas   aromáticas   con   diversos   usos:   culinarios,   medicinales   y   estéticos,   entre  otros.   Una   rama   importante   de   la   biotecnología   es   el   cultivo   in   vitro,   que   es   el   cultivo   en   medio  nutritivo,   en   condiciones   estériles,   de   plantas,   semillas,   embriones,   órganos,   explantes,   tejidos,  células  y  protoplastos  de  vegetales.  Se  forma  una  masa  desdiferenciada  sin  control  en  su  crecimiento  que  recibe  el  nombre  de  callo,  creado  a  partir  de  una  porción  de  planta  en  contacto  con  un  medio  adecuado  para  su  proliferación.  El  propósito  de  la  siguiente  investigación  es  desarrollar  un  protocolo  de  asepsia  y  cultivo  de  callo  in  vitro  del  orégano  mexicano  en  medio  adicionado  con  jugo  de  naranja  como   agente   antioxidante.   Se   utilizaron   explantes   de   hoja   sanas,   que   se   pasaron   por   un   proceso  aséptico  que  consistió  en  30  segundos  en  etanol  100  %,  hipoclorito  de  sodio  comercial  (15  %)  por  15  minutos   de   3   a   5   enjuagues   en   agua   destilada   esterilizada;   posteriormente   fueron   sembrados   en  medio  de  cultivo  Murashige-­‐Skoog  (MS)  (Sigma  Aldrich)  con  el  RCV  2,4-­‐Diclorofenoxiacético  y  jugo  de  naranja  en  concentraciones  de  0,  10  y  20  %.  La  inducción  de  tejido  desdiferenciado  se  logró  a  los  10  días;  el  tratamiento  T3  (3  mg/L  de  2,4-­‐D)  mostró  los  mejores  resultados  a  los  40  días  al  presentar  callo  de  gran  tamaño  y  calidad;  el  callo  es  friable  con  una  coloración  verde  cristalino.  El  uso  del  complejo  natural  jugo  de  naranja  no  mejoró  la  respuesta  sobre  la  inducción  en  los  tratamientos.  El  Análisis  de  Varianza   demostró   que   hay   una   diferencia   significativa   entre   los   tratamientos   en   relación   a   la  promoción  de  la  formación  de  callo  de  Lippia  graveolens  (P  <  0.01).  

ID_799    Modalidad:  cartel  Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Evaluación  de  la  viabilidad  económica  de  la  micropropagación  de  Alsophila  firma  Baker  

Carlos   Iván   LINARES   GARCÍA,   Guillermo   Alfonso   HERRERA   QUECHOL,   María   Sol   MONTERRUBIO  ROBLEDO,  Oswaldo  NÚÑEZ  CASTILLO  y  Juan  Carlos  PEÑA  BECERRIL    

Facultad  de  Ciencias,  Universidad  Nacional  Autónoma  de  México,  Ciudad  Universitaria,  04510  México,  D.F.,  México  

Los  helechos  arborescentes  tienen  una  gran  importancia  económica  ya  que  son  comercializados  como  maquique   (fibra   para   cultivar   epífitas)   o   para   uso   ornamental.   La   extracción   excesiva   junto   con   el  indiscriminado  deterioro  de  su  hábitat  ha  provocado  que  muchas  especies  estén  incluidas  en  la  NOM-­‐059.  El  objetivo  es  analizar  la  sustentabilidad  de  la  aplicación  de  una  técnica  de  micropropagación  de  Alsophila  firma  contra  la  extracción  ilegal.  Para  ello  se  realizó  un  análisis  de  la  relación  costo-­‐beneficio  de   la   micropropagación   y   de   la   extracción   ilegal   a   corto,   mediano   y   largo   plazo.   Para   recabar  información   se   realizaron   salidas   a   campo   a   los   sitios   de   venta   de   maquique   y   de   plantas  ornamentales  de  la  especie,  y  a  su  vez  se  recopiló  información  bibliográfica.  A  corto  plazo  a  través  de  la   micropropagación   no   se   obtiene   una   ganancia   neta   comparada   con   lo   invertido   por   lo   que   se  considera  no  viable.  A  mediano  plazo  hay  ganancia  del  60  %  sobre  lo  ganado  ilegalmente  por  lo  que  no  se  equipara.  A  largo  plazo  se  supera  la  ganancia  con  la  técnica  de  micropropagación  en  un  162  %  sobre   la   venta   ilegal.   Para   la   producción   de   maquique,   en   ningún   lapso   la   micropropagación   es  redituable,   ya   que   los   costos   de   inversión   superan   a   las   ganancias   en   un   84   %.   La   técnica   de  micropropagación  es  redituable  a  largo  y  tal  vez  a  mediano  plazo  cuando  se  propaga  a  la  especie  con  el  fin  de  venta  para  ornato.    

ID_828    Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS  

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Germinación  asimbiótica  in  vitro  de  la  orquídea  Epidendrum  radicans    

Yareli  Odemaris  BUENDÍA  LÓPEZ1,*,  Julio  Enrique  MÉNDEZ  FLORES1,  Alejandro  HERNÁNDEZ  GARCÍA1,  Héctor  SERRANO2  y  María  Dolores  GARCÍA  SUÁREZ1  *[email protected]    

1Laboratorio  de  Micropropagación  y  Ecofisiología  Vegetal,  Departamento  de  Biología,  2Laboratorio  de  Biología  Molecular,  Departamento  de  Ciencias   de   la   Salud;  División  de  CBS,  Universidad  Autónoma  Metropolitana-­‐Iztapalapa.  Av.  San  Rafael  Atlixco  186,  Col.  Vicentina,  09340  México,  D.F.,  México    

Epidendrum  radicans,  planta  terrestre  o   litófita  que  llega  a  medir  2  m  de  alto,  con  cañas  delgadas  y  hojas   alternadas   carnosas   en   toda   su   longitud,   con   raíces   laterales   adventicias   a   lo   largo   que   se  adhieren  a   rocas  y   troncos,   llega  a   formar  grandes   cúmulos.   Sus   inflorescencias   forma   racimos  que  producen  hasta  30  flores  en  sucesión  de  color  naranja  brillante.  La  especie  puede  florecer  y   formar  frutos   durante   todo   el   año   y,   a   diferencia   de  muchas   orquídeas,   es   de   fácil   cultivo.   Se   pusieron   a  germinar  las  semillas  asimbióticamente  e  in  vitro  provenientes  de  una  cápsula  colectada  y  sembrada  en  diciembre  2012;   su   germinación   se  dio  utilizando   como  medio  de   cultivo  Knudson  C  adicionado  con  plátano,  sacarosa  al  3  %  y  agargel.  Los  cultivos  se  mantuvieron  en  cámara  de  crecimiento  con  un  temperatura  de  32.5  °C/20  °C  y  fotoperiodo  de  16  h/8  h  luz/obscuridad.  Los  resultados  muestran  una  germinación  asimbiótica  muy  uniforme  con  una   tasa  de  crecimiento  bastante  acelerada,   ya  que   las  plántulas  hasta  ahora  obtenidas  después  de  seis  meses  miden  1.5  cm,  al  igual  que  para  otros  géneros  de   orquídea   como   Laelia,   los   cuales   presentan   la   misma   longitud   pero   con   un   año   de   edad.   Este  resultado   sugiere   que   esta   planta   presenta   características   semejantes   a   una   colonizadora   con   una  gran   adaptación   a   proliferar   fácilmente   en   condiciones   naturales,   así   como   también   creciendo   en  sitios  perturbados  como  ha  sido  reportada.  Se  le  ha  recolectado  en  diversos  tipos  de  vegetación  como  bosques  mesófilos,  selvas  tropicales  y  bosques  de  pino-­‐encino;  así  mismo,  se  distribuye  ampliamente  desde  Puebla,  Veracruz,  Oaxaca,  Tabasco  y  Chiapas  en  México,  y  en  Centroamérica  hasta  Panamá.    

ID_929  Modalidad:  cartel    Sesión  CA6:  PROPAGACIÓN  DE  PLANTAS