ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب -...

68
ال ﷲ المحي الرنحم الرم بس

Transcript of ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب -...

Page 1: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ال ال بسم هللا الرحمن الرحيمهللا

Page 2: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ية الحي جيا ل التكن ف ة مقدمة في التكنولوجيا الحيويةقد:األقسام المشاركة ر م

الكيمياء الحيوية الزراعيةة ا الز ا ل ك الميكروبيولوجيا الزراعيةال

الوراثــــــــــةالوراثــــــــــة

Page 3: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ع:المراجع•١-Biotechnology, An Introduction; otec o ogy, t oduct o ;

Susan R. Barnum.

فتحى محمد عبد . البيولوجيا الجزيئية للجينوم؛ د -٢•.التواب

النباتية-٣• الحيوية األنسجة“التكنولوجيا زراعة ي ب يوي ا وجي ا و ج ا زرا األ. محمد كمال البحر وآخرون. ؛ د”والھندسة الوراثية

ة٤ ا الز الط ف ا ل تكن تال أ . أحمد مستجير.البيوتكنولوجيا في الطب والزراعة؛ د-٤•الوراثية-٥• بالھندسة الخاصة النت .مواقع ي ور ھ ع ب .و

Page 4: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:الحيوية التكنولوجياھيما ي األزل قديم منذ القديمة بالطريقة الحيوية التكنولوجيا مفھوم•

نن( دةق د)د تئنالت اتاتإ االن ت ا ز وزراعتھا النباتاتإستئناسعلىيعتمد)عديدةقرونمن( .للرعي الحيوانات واستئناس

عمليةتطور علىيعتمدالكالسيكيالحيويةالتكنولوجيامفھوم•يي حواليمنذ إستمرتوالتيfermentationالتخمر الكحول -الخبز صناعة من بداية الحالي وقتنا حتى عام٢٠٠إلجى .الحيوية المضادات-اإلنزيمات-األمينيةاألحماضإنتاجحتى

واإلكتشافات التجارب من والتطبيقية العلمية المعلومات تراكم•والصناعةالزراعةعملياتتطورإلىأدىوالحاليةالسابقة والصناعة الزراعةعملياتتطورإلىأدىوالحاليةالسابقة .والخدمات المنتجات بزيادة حاليا تزودنا والتي

Page 5: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

الحيوية التكنولوجياھيما ي الكائنات تستخدم )تكنيك( تقنية أي“ ھي الحيوية التكنولوجيا•

لتحسينتحويرهأومنتجلعملالكائناتھذهمنموادأوالحية لتحسينتحويرهأومنتجلعملالكائنات ھذهمنموادأوالحية دقيقة كائنات لتطوير أو حيوانات أو نباتات

microorganismsتخدامات معينةال microorganisms معينةالستخدامات. فيھا بما والتقنيات الوسائل جميع تتضمن الحيوية فالتكنولوجيا•

صياغته المعاد DNA الـ تقنية Recombinant DNA technologyRecombinant DNA technology

حيوانات أو نباتات تكون إما تحسينھا يتم التي الحية والكائنات•قةكائناتأ نقدproductsنتجاتھادق دةتك أجد أو جديدة تكون وقدproductsومنتجاتھادقيقةكائناتأو

بكمية موجودة أو قبل من موجودة تكن لم أنھا بمعنى نادرة،تااأقل اضن اتأألغ ا ت ف”نةإ كتت مكتبتعريف .”معينةإحتياجاتأو ألغراضنحتاجمماأقل .المتحدة بالواليات بالكونجرس التكنولوجي تقييم

Page 6: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

عدد مشاركة biotechnology الحيوية التكنولوجيا وتشمل•لن ة؛ال االط ل ةال ةالخل ئ ز ال والجزيئية، الخلويةالبيولوجياالطبيعية؛العلوممن

الحيوية والكيمياء الفسيولوجي الوراثة، الميكروبيولوجيا،لإلضافة ةل ن تال الك .والكمبيوتر الھندسةلعلوم بإلضافة

الـ تقنية الحيويةالتكنولوجياتشمل الوراثيةالناحيةمن•DNA صياغته المعاد recombinant DNA

technologyيستخدماالمصطلحانھذانأنحتى gyى .كمرادفين

سواءاللكائناتالوراثيةالمعالجةطرقالتقنيةھذهتتضمن• سواءاللكائناتالوراثيةالمعالجةطرقالتقنيةھذهتتضمن.حيوانات أو نباتات أو فطريات أو بكتريا أكانت

تطيعاآلن• لمنتجاتعلليحصلواالكائناتتغييالعلماءي لم منتجات علىليحصلواالكائناتتغييرالعلماءيستطيعاآلن•.مضت عاما ٤٠ قبل ممكنة تكن

Page 7: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

الحيوية التكنولوجيا :تطبيقات يوي وجي و :بي .إنتاج غذاء محسن جديد-١• ج. إنتاج كيماويات صناعية -٢•صيدالنية٣• مستحضرات إنتاج .إنتاج مستحضرات صيدالنية-٣•.محسنة) دواب(إنتاج مواشي -٤•. إنتاج محاصيل ومواشي مقاومة للفيرس -٥•الوراثية-٦• األمراض الوراثي(تشخيص السرطان مثل ي ورا راض ا ي(يص األ ورا ن ا ر ل ا

). AIDSومرض المناعة المكتسب بالجينات٧• geneالعالج therapyاألدينوزين نقص مثل مثل نقص األدينوزين gene therapyالعالج بالجينات-٧•

. ADAدي أمينيز

Page 8: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

recombinantإنتاج الفاكسينات المعاد صياغتھا -٨•ال ل ثل أل ل vaccinesلمنع بعض األمراض مثل المالريا .

بيتأمل إستراتيجيات التكنولوجيا الحيوية في إستعادة البيئة -٩• إ ي يوي وجي و يجي ر إ ل. السليمة

للخطر-١٠• المعرضة األنواع حماية .حماية األنواع المعرضة للخطر-١٠• microorganismsإستخدام الكائنات الدقيقة -١١•

ة ناع ال خلفات ال ة ن . للتخلص من سمية المخلفات الصناعيةللتخلعند تحديد التنوع الوراثي للكائنات المختلفة يمكن -١٢•

ة أل مساعدة علماء البيولوجي في تحسين األنواع الحيوانيةفimprove conservation pوالنباتية والمحافظة عليھا

practices.

Page 9: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ة اث ال ة ند الھندسة الوراثيةالG ti E i iGenetic Engineering

Page 10: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ي Genetic Engineeringتعرف بالھندسة الوراثية • gھ g Genetic Manipulationأو بالمعالجة الوراثية •المعاد صياغته DNAأو تقنية الـ •

Recombinant DNA TechnologyRecombinant DNA Technology الجينية• التقنية Geneأو Technology ي جي ي Gene Technologyو

١٩٧٠بدأت في السبعينات

Page 11: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

الوراثية الھندسة ھى :ما ي ور ھ ى :

جين• نقل من(ھ (DNAقطعة جينات) إل)أو نوع من من نوع إلى)أو جينات) (DNAقطعة من (ھي نقل جين•. نوع آخر

العادية• التربية بطرق ومستحيل تنفيذه يمكن ال .وھذا ال يمكن تنفيذه ومستحيل بطرق التربية العاديةوھذا

Page 12: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

DNA:الـماھو DNA:ويو في الخلية نواةفيالموجودة)الجينات(الوراثيةالمادةھو• ييويوجو)جي(ور

ويوجدeukaryotes اإليوكاريوت النواة؛ حقيقية الكائناتالتي)طوليةخيوط(chromosomesالكروموسوماتفي التي)طولية خيوط(chromosomesالكروموسوماتفي

الھستونات ھما البروتينات من ونوعين DNA الـ من تتكونHi tناتغ ت Nال hi t Histonesالھستوناتوغير.Non-histones

ي البروكاريوت األنوية؛حقيقيةغيرالكائناتفييوجدبينما•prokaryotes كمثال نووي غالف بدون حلقية صورة في

الحمضعنعبارةالوراثيةالمادةتكونبينماالبكتريافي الحمضعن عبارةالوراثيةالمادة تكونبينماالبكتريافي الفيروسات مثل الحية األنظمة بعض في RNA النووي.النباتيةالنباتية

Page 13: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ل DNA:أين يوجد الـأ

حية خلية كل :في ي ي ل :ي إنسان -حيوان–نبات -فطريات -طحالب -بوتوزوا -بكتريا

ف ة ة ظ أل ف .في كل كائن حى وحتى في األنظمة الحية كالفيرسف

Page 14: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Prokaryotesشكل لخلية غير حقيقية األنوية وي ي ي ير yي

Page 15: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

The plant cellpالخليــــــة النباتية

Page 16: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

النواة

النواة في الكائنات حقيقية األنوية Eukaryotic nucleus

Page 17: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

DNAالخلية، النواة، الكروموسوم، المادة الوراثية

Page 18: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 19: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 20: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

DNAالشكل الفراغي لجزيئ الـ

Page 21: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

DNAا.ن.تركيب جزئ ال د

Page 22: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Nucleotideالنيوكليوتيدة :وتتركب من DNAھي وحدة تركيب جزئ الدنا ي

قاعدة نتروجينية من بين أربع قواعد ھي -١نات نال نAاألدن ان Gال Gوالجوانين Aاألدنين :البيورينات

ھبينھا روابطCوالسيتوزين Tالثيامين :البيريمينات ھيدروجينية

ريبوز٢ ديوكس الخماس Deoxyriboseالسكر Deoxyriboseالسكر الخماسي ديوكسي ريبوز-٢ Pحامض الفوسفوريك -٣

DNAويكون السكر وحامض الفوسفوريك العمود الفقري للـ

Page 23: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 24: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Nucleotideالنيوكليوتيدة

Page 25: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

= Nucleotidesالنيوكليوتيدات ة ل فللق لف الفوسفات) + ديزوكسي ريبوز(السكر+القواعد النتروجينية

Page 26: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:ما ھى الھندسة الوراثية ھ ىمن نوع إلى نوع )أو جينات) (DNAقطعة من (ھي نقل جين• جين (ن(ي جي) وع)و ى إ وع ن

آخر؛ ا اث ة ند ال الكائنات النات : ويسمى الناتج بالكائنات المھندسة وراثيا •

Genetically Engineered Organisms (GEOs)y g g ( )أو

ا اث ة ال الكائنات : الكائنات المحورة وراثيا•Genetically Modified Organisms (GMOs)y g ( )

Page 27: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

.الجين ھو جزيئية وراثية تقنية أى قلب• إعادة في إستخدامه قبل جيدا ويوصف الجين يعزل أن يجب•

geneticالوراثيةالصياغة manipulation. يي gور p قطعة amplifying وتكبير isolating عزل طرق أحد•

DNAالجين(المختارة(gene of interestكلونةھي DNAالجين(المختارة(gene of interest كلونةھي clone جزيئ في بإدخاله الجين DNA كناقل يستخدم آخر

vehicle or vectorvehicle or vector. جزيئ الناتج يسمى DNA الـ من النوعين ھذين إتحاد عند•

DNAاد biاغتهال t DNA DNAصياغتهالمعادrecombinant DNAmolecule.

hostمضيف كائنإلىصياغتهالمعادالجزيئھذانقليتم•.Eمثال( coli(تكاثر فيهيتم)(م)( .الجزيئ)أعدادهزيادة(

Page 28: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:Gene (DNA) Cloningالكلونة الجينية صياغته المعاد DNA الـ على للحصول المستخدمة التقنية ھي•

:خطواتعدةفيوتتم :خطواتعدةفيوتتم.(DNA) الجين عزل -١•

ةل طلللةلقط لل كلونتهالمطلوب الجينعلىمحتويةDNAالـمنقطعةإدخال-٢•cloning الكلونة ناقل في ligase بإنزيم وتلصق vector.

transformation المضيفة الخلية تحول -٣• of a hostcell)مثالالبكتيرية(بDNAصياغتهالمعاد)DNAالناقل+ cell)يري لDNA( يDNA ب)ب

DNA الجين(. hostالمضيفةالخالياإنتخاب-٤• cellsستستضيفالت hostالمضيفةالخالياإنتخاب-٤• cells ستستضيف التي

DNA صياغته المعاد recombinant DNA.اتق٥ فالتالخال تض اDNAت التأاغتهال التي أوصياغته المعادDNAتستضيفالتيالخالياتقييم-٥•

.)الجين ناتج( المطلوب البروتين تنتج

Page 29: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

سيحتاج إلنزيمات تسمى إنزيمات القطع ) الجين( DNAعزل الـ• ع)جين(زل زي إ ى زي إل ج ي. Restriction endonucleasesالمحددة

Restriction enzymesRestriction enzymesRestriction enzymesRestriction enzymes

Page 30: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ع Restriction Restrictionإنزيمات القطع المحددةإنزيمات القطع المحددة زي عإ زي إenzymesenzymes

محددة تتابعات عند DNA الـ جزيئ بقطع تقوم إنزيمات ھي•ا اأز ةالق اخل اطلال ال فتتا الت التعرفتتابعاتعليھايطلقالداخليةالقواعدأزواجمن

recognition sequences موقع بداخلھا يوجد والتي االقطقف أن قف cleavageالقطعبموقعيعرفمعين site مقصفكأنھا

.حيوي البكتريوفاج نمو لتمنع البكتيرية الخاليا في أصال موجودة•

يبييرس( .)البكتريايصيبالذيالفيرس( ريي )ب مكونة قصيرة تتابعات على تتعرف إنزيم٢٠٠ حوالي عددھا•

كمانوعيكسرفيھاوتحدثالقواعدمنأزواج٦-٤من كما نوعي كسرفيھاوتحدثالقواعدمنأزواج٦-٤من:بالشكل

Page 31: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

لة ل ال ة زد ات ةنھا ل ال ة ا ا ن نھايات مزدوجة السلسلةBlunt ends ex. Hpa I

نھايات وحيدة السلسة Sticky ends ex. Eco RI

Page 32: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:Cloning Vectorsأنواع ناقالت الكلونة ) الجين(الغريب DNAوھي الناقالت التي يدخل فيھا الـ •

فة تض ال ا الخال إل له ت ك ت نقله ا hال t hostالمراد نقله حتى يمكن توصيله إلى الخاليا المستضيفة cells .

: مواصفاتھا•ا للتك نشأ ت ال(ت عا)DNAتكاث ن ة غ ن تك تكون صغيرة نوعا –)DNAتكاثر الـ(تحتوي منشأ للتكرار•

بھا مواقع عديدة متفردة –ما حتى يمكن عزلھا بدون أن تھدم ق ط ف لفعل إنزيمات القطع المحددة فيقطع الناقل مرة واحدة وتوجد ط

تحتوي–مواقع قطع عديدة إلدماج القطعة المراد صياغتھا ج إل ع يع.كشافات إنتخابية يمكن بھا تحديد مدى نجاح العملية

Page 33: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:Cloning vectorsأنواع ناقالت الكلونة gع

: Bacterial vectorsالناقالت البكتيرية - أ• ، لكن من الممكن أن تنقل في E. Coliمعظمھا ينقل في بكتريا ي يھ

.بكتريا أخرى وفي الخميرة والفطر والحيوان واإلنسان

Page 34: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

دات١ الز lال id :plasmidsالبالزميدات-١•الـ• من مزدوج حلقي صغير جزء ووظيفتهDNAھي ن وج ز ي ير ي DNAي جز وو

الطبيعية ھي إكساب الخلية المضيفة لصفة المناعة ضد الحيوية المضادات عدةبعض أو وحيدة كنسخة يوجد يوجد كنسخة وحيدة أو عدة .بعض المضادات الحيوية

نسخ في البكتريا وتتابع النيوكليوتيدات فيھا معروفة ل ةالكا الخل ك ن كث غ أ ھ وھو أصغر بكثير من كروموسوم الخلية– بالكامل

مويقدر حجم الـ . المضيفة مما يجعل من السھل عزله منھاDNA١٠-,١الذي يمكن إدخاله فيھا من Kb .

ھو• أستخدم بالزميد وتمpColE1ثمPsc101أول وتم pColE1ثمPsc101أول بالزميد أستخدم ھو•واآلن أكثرھا إستخداما ھو pBR322 تحويره إلى

UCه ا أن pUCبأنواعه.

Page 35: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

في الخلية البكتيرية Plasmidوجود البالزميد

Page 36: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

بكتريا خلية في اإللكتروني بالميكرسكوب البالزميد شكل البالزميد بالميكرسكوب اإللكتروني في خلية بكتريا شكلE. coliالقولون

Page 37: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

pBR322 (Bolivar and Rodriquez) p ( q )

Page 38: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

يالبالزميد البكتيري وبه جين األنسولين

Page 39: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Bacteriophage البكتيريوفاج -٢• جزئ من ويتكون البكتيرية الخلية يصيب الذي الفيرس وھو

عدةفيالمرغوبالجينإدخالفيهيمكنDNAالـمنخطي عدةفيالمرغوبالجينإدخالفيهيمكنDNAالـمنخطي من أكبر DNA قطع ويستوعب .المحدد اإلنزيمي للقطع مواقع

قاعدةكيلو١٠٢٠منيتراوحبطولالبالزميد .قاعدةكيلو٢٠-١٠ منيتراوحبطولالبالزميد Cosmid الكوزميد -٣•

DNA من أطول شظايا تستقبل الناقالت من مجموعة ھي وتنقلمعاوالفاجالبالزميدمميزاتأفضلبينوتجمع وتنقلمعا والفاجالبالزميدمميزاتأفضلبينوتجمع

.قاعدة كيلو ٥٠ –٣٥من طولھا قطعةيتراوح

Page 40: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:ناقالت لكائنات أخرى - بتستخدم في الكائنات حقيقية –تنقل قطع كروموسومية أكبر •

:وتشملEukaryotesاألنوية ل Eukaryotesوي : والكروموسوم البكتيري الصناعي -١•

B t i l A tifi i l Ch BAC’نقل •Bacterial Artificial Chromosomes BAC’s وينقل.كيلوقاعدة ٦٠٠ -٣٠٠بحجم يتراوح من DNAقطعة

يسمى BAC’sوP1ناقل يجمع مزايا بكتريوفاج-٢•PAC’sوينقل قطعةDNA كيلوقاعدة٣٠٠بحجم. م

كروموسوم الخميرة الصناعي -٣••Yeast Artificial Chromosomes YAC’sوينقل •Yeast Artificial Chromosomes YAC s وينقل

.كيلوقاعدة ١٢٠٠ -٦٠٠بحجم يتراوح من DNAقطعة

Page 41: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Ligaseإنزيمات القطع والناقل وإنزيم ليجيز م gع

بوصل Ligaseيقوم إنزيم الليجيز مولحم األجزاء المكسورة

Page 42: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 43: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

طريقة الھندسة الوراثية

Page 44: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

معاد DNAتكوين - ١يصياغته

معاد صياغته DNAجزيئ

الناقلالناقلDNAشظية

النقل إلى الخلية - ٢المضيفة

البكتريا المضيفة

تكاثر الجزيئ المعاد - ٣صياغته

DNAبكتريا تحتوي على معاد صياغته

إنقسام الخلية المضيفة - ٤

إنقسامات عديدة للخاليا مكونة كلون - ٥

كلونات بكتيرية نامية على بيئة صلبة

Page 45: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 46: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

لماذا يحتاج العلماء للھندسة الوراثية أو بمعنى آخر Proponentsلتغيير التركيب الجيني؟ رأى المؤيدونأ

مرغوبة صفات على للحصول -١• محاصيل تطوير مثل تجارياتغذيةأكثرطعامإنتاجأوالحشائشأوكاآلفاتلإلجھادمقاومة .تغذيةأكثر طعامإنتاجأوالحشائشأو كاآلفاتلإلجھادمقاومة

.جيدة وصحة حيوية أكثر ماشية قطعان إنتاج -٢•.نظافة أكثر بيئة نحقق المستقبل في وربما -٣•Medicalالطبوالعالجالتشخيصتطوير٤• Medical الطبيوالعالجالتشخيصتطوير-٤•

diagnostics and treatment أفضل لقاحات وإنتاجB iBetter vaccines

Page 47: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Critics:المعارضون ةأث ةألغذ ل ةلث كقل ھناك تكون قد الصحة،علىوراثيا المھندسةاألغذيةتأثير-١• المحولة الكائنات وراء أخطار جديدة مسببات ظھور مثل وراثيا

أأة Newجديدةسمياتأو Allergensللحساسية toxins أو.الجين موقع لتغير نتيجة Diseases أمراض

.والمحاصيل للبذور الحيوي التنوع فقدان -٢•مماالجديدةاألنواعمعللتزاوجنتيجةجديدةحشائشظھور-٣• مما الجديدة األنواعمعللتزاوجنتيجة جديدةحشائشظھور-٣•

.البيئة على يؤثرةن٤ قا نال دللكانا دفال الز إنزنتال إنزيم ينتجالبالزميدفيالموجودللكاناميسينالمقاومةجين-٤•

.لإلنسان سام وھو IIفيريز فوسفوترانس نيومايسينأة تأثيرھايوقف جزءتضيفالمحاصيللھذهالمنتجةالشركات-٥•

محيىى .عنھمالفالحيستغنيالحتى Terminatorيسمى.باإلنسان ستلحق التي األضرار خالف ھذا -٦•

Page 48: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

التكنولوجيا الحيوية في النبات Pl t Bi t h lPlant Biotechnology

األنسجةزراعةتقنيةإتقانمنالبدتطبيقھايمكنحت• األنسجةزراعةتقنيةإتقانمنالبدتطبيقھايمكنحتى•.النبات في تطبيقاتھا ومعرفة

اتاتنت شتقاالن ةال ا ةالك االتالثان ل لھاالتي الثانويةالكيماويةالمشتقات منعديدالنباتاتتنتج• - flavorings )النكھة( الطعم مكسبات : مثل أھميتھا

غألل ل مكسبات– dyesالصبغاتأوcoloringsاللونمكسبات الصيدالنية المنتجات –fragrances رائحة

ةة ةط ط pharmaceuticals والعطرية الطبيةالنباتاتخاصة – .insecticides الحشرات مبيدات

.النبات في الوراثية الھندسة وأخيرا •

Page 49: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

الھندسة الوراثية في النبات Genetically Engineered Plants

الھندسة ھي تقدماالحيويةالتكنولوجياإنجازاتأكثرمن•.النباتفيالوراثية ي بيور

.الھامة للمحاصيل جديدة صفات إضافة ھدفھا•لفةفلآلأ .النباتاتفيجديدةصفات ٦إدخالاآلنحتىأمكن•

مھندسنباتينوع١٢لـالتجارياإلنتاجعلىالموافقةتم• جىوم ري إل ي وعج س ب ھ .وراثيا

Page 50: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Plant Genetic Engineering ProcessPlant Genetic Engineering ProcessPlant Genetic Engineering ProcessPlant Genetic Engineering Process

CellPlant cell

Extracted DNA A single

Plant cell

gene

Transformation

Cell divisionTransgenic plant

Page 51: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Traitالصفة وراثيا المحورة النباتات النباتات المحورة وراثيا TraitالصفةGenetically modified plants

المقاومة للحشراتللحشائش المقاومة

. طماطم–بطاطس–قطن–ذرةالصويا–ذرة –أرز–كتان–قطن–فول –أرز –كتان –قطن–فول الصويا–ذرةالمقاومة للحشائش

).الشلجم(الكانوال –بنجر السكر طة ط المقاومة للفيرس

الثمار نضج تأخير.بطاطس–ببايا–كوسة .طماطم تأخير نضج الثمار

تغيير محتوى . م

. فول الصويا–الكانوال الزيت

اللقاح حبوب البرية(شيكوريا–ذرةتنظيم )الھندبا )الھندبا البرية(شيكورياذرةتنظيم حبوب اللقاح

Page 52: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

ج نسيجقطعة منكاملنباتإنتاجيمكن أنهالنباتمميزاتمن•.)أنسجة زراعة( مزرعة في أحادية خاليا أو

صفة(نباتيةخالياإلغريبجينإدخالالعلماءإستطاع• صفة(نباتية خالياإلىغريبجين إدخالالعلماءإستطاع• لتعطي والتكشف اإلنقسام على تحث ثم مزرعة في )جديدةات لن كا .كاملنبات

Plantالنباتفيالتحول• transformation يوبيو عمليةھو expressed يعبر أن يمكنه نبات في غريب جين إدخال

)الكليةالوراثيةالمادة(جينوممنكجزءويورث)ينتج( )الكليةالوراثيةالمادة(جينوممن كجزءويورث)ينتج( .النبات

لل ث محولنباتعهالناتج• Transgenicوراثيا plant gى .Transgeneيسمىوالجين

Page 53: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

جكيف تنتج النباتات المھندسة وراثيا؟

:يمكن إستخدام طرق متعددة منھا• ھ رق م إ ن يAgrobacteriumإستخدام األجروبكتريا-١•

t mefacienstumefaciens. مباستخدام Direct Gene Transferالنقل المباشر-٢•

. البروتوبالستالجينات٣• Geneمسدس Gun .Gene Gunمسدس الجينات-٣• Electroporation.طريقة الثقب الكھربي -٤•

Page 54: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

11--Agrobacterium tumefaciensAgrobacterium tumefaciensTi plasmid with the new gene

cell’s DNA+ Transformation

AgrobacteriumPlant cell

The new gene

Transgenic plant Cell division

Page 55: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

Direct Gene Transferالنقل المباشر - ٢ا تخ تا ال ت ال . البروتوبالستباستخدام

Page 56: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

:الخطوات:الخطوات

.التخلص من الجدارالخلوي-١•البالزمي-٢• الغشاء في ثقوب ي.عمل بالز ء ا ي ا وب .ل إضافة بعض المواد التي تزيد من كفاءة إنتقال -٣•

ال ت ال إل ا الز .البالزميدات إلى البروتوبالستال

Page 57: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

33-- ““Gene Gun” TechniqueGene Gun” TechniqueDNA coated

golden particlesCell’s DNA

qq

golden particles

Gene gun Plant cell

A plant cell withthe new gene

Cell divisionTransgenic plant

Page 58: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 59: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 60: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

44-- Electroporation TechniqueElectroporation Technique

Power supply

p qp q

DuracellPlant cell

Power supply

Protoplast

DNA containingthe gene of interest DNA inside the

l llThe plant cell with

thplant cell the new gene

Page 61: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

إستماعكم لحسن شكرا لحسن إستماعكمشكرا

Page 62: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 63: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 64: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 65: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...
Page 66: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

C ti i i i l d 1) DNA •Crop genetic engineering includes: 1) DNA isolation 2) gene cloning 3) gene design 4) transformation and 5) plant breeding Thetransformation, and 5) plant breeding.The

entire genetic engineering process is basically the same for any plant The length of timethe same for any plant. The length of time

required to complete all five steps from start to finish varies depending upon the gene, crop p g p g , pspecies, and available resources. It can take

anywhere from 6-15+ years before a new transgenic hybrid is ready for release to be

grown in production fields.

Page 67: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...

•Crops•Enhanced taste and quality•Reduced maturation time•Increased nutrients, yields, and stress tolerance•Improved resistance to disease, pests, and herbicidesp , p ,•New products and growing techniques

•AnimalsAnimals•Increased resistance, productivity , hardiness, and feed

efficiency•Better yields of meat eggs and milkBetter yields of meat, eggs, and milk•Improved animal health and diagnostic methods•Environment•"Friendly" bioherbicides and bioinsecticides •Friendly bioherbicides and bioinsecticides•Conservation of soil, water, and energy•Bioprocessing for forestry products

B tt t l t t •Better natural waste management•More efficient processing•Society•Increased food security for growing populations

Page 68: ميحرلالا نمحرلالا ﷲ مسب - agr.asu.edu.egagr.asu.edu.eg/uploads/agr/Lecture_2_201503317808.pdf · امدختسي ناحلطصملا ناذھ ...