Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н.,...
-
Upload
brandee-canute -
Category
Documents
-
view
63 -
download
2
description
Transcript of Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н.,...
![Page 1: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/1.jpg)
Тема роботи: «Гігієнічне та ветеринарно-санітарне обґрунтування впливу
випоювання питної води з використанням пробіотику на
організм щурів»
Доповідач: Болгова О.С.
Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М.
2012 р.
![Page 2: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/2.jpg)
Актуальність
• Якість питної води є одним із факторів, який впливає на здоров’я людей і тварин.
![Page 3: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/3.jpg)
• Об’єкт дослідження – лабораторні щурі.• Предмет дослідження – вода, насичена
пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis, що випоювалась щурам; клінічні, гематологічні та біохімічні показники сироватки крові.
• Гіпотеза: для поліпшення якості та безпеки води можна використовувати фільтри для води, збагачені пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis, що позитивно впливає на здоров’я тварн.
![Page 4: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/4.jpg)
Мета роботи – дослідити вплив випоювання питної води з використанням пробіотичних бактерій В.subtilis та В.licheniformis на організм щурів.Для досягнення поставленої мети визначено такі завдання:
• провести аналіз проби води, що використовується в дослідженнях;
• дослідити зміни у воді, збагаченій іммобілізованими на фільтрі (пісок крупнокристалічний стерильний) живими бактеріями Вacillus subtilis УКМ В-5007 та Вacillus licheniformis УКМ-5514;
• провести клінічні дослідження організму щурів і гематологічні та біохімічні показники крові;
• вивчити патологоанатомічні та гістологічні зміни внутрішніх органів щурів;
• зробити висновки та пропозиції виробництву.
![Page 5: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/5.jpg)
• Було сформовано одну дослідну та одну контрольну групи білих нелінійних лабораторних щурів. В кожній групі було по 5-ть щурів самців, трьохмісячного віку, що мали практично однакову живу масу тіла.
• Тварини знаходилися на загальноприйнятому раціоні віварію в однакових умовах і відрізнялись лише за якістю питної води, яку споживали з крапельної напувалки.
![Page 6: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/6.jpg)
Імунологічні та біологічні властивості. Виявляє високу антагоністичну активність по відношенню до патогенних та умовно-патогенних мікроорганізмів і не впливає на представників нормальної мікробіоти. Синтезує комплекс ферментів, які стимулюють і регулюють травлення та сприяють кращому засвоєнню їжі.
Основою для досліду була вода із живими мікробними клітинами В.subtilis УКМ В-5007 та В.licheniformis УКМ-5514, що містить в собі препарат Біоспорин–Біофарма
![Page 7: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/7.jpg)
Фільтр змонтовано в Інституті колоїдної хімії та хімії води ім. А. В. Думанського.Фільтр з іммобілізованими живими бактеріями.1) фільтр-колонка; 2) штатив; 3) сифон; 4) кран; 5) вхідна вода; 6) вихідна вода; 7) вихід І; 8) вихід ІІ.
Впродовж 3-х місяців щурів контрольної групи напували водою, взятою зі свердловини, що знаходиться на території НУБіП України по вулиці Героїв Оборони. А щурів дослідної групи напували цією ж водою, але пропущеною через фільтр з іммобілізованими живими бактеріями В.subtilis УКМ В-5007 та В.licheniformis УКМ-5514. В результаті вода, пропущена через цей фільтр, збагачувалась цими живими організмами.
![Page 8: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/8.jpg)
Результати аналізу проб водиВ Інституті колоїдної хімії та хімії води ім. А. В. Думанського було проведено аналіз проб води, що використовується в дослідженнях.
Найменування показників
Результати вимірювань
Вимоги НД,не більше
Позначення НД на метод випробувань
Узагальнені показники рН 7,4 6,0–9,0 [1] Мутність, мг/дм3 0,3 1,5 ГОСТ 3351
Сухий залишок, мг/дм3 352 100–1000 ГОСТ 18164
Жорсткість, мг-екв/дм3 5,3 1,5–7,0 ГОСТ 4151 Лужність, мг-екв/дм3 6,0 0,5–6,5 [1] Загальний органічний вуглець, мг/дм3 1,7 3,0 НТЦ ВВ МВВ 144-
36-98
Неорганічні показники Залізо (заг.), мг/дм3 0,15 0,3 ГОСТ 4011Бікарбонати, мг/дм3 324 400 [1]
Кальцій, мг/дм3 82 130 [1] Магній, мг/дм3 9,0 10–80 [1]
Нітрати, мг/дм3 0,4 45 ГОСТ 18826
Нітрити, мг/дм3 0,02 3 ГОСТ 4192 Сульфати, мг/дм3 11,0 500 ГОСТ 4389 Хлориди, мг/дм3 5,2 350 ГОСТ 4245
![Page 9: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/9.jpg)
Результати мікробіологічних дослідженьДоказом того, що вода, яка пропущена через фільтр з іммобілізованими
живими бактеріями В.subtilis та В.licheniformis, збагачувалась ними, свідчать результати посівів на МПА вхідної та вихідної води за методом Дригальського.
На першому рисунку показано значний ріст різноманітної мікробіоти, що містить у собі вхідна вода, яка була взята у стерильних умовах зі свердловини.
При посіві вихідної води (рисунок другий), що збагачена живими бактеріями, спостерігали рясний ріст гладеньких колоній, які властиві В.subtilis УКМ В-5007 та В.licheniformis УКМ-5514. Це свідчить про те, що дані пробіотичні бактерії витісняють мікробіоту, що містить вода зі свердловини. Проте, потрапивши в тваринний організм, вони не пригнічують корисну мікробіоту.
За добу щур випивав 30–35 мл води, що містила в собі 2×105 пробіотичних бактерій В.subtilis та В.licheniformis.
![Page 10: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/10.jpg)
Клінічні дослідження лабораторних тваринВпродовж досліду проводилися клінічні дослідження
контрольної та дослідної груп щурів. При визначені габітусу тварини мали жвавий темперамент, середню вгодованість, положення тіла у просторі природнє. Апетит добрий, напування вільне досхочу. У дослідних щурів на кінець досліду (через 3 місяці) шерсть густа, добре прилягає до тіла, блискуча, міцно зафіксована в шкірі. У контрольних – дещо тьмяна. Цілісність шкіри не порушена, еластична, колір блідо-рожевий, має запах, властивий даному виду тварин. Кігті тверді, недеформовані.
Слизова оболонка ротової та носової порожнин блискуча, блідо-рожевого кольору, секреція збережена. Дихання не утруднене, серцевий поштовх помірної сили, частий. Акт дефекації регулярний, калові маси сформовані, темно-коричневі. Акт сечовиділення не утруднений.
Радикальних змін зовнішнього вигляду та поведінки не виявляли. Фізіологічні показники були в межах норми: температура тіла – 37–38 °С, частота дихання – 85–90 дихальних рухів/хв, пульс – 300–500 уд/хв. Проте у щурів дослідної групи дещо покращився апетит та стан шерсті, вона стала густішою та більш блискучою.
![Page 11: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/11.jpg)
Результати змін живої маси тіла щурів
Дані, наведені в таблиці 2, свідчать про те, що для досліду обрано щурів практично з ідентичною масою тіла. Через 2 місяці випоювання води із пробіотиками щурі дослідної групи мали на 24,2 г більшу масу тіла, порівняно з контролем. Через 3 місяці маса тіла щурів дослідної групи підвищилася ще на 10,5 г по відношенню до контролю. Отже, можна зробити висновок, що вода із пробіотичними бактеріями B.subtilis та B.licheniformis покращує засвоєння корму та обмін білків, жирів і вуглеводів.
Показники Вік Групи щурів контрольна дослідна
Жива маса тіла на початку досліду, г 3 міс 153,5±2,5 153,9±2,4
Жива маса тіла на другий місяць досліду, г 5 міс 240,6±1,4 265,2±2,4
Жива маса тіла в кінці досліду, г 6 міс 284,3±1,5 319,4±2,5
![Page 12: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/12.jpg)
Гематологічні та біохімічні показники сироватки крові щурів
Гематологічні та біохімічні показники сироватки крові щурів, (M ± m)Показники Одиниці
вимірю–вання
Результати вимірювань Норма контрольна група
дослідна група
Гематологічні показники Еритроцити 1012/л 7,0±1,0 7,0±1,0 6–9 Лейкоцити 109/л 18,5±0,1 13,3±0,1 4–17 Гемоглобін Г/л 111,0±1,8 136,0±1,4 110–170 Гематокрит % 38,0±2,0 40,0±2,5 38–50 Тромбоцити 109/л 1220,0±5,8 1200,0±5,5 800–1400 Біохімічні показники Холестерин Ммоль/л 2,5±0,05 2,0±0,05 0,51–2,82 Загальний білок Г/л 58,4±1,8 67,6±2,5 50–80 АЛТ Од/л 63,0±1,5 64,0±2,0 10–80 АСТ Од/л 56,0±2,0 55,0±2,0 20–143 Глюкоза Ммоль/л 5,5±0,4 5,5±0,2 3,89–12,21 Сечовина Ммоль/л 8,1±0,5 8,4±1,0 4,28–11,48 Лужна фосфатаза Од/л 270,0±3,5 325,0±3,0 70–450 Тригліцериди Ммоль/л 2,0±0,02 2,1±0,04 0,56–2,23 ЛДГ Од/л 307,0±3,0 315,0±2,0 50–700 Креатинкіназа-МВ Од/л 493,0±2,5 500,0±2,5 50–650
![Page 13: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/13.jpg)
Патологоанатомічні та гістологічні дослідження
В кінці третього місяця провели патологоанатомічний розтин одного
щура з кожної групи, при якому очевидної різниці щодо патологоанатомічних змін внутрішніх органів у обох груп не виявлено. Тому було проведено гістологічні дослідження печінки та нирок.
В полі зору мікроскопа на зрізах печінки у щурів контрольної та дослідної груп виявлена типова будова печінкових часточок: гепатоцити округлої форми з еозинофільною цитоплазмою і досить великим базофільним ядром. В центрі кожної часточки – центральна вена, від якої радіально розходяться печінкові балки, між якими знаходяться синусоїдні капіляри. Між часточками знаходиться сполучна тканина строми печінки. Судини в міру кровонаповненні.
Печінка щура контрольної групи. Печінка щура дослідної групи Фарбування гематоксилін-еозином. х 80 Фарбування гематоксилін-еозином. х 80
![Page 14: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/14.jpg)
Гістологічними дослідженнями нирок щурів обох груп не виявлено будь-яких патологічних змін. Кожна нирка складається з величезної кількості нефронів. ниркові клубочки і канальці незмінені, що свідчить про нормальне функціонування нирок щурів обох груп.
Нирка щура контрольної групи. Нирка щура дослідної групи. Фарбування гематоксилін-еозином. х 80 Фарбування гематоксилін-еозином. х 80
![Page 15: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/15.jpg)
Заключне дослідження води
По закінченні досліджень (через 3 міс.) нами повторно було проведено аналіз води щодо узагальнених показників (рН, мутність, сухий залишок, жорсткість, лужність, загальний органічний вуглець), неорганічних (залізо, бікарбонати, кальцій, магній, нітрати, нітрити, сульфати, хлориди) і мікробіологічних показників. Усі показники практично не відрізнялися від отриманих нами на початку досліджень.
Мікробіологічні дослідження води, збагаченої пробіотичними бактеріями, виявили суцільний ріст сіро-жовтих, гладеньких колоній із сильно порізаними краями, які властиві В.subtilis та В.licheniformis. Це свідчить про збільшення кількості пробіотичних бактерій у воді, що підтверджує підвищення їх чисельності на фільтрі за умови безперервного його використання. Отже, у воді міститься органічний вуглець, що і є основною поживною речовиною для пробіотичних мікроорганізмів. Це абсолютно економічно вигідно для застосування пробіотиків у великих масштабах.
![Page 16: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/16.jpg)
ВИСНОВКИ
• 1. Вода зі свердловини, що знаходиться на території НУБіП України, відповідає вимогам ДСанПіН №383 «Вода питна. Гігієнічні вимоги до якості води централізованого господарсько-питного водопостачання» та ДСТУ 4808:2007 «Джерела централізованого водопостачання».
• 2. Мікробіологічними дослідженнями води, збагаченої пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis, виявлено підвищений вміст пробіотичних мікроорганізмів, що пригнічують іншу мікробіоту води.
• 3. Клінічними дослідженнями виявлено, що у щурів дослідної групи вже через 1 місяць вживання води з пробіотичними бактеріями дещо покращився апетит та стан шерсті. Вона стала густішою та більш блискучою, порівняно з контролем.
• 4. Щурі дослідної групи через 2 місяці випоювання води із пробіотиками мали на 24,2 г більшу масу тіла, порівняно з контролем. Через 3 місяці маса тіла щурів дослідної групи підвищилася ще на 10,5 г по відношенню до контролю.
• 5. Випоювання щурам води з пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis позитивно впливає на гематологічні та біохімічні показники сироватки крові. Так, у дослідних груп щурів нормалізувався дещо підвищений вміст лейкоцитів у крові, а також підвищився вміст гемоглобіну, загального білку і лужної фосфатази.
• 6. Патологоанатомічними та гістологічними дослідженнями внутрішніх органів не виявлено будь-яких відхилень як у дослідних, так і контрольних щурів.
• 7. Встановлено, що безперервне використання фільтру, збагаченого пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis забезпечує не тільки належну високу якість води, але й наявність у ній значної кількості пробіотичних бактерій, кількість яких збільшується.
![Page 17: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/17.jpg)
ПРОПОЗИЦІЇ ВИРОБНИЦТВУ
З метою поліпшення якості та безпеки води пропонуємо використовувати фільтри для води, збагачені пробіотичними бактеріями В.subtilis та В.licheniformis.
![Page 18: Доповідач: Болгова О.С. Науковий керівник: д.вет.н., професор Якубчак О.М. 2012 р.](https://reader036.fdocument.pub/reader036/viewer/2022062321/56813783550346895d9f1bce/html5/thumbnails/18.jpg)
ДЯКУЮ ЗА УВАГУ