榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究 · PDF...

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收稿日期2009-11-15 基金项目广州市粤港关键领域重点突破项目2006Z1-E6021作者简介吴敏芝1979-冤袁硕士助理研究员E-mail: wmzzs@163. com 通讯作者吴曙光1953-冤袁博士博士生导师教授研究方向疫肿瘤药理学电话020-61648530E-mail: [email protected]进军1963-冤袁 博士副教授研究方向抗炎免疫药理学电话020-61648535E-mail: [email protected] 榴莲壳提取物止咳镇痛及抗菌作用研究 吴敏芝 1,2 谢果 2,3 李泳贤 2 廖燕峰 2 朱瑞 2 林仁岸 2 栗原博 3 吴曙光 1 饶进军 1 1 南方医科大学药学院广 东 广州 5105152 电子科技大学中山学院广东 中山 5284023 暨南大学中药及天然药物研究所广东 广州 510632摘要目的 探讨榴莲壳提取物DSE止咳镇痛及抗炎的作用方法 分别采用氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽模型来评 DSE 的止咳作用采用醋酸致小鼠扭体反应及热板法评价 DSE 的镇痛作用采用最小抑菌浓度MIC和抑菌圈法 来评价 DSE 的抗菌作用结果 与空白对照组相比300 900 mg kg -1 DSE 对氨水和二氧化硫所致的小鼠咳嗽潜伏 期及咳嗽次数都有明显的抑制作用DSE 明显抑制醋酸所致小鼠的扭体反应的潜伏期及扭体次数但不影响热板法所 致的疼痛阀值DSE 对金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌及大肠埃希杆菌等细菌无抑制作用对绿脓假单胞菌有较弱的 抑制作用结论 DSE 有明显的止咳作用且对化学刺激所致的疼痛抑制作用优于物理性所致的疼痛抑制作用DSE 对绿脓假单胞菌有一定抑菌作用关键词榴莲止咳镇痛抗菌 中图分类号R282.71R285.5R96.5.1R971.5 文献标识码A 文章编号1673-4254(2010)04-0793-04 Cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extracts: a study in mice WU Min-zhi 1, 2 , XIE Guo 2, 3 , LI Yong-xian 2 , LIAO Yan-feng 2 , ZHU Rui 2 , LIN Ren-an 2 , SU Yuan-bo 3 , WU Shu-guang 1 , RAO Jin-jun 1 1 School of Pharmaceutical Sciences, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2 Zhongshan Institutes of University of Electronic Science and Technology, Zhongshan 528402, China; 3 Institute of Traditional Chinese Medicine and Natural Products, Jinan University, Guangzhou 510632, China Abstract: Objective To investigate the cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extract (DSE) in relieving cough and its analgesic and antibiotic effects. Methods The effect of DSE in relieving cough was assessed in mice challenged with ammonia and SO 2 to induce coughing. The analgesic and antibiotic effects of DSE in mice were evaluated by hot plate test and twisting reaction induced by acetic acid, and by minimal inhibitory concentration (MIC) and disc-agar diffusion tests, respectively. Results Compared with the control group, the mice treated with 300 and 900 mg/kg DSE showed significantly prolonged latency with decreased number of coughing induced by ammonia and SO 2 , and the effect was dose-dependent. DSE markedly prolonged the latency and decreased the twisting number of the mice induced by acetic acid without affecting the pain threshold in hot plate test. DSE produced no significant inhibitory effects against Staphylococcus aureus , Staphylococcus epidermidis, or E. coli, and showed a week inhibition against Bacillus aeruginosus . Conclusion DSE shows obvious effect in relieving cough and produces better analgesic effect against chemical factor-induced pain than against physical agent-induced pain sensation. DSE has a moderate inhibitory effect against Bacillus aeruginosus . Key words: Durio zibethinus Murr; coughing; analgesia; antibiosis 榴莲 Durio zibethinus Murr又名韶子 麝香猫 是木棉科榴莲属长绿乔木榴莲的果实是风味奇 异的热带大型鲜果热带果王之美誉 1目前国 内外对榴莲的研究集中在农业食品等方面 2-3近年 人们研究发现榴莲不同部位有特有的营养和化学 成分 4-5榴莲味甘温无毒可入药主治暴痢和心腹 冷气现代研究也开始重视榴莲及榴莲壳的医药用途 6-9虽榴莲壳早己在民间广泛用于滋阴降火但有关 榴莲壳提取物DSE止咳镇痛和抗菌的实验研究还 未见任何报道故本文从止咳镇痛和抗菌角度对 DSE 的功效进行研究为其开发利用提供科学依据1 材料和方法 1.1 实验动物 SPF Kungming 种老鼠雄性7 周龄购自广 东省医学实验动物中心 许可证号 SCXK 2003-0002粤监证字 2006A018饲养温度232冤益袁 照明时间 12 h/d7:00~19:00冤曰 饲养 1 周后进行药理 活性实验2010;30(4) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 793

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Page 1: 榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究 · PDF file疫肿瘤药理学袁电话院020-61648530袁E-mail: ... 东广州510515曰2 电子科技大学中山学院袁广东中山528402

收稿日期院2009-11-15

基金项目院广州市粤港关键领域重点突破项目渊2006Z1-E6021冤

作者简介院吴敏芝渊1979-冤袁女袁硕士袁助理研究员袁E-mail: wmzzs@163.

com

通讯作者院吴曙光渊1953-冤袁男袁博士袁博士生导师袁教授袁研究方向院免

疫肿瘤药理学袁电话院020-61648530袁E-mail: [email protected]曰饶

进军渊1963-冤袁男袁博士袁副教授袁研究方向院抗炎免疫药理学袁电话院

020-61648535袁E-mail: [email protected]

榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究

吴敏芝 1,2袁谢 果 2,3袁李泳贤 2袁廖燕峰 2袁朱 瑞 2袁林仁岸 2袁栗原博 3袁吴曙光 1袁饶进军 1渊1南方医科大学药学院袁广

东 广州 510515曰2电子科技大学中山学院袁广东 中山 528402曰3暨南大学中药及天然药物研究所袁广东 广州

510632冤

摘要院目的探讨榴莲壳提取物渊DSE冤止咳尧镇痛及抗炎的作用遥 方法分别采用氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽模型来评

价 DSE的止咳作用曰采用醋酸致小鼠扭体反应及热板法评价 DSE的镇痛作用曰采用最小抑菌浓度渊MIC冤和抑菌圈法

来评价 DSE的抗菌作用遥 结果与空白对照组相比袁300及 900 mg窑kg-1 DSE对氨水和二氧化硫所致的小鼠咳嗽潜伏

期及咳嗽次数都有明显的抑制作用曰DSE明显抑制醋酸所致小鼠的扭体反应的潜伏期及扭体次数袁但不影响热板法所

致的疼痛阀值曰DSE对金黄色葡萄球菌尧表皮葡萄球菌及大肠埃希杆菌等细菌无抑制作用袁对绿脓假单胞菌有较弱的

抑制作用遥 结论 DSE有明显的止咳作用袁 且对化学刺激所致的疼痛抑制作用优于物理性所致的疼痛抑制作用曰DSE

对绿脓假单胞菌有一定抑菌作用遥

关键词院榴莲曰止咳曰镇痛曰抗菌

中图分类号院R282.71曰R285.5曰R96.5.1曰R971.5 文献标识码院A 文章编号院1673-4254(2010)04-0793-04

Cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extracts: a study in miceWU Min-zhi1, 2, XIE Guo2, 3, LI Yong-xian2, LIAO Yan-feng2, ZHU Rui2, LIN Ren-an2, SU Yuan-bo3, WU Shu-guang1, RAO Jin-jun1

1School of Pharmaceutical Sciences, Southern Medical University, Guangzhou 510515, China; 2Zhongshan Institutes of University of

Electronic Science and Technology, Zhongshan 528402, China; 3Institute of Traditional Chinese Medicine and Natural Products, Jinan

University, Guangzhou 510632, China

Abstract: Objective To investigate the cough-relieving, analgesic and antibiotic effects of durian shell extract (DSE) in

relieving cough and its analgesic and antibiotic effects. Methods The effect of DSE in relieving cough was assessed in mice

challenged with ammonia and SO2 to induce coughing. The analgesic and antibiotic effects of DSE in mice were evaluated by

hot plate test and twisting reaction induced by acetic acid, and by minimal inhibitory concentration (MIC) and disc-agar

diffusion tests, respectively. Results Compared with the control group, the mice treated with 300 and 900 mg/kg DSE showed

significantly prolonged latency with decreased number of coughing induced by ammonia and SO2, and the effect was

dose-dependent. DSE markedly prolonged the latency and decreased the twisting number of the mice induced by acetic acid

without affecting the pain threshold in hot plate test. DSE produced no significant inhibitory effects against Staphylococcus

aureus, Staphylococcus epidermidis, or E. coli, and showed a week inhibition against Bacillus aeruginosus. Conclusion DSE

shows obvious effect in relieving cough and produces better analgesic effect against chemical factor-induced pain than against

physical agent-induced pain sensation. DSE has a moderate inhibitory effect against Bacillus aeruginosus.

Key words: Durio zibethinus Murr; coughing; analgesia; antibiosis

榴莲渊Durio zibethinus Murr冤又名韶子袁麝香猫

果袁是木棉科榴莲属长绿乔木榴莲的果实袁是风味奇

异的热带大型鲜果袁有野热带果王冶之美誉咱1暂遥 目前国

内外对榴莲的研究集中在农业尧食品等方面咱2-3暂遥 近年

来袁人们研究发现榴莲不同部位有特有的营养和化学

成分咱4-5暂遥 榴莲味甘温尧无毒袁可入药袁主治暴痢和心腹

冷气袁现代研究也开始重视榴莲及榴莲壳的医药用途咱6-9暂遥 虽榴莲壳早己在民间广泛用于滋阴降火袁但有关

榴莲壳提取物渊DSE冤止咳尧镇痛和抗菌的实验研究还

未见任何报道袁 故本文从止咳尧 镇痛和抗菌角度对

DSE的功效进行研究袁为其开发利用提供科学依据遥

1 材料和方法

1.1 实验动物

SPF级 Kungming种老鼠袁雄性袁7周龄袁购自广

东省医学实验动物中心袁 许可证号 SCXK 渊粤冤

2003-0002袁粤监证字 2006A018遥 饲养温度渊23依2冤益袁

照明时间 12 h/d渊7:00~19:00冤曰饲养 1周后进行药理

活性实验遥

2010;30(4) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 793窑 窑

Page 2: 榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究 · PDF file疫肿瘤药理学袁电话院020-61648530袁E-mail: ... 东广州510515曰2 电子科技大学中山学院袁广东中山528402

1.2 药品与菌种

榴莲壳为泰国金枕头榴莲的白瓤内皮曰 可待因尧

阿司匹林为 Sigma公司产品曰其他试剂均为国产分析

纯遥 菌株院 金黄色葡萄球菌 渊Staphylococcus aureus袁

ATCC 29253冤袁 表 皮 葡 萄 球 菌 渊Staphylococcus

epidermidis袁ATCC12228冤袁 绿 脓 杆 菌 渊Bacillus

aeruginosus袁ATCC 27853冤袁 大 肠 杆 菌 渊E.coli袁

ATCC25922冤袁由暨南大学华侨医院提供遥 培养基等

为由广东环凯微生物科技公司产品遥

1.3 仪器与设备

PC262专用秒表 渊深圳市惠波工贸有限公司冤尧

MK3型酶标仪渊芬兰 Labsystem 公司冤尧绝对原点编

码型 Digimatic卡尺渊日本三丰公司冤尧BS210S电子分

析天平渊德国 Sartorius公司冤尧MODULYOD-230冷冻

干燥机渊美国 Thermo Electron Corperation冤尧3-18K型

台式高速冷冻离心机 渊Sigma公司冤尧N-1000型旋转

蒸发器渊日本东京理化公司冤尧YLS-6A型智能热板仪

渊山东省医学科学院冤尧 直流超净工作台 渊新加坡

ESCO公司 冤尧SHA-C型恒温振荡器 渊江苏金坛市荣

华仪器制造公司冤尧WGZ-2型细菌浊度仪 渊深圳三诺

仪器公司冤尧AMA240全自动高压灭菌锅渊英国 Astell

Scientific公司冤遥

1.4 DSE的制备

准确称量烘干至恒重的榴莲白瓤内皮 75 g袁加

20倍双蒸水袁在 80 益恒温水浴下提取 2 h袁过滤袁滤

饼同样条件提取 2次袁离心取上提取液上清遥 提取液

用旋转蒸发器浓缩袁用 95%乙醇沉淀多糖袁离心取上

清再浓缩袁用冷冻干燥机干燥袁烘干提取物储存于 4

益冰箱备用遥

1.5 DSE镇咳作用的检测

1.5.1 对氨水致小鼠咳嗽反应的作用 实验动物 50

只随机分为 5组袁每组 10只袁即正常对照组渊蒸馏水

20 mg窑kg-1冤尧阳性药对照组渊可待因 20 mg窑kg-1冤尧DSE

低剂量组 渊100 mg窑kg-1冤尧DSE 中剂量组 渊300 mg窑

kg-1冤尧DSE高剂量组渊900 mg窑kg-1冤遥 每天灌胃给药 1

次袁连续给药 3 d袁于末次给药 1 h后袁将小鼠逐只置

于 5 L钟罩内袁恒压喷雾浓氨水袁观察小鼠咳嗽的潜

伏期渊从开始喷雾到引起小鼠第 1次咳嗽的时间冤袁并

记录 2 min内小鼠咳嗽次数渊典型咳嗽动作院腹肌收

缩或缩胸袁同时张大口袁有咳声冤咱10暂遥

1.5.2 DSE对二氧化硫致小鼠咳嗽反应的作用 实验

动物 50只随机分为 5组袁每组 10只袁即正常对照组

渊蒸馏水 20 mg窑kg-1)尧阳性药对照组渊可待因 20 mg窑

kg-1冤尧DSE 低剂量组 渊100 mg窑kg-1冤尧DSE 中剂量组

渊300 mg窑kg-1冤尧DSE高剂量组渊900 mg窑kg-1冤遥 每天灌

胃给药 1次袁 连续给药 3 d袁 于末次给药 1 h后袁把

50%硫酸 5 ml滴加至盛有 0.5 g无水亚硫酸钠的蒸

发皿上袁并立即将 500 ml玻璃烧杯倒扣在蒸发皿上袁

使之充满恒定浓度渊1颐50000冤的 SO2气体袁然后迅速

将小鼠放入倒扣烧杯内袁观察小鼠发生咳嗽反应的情

况袁记录咳嗽潜伏期和开始咳嗽后 2 min内的咳嗽次

数咱11暂遥

1.6 DSE镇痛作用的检测

1.6.1 DSE对醋酸致小鼠扭体反应的作用 实验动物

50只随机分为 5组袁每组 10只袁即正常对照组渊蒸馏

水 20 mg窑kg-1冤尧 阳性药对照组 渊阿司匹林 200 mg窑

kg-1冤尧DSE 低剂量组 渊100 mg窑kg-1冤尧DSE 中剂量组

渊300 mg窑kg-1冤尧DSE高剂量组渊900 mg窑kg-1冤遥 每天灌

胃给药 1次袁连续给药 3 d袁于末次给药 1 h后袁各鼠

分别腹腔注射 0.7%醋酸溶液 0.2 ml/只袁观察小鼠扭

体的潜伏期渊从开始注射到引起小鼠第 1次扭体的时

间冤袁并记录 15 min内小鼠扭体次数渊腹部内凹袁伸展

后肢袁臀部抬高冤袁并计算镇痛百分率咱12暂遥

1.6.2 DSE对热板法致小鼠疼痛反应的作用 实验前

将雌性小鼠置于智能热板仪渊55.0依0.5冤 益进行筛选袁

以小鼠舔后足反应的潜伏期为痛阈指标袁选取反应潜

伏期在 10~20 s内的合格小鼠 50只随机分为 5组袁

每组 10只袁即正常对照组渊蒸馏水 20 mg窑kg-1冤尧阳性

药对照组 渊阿司匹林 200 mg窑kg-1冤尧DSE 低剂量组

渊100 mg窑kg-1冤尧DSE中剂量组渊300 mg窑kg-1冤尧DSE高

剂量组渊900 mg窑kg-1冤遥 灌胃给药袁1次 /d袁连续 3 d袁分

别测定给药前及末次给药后 30尧60尧90 min小鼠的第

一次添后足的时间袁此值为痛阈值遥 如小鼠置于智能

热板仪 60 s仍无反应袁则将小鼠取出以免烫伤袁其痛

阈值以 60 s计算遥 比较给药后不同时间平均痛阈与

基础痛阈的差异袁判断是否有镇痛作用咱13暂遥

1.7 DSE对金黄色葡萄球菌尧表皮葡萄球菌尧大肠埃

希杆菌和绿脓假单胞菌的抑菌作用

1.7.1 最低抑菌浓度渊MIC冤测定渊倍半稀释法冤 渊1冤

菌液制备院将保存的金黄色葡萄球菌尧表皮葡萄球菌尧

大肠埃希杆菌和绿脓假单胞菌菌种接种于M-H琼脂

板培养基袁37 益培养 24 h袁平板分离单个菌落接种于

含M-H肉汤培养基内袁37益培养 6~8 h遥 校正菌液浓

度袁使其相当于 0.5麦氏比浊度袁再用 M-H液体培养

基按 1颐20稀释后备用袁稀释后的菌液在 15 min内接

种遥 渊2冤MIC的测定 ①取无菌小试管 12支排于试管

架袁 于第 1管加入液体培养基 1.9 ml袁2~12管各加 1

ml遥②将 0.1 ml DSE加入第 1管中袁混合后吸出 1 ml

加入第 2管中袁用同法依次 2倍稀释至第 12管袁从第

12管吸 1 ml加入到第 13管袁 则各管的浓度依次为

128尧64尧32尧16尧8尧4尧2尧1尧0.5尧0.25尧0.125和 0.06 mg/ml遥

③将 1~12管中加入已校正浓度的菌液 0.1 ml袁混匀袁

南方医科大学学报(J South Med Univ) 第 30卷794窑 窑

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*P<0.05, **P<0.01 vs distilled water group;△P<0.05 vs codeine

group

表 1 DSE对氨水致小鼠致咳反应的影响

Tab.1 Effects of DSE on coughing induced by

ammonia in mice (Mean依SD, n=10)

Group Dose (mg窑kg-1) tlatency(s) Cough number (n)

Distilled water 20 55.7依10.6 13.4依2.9

Codeine 20 67.1依16.3* 9.6依3.7*

DSE

100 52.7依13.4△ 9.7依3.5*

300 68.9依14.5* 9.8依3.4*

900 83.1依22.1**△ 7.8依4.0**

*P<0.05, **P<0.01 vs distilled water group; △P<0.05, △△P<0.01

vs codeine group

表 2 DSE对二氧化硫致小鼠致咳反应的影响

Tab.2 Effects of DSE on coughing induced by SO2 in

mice (Mean依SD, n=10)

GroupDose

(mg窑kg-1)tlatency(s) Cough number (n)

Distilled water 20 17.85依5.71 15.3依6.7

Codeine 20 48.57依16.66** 5.8依3.5***

DSE

100 18.35依5.46△△ 13.9依6.1△△

300 22.90依6.01*△△ 10.1依4.0*△△

900 29.65依10.09**△ 9.1依3.5*△

*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 vs distilled water group; △△

△P<0.001 vs aspirin group

表 3 DSE对醋酸致小鼠扭体反应的影响

Tab.3 Effects of DSE on twisting reaction induced by

acetic acid in mice (Mean依SD, n=10)

GroupDose

(mg窑kg-1)tlatency (s)

Twistingnumber (n)

Analgesiarate (%)

Distilledwater

20 212.3依32.5 36.9依10.33 0.00

Aspirin 200 850.2依123.1*** 2.2依1.88*** 94.01***

DSE

100 220.5依36.6△△△ 38.0依12.9△△△ -3.02△△△

300 250.7依45.8*△△△ 30.9依10.8△△△ 16.81△△△

900 363.7依117.0**△△△ 24.1依8.5**△△△ 34.73**△△△

使各管中的菌液浓度约为 107 cfu/ml遥 ④取一支试管

只加入液体培养基 1.0 ml袁作为空白对照曰取一支试

管加入液体培养基 1.0 ml和菌液 0.1 ml袁作为菌液对

照遥 ⑤混匀后试管加硅胶塞塞好袁恒温振荡器中放置

37 益恒温培养 18~20 h袁观察结果袁以无细菌生长的

最低浓度为MIC咱14暂遥

1.7.2 抑菌圈的测定 用打孔器将滤纸制成直径为 6

mm的圆片袁放入干燥洁净的试管内袁经 121 益灭菌

30 min袁浸入相应浓度的 DSE溶液中袁1 h后取出袁无

菌条件下晾干备用遥将上述 4种供试菌悬液各取 0.1

ml涂平板袁制成含菌平板遥用无菌镊子夹取已制备好

的滤纸片袁放到上述含菌平皿上袁每皿 3片袁以乙醇溶

剂作为阴性对照袁每皿 3片遥每个滤纸间距离相等袁每

种处理重复 3次遥 经 37益尧24 h培养后袁用十字交叉

法测量抑菌圈直径袁重复测量 3次袁取平均值咱15暂遥

1.8 统计学处理

实验数据以表示袁采用重复测量方差分析袁单因

素方差分析袁组间多重比较方差齐时用 LSD法袁不齐

时用 Games-Howell 法遥 P<0.05被认为有统计学意

义袁所有数据均采用 SPSS 13.0软件进行处理遥

2 结果

2.1 DSE对氨水致小鼠咳嗽反应的作用

2.1.1 DSE对氨雾致小鼠咳嗽反应的作用 与空白对

照组相比袁DSE在 300~900 mg窑kg-1剂量范围内延长

氨水致小鼠咳嗽反应的潜伏期袁 其中 900 mg窑kg-1

DSE 组可明显延长氨水致小鼠咳嗽反应的潜伏期

渊P<0.01冤袁且延长作用明显强于 20 mg窑kg-1可待因组

渊P<0.05冤袁见表 1遥 DSE在 100~900 mg窑kg-1剂量范围

内明显减少氨水所致的小鼠咳嗽数袁并且呈明显的剂

量依赖性袁见表 1遥

2.1.2 DSE对二氧化硫致小鼠咳嗽反应的作用 与空

白对照组比较袁300 mg窑kg-1 DSE组 渊P<0.05冤 与 900

mg窑kg-1 DSE组有统计学差异 渊P<0.01冤袁DSE明显延

长二氧化硫所致小鼠咳嗽的潜伏期袁并且呈明显的剂

量依赖性袁 见表 2曰 与空白对照组比较袁300 mg窑kg-1

DSE组渊P<0.05冤与 900 mg窑kg-1 DSE组渊P<0.01冤有统

计学差异袁DSE明显减少二氧化硫所致小鼠咳嗽数袁

并且呈明显的剂量依赖性袁见表 2遥

2.2 DSE镇痛作用

2.2.1 DSE对醋酸致小鼠扭体反应的作用 与空白对

照组相比袁DSE在 300~900 mg窑kg-1剂量范围内明显

延长醋酸所致小鼠扭体反应的潜伏期袁其中 900 mg窑

kg-1 DSE组能明显延长醋酸所致小鼠扭体反应的潜

伏期并明显减少小鼠扭体反应的次数渊P<0.01冤袁见表

3遥

2.2.2 DSE对热板法致小鼠疼痛反应的作用 与空白

对照组相比袁900 mg窑kg-1 DSE给药 60尧90 min 后明

显延长小鼠热板疼痛反应时间 渊P<0.05冤袁 见表 4曰

300尧900 mg窑kg-1 DSE给药 90 min后明显延长小鼠

热板疼痛反应时间渊P<0.05冤袁见表 4遥

2.3 DSE对金黄色葡萄球菌尧表皮葡萄球菌尧大肠埃

希杆菌和绿脓假单胞菌的抑菌作用

2.3.1 DSE对 4种菌株的 MIC DSE对大肠埃希杆

菌在实验的浓度范围内没有观察到抑制作用袁对于金

黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌两种细菌有较弱的抑

制作用袁其 MICs值分别为 32 mg/L和 64 mg/L曰DSE

吴敏芝,等.榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究第 4期 795窑 窑

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*P<0.05, **P<0.01, ***P<0.001 vs distilled water group; △P<0.05, △△P<0.01, △△△P<0.001 vs aspirin group

表 4 DSE对小鼠热板法痛阈时间的影响

Tab.4 Effects of DSE on analgesia time in hot plate test (Mean依SD, n=10)

Group Dose (mg窑kg-1) Normal analgesia time (s)Analgesia time after administration (s)

30 min 60 min 90 min

Distilled water 20 16.06依1.67 16.02依2.42 16.13依2.53 16.62依2.31

Aspirin 200 15.78依1.97 20.49依3.97** 22.33依3.26*** 24.37依372***

DSE

100 15.73依2.17 16.52依3.08△ 16.82依2.89△△△ 17.46依2.12△△△

300 15.82依1.42 16.40依2.98△△ 17.93依2.28△△ 18.59依2.26*△△△

900 16.01依2.02 16.26依3.13△△ 18.82依3.15*△ 20.14依3.94*△

表 5 DSE对抑菌圈的影响

Tab.5 Effects of DSE on disc-agar diffusion (Mean依

SD, n=9)

Strain Serial number Colony Diameter (mm) Result

Staphylococcusaureus

ATCC 29253 6.15依0.34 inferior

Staphylococcusepidermidis

ATCC 12228 6.88依0.31 inferior

Bacillusaeruginosus

ATCC 27853 8.12依0.37 intermediate

E. coli ATCC 25922 5.79依0.22 resistant

对绿脓假单胞菌有较强的抑制作用袁 其MIC值分别

为 2 mg/L遥

2.3.2 DSE对 4种菌株抑菌圈的影响 如表 5所示袁

DSE对金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌两种细菌低

度的敏感作用袁 其抑菌圈直径分别只有 6.15 mm和

6.88 mm曰对绿脓假单胞菌中度敏感袁其抑菌圈直径

为 8.12 mm曰对大肠埃希杆菌不敏感袁其抑菌圈直径

为 5.79 mm遥

3 讨论

雾氨引起小鼠咳嗽的实验结果表明袁DSE不仅

能有效延长咳嗽的潜伏期袁而且可以显著降低小鼠的

咳嗽量袁具有良好的镇咳效果遥 同时袁300和 900 mg窑

kg-1 DSE对二氧化硫引起的小鼠咳嗽的潜伏期及咳

嗽次数也有显著的抑制作用袁 这表明 DSE对化学性

刺激物质引起的支气管黏膜感受器有较好的抑制作

用袁但其作用的受体或分子生物学基础不详遥

醋酸致小鼠扭体反应是间接的通过腹腔产生急

性炎症所致袁腹腔液中 PG水平升高尧毛细血管通透

性增高尧炎细胞浸润趋化与炎性介质的释放是炎症反

应的基本过程袁是引起炎症部位肿胀尧疼痛的主要原

因遥 我们前期实验结果表明 DSE对于各种急慢性炎

症都有较好的抑制作用袁 效果可能是与 DSE抑制花

生四烯酸的相关代谢产物和增强动物免疫细胞的活

性有关遥 另外袁氧自由基是刺激性化学物质注入小鼠

腹腔引起的深部的大面积炎性疼痛的分子机制之一咱16暂袁这与谢果等咱9暂研究 DSE清除自由基和减少拘束

负荷小鼠氧化应激水平的结论一致遥 DSE能在一定

程度上延长醋酸所致小鼠扭体的潜伏期及扭体次数袁

显示出其有抗炎症性疼痛的药理活性袁且一定的剂量

依赖性遥 同时袁DSE能在一定程度上延长小鼠热板疼

痛反应时间袁与生理盐水组比较差异有显著性袁但是

与阿司匹林组比较作用较弱且起效稍慢袁 这表明

DSE对温度等物理因素导致的疼痛有一定作用袁但

比急性化学因素导致的疼痛的保护作用效果要弱遥但

是其镇痛抗炎作用的活性成分及其作用机制有待进

一步研究遥

对于 DSE抑菌的研究方面袁 本实验采用的二倍

稀释法对 4种常见细菌的作用袁 结果表明 DSE没有

明显的抗菌活性曰 抑菌圈的实验也显示相同的效果袁

只是对绿脓假单胞菌有微弱的作用遥 这可能因为

DSE是多种成分构成的混合物袁 使其抑菌的有效成

分含量急剧降低袁影响其抗菌功效袁或者是由于 DSE

的各种物质中本身就有不少组分渊如维生素袁糖分等冤

是微生物赖以生长的必要成分所致遥

综上所述袁DSE不仅能有效抑制化学因素所导

致的小鼠的疼痛并可在一定程度上提高热板致小鼠

疼痛的阀值袁 其作用可能与 DSE抑制炎症因子的产

生及释放有关袁或者与其能清除自由基有关遥 DSE也

能明显延长氨水及二氧化硫致小鼠咳嗽的潜伏期及

咳嗽次数遥 DSE对实验的 4种细菌没有明显的抑制

作用遥榴莲壳资源丰富袁安全性高袁虽然目前尚未作为

一种正规药材使用袁 但在民间已有广泛而长期的应

用袁这为榴莲壳作为药材或健康食品的综合开发利用

提供了坚实基础袁本实验的研究为深入探索其作用机

制提供了实验依据遥

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Page 5: 榴莲壳提取物止咳尧镇痛及抗菌作用研究 · PDF file疫肿瘤药理学袁电话院020-61648530袁E-mail: ... 东广州510515曰2 电子科技大学中山学院袁广东中山528402

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收稿日期院2009-12-04

作者简介院陈雪峰渊1981-冤袁男袁硕士袁住院医师袁E-mail: cxfchen2010

@163.com

17琢-羟化酶缺乏症 1例报道及文献回顾

陈雪峰袁傅君芬袁王春林袁梁 黎渊浙江大学医学院附属儿童医院袁浙江 杭州 310003冤

关键词院先天性肾上腺皮质增生症曰17琢-羟化酶缺乏症曰病例报告

中图分类号院R586.2 文献标识码院B 文章编号院1673-4254(2010)04-0797-02

1 临床资料

患者女性袁14岁 3月袁主因野因双侧乳腺一直未

发育袁月经未来潮冶就诊袁门诊初步查体院血压 165/96

mmHg袁身高 152 cm遥 体格发育较健壮袁智力发育正

常袁双乳未发育袁乳晕色素稍偏黑袁PH1期袁女性外生

殖器尧皮肤粘膜无特别加深袁无齿龈色素沉着遥四肢无

畸形袁肌力吁级袁肌张力正常袁双侧巴氏征阴性遥

辅助检查院血尧尿尧便常规尧肝肾功能均正常遥血钾

2.8 mmol/L袁钠 143 mmol/L袁氯化物 107 mmol/L袁超

声反复检查腹腔内未探及子宫尧附件尧未探及明显睾

丸样回声袁阴阜尧腹股沟未探及睾丸样回声遥左手腕骨

骨龄院9/10颗遥 性激素院睾酮 <20 ng/dl袁促黄体生成素

24.3 mIU/ml渊升高冤袁雌二醇 <20 ng/dl袁促卵泡生成素

83.3 mIU/ml 渊升高冤袁 人绒毛膜促腺性激素 1.6

mIU/ml袁皮质醇 <1.00 滋g/dl袁泌乳素 8.01 ng/dl袁孕酮

6.0 ng/dl袁促肾上腺皮质激素 74.0 pg/dl遥染色体检查院

46袁XY袁性别基因检测阳性渊男性冤遥

诊断治疗经过院患者外生殖器为女性袁染色体核

型为 46XY袁B超未发现隐睾及女性内生殖器袁 表明

患者为男性假两性畸形遥患者存在高血压尧低血钾袁血

皮质醇降低袁促肾上腺皮质激素升高袁性激素水平减

低袁考虑诊断为先天性肾上腺皮质增生症袁17琢-羟化

酶缺乏症遥 该患者染色体性别为男性袁表现型和社会

性别为女性袁选择女性性别对其今后的心理发育和社

会生活影响较小遥 同时予醋酸可的松 10 mg渊早冤/20

mg渊晚冤袁安体舒通 20 mg尧双克片 25 mg/d袁补达秀口

服补钾遥 门诊随访患者血压和血钾恢复正常遥

2010;30(4) 南方医科大学学报(J South Med Univ) 797窑 窑