Post on 06-Mar-2019
i
UJI EFEK ANTIINFLAMASI TOPIKAL EKSTRAK ETANOL BIJI
JINTEN HITAM (Nigella sativa) PADA KULIT PUNGGUNG MENCIT
YANG TERINDUKSI KARAGENIN
SKRIPSI
Dijalankan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Program Studi Farmasi
Disusun Oleh :
Liana Yudomulyono
138114004
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ii
UJI EFEK ANTIINFLAMASI TOPIKAL EKSTRAK ETANOL BIJI
JINTEN HITAM (Nigella sativa) PADA KULIT PUNGGUNG MENCIT
YANG TERINDUKSI KARAGENIN
SKRIPSI
Dijalankan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat
Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)
Program Studi Farmasi
Disusun Oleh :
Liana Yudomulyono
138114004
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SANATA DHARMA
YOGYAKARTA
2016
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
iii
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
v
HALAMAN PERSEMBAHAN
HALAMAN PERSEMBAHAN
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
vii
HALAMAN PERSEMBAHAN
Karya ini ku persembahkan kepada :
Kemuliaan Tuhan Yesus Kristus
Kedua orang tuaku
Sahabat dan teman-teman
Angkatan farmasi 2013
Dan Almamaterku, Universitas Sanatha Dharma
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
viii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Yesus Kristus atas
segala berkat, rahmat, dan cinta kasih-Nya sehingga penulis dapat meyelesaikan
skripsi yang berjudul “Uji Efek Antiinflamasi Topikal Ekstrak Etanol Biji Jinten
Hitam (Nigella Sativa) pada Kulit Mencit yang Terinduksi Karagenin” sebagai
syarat untuk memperoleh gelar sarjana Farmasi di Universitas Sanata Dharma
Yogyakarta.
Penyelesaian skripsi ini melibatkan banyak dukungan dan bantuan dari
berbagai pihak, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, pada
kesempatan ini penulis hendak menyampaikan ungkapan terimakasih kepada :
1. Ibu Aris Widayati, M.Si., Ph.D., Apt selaku Dosen Pembibing
Akademik dan Dekan Fakultas Farmasi Sanata Dharma, Yogyakarta.
2. Ibu drh. Sitarina Widyarini, M.P., Ph.D., selaku dosen pembimbing
penelitian “Uji Efek Antiinflamasi Topikal Ekstrak Etanol Biji Jinten
Hitam (Nigella Sativa) pada Kulit Mencit yang Terinduksi Karagenin”
yang telah membimbing, meluangkan waktu, memberikan motivasi,
dukungan dan masukan bagi penulis selama proses penelitian dan
penyusunan skripsi.
3. Komisi Etik Penelitian Kedokteran dan Kesehatan Fakultas Kedokteran
Universitas Gadjah Mada yang telah memberikan izin pelaksanaan
penelitian.
4. Ibu Dr. Yustina Sri Hartini, M.Si., Apt., dan Ibu Phebe Hendra, M.Si.,
Ph.D., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dan
saran yang sangat berharga dalam penulisan naskah ini dari awal hingga
akhir.
5. Ibu Agustina Setiawati, M.Sc., Apt., selaku Kepala Laboratorium
Fakultas Farmasi yang telah memberikan izin dalam penggunaan
fasilitas laboratorium yang mendukung dalam penelitian ini.
6. Bapak Heru, Bapak Wagiran, serta semua staff laboratorium yang telah
bersedia membantu penulis selama penelitian berlangsung.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
ix
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
x
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ............................................................................................... ii
HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING .................................................. ..iii
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iv
LEMBAR PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................. v
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI................................. vi
HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................................... vii
PRAKATA ........................................................................................................... viii
DAFTAR ISI ............................................................................................................ x
DAFTAR TABEL ................................................................................................. xii
DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiii
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xiv
INTISARI ............................................................................................................... xv
ABSTRACT ......................................................................................................... xvi
PENDAHULUAN ................................................................................................... 1
METODOLOGI ....................................................................................................... 2
A. Alat dan Bahan ............................................................................................... 2
B. Metode ............................................................................................................ 2
a. Determinasi tanaman .......................................................................... 2
b. Pengumpulan bahan dan pengeringan ................................................ 2
c. Ekstraksi biji Nigella sativa ................................................................ 2
d. Uji kadar air ........................................................................................ 3
e. Uji flavonoid ....................................................................................... 3
f. Uji pendahuluan karagenin ................................................................. 3
g. Pembuatan karagenin dan dosis ketiga ekstrak .................................. 3
h. Perlakuan pembentukan edema pada mencit ...................................... 4
i. Pengujian aktivitas antiinflamasi ........................................................ 4
j. Analisis statistika ................................................................................ 5
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................ 6
A. Determinasi dan Ekstraksi Biji Nigella sativa ................................................ 6
B. Uji Kadar Air .................................................................................................. 7
C. Uji Flavonoid .................................................................................................. 7
D. Uji Pendahuluan Karagenin ............................................................................ 7
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xi
E. Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Biji Nigella sativa ............................. 8
F. Uji Persentase Penghambatan Inflamasi ...................................................... 10
KESIMPULAN ...................................................................................................... 11
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 12
LAMPIRAN ........................................................................................................... 14
BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................... 36
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xii
DAFTAR TABEL
Tabel I. Nilai Rata-Rata AUC Total dan %PI Masing-Masing Kelompok
Perlakuan ................................................................................................. 9
Tabel II. Hasil Uji Post Hoc Bon Ferroni AUC Pada Setiap Kelompok
Perlakuan ................................................................................................. 9
Tabel III. Hasil Uji Post Hoc Bon Ferroni Rata-rata % PI Pada Setiap
Kelompok Perlakuan ............................................................................ 10
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Ekstrak etanol biji Nigella sativa ........................................................ 7
Gambar 2. Kurva Rata-rata selisih tebal lipat kulit punggung yang
dihasilkan karagenin konsentrasi 1,5% dan 3% ................................... 8
Gambar 3. Tanaman Nigella sativa dan biji Nigella sativa ................................. 15
Gambar 4. Ekstrak Nigella sativa 5% yang dilarutkan dalam basis Biocream® . 15
Gambar 5. Ekstrak Nigella sativa 10% yang dilarutkan dalam basis Biocream® 15
Gambar 6. Ekstrak Nigella sativa 20% yang dilarutkan dalam basis Biocream® 15
Gambar 7. Mencit betina galur Swiss .................................................................. 16
Gambar 8. Kulit punggung mencit setelah injeksi karagenin ............................. 16
Gambar 9. Cara pengukuran edema (tebal lipat kulit) ......................................... 17
Gambar 10. Karagenin sebagai kontrol negatif...................................................... 18
Gambar 11. Biocream® (Basis ekstrak) ................................................................ 18
Gambar 12. Alat spuit injeksi................................................................................. 18
Gambar 13. Jangka sorong digital .......................................................................... 19
Gambar 14. FeCl3 ................................................................................................... 20
Gambar 15. Ekstrak Nigella sativa + FeCl3 .......................................................... 20
Gambar 16. Alat untuk uji kadar air ...................................................................... 21
Gambar 17. Hasil uji replikasi 1 ............................................................................ 21
Gambar 18. Hasil uji replikasi 2 ............................................................................ 22
Gambar 19. Hasil uji replikasi 3 ............................................................................ 22
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Tanaman dan biji Nigella sativa serta ekstrak Nigella sativa
dalam basis Biocream® ................................................................... 14
Lampiran 2. Hewan uji yang digunakan beserta cara pengukuran edema ........... 16
Lampiran 3. Kontrol yang digunakan dalam penelitian, alat spuit injeksi,
beserta jangka sorong digital ........................................................... 18
Lampiran 4. Uji FeCl3 .......................................................................................... 20
Lampiran 5. Uji kadar air beserta hasil uji ........................................................... 21
Lampiran 6. Surat determinasi biji Nigella sativa ............................................... 23
Lampiran 7. Surat Ethical Clearance ................................................................... 24
Lampiran 8. Surat Kalibrasi Jangka Sorong ........................................................ 25
Lampiran 9. Hasil uji statistik AUC ..................................................................... 26
Lampiran 10. Kurva rata-rata selisih tebal lipat kulit punggung mencit pada jam
ke 0 hingga jam ke 6 ........................................................................ 30
Lampiran 11. Hasil uji statistik %PI ...................................................................... 31
Lampiran 12. Surat Clinical Epidemiology & Biostatistic Unit ............................ 35
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xv
INTISARI
Biji Nigella sativa merupakan salah satu tanaman yang memiliki kandungan
fitokimia, salah satunya adalah flavonoid yang memiliki aktivitas sebagai antiinflamasi.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek antiinflamasi topikal, konsentrasi optimum
dan persen penghambatan inflamasi dari ekstrak etanol biji Nigella sativa pada mencit betina
galur Swiss yang terinduksi karagenin 3%. Penelitian ini merupakan eksperimental murni
dengan rancangan acak lengkap pola searah. 25 hewan uji dibagi menjadi 5 kelompok
perlakuan secara acak, yaitu kontrol karagenin 3%, kontrol Biocream, ekstrak etanol biji
Nigella sativa 5, 10 dan 20% 𝑏𝑏⁄ . Biocream dan krim ekstrak etanol biji Nigella sativa
diaplikasikan secara topikal setelah injeksi karagenin 3%. Perubahan tebal lipat kulit
punggung mencit diukur sebelum injeksi karagenin dan pada jam ke 1, 2, 3, 4, 5 dan 6 setelah
injeksi karagenin dengan menggunakan jangka sorong digital. Data yang didapat dari
penelitian diolah untuk mendapatkan nilai AUC dan persen penghambatan inflamasi.
Analisis statistik dilakukan dengan post hoc Bon Ferroni (95%). Konsentrasi 5% dengan
kontrol karagenin berbeda tidak bermakna, tetapi konsentrasi 10% dan 20% berbeda
bermakna dengan kontrol karagenin. Dapat disimpulkan bahwa ekstrak etanol biji Nigella
sativa mampu menurunkan inflamasi. Persen penghambatan inflamasi ekstrak etanol biji
Nigella sativa konsentrasi 5, 10 dan 20% berturut-turut adalah 14,42%; 16,07%; 39,59%.
Konsentrasi optimum dari ekstrak etanol biji Nigella sativa adalah 10%.
Kata kunci: antiinflamasi, topikal, biji Nigella sativa, ekstrak etanol.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
xvi
ABSTRACT
Nigella sativa seeds is one of many plants that contain phytochemicals, one of which
is a flavonoid that has anti-inflammatory activity. The purpose of this study are determine
the topical anti-inflammatory effect, optimum concentration and percent inhibition of
inflammation from ethanol extract of Nigella sativa seeds in female mice Swiss strain
induced by carrageenan 3%. This research was experimental study with one way-complete-
random design. 25 animals were divided into 5 groups randomly: 3% carrageenan control,
Biocream control, ethanol extract of Nigella sativa seeds 5, 10 and 20% b/b. Biocream and
cream ethanol extract of Nigella sativa seed applied topically after injection carrageenan 3%.
The change in back skin of mice was measured before carrageenan injection and at 1, 2, 3,
4, 5 and 6 hours after carrageenan injection using digital caliper. Data obtained from research
processed to get AUC values and percent inhibition of inflammation. Statistic analysis was
done with post hoc Bon Ferroni (95%). The result was not significantly different between
the concentration of 5% and carrageenan control, but concentration of 10% and 20% was
significantly different to the carrageenan control. This study shows that the ethanol extract
of Nigella sativa seeds can lower inflammation. Percent inhibition of inflammatory ethanol
extract of Nigella sativa seeds 5, 10 and 20% consecutive are 14.42%; 16.07%; 39.59%. The
optimum concentration of the ethanol extract of Nigella sativa seeds is 10%.
Keywords: antiinflammation, topical, Nigella sativa seeds, ethanol extract.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
1
PENDAHULUAN
Inflamasi adalah suatu respon protektif tubuh ketika terjadi luka jaringan yang
bertujuan untuk menarik protein plasma dan mediator inflamasi ke tempat yang mengalami
cedera agar dapat mengeliminasi serta inisiasi proses penyembuhan (Kumar, Abbas dan
Aster, 2013). Gejala-gejala yang timbul sebagai respon inflamasi antara lain kemerahan
(rubor), rasa panas (calor), rasa sakit (dolor), pembengkakan (tumor), dan adanya perubahan
fungsi (function laesa) (Shapiro, 2009).
Masyarakat umumnya memandang inflamasi sebagai suatu respon tubuh yang
merugikan dan membuat tidak nyaman, oleh karena itu dibutuhkan suatu obat untuk
mengatasi masalah ini. Obat modern yang biasa digunakan sebagai antiinflamasi adalah obat
golongan NSAID dan steroid. Menurut Golan (2008), NSAID dapat menyebabkan
peningkatan resiko pendaharan lambung. Steroid dapat menyebabkan miopati, hipokalemia
dan imunosupresi (Bersten dan Soni, 2009). Oleh karena itu, saat ini masyarakat lebih
memilih menggunakan obat herbal yang memiliki efek samping yang relatif lebih kecil,
misalnya obat yang berasal dari tumbuhan (Prasad dan Tyagi, 2015). Biji Nigella sativa
merupakan salah satu obat herbal yang memiliki kandungan flavonoid yang berperan sebagai
antiinflamasi (Abbas, dkk., 2013). Flavonoid yang terkandung dalam biji Nigella sativa
adalah quercetin dan kaempferol (Merfort, Wray, Barakat, Hussein, Nawwar dan Willuhn,
1997).
Penelitian Gimbun dkk., (2014) menunjukkan bahwa ekstraksi dengan
menggunakan pelarut etanol menunjukkan hasil ekstraksi yang simultan dan paling tinggi
Total Flavonoid Content, Total Phenolic Content dan aktivitas antioksidannya, sedangkan
jika menggunakan pelarut metanol mendapatkan hasil ekstraksi yang bagus pada Total
Phenolic Content dan aktivitas antioksidannya tetapi Total Flavonoid Contentnya sangat
rendah, padahal dalam penelitian ini yang akan digunakan adalah flavonoid, oleh karena itu
pelarut yang digunakan adalah etanol.
Ekstrak etanol biji Nigella sativa dibuat dalam bentuk sediaan topikal dengan tujuan
supaya lebih mudah ketika mengaplikasikannya pada kulit punggung mencit. Selain itu, efek
lokal dari sediaan topikal menyebabkan obat lebih cepat menimbulkan efek serta
meminimalkan terjadinya efek samping tukak lambung seperti ditimbulkan pada
penggunaan obat antiinflamasi oral (Anonim, 2015). Penelitian ini dilakukan dengan tujuan
untuk melihat apakah ekstrak etanol biji Nigella sativa dapat menurunkan inflamasi,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
2
mengetahui konsentrasi optimum dan persen penghambatan inflamasi ekstrak etanol biji
Nigella sativa pada mencit betina yang diinduksi karagenin 3% secara subkutan.
METODOLOGI
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap
pola searah.
Alat dan Bahan
Bahan penelitian yang digunakan ialah etanol, karagenin, aquades, NaCl 0,9%, Biocream
(Merck®), Veet (Reckitt Benckiser®). Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah
jangka sorong digital (Hardened®), aluminium foil, spuit injeksi, gelas beaker, stopwatch,
mortir dan stamper, labu ukur, shaker (Innova 2100), rotary evaporator (Buchi R 201/215),
oven (Memmert®), corong Buchner, pompa vakum, kertas saring, alat moisture balance
(Halogen Moisture Analyzer HG53), labu alas bulat, mesin penyerbuk, ayakan 40 mesh,
waterbath, cawan porselen, erlenmeyer, serta batang pengaduk.
Metode
Penelitian ini mengukur tebal lipat kulit punggung mencit betina yang terinduksi
karagenin. Subyek penelitian ini adalah mencit betina yang diperoleh dari Laboratorium
Imono Universitas Sanata Dharma, berusia 2-3 bulan. Mencit tersebut dibagi ke dalam 5
kelompok dengan masing-masing kelompok terdiri atas 5 mencit. Biji Nigella sativa
diperoleh dari Toko Obat Bintang Selatan, Jakarta Barat.
Determinasi tanaman
Biji Nigella sativa dideterminasi di Fakultas Biologi Universitas Gadjah Mada.
Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang digunakan dalam penelitian ini adalah
benar merupakan biji Nigella sativa (Lampiran 6).
Pengumpulan bahan dan pengeringan
Biji Nigella sativa dicuci dengan air hingga bersih kemudian dijemur hingga kering,
kemudian diserbuk dengan menggunakan blender, setelah itu dimasukkan ke oven pada suhu
antara 40 oC- 50 oC selama 3 hari supaya serbuk biji Nigella sativa benar-benar kering.
Serbuk biji Nigella sativa yang sudah kering diayak dengan menggunakan ayakan 40 mesh.
Ekstraksi biji Nigella sativa
Sebanyak 300 gram serbuk biji Nigella sativa dibagi ke dalam 5 buah erlenmeyer dan
direndam dengan menggunakan 250 ml etanol 80% lalu dimaserasi dengan menggunakan
shaker selama 24 jam. Kemudian dilakukan remaserasi sebanyak 2 kali. Remaserasi
dilakukan dengan cara hasil maserasi disaring dengan menggunakan corong buchner,
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3
kemudian ampas serbuk dipindahkan ke dalam erlenmeyer berbeda dan direndam dengan
pelarut baru kemudian diletakkan di shaker selama 24 jam, sedangkan hasil saringan
disimpan. Setelah 2 kali proses remaserasi, hasil saringam disatukan dan diuapkan
menggunakan rotary evaporator pada suhu 60°C. Setelah filtrat tersisa ± 200 mL, ekstrak
dipindahkan ke dalam cawan porselen. Hasil ekstraksi terdapat minyak pada lapisan atas.
Minyak yang ada di lapisan atas dibuang dengan menggunakan pipet, setelah itu ditimbang
bobotnya. Ekstrak tersebut kemudian diuapkan di atas waterbath dan dioven pada suhu 40
°C-50 °C hingga bobot tetap dan didapat ekstrak kental. Setelah itu disimpan di kulkas
hingga akan digunakan.
Uji kadar air
Uji kadar air mengetahui kadar air dalam serbuk apakah sudah memenuhi standar
persyaratan serbuk yang baik. Uji kadar air dilakukan di Laboratorium Formulasi dan
Teknologi Sediaan Farmasi, Universitas Sanata Dharma dengan menguji 0,2 g serbuk ke
dalam alat moisture balance. Alat akan memanaskan sampel hingga 120°C dan akan berhenti
dengan sendirinya ketika sudah mencapai bobot tetap.
Uji flavonoid
Uji flavonoid dilakukan untuk membuktikan bahwa ekstrak kental mengandung
flavonoid. Uji ini dilakukan dengan cara meneteskan 2 tetes FeCl3 ke ekstrak kental, apabila
ekstrak mengandung flavonoid, maka akan berubah warna menjadi kecoklatan (Karna,
2013).
Uji pendahuluan karagenin
Uji ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui konsentrasi optimum karagenin
yang dapat menimbulkan selisih penebalan lipat kulit punggung sebesar dua hingga tiga kali
dari tebal kulit normal dan mampu mempertahankan ketebalannya hingga jam ke 6.
Konsentrasi karagenin yang diuji adalah 1,5% dan 3%. Mencit yang digunakan sebanyak 3
ekor untuk masing-masing konsentrasi. 0,1 ml karagenin diinjeksikan ke kulit punggung
mencit kemudian dilakukan oengukuran tebal lipat kulit punggung mencit dilakukan dari
jam ke 0 hingga jam ke 6.
Pembuatan karagenin dan dosis ketiga ekstrak
Karagenin yang digunakan adalah konsentrasi 3% yang dibuat dengan cara
menimbang 0,15 gram serbuk karagenin dan dilarutkan dalam 5 ml NaCl 0,9%. Dosis ketiga
ekstrak dibuat dengan cara menimbang ekstrak kental sebanyak 0,5 gram; 1 gram dan 2 gram
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4
yang dicampurkan pada 10 gram basis Biocream. Ekstrak kental yang digunakan adalah
yang lapisan bagian bawah yang berwarna coklat tua kehitaman.
Perlakuan pembentukan edema pada mencit
Penelitian ini telah mendapatkan persetujuan dari The Medical and Health Research
Ethic Committee (MHREC) Fac. of Medicine Gadjah Mada University. Hewan uji sebanyak
25 dibagi secara acak menjadi lima kelompok yang masing-masing kelompok terdiri dari
lima ekor mencit. Hewan uji sebelum diperlakukan dicukur terlebih dahulu bulu
punggungnya dengan gunting, kemudian dioleskan Veet® untuk merontokkan bulu yang
belum tercukur sempurna. Mencit dibiarkan selama satu hari untuk menghindari adanya
inflamasi yang disebabkan oleh pencukuran dan pemberian Veet®. Perubahan tebal lipat
kulit punggung mencit diukur sebelum injeksi karagenin dan pada jam ke 1, 2, 3, 4, 5 dan 6
setelah injeksi karagenin dengan menggunakan jangka sorong digital (Paulsamy dan
Saradha, 2013). Senyawa penginduksi edema yang digunakan adalah karagenin 3%.
Kelompok I (kontrol negatif) diberi injeksi 0,1 ml karagenin 3%. Kelompok II diberi injeksi
0,1 ml karagenin 3% lalu dioleskan Biocream. Kelompok III, IV, dan V diberi injeksi 0,1 ml
karagenin 3% lalu dioleskan krim ekstrak etanol biji Nigella sativa (Biocream yang telah
dicampur dengan ekstrak etanol Nigella sativa) dengan konsentrasi 5, 10 dan 20% di kulit
punggung mencit.
Pengujian aktivitas antiinflamasi
Pengukuran edema dilakukan setiap jam dari jam ke-0 sampai jam ke-6 dengan
menggunakan jangka sorong digital. Jangka sorong yang digunakan telah dikalibrasi terlebih
dahulu di Badan Penelitian dan Pengembangan Industri Balai Besar Kulit, Karet, dan Plastik
Laboratorium Pengujian dan Kalibrasi, hal ini dilakukan untuk memastikan akurasi dan
presisinya. Data selisih tebal lipat kulit yang didapatkan kemudian dilanjutkan dengan
penghitungan AUC dan % penghambatan inflamasi dari tiap kelompok perlakuan.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
5
Rumus perhitungan:
𝐴𝑈𝐶0−6 = ∑ [((𝑦𝑛−1 + 𝑦𝑛)(𝑥𝑛 + 𝑥𝑛−1)
2) ]
6
0
Keterangan :
𝐴𝑈𝐶0−6 = area di bawah kurva dari jam ke-0 hingga jam ke-6 (mm.jam)
𝑦𝑛−1 = tebal lipatan kulit pada jam ke-(n-1) (mm)
𝑦 𝑛 = tebal lipatan kulit pada jam ke-n (mm)
𝑥𝑛−1 = jam ke-(n-1) (jam)
(Ikawati, Supardjan dan Asmara, 2007)
Nilai persen penghambatan inflamasi dihitung dengan rumus berikut :
Penghambatan inflamasi (%) = (𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0− (𝐴𝑈𝐶0−𝑛)𝑛
(𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0 ×100%
Keterangan :
(𝐴𝑈𝐶0−𝑥)0 = rata-rata AUC total kontrol negatif (mm.jam)
(𝐴𝑈𝐶0−𝑛)𝑛 = nilai AUC total pada kelompok perlakuan replikasi ke - (mm.jam)
(Tanko, Mohammed, Okasha, Shuaibu, Magaji dan Yaro, 2007)
Analisis statistika
Hasil dianalisis dengan menggunakan uji Shapiro Wilk untuk mengetahui distribusi
data. Berdasarkan uji tersebut, semua kelompok memiliki distribusi normal yang dilihat dari
angka probabilitasnya > 0,05. Kemudian dilanjutkan dengan uji varian dan menunjukkan
probabilitas > 0,05 yang menunjukkan bahwa varian data yang diuji adalah sama.
Dilanjutkan dengan uji ANOVA satu arah dengan taraf kepercayaan 95%. Hasil uji
ANOVA, diperoleh nilai p < 0,05 yang menunjukkan paling tidak terdapat dua kelompok
yang mempunyai rerata AUC total yang berbeda bermakna. Kemudian untuk melihat
kelompok mana yang memiliki perbedaan, dilakukan analisis Post Hoc menggunakan uji
Bon Ferroni (Dahlan, 2016)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
6
HASIL DAN PEMBAHASAN
Determinasi dan ekstraksi biji Nigella sativa
Biji Nigella sativa dideterminasi dengan tujuan untuk memastikan bahwa tanaman
yang akan diteliti benar identitasnya. Determinasi dilakukan di Fakultas Biologi Universitas
Gadjah Mada. Hasil determinasi menunjukkan bahwa tanaman yang digunakan dalam
penelitian ini adalah benar merupakan biji Nigella sativa (Lampiran 6).
Tahap pertama yang dilakukan adalah mencuci biji Nigella sativa hingga bersih, kemudian
diblender dan diayak dengan menggunakan ayakan 40 mesh, hal ini dilakukan dengan tujuan
memperbesar luas permukaan biji Nigella sativa sehingga kontak pelarut dengan biji
Nigella sativa semakin luas. Kandungan fitokimia yang terekstrak akan semakin banyak
apabila kontak pelarut dengan biji Nigella sativa besar. Setelah itu dilakukan proses maserasi
dengan alat shaker selama 24 jam dan remaserasi 2 kali. Proses remaserasi dilakukan dengan
tujuan agar zat fitokimia di dalam sel yang masih tertinggal pada ampas serbuk dapat tertarik
ke pelarut baru yang ditambahkan karena pelarut awal sudah jenuh oleh senyawa sehingga
tidak dapat melarutkan kembali senyawa-senyawa lainnya. Pemilihan pelarut etanol mengacu
pada penelitian Gimbun dkk., (2014) yang menunjukkan bahwa ekstraksi dengan
menggunakan pelarut etanol menunjukkan hasil ekstraksi yang simultan dan paling tinggi
Total Flavonoid Content sedangkan jika menggunakan pelarut metanol mendapatkan Total
Flavonoid Contentnya sangat rendah, padahal dalam penelitian ini yang akan digunakan
adalah flavonoid. Sedangkan pemilihan konsentrasi 80% mengacu pada penelitian
Mazandarani (2015) dan Gimbun (2014) yang melaporkan bahwa ekstrak etanol Nigella
sativa konsentrasi 70% mengandung Total Flavonoid Content sebesar 0,247 mg QUE g-1
sedangkan ekstrak etanol Nigella sativa konsentrasi 80% mengandung Total Flavonoid
Content yang lebih tinggi, yaitu 194,04±11,65 mg QUE g-1. Kemudian etanol diuapkan
dengan menggunakan rotary evaporator suhu 60°C. Setelah filtrat tersisa ± 200 mL, ekstrak
dipindah ke cawan porselen. Hasil ekstrak etanol biji Nigella sativa dapat dilihat di gambar
1. Minyak yang terbentuk dari hasil ekstraksi dibuang dengan menggunakan pipet. Setelah
itu, ekstrak diuapkan di atas waterbath dan oven hingga terbentuk ekstrak kental. Rendemen
yang diperoleh ialah 21,9%.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
7
Gambar 1. Ekstrak Etanol Biji Nigella sativa
Uji kadar air
Uji ini bertujuan untuk mengetahui kadar air dalam serbuk apakah sudah memenuhi
standar persyaratan serbuk yang baik. Menurut BPOM RI (2014) kadar air dalam serbuk
simplisia harus <10%. Pengujian kadar air menggunakan metode gravimetri dengan
moisture balance (Lampiran 5). Hasil rata-rata pengujian kadar air serbuk biji Nigella sativa
pada penelitian ini adalah 6,69%. Hasil ini sudah sesuai dengan persyaratan serbuk yang
baik.
Uji flavonoid
Uji flavonoid dilakukan untuk membuktikan bahwa ekstrak kental mengandung
flavonoid. Dari hasil uji didapatkan ekstrak berubah warna menjadi kecoklatan setelah
ditetesi dengan FeCl3. Hal ini menunjukkan ekstrak positif mengandung flavonoid.
Uji pendahuluan karagenin
Senyawa penginduksi edema yang digunakan adalah karagenin karena mampu
menimbulkan inflamasi akut, biasa digunakan dalam penelitian inflamasi dan memiliki
reprodubilitas yang tinggi (Morris, 2003). Sebelum melakukan uji efek antiinflamasi ekstrak
etanol biji Nigella sativa, dilakukan uji pendahuluan terlebih untuk mengetahui konsentrasi
karagenin yang optimal yang dapat menimbulkan selisih tebal lipat kulit punggung sebesar
dua hingga tiga kali dari tebal kulit normal dan mampu mempertahankan ketebalannya
hingga jam ke 6. Karagenin 1,5 mampu menimbulkan edema sebesar dua hingga tiga kali
lipat pada jam pertama hingga jam ketiga, namun setelah jam ketiga, edema turun drastis
dan tidak mampu bertahan hingga jam ke 6. Sedangkan karagenin 3% mampu menimbulkan
edema sebesar dua hingga tiga kali lipat pada jam pertama dan mampu mempertahankan
hingga jam ke 6. Oleh karena itu, konsentrasi karagenin yang digunakan adalah yang 3%.
Kurva rata-rata selisih tebal lipat kulit punggung yang dihasilkan oleh masing-masing
konsentrasi karagenin dapat dilihat pada gambar 2.
Lapisan
minyak yang
dibuang
dengan
menggunakan
pipet
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
8
Gambar 2. Kurva Rata-rata Selisih Tebal Lipat Kulit Punggung yang dihasilkan Karagenin
Konsentrasi 1,5 dan 3%
Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Biji Nigella sativa
Penelitian efek antiinflamasi ekstrak etanol biji Nigella sativa pada mencit betina
galur Swiss ini bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak etanol biji Nigella sativa
memiliki efek antiinflamasi topikal, mengetahui konsentrasi optimum serta persen
penghambatan inflamasi ekstrak etanol biji Nigella sativa yang menunjukkan efek
antiinflamasi topikal pada mencit betina galur Swiss.
Alat ukur yang digunakan adalah jangka sorong digital karena sederhana, mudah
digunakan dan memiliki reprodubilitas yang tinggi. Pengambilan data dilakukan setiap 1 jam
dari jam ke-0 (pengukuran kulit normal sebelum injeksi karagenin) hingga jam ke-6. Pada
penelitian ini ekstrak etanol biji Nigella sativa dicampurkan dengan Biocream. Konsentrasi
ekstrak biji Nigella sativa yang digunakan adalah 5, 10 dan 20%.
Data selisih lipat kulit yang didapatkan kemudian dilanjutkan dengan
penghitungan AUC dan rata-rata AUC total dari tiap kelompok perlakuan. Rata-rata AUC
total adalah luas daerah di bawah kurva yang menunjukkan rata-rata selisih tebal lipat kulit
punggung mencit dari jam ke 0 hingga jam ke 6. Hasil rata-rata AUC total dari tiap kelompok
perlakuan dapat dilihat pada tabel I.
Pada tabel I dapat dilihat bahwa kontrol Biocream memiliki rata-rata AUC total
paling tinggi, diikuti dengan kontrol karagenin, ekstrak etanol biji Nigella sativa 5%, ekstrak
etanol biji Nigella sativa 10% dan ekstrak etanol biji Nigella sativa 20%. Rata-rata AUC
total menggambarkan seberapa besar edema pada kulit punggung mencit.
Perbedaan AUC antar kelompok dilihat dengan menggunakan statistik post hoc
Bon Ferroni. Hasil uji post hoc Bon Ferroni dapat dilihat di tabel II. Hasilnya adalah kontrol
karagenin dengan kontrol biocream berbeda tidak bermakna, hal ini menunjukkan bahwa
Biocream tidak menginduksi inflamasi dan dapat digunakan sebagai basis cream dalam
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
9
penelitian ini. Kemudian ekstrak etanol biji Nigella sativa konsentrasi 5% berbeda tidak
bermakna dengan kontrol karagenin, hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi 5% tidak
memiliki efek antiinflamasi. Sedangkan konsentrasi 10 dan 20% berbeda bermakna dengan
kontrol karagenin. Hal ini menunjukkan bahwa konsentrasi 10 dan 20% memiliki efek
antiinflamasi.
Tabel I. Nilai Rata-Rata AUC Total dan %PI Masing-Masing Kelompok Perlakuan
Kelompok
Rata-rata AUC total ±
Standard Error
(mm.jam)
Rata-rata %PI ±
Standard Error
(mm.jam)
Kontrol Karagenin 13,62 ± 0,55 -0,20 ± 4,51
Kontrol Biocream 15,14 ± 0,51 -10,91 ± 3,98
Ekstrak Nigella sativa 5% 11,64 ± 0,47 14,42 ± 4,91
Ekstrak Nigella sativa 10% 11,32 ± 0,21 16,07 ± 2,27
Ekstrak Nigella sativa 20% 7,96 ± 0,38 39,59 ± 8,36
Tabel II. Hasil Uji Post Hoc Bon Ferroni AUC Pada Setiap Kelompok Perlakuan
Kelompok Kontrol
karagenin
Kontrol
biocream
Ekstrak
konsentrasi
5%
Ekstrak
konsentrasi
10%
Ekstrak
konsentrasi
20%
Kontrol karagenin - BTB BTB BB BB
Kontrol biocream BTB - BB BB BB
Ekstrak konsentrasi 5% BTB BB - BTB BB
Ekstrak konsentrasi 10% BB BB BTB - BB
Ekstrak konsentrasi 20% BB BB BB BB -
Keterangan:
B : Berbeda bermakna (p < 0,05)
TB : Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Uji persentase penghambatan inflamasi
Uji ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui kemampuan senyawa uji dalam
menurunkan edema mencit yang terinduksi karagenin dibandingkan kelompok kontrol
negatif. Nilai % PI didapatkan dengan menghitung selisih antara rata-rata AUC kontrol
karagenin dengan AUC total kelompok uji dibagi dengan rata-rata AUC kontrol karagenin.
Rata-rata persen penghambatan inflamasi dan hasil uji post hoc Bon Ferroni persen
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
10
penghambatan inflamasi pada setiap kelompok perlakuan ekstrak biji Nigella sativa beserta
kontrol dapat dilihat pada tabel I dan III.
Tabel III. Hasil Uji Post Hoc Bon Ferroni Rata-rata % PI Pada Setiap Kelompok
Perlakuan
Kelompok Kontrol
karagenin
Kontrol
biocream
Ekstrak
konsentrasi
5%
Ekstrak
konsentrasi
10%
Ekstrak
konsentrasi
20%
Kontrol karagenin - BTB BTB BB BB
Kontrol biocream BTB - BB BB BB
Ekstrak konsentrasi 5% BTB BB - BTB BB
Ekstrak konsentrasi 10% BB BB BTB - BB
Ekstrak konsentrasi 20% BB BB BB BB -
Keterangan:
B : Berbeda bermakna (p < 0,05)
TB : Berbeda tidak bermakna (p > 0,05)
Pada tabel I dapat dilihat bahwa kontrol Biocream dan kontrol karagenin memiliki
nilai %PI yang minus, hal ini menunjukkan bahwa karagenin sebagai senyawa penginduksi
edema dan biocream sebagai basis tidak memiliki efek antiinflamasi. Nilai persen
penghambatan inflamasi yang paling rendah ke yang paling tinggi dari kelompok ekstrak
etanol biji Nigella sativa adalah konsentrasi 5%, diikuti dengan konsentrasi 10% lalu
konsentrasi 20%. Hal ini menunjukkan bahwa seiring meningkatnya konsentrasi, aktivitas
antiinflamasi semakin tinggi.
Pada tabel III dapat dilihat bahwa kontrol karagenin berbeda tidak bermakna
dengan kontrol Biocream dan ekstrak etanol biji Nigella sativa 5% yang menunjukkan
bahwa Biocream dan ekstrak etanol biji Nigella sativa 5% tidak memiliki efek
antiinflamasi. Ekstrak etanol biji Nigella sativa konsentrasi 10 dan 20% berbeda bermakna
dengan kontrol karagenin yang menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji Nigella sativa
konsentrasi 10 dan 20% memiliki efek antiinflamasi.
Tabel II dan III menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji Nigella sativa 5% berbeda
tidak bermakna dengan ekstrak etanol biji Nigella sativa 10%, hal ini diduga terjadi karena
ada kemungkinan sewaktu mengambil ekstrak etanol biji Nigella sativa 5% jumlah minyak
di lapisan atas yang terambil lebih banyak daripada ketika mengambil ekstrak etanol biji
Nigella sativa 10%. Karena dalam penelitian ini minyak di lapisan atas tidak bisa hilang
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
11
seutuhnya dengan menggunakan pipet tetes. Berdasarkan penelitian Tanko, dkk (2007) dan
Ghannadi, Hajhashemi dan Jafarabadi (2005), pada dosis 200 μL/kg minyak biji Nigella
sativa mampu menghasilkan %PI sebesar 74%, sedangkan 200 mg/kg senyawa fitokimia
dalam ekstrak etanol biji Nigella sativa mampu menghasilkan %PI sebesar 61,3%. Hal ini
menunjukkan bahwa minyak biji Nigella sativa lebih poten aktivitas antiinflamasi
dibanding dengan senyawa fitokimia dalam ekstrak etanol biji Nigella sativa.
Berdasarkan hasil statistik AUC dan persen penghambatan inflamasi di atas,
ekstrak etanol biji Nigella sativa konsentrasi 10% dipilih sebagai konsentrasi optimum,
karena dengan pemberian ekstrak etanol biji Nigella sativa konsentrasi 10% sudah mampu
menurunkan tebal lipat kulit punggung yang signifikan (p<0,05) dibanding dengan kontrol
karagenin.
Peneliti menyarankan pada penelitian selanjutnya untuk mengambil flavonoid
yang berada di lapisan bawah ekstrak etanol dengan menghilangkan minyak menggunakan
metode freeze drying atau corong pisah.
KESIMPULAN
1. Ekstrak etanol biji Nigella sativa memiliki efek antiinflamasi topikal pada edema
punggung mencit yang terinduksi karagenin.
2. Persen penghambatan inflamasi (%PI) dari ekstrak etanol biji Nigella sativa konsentrasi
5, 10, dan 20% b/b secara berturut-turut adalah 14,42%; 16,07%; 39,59%.
3. Ekstrak etanol biji Nigella sativa yang memiliki efek antiinflamasi topikal paling
optimum adalah konsentrasi 10%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
12
DAFTAR PUSTAKA
Abbas, M., Shahid, M., Iqbal, M., Anjum, F., Sharif, S., Ahmed, S., Pirzada, T., 2013,
Antitermitic Activity And Phytochemical Analysis Of Fifteen Medicinal Plant Seeds,
Academic Journals, 7(22), 1608-1617.
Aljabre, S.H.M., Alakloby, O.M. and Randhawa, M.A., 2015, Dermatological Effects of
Nigella sativa, Journal of Dermatology & Dermatologic Surgery, 19, 92–98.
Anonim, 2015, Benefits of Topical Pain Relief vs Oral Medications,
https://rxcompound.com/topical-pain-relief-vs-oral-medications/, diakses tanggal 9
Januari 2017.
Bersten, A.D., Soni, N., 2009, Oh’s Intensive Care Manual, 6th ed., Elsevier Health Sciences,
p. 651.
BPOM RI, 2014, Persyaratan Mutu Obat Tradisional, Badan Pengawas Obat Dan Makanan
Republik Indonesia, Jakarta.
Dahlan, S.M., 2016, Statistik untuk Kedokteran dan Kesehatan: Deskriptif, Bivariat, dan
Multivariat, edisi 6, Salemba Medika, Jakarta.
Gimbun, J., Ishak, N.F., Muhammad, N.I.S., Pang, S.F., Kadir, M.A.A., Ramli, H.,
Abdullah, M.F., Giman, Z., Khadisah, Z., 2014, Ultrasonic Assisted Extraction
Polyphenols And Antioxidant From Nigella Sativa Seed, Journal of Engineering and
Technology, 5(2), 17-25.
Golan, D.E., 2008, Principles of Pharmacology: The Pathophysiologic Basis of Drug
Therapy, Lippincort Williams & Wilkins, Philadelphia, p. 815.
Hajhashemi, V., Ghannadi, A., Jafarabadi, H., 2004, Black Cumin Seed Essential Oil, as a
Potent Analgesic and Antiinflammatory Drug, John Wiley and Sons, 18, 195-199.
Ikawati, Z., Supardjan, A.M., Asmara, L.S., 2007, Pengaruh Senyawa Heksagamavunon-1
(HGV-1) Terhadap Inflamasi Akut Akibat Reaksi Anafilaksis Kutaneus Aktif Pada
Tikus Wistar Jantan Terinduksi Ovalbumin, Laporan Penelitian, Fakultas Farmasi
Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta.
Johansson, C.T., 2009, Photo of the stem, scape, stalk or bark of Blackseed (Nigella sativa),
https://garden.org/plants/photo/284960/, diakses tanggal 9 Januari 2017.
Karna, S.K.L., 2013, Phytochemical Screening and Gas Chromatography-Mass
Spectrometry and Analysis of Seed Extract of Nigella sativa, Linn., International
Journal of Chemical Studies, 1(4), 183-187.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
13
Kumar, V., Abbas A.K., Aster, J.C., 2013, Robbins Basic Pathology, 9th ed., Elsevier,
Philadelphia, p. 29.
Mazandarani, M. 2015, Aut Ecology, Total Phenol and Total Flavonoid Content,
Antioxidant Activity and Ethno-pharmacological Survey of Nigella sativa Linn. in
Traditional Medicine of Golestan Province, North of Iran, Crescent Journal of
Medical and Biological Sciences, 2(3), 95-99.
Merfort, I., Wray, V., Barakat, H., Hussein, S.A.M., Nawwar, M.A.M., Willuhn, G., 1997,
Flavonol Triglycosides from Seeds of Nigella sativa, Elsevier, 46(2), 359-363.
Morris, C.J., 2003, Carrageenan-Induced Paw Edema in the Rat and Mouse, Springer,
p.115.
Paulsamy, S., Saradha, M., 2013, Antinociceptive And Antiinflammatory Activities Of Stem
Bark Of An Endangered Medicinal Plant, Hildegardia Populifolia (Roxb.) Schott And
Endl., International Journal of Pharma and Bio Sciences, 4(3), 30-36.
Prasad, S. and Tyagi, A.K., 2015, Traditional Medicine: The Goldmine for Modern Drugs,
Adv Tech Biol Med, 3(1), 1-2.
Shapiro, L.S., 2009, Pathology and Parasitology for Veterinary Technicians, Delmar
Cengage Learning, p. 23.
Tanko, Y., Mohammed, A., Okasha, M.A., Shuaibu, A., Magaji, M.G. and Yaro, A.H., 2007,
Analgesic And Anti-Inflammatory Activities Of Ethanol Seed Extract Of Nigella
sativa (Black Cumin) In Mice And Rats, Eur. J. Sci. Res., 18(2), 277-81.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
15
Lampiran 1. Tanaman dan biji Nigella sativa serta ekstrak Nigella sativa dalam basis
Biocream®
Gambar 3. Tanaman Nigella sativa (Johansson, 2009) dan biji Nigella sativa
Gambar 4. Ekstrak Nigella sativa 5% yang dilarutkan dalam basis Biocream®
Gambar 5. Ekstrak Nigella sativa 10% yang dilarutkan dalam basis Biocream®
Gambar 6. Ekstrak Nigella sativa 20% yang dilarutkan dalam basis Biocream®
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
16
Lampiran 2. Hewan uji yang digunakan beserta cara pengukuran edema
Gambar 7. Mencit betina galur Swiss
Gambar 8. Kulit punggung mencit setelah injeksi karagenin
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
17
Gambar 9. Cara pengukuran edema (tebal lipat kulit)
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
18
Lampiran 3. Kontrol yang digunakan dalam penelitian, alat spuit injeksi, beserta
jangka sorong digital
Gambar 10. Karagenin sebagai kontrol negatif
Gambar 11. Biocream® (Basis ekstrak)
Gambar 12. Alat spuit injeksi
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
19
Gambar 13. Jangka sorong digital
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
20
Lampiran 4. Uji FeCl3
Gambar 14. FeCl3
Gambar 15. Ekstrak Nigella sativa + FeCl3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
21
Lampiran 5. Uji kadar air beserta hasil uji
Gambar 16. Alat untuk uji kadar air
Gambar 17. Hasil uji replikasi 1
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
22
Gambar 18. Hasil uji replikasi 2
Gambar 19. Hasil uji replikasi 3
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
23
Lampiran 6. Surat determinasi biji Nigella sativa
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
24
Lampiran 7. Surat Ethical Clearance
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
25
Lampiran 8. Surat Kalibrasi Jangka Sorong
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
26
Lampiran 9. Hasil uji statistik AUC
a. Tes Normalitas
Tests of Normality
Kelompok
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
AUC KONTROL KARAGENIN .250 5 .200* .952 5 .753
KONTROL BIOCREAM .239 5 .200* .928 5 .582
EEBJH 5% .236 5 .200* .955 5 .775
EEBJH 10% .295 5 .179 .859 5 .225
EEBJH 20% .218 5 .200* .882 5 .319
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Distribusi normal p > 0.05 analisis menggunakan parametric ANOVA (kategori lebih dari
2)
Descriptives
Kelompok Statistic Std. Error
AUC KONTROL
KARAGENI
N
Mean 12.7420 .54890
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 11.2440
Upper Bound 14.2920
5% Trimmed Mean 12.7850
Median 13.2400
Variance 1.506
Std. Deviation 1.22738
Minimum 11.04
Maximum 14.19
Range 3.15
Interquartile Range 2.20
Skewness -.535 .913
Kurtosis -.624 2.000
KONTROL
BIOCREAM
Mean 14.1320 .50637
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 12.7261
Upper Bound 15.5379
5% Trimmed Mean 14.1006
Median 13.7300
Variance 1.282
Std. Deviation 1.13229
Minimum 13.01
Maximum 15.82
Range 2.81
Interquartile Range 2.05
Skewness .896 .913
Kurtosis -.303 2.000
EEBJH 5% Mean 10.9040 .46813
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
27
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 9.6043
Upper Bound 12.2037
5% Trimmed Mean 10.8861
Median 10.5400
Variance 1.096
Std. Deviation 1.04677
Minimum 9.68
Maximum 12.45
Range 2.77
Interquartile Range 1.81
Skewness .667 .913
Kurtosis .372 2.000
EEBJH 10% Mean 10.6940 .21177
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 10.1060
Upper Bound 11.2820
5% Trimmed Mean 10.6739
Median 10.5700
Variance .224
Std. Deviation .47353
Minimum 10.26
Maximum 11.49
Range 1.23
Interquartile Range .74
Skewness 1.594 .913
Kurtosis 2.957 2.000
EEBJH 20% Mean 7.6980 .37850
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 6.6471
Upper Bound 8.7489
5% Trimmed Mean 7.7033
Median 7.8100
Variance .716
Std. Deviation .84636
Minimum 6.73
Maximum 8.57
Range 1.84
Interquartile Range 1.68
Skewness -.186 .913
Kurtosis -2.826 2.000
Descriptives
N Mean
Std.
Deviatio
n
Std.
Error
95% Confidence
Interval for
Mean
Mini
mum
Maxi
mum
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
28
b. ANOVA
Test of Homogeneity of Variances
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
AUC 1.497 4 20 .241
% PI 3.725 4 20 .020
ANOVA
Sum of
Squares df Mean Square F Sig.
AUC Between Groups 118.276 4 29.569 30.643 .000
Within Groups 19.299 20 .965
Total 137.575 24
c. Pos hoc Bon Ferroni
Multiple Comparisons
Dependent
Variable
(I)
Kelompok (J) Kelompok
Mean
Differenc
e (I-J)
Std.
Error Sig.
95% Confidence
Interval
Lower
Bound
Upper
Bound
AUC Bonferroni KONTROL
KARAGENI
N
KONTROL
BIOCREAM -1.36400
.6212
8 .401 -3.3231 .5951
EEBJH 5% 1.86400
.6212
8 .071 -.0951 3.8231
EEBJH 10% 2.07400*
.6212
8 .033 .1149 4.0331
EEBJH 20% 5.07000*
.6212
8 .000 3.1109 7.0291
KONTROL
BIOCREAM
KONTROL
KARAGENIN 1.36400
.6212
8 .401 -.5951 3.3231
EEBJH 5% 3.22800*
.6212
8 .000 1.2689 5.1871
Lower
Bound
Upper
Bound
AUC KONTROL
KARAGENIN 5 12.7420 1.22738 .54890 11.2440
14.292
0 11.04 14.19
KONTROL
BIOCREAM 5 14.1320 1.13229 .50637 12.7261
15.537
9 13.01 15.82
EEBJH 5% 5 10.9040 1.04677 .46813 9.6043
12.203
7 9.68 12.45
EEBJH 10% 5 10.6940 .47353 .21177 10.1060
11.282
0 10.26 11.49
EEBJH 20% 5 7.6980 .84636 .37850 6.6471 8.7489 6.73 8.57
Total 25 11.2392 2.39422 .47884 10.2509
12.227
5 6.73 15.82
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
29
EEBJH 10% 3.43800*
.6212
8 .000 1.4789 5.3971
EEBJH 20% 6.43400*
.6212
8 .000 4.4749 8.3931
EEBJH 5% KONTROL
KARAGENIN -1.86400
.6212
8 .071 -3.8231 .0951
KONTROL
BIOCREAM -3.22800*
.6212
8 .000 -5.1871
-
1.2689
EEBJH 10% .21000
.6212
8 1.000 -1.7491 2.1691
EEBJH 20% 3.20600*
.6212
8 .000 1.2469 5.1651
EEBJH 10% KONTROL
KARAGENIN -2.07400*
.6212
8 .033 -4.0331 -.1149
KONTROL
BIOCREAM -3.43800*
.6212
8 .000 -5.3971
-
1.4789
EEBJH 5% -.21000
.6212
8 1.000 -2.1691 1.7491
EEBJH 20% 2.99600*
.6212
8 .001 1.0369 4.9551
EEBJH 20% KONTROL
KARAGENIN -5.07000*
.6212
8 .000 -7.0291
-
3.1109
KONTROL
BIOCREAM -6.43400*
.6212
8 .000 -8.3931
-
4.4749
EEBJH 5% -3.20600*
.6212
8 .000 -5.1651
-
1.2469
EEBJH 10% -2.99600*
.6212
8 .001 -4.9551
-
1.0369
KONTROL
BIOCREAM -6.43400*
.6322
0 .000 -8.7988
-
4.0692
EEBJH 5% -3.20600*
.6020
0 .007 -5.4357 -.9763
EEBJH 10% -2.99600*
.4337
2 .003 -4.7061
-
1.2859
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
30
Lampiran 10. Kurva rata-rata selisih tebal lipat kulit punggung mencit pada jam ke 0
hingga jam ke 6
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
0 1 2 3 4 5 6 7
Rat
a-ra
ta s
elis
ih t
ebal
lip
at k
ulit
(mm
)
Waktu (jam)
Kontrol Karagenin Kontrol Biocream Nigella sativa 5%
Nigella sativa 10% Nigella sativa 20%
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
31
Lampiran 11. Hasil uji statistik %PI
d. Tes normalitas
Tests of Normality
Perlakuan
Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk
Statistic df Sig. Statistic df Sig.
persenPI Kontrol Karagenin .250 5 .200* .952 5 .752
Kontrol Biocream .239 5 .200* .928 5 .582
Konsentrasi 1 .236 5 .200* .955 5 .775
Konsentrasi 2 .295 5 .178 .859 5 .225
Konsentrasi 3 .218 5 .200* .882 5 .319
*. This is a lower bound of the true significance.
a. Lilliefors Significance Correction
Distribusi normal p > 0.05 analisis menggunakan parametric ANOVA (kategori lebih dari
2)
Descriptives
Perlakuan Statistic Std. Error
persenPI Kontrol Karagenin Mean -.2040 4.30774
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound -12.1642
Upper Bound 11.7562
5% Trimmed Mean -.3378
Median -3.9100
Variance 92.783
Std. Deviation 9.63241
Minimum -11.36
Maximum 13.36
Range 24.72
Interquartile Range 17.27
Skewness .536 .913
Kurtosis -.623 2.000
Kontrol Biocream Mean -10.9080 3.97567
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound -21.9462
Upper Bound .1302
5% Trimmed Mean -10.6611
Median -7.7500
Variance 79.030
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
32
Std. Deviation 8.88986
Minimum -24.16
Maximum -2.10
Range 22.06
Interquartile Range 16.14
Skewness -.896 .913
Kurtosis -.305 2.000
Konsentrasi 1 Mean 14.4240 3.67444
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 4.2221
Upper Bound 24.6259
5% Trimmed Mean 14.5644
Median 17.2800
Variance 67.508
Std. Deviation 8.21631
Minimum 2.29
Maximum 24.03
Range 21.74
Interquartile Range 14.21
Skewness -.667 .913
Kurtosis .369 2.000
Konsentrasi 2 Mean 16.0760 1.66153
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 11.4628
Upper Bound 20.6892
5% Trimmed Mean 16.2339
Median 17.0500
Variance 13.803
Std. Deviation 3.71530
Minimum 9.83
Maximum 19.48
Range 9.65
Interquartile Range 5.81
Skewness -1.595 .913
Kurtosis 2.960 2.000
Konsentrasi 3 Mean 39.5840 2.97047
95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound 31.3367
Upper Bound 47.8313
5% Trimmed Mean 39.5422
Median 38.7100
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
33
Variance 44.118
Std. Deviation 6.64216
Minimum 32.74
Maximum 47.18
Range 14.44
Interquartile Range 13.18
Skewness .185 .913
Kurtosis -2.825 2.000
Descriptives
persenPI
N Mean
Std.
Deviation
Std.
Error
95% Confidence
Interval for Mean
Minimum Maximum
Lower
Bound
Upper
Bound
Kontrol
Karagenin 5 -.2040 9.63241 4.30774 -12.1642 11.7562 -11.36 13.36
Kontrol Biocream 5 -10.9080 8.88986 3.97567 -21.9462 .1302 -24.16 -2.10
Konsentrasi 1 5 14.4240 8.21631 3.67444 4.2221 24.6259 2.29 24.03
Konsentrasi 2 5 16.0760 3.71530 1.66153 11.4628 20.6892 9.83 19.48
Konsentrasi 3 5 39.5840 6.64216 2.97047 31.3367 47.8313 32.74 47.18
Total 25 11.7944 18.78975 3.75795 4.0384 19.5504 -24.16 47.18
e. Anova
Test of Homogeneity of Variances
persenPI
Levene Statistic df1 df2 Sig.
1.499 4 20 .240
ANOVA
persenPI
Sum of Squares df Mean Square F Sig.
Between Groups 7284.347 4 1821.087 30.633 .000
Within Groups 1188.970 20 59.448
Total 8473.316 24
f. Post hoc Bon Ferroni
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
34
Multiple Comparisons
Dependent Variable: persenPI
Bonferroni
(I) Perlakuan (J) Perlakuan
Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig.
95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
Kontrol
Karagenin
Kontrol Biocream 10.70400 4.87641 .401 -4.6733 26.0813
Konsentrasi 1 -14.62800 4.87641 .071 -30.0053 .7493
Konsentrasi 2 -16.28000* 4.87641 .033 -31.6573 -.9027
Konsentrasi 3 -39.78800* 4.87641 .000 -55.1653 -24.4107
Kontrol
Biocream
Kontrol Karagenin -10.70400 4.87641 .401 -26.0813 4.6733
Konsentrasi 1 -25.33200* 4.87641 .000 -40.7093 -9.9547
Konsentrasi 2 -26.98400* 4.87641 .000 -42.3613 -11.6067
Konsentrasi 3 -50.49200* 4.87641 .000 -65.8693 -35.1147
Konsentrasi 1 Kontrol Karagenin 14.62800 4.87641 .071 -.7493 30.0053
Kontrol Biocream 25.33200* 4.87641 .000 9.9547 40.7093
Konsentrasi 2 -1.65200 4.87641 1.000 -17.0293 13.7253
Konsentrasi 3 -25.16000* 4.87641 .000 -40.5373 -9.7827
Konsentrasi 2 Kontrol Karagenin 16.28000* 4.87641 .033 .9027 31.6573
Kontrol Biocream 26.98400* 4.87641 .000 11.6067 42.3613
Konsentrasi 1 1.65200 4.87641 1.000 -13.7253 17.0293
Konsentrasi 3 -23.50800* 4.87641 .001 -38.8853 -8.1307
Konsentrasi 3 Kontrol Karagenin 39.78800* 4.87641 .000 24.4107 55.1653
Kontrol Biocream 50.49200* 4.87641 .000 35.1147 65.8693
Konsentrasi 1 25.16000* 4.87641 .000 9.7827 40.5373
Konsentrasi 2 23.50800* 4.87641 .001 8.1307 38.8853
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
g. Grafik %PI
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
35
Lampiran 12. Surat Clinical Epidemiology & Biostatistic Unit
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
36
BIOGRAFI PENULIS
Penulis skripsi dengan judul “Uji Efek Antiinflamasi Topikal Ekstrak
Etanol Biji Jinten Hitam (Nigella Sativa) pada Kulit Punggung Mencit
yang terinduksi Karagenin” bernama Liana Yudomulyono yang
merupakan anak dari pasangan Karyanto Yudomulyono dan Hioe
Sonny Tjen. Penulis lahir di Yogyakarta, 6 Maret 1995. Pendidikan
formal yang telah ditempuh yaitu TK Tarakanita Bumijo (1999-2001).
Pendidikan dilanjutkan ke SD Tarakanita Bumijo (2001-2007), setelah
itu dilanjutkan ke SMP Stella Duce 1 (2007-2010), pendidikan menengah atas di SMA Stella
Duce 1 (2010-2013). Kemudian pendidikan dilanjutkan ke perguruan tinggi di Fakultas
Farmasi Sanata Dharma, Yogyakarta. Selama menempuh kuliah, penulis pernah terlibat
dalam kepanitiaan di kampus, antara lain menjadi panitia kampanye KPU Farmasi (2013),
panitia pubdekdok Paingan Festival (2014), panitia dana dan usaha donor darah farmasi
(2014), panitia dokumentasi INSADHA (2015), bendahara donor darah farmasi (2015) dan
asisten praktikum Peracikan Obat (2015).
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI